白介素4受体基因Q576R多态性及与变应性鼻炎的相关性

目的对变应性鼻炎患者行白介素4受体基因Q576R分型,探讨白介素4受体基因Q576R基因与变应性鼻炎遗传易感性的相关性。方法用PCR-RFLP法为69名无亲缘关系的变应性鼻炎患者和91名无血缘关系的健康汉族人行白介素4受体基因Q576R分型。结果AR组中TIgE含量明显高于对照组。(P<0.001),Q576R各基因型之间TIgE无显著性差异,在AR组中QR基因型频率高于对照组(P=0.007),QQ基因型频率低于对照组(P=0.02)。AR组与对照组之间等位基因频率存在显著性差异(P=0.005),AR组的R等位基因频率高于对照组(OR=2.18)。结论Q576R基因多态性与AR存在相关性,R等位基因可能是AR的易感基因。

人可溶性白介素4受体(sIL4R)在大肠杆菌中的表达和纯化

白细胞介素 4 (IL 4 )作为一种多功能的细胞因子在哮喘等变态性炎症反应中具有关键作用 .IL 4通过结合细胞表面的白介素 4受体 (IL 4R)发挥其生物学效应 .sIL 4R缺少跨膜和胞内结构域 ,结合IL 4后不能产生信号传递介导IL 4的生物学活性 ,但sIL 4R与IL 4结合的高度特异性和极高的亲和力使它非常适合作为理想的IL 4拮抗剂 ,应用于哮喘等疾病治疗 .采用RT PCR方法 ,以人单核细胞总RNA为模板扩增得到编码sIL 4R的基因片段 ,经测序确证后插入大肠杆菌高效表达质粒pBV2 2 0 ,得到重组质粒pBV2 2 0 sIL 4R ,重组质粒转化E .coliDH5α .重组菌经温度诱导后超声破碎得到包涵体 ,经SuperdexHR75分子筛柱和DEAE SepharoseFastFlow离子交换柱进行纯化 ,HPLC检测表明纯度达到 90 % .N端测序证明 ,重组sIL 4R与天然sIL 4RN端序列完全一致 .Western印迹、配基结合印迹对重组sIL 4R进行鉴定 .结果表明 ,重组sIL 4R具有结合IL

可溶性白介素4受体(sIL-4R)和白介素5抗体(IL-5Ab)在预防迟发性变态反应所致咽鼓管功能障碍中的作用

对于分泌性中耳炎(SOM)的病因学和治疗尚有很多争论,其中之一即为SOM与变态反应的关系。IL-4和IL-5是参与迟发性变态反应的两种主要介质,这些细胞因子控制组织的炎症过程、水肿形成、粘液产生、

白介素4受体α链基因多态性与哮喘易感性的相关性研究

目的 探讨白介素 4受体α链 (IL 4Rα)基因多态性与武汉地区人群哮喘易感性的相关关系。方法 用逆转录 聚合酶链反应 /单链构象多态性 /测序技术对 35例哮喘儿童 ,2 5例成人发病哮喘患者 ,以及健康成人与健康儿童各 2 0名进行IL 4Rα链基因编码区 12 0 5 192 8基因突变检测分析。结果 5 7.8%的哮喘患儿在IL 4Rα基因编码区 190 2位存在突变 (A→G) ,使该编码区 5 76位谷氨酸突变为精氨酸 ,而仅有 8%的成人哮喘患者存在该突变 ,健康成人和健康儿童均有 5 %存在该突变。结论 本研究表明IL 4Rα链基因编码区 190 2位点单核苷酸的变异与武汉地区儿童哮喘易感性相关 (χ2 =12 .5 4 ,P <0 .0 0 1,α =0 .0 5 ) ;而成人哮喘患者则与该基因编码区 190 2位点单核苷酸的变异无关 (χ2 =0 .16 ,P >0 .0 5 ,α=0 .0 5 )。

白介素4、白介素10受体基因多态性的现状

近来越来越多的研究证实人白介素4受体基因和白介素10要体基因具有高度多态性,且此基因多态性与特应性、哮喘、IgE水平改变及系统性红斑狼疮有关。综述了白介素4受体和白介素10受体的研究现状。揭示疾病发病的遗传学背景和发病机制,为今后的基因诊断和基因治疗提供线索。

中国人群白介素1受体相关激酶4基因多态性与脓毒症易感性的相关性研究

目的探讨白介素1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor-associated kinase 4,IRAK4)多态性位点与脓毒症发生风险及疾病严重程度的关联性。方法采用Hapmap单倍型标签SNPs(htSNPs)策略和SNPstream分型方法,对255例脓毒症患者和260例对照个体进行分型。采用Logistic回归分析,校正性别、年龄、吸烟和饮酒、慢性病状态、A-PACHEⅡ评分和脓毒症病因等混杂因素的影响,评价IRAK4多态性位点与脓毒症的发生风险,以及脓毒症性休克、死亡和多器官功能障碍的遗传相关性。结果 IRAK4基因在中国人群中共捕获6个htSNPs。rs4251431 G/T,rs4251460A/C,rs4251513 G/C和rs4251545 G/A最终用于分型研究。4个htSNPs位点在病例和对照组中的基因型分布均呈Hardy-Weinberg平衡状态。IRAK4多态性位点及单倍体与脓毒症的发生风险和疾病严重程度均无明显相关性。结论在中国人群中,IRAK4基因多态性位点在脓毒症的发生、发展和病程转归中可能不发挥重要作用。

人可溶性白介素-4受体(sIL-4R)在甲醇酵母中的表达

白细胞介素 4(IL 4)作为一种多功能的细胞因子在哮喘等变态性炎症反应中具有关键作用。IL 4通过结合细胞表面的白介素 4受体 (IL 4R)发挥其生物学效应。sIL 4R缺少跨膜和胞内结构域 ,结合IL 4后不能产生信号传递来介导IL 4的生物学活性 ,但sIL 4R与IL 4结合的高度特异性和极高的亲和力使它非常适合作为理想的IL 4拮抗剂应用于哮喘等疾病的治疗。采用RT PCR方法以人的单核细胞总RNA为模板扩增得到编码sIL 4R的基因片段 ,经测序证实后插入到甲醇酵母分泌表达质粒pPIC9K中 ,得到重组质粒pPIC9K sIL 4R ,利用限制性内切酶BglⅡ将其线性化后用电穿孔法导入PichiapastorisGS115。分别用SDS PAGE、Westernblot和Ligandbindingblot对重组菌发酵上清中的sIL 4R进行鉴定。结果表明 ,在分子量约为 3 0kD处有sIL 4R特异条带出现 ,并具有结合其配基IL

IRAK-4在白介素-1受体/Toll样受体(IL-1R/TLRs)介导的炎症信号通路中的关键作用

白介素-1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor-associated kinase 4;IRAK-4)是近年来发现的参与机体先天性免疫反应过程中的关键分子。它与另外3个成员IRAK-1、IRAK-2、IRAK-M同属于IRAK家族,目前经过对IRAK-4分子的激酶活性以及其对炎症反应的正向和负向的调控作用的研究表明,IRAK-4分子联系着上下游的信号转导,在TLRs/IL-1R介导的炎症信号通路中的作用更为关键。本文就IRAK-4分子的活性、以及IRAK-4分子在TLRs/IL-1R介导的炎症信号转导通路中的作用作一综述。以期设计出针对IRAK-4特异性的药物,或者通过基因治疗手段干预IRAK-4表达,为感染控制提供新的思路,开发出新的抗炎药物。

白介素-4受体基因多态性与哮喘发病关系的研究

目的 探讨白介素 4受体 (IL 4R)基因多态性 (Ile5 0Val)与哮喘发病之间的关系。方法 采用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析法 (PCR RFLP)检测 34例哮喘患者、2 9例健康人IL 4R基因型。结果 哮喘组与健康对照组三种基因型 (Ile/Ile、Val/Ile、Val/Val)在分布上无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,哮喘组Ile5 0基因型出现的频率为 0 .4 85 ,对照组为 0 .5 5 2 ,两组比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 IL 4受体基因多态性 (Ile5 0Val)可能与哮喘发病无关。

白介素4受体α链Q576R基因多态性与支气管哮喘关系的研究进展

白介素4受体（IL-4R）在支气管哮喘（简称哮喘）的发病机制中起重要作用，IL-4通过与IL-4R结合，刺激信号转导及转录激活因子6（STAT6）磷酸化构成二聚体由胞浆进入胞核，诱导Th2类细胞因子转录，导致哮喘症状。Q576R为1920位腺嘌呤A变成鸟嘌呤G，IL-4Rα链基因存在Q576R多态性，R576与儿童哮喘易感有关，可能是儿童哮喘易感的一个候选基因。IL-4Rα链576在IgE水平中发挥重要作用，R576与血浆总IgE水平相关性的讨论结果不一致。IL-4Rα链的其他基因多态性同样作用于哮喘，基因与基因的相互作用已经被关注。本文综述了IL-4Rα链Q576R基因多态性与哮喘关系的研究进展。

白细胞介素4受体和哮喘

Th1 Th2亚群的失衡可能是哮喘发病的主要机制。本文主要对在哮喘发病过程中起主要作用的Th2型细胞因子IL - 4及其受体的生物学作用及其与哮喘的关系作一综述 ,对IL- 4及其受体的研究 ,不仅使我们深入了解过敏性疾病、自身免疫性疾病和感染性疾病的发病机制 ,而且为治疗这类疾病提供了一个新的思路。

靶向白介素-4受体的抗体类药物研究进展

白介素(interleukin,IL)-4是一种多效细胞因子,特异性地与细胞表面的IL-4受体(IL-4 receptor,IL-4R)结合后发挥其生物学效应。正常情况下细胞表面IL-4R表达水平较低,当受到激素、应激及炎症等刺激后表达量增高。目前发现IL-4/IL-4R在特应性皮炎(atopic dermatitis)、哮喘(asthma)及恶性肿瘤等疾病的发生、发展中起重要作用。当前,已有针对IL-4Rα靶点的抗体药物用于临床治疗,对于2型炎症疗效尤为突出,超过8个治疗型药物处在临床研究阶段。该文主要对IL-4/IL-4R信号通路及其相关疾病、靶向IL-4R的治疗性抗体药物研究现状及其临床应用作综述。

白细胞介素4受体基因rs3024608、rs1110470、rs3024685多态性与哮喘的相关性研究

哮喘是常见的呼吸道疾病,也是一种多发病,全球约有3亿哮喘患者,其中我国约有2 000万人催患此病[1].随着工业化的进展及生活方式的改变,哮喘发病率和死亡率在大多数国家呈上升趋势,己成为严重的公共卫生问题.然而,哮喘发病机制至今尚不十分清楚.结合文献我们选择白介素4受体（Interleukin-4 receptor,IL-4R）基因的rs3024608、rs1110470、rs3024685共3个多态位点,探讨青岛地区成人中该基因多态性与哮喘的相关性,以期进一步揭示哮喘的遗传学发病机制,有利于哮喘的预防、早期诊断和治疗.

白细胞介素4受体基因多态性与变应性鼻炎的相关性

目的通过研究白细胞介素4受体(interleukin–4,IL-4R)基因多态性与变应性鼻炎的相关性,探讨IL-4Rα链上Q576R位点基因多态性与变应性鼻炎发病之间的关系。方法采用聚合酶链反应——限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)检测50例变应性鼻炎患者(病例组)和40例健康人群(对照组)的IL-4Rα链上Q576R位点基因多态性,比较两组的基因型和等位基因的分布频率,并计算基因优势比(OR)。结果病例组和对照组R576和Q576等位基因分布频率的差异具有显著性(x2=9.12,P<0.01),病例组中R576等位基因分布频率显著高于对照组。R576携带者发生变应性鼻炎的相对危险度是Q576的4.66倍(OR=4.66,x2=9.98,P<0.01)。结论IL-4Rα链上Q576R位点基因多态性与变应性鼻炎有相关性,提示Q576R多态性可能在决定变应性鼻炎遗传易感性方面有重要作用,是变应性鼻炎的一个易感候选基因。

白细胞介素4受体α亚单位基因多态性与重症肌无力的相关性

目的探索IL-4R基因多态性与汉族人MG易感性和严重程度的相关性。方法采用SNPscan^(TM)技术对480例MG患者和487例健康对照的6个SNP(rs2107356、rs1805010、rs1805011、rs1805015、rs1801275和rs8832)进行分型,比较MG与对照组、MG亚组与对照组及亚组间等位基因和基因型的频率。结果 rs2107356和rs1805010的等位基因和基因型频率在伴胸腺瘤的成人亚组高于对照组和不伴胸腺瘤的成人亚组,但不伴胸腺瘤的成人亚组和对照组之间无差异。MG患者rs1801275 G等位基因的频率高于对照组,尤其是在AChR抗体阳性不伴胸腺瘤的成人亚组。rs1801275的基因型是MG患者AChR抗体阳性的独立相关因素。结论在中国汉族人群,rs2107356、rs1805010和rs1801275与MG的易感性相关。

基因工程人可溶性白细胞介素4受体（sIL-4R）

白细胞介素-4(IL-4)作为一种多功能的细胞因子在哮喘等变态性炎症反应中具有关键作用。IL-4通过结合细胞表面的白介素-4受体(IL-4R)发挥其生物学效应。sIL-4R缺少跨膜和胞内结构域，结合IL-4后不能产生信号传递介导IL-4的生物学活性，但sIL-4R与IL-4结合的高度特异性和极高的亲和力使它非常适合作为理想的IL-4拮抗剂应用于哮喘等疾病的治疗。国外已经应用重组sIL-4R蛋白进行治疗哮喘的临床研究，美国Immunex公司制备的sIL-4R重组蛋白(商品名为NuvanceIM)己进入临床Ⅱ期研究，结果显示了良好的治疗效果，无副作用，

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞IL-4受体水平的研究

目的:探讨白介素(IL)-4受体在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用及其临床意义。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例SLE患者和30名健康对照者外周血单一核细胞(PBMC)中IL-4受体mRNA的表达水平;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-4水平。结果:①活动期SLE患者、非活动期SLE患者及健康对照者PBMCIL-4受体表达阳性率为100%。②活动期SLE患者、非活动期SLE患者及健康对照者PBMCIL-4受体mRNA表达水平分别为0.604±0.147、0.400±0.130、0.370±0.070。活动期SLE患者和非活动期SLE患者比较、活动期SLE患者和正常对照者比较差异均有显著性(P=0.000),非活动期SLE患者和正常对照者比较差异无显著性(P=0.351)。③血清中IL-4水平在活动期SLE患者显著高于非活动期SLE患者和正常对照组(P=0.000),非活动期SLE患者显著高于正常对照组(P=0.000),活动期和非活动期SLE患者血清中IL-4水平与PBMCIL-4受体表达水平呈正相关(r=0.622～0.859,P<0.05)。结论:IL-4及其受体的异常表达可能在SLE疾病活动和进展过程中起重要作用。检测SLE患者PBMCIL-4受体的表达水平可作为了解疾病活动性的指标之一。

miR-485-5p通过靶向白介素-1受体关联激酶4调控巨噬细胞炎症反应

目的探究miR-485-5p对白介素-1受体关联激酶4(IRAK-4)的靶向作用,研究其在巨噬细胞模型炎症反应中的调控作用。方法合成miR-485-5p模拟物(mimics)及其抑制剂(inhibitors),分别转染HEK-293T细胞,RT-PCR检测miR-485-5p的表达水平。根据miRNA靶向作用预测数据分析选定IRAK-4作为研究的靶基因,构建IRAK-43'UTR及其突变体萤火虫-海肾双荧光素酶报告基因系统,通过检测在细胞模型中过表达/抑制表达miR-485-5p后对荧光素酶活力的影响,验证miR-485-5p与IRAK-4之间的靶向关系,Westernblot检测IRAK-4蛋白质表达水平。构建巨噬细胞模型,将miR-485-5pmimics及inhibitors分别转染巨噬细胞,RT-PCR检测靶基因IRAK-4mRNA的表达水平,ELISA检测上清中下游致病因子IL-6、IL-17、IL-18的表达。结果通过实验证实miR-485-5p与IRAK-4存在靶向作用。细胞模型中,与对照组相比,转染miR-485-5pmimics后miR-485-5p表达水平升高了17.15倍(P<0.01),转染miR-485-5pinhibitors后miR-485-5p表达水平降低了79.80%(P<0.05)。过表达miR-485-5p后明显抑制IRAK-4的蛋白水平表达及mRNA相对含量,抑制下游炎性因子IL-6、IL-17、IL-18的表达(P<0.05);抑制表达miR-485-5p,则上调IRAK-4的蛋白水平及mRNA相对含量,可显著提高IL-6、IL-17、IL-18的释放(P<0.05)。结论证实miR-485-5p可以通过对靶向IRAK-4的特异性序列,调控下游炎性细胞因子的表达,进而调控细胞的炎症反应。

肝X受体激动剂对脂多糖诱导的炎症反应相关因子IRAK-4和NF-κB的影响

目的:观察在枯否细胞中人工合成的肝X受体激动剂在脂多糖(LPS)诱导的炎症反应中,对白细胞介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)和核因子NF-κB的影响。方法:雄性昆明小鼠,用胶原酶原位灌注法分离和培养肝脏Kupffer细胞,获得的细胞随机分为正常对照组、LPS处理组、LXR人工合成激动剂T0901317处理组和LPS+T0901317共同处理组。实时-聚合酶链式反应和蛋白Western blot检测各组细胞LXR、IRAK-4和NF-κB的mRNA和蛋白表达水平;凝胶电泳迁移率(EMSA)检测NF-κB活性水平。结果:LXR mRNA和蛋白在T0901317组表达都是最高的,而在LPS处理组最低。I-RAK4和NF-κB的mRNA和蛋白水平在LPS处理组最高,联合处理组要低于LPS处理组。NF-κB的活性在LPS最高,联合处理组和T0901317处理组都较LPS组降低。结论:LXR激动剂能有效的上调LXR基因和蛋白水平,同时抑制TLR4信号通路中IRAK-4和NF-κB的mRNA水平和蛋白表达水平,并且能抑制NF-κB的活化。

scFv-LAA0融合蛋白的制备及对人肺腺癌细胞H460、小鼠肺腺癌增殖抑制作用观察

目的：制备重组抗白介素4受体（IL-4R）单链抗体基因与竹叶青蛇毒L-氨基酸氧化酶（LAAO）的融合蛋白（scFv-LAAO融合蛋白），并观察其对人肺腺癌细胞H460、小鼠肺腺癌增殖抑制作用。方法①采用重叠延伸PCR技术将抗IL-4R单链抗体与竹叶青蛇毒LAAO基因连接成scFv-LAAO融合基因，构建重组质粒pET28a-scFv-LAAO，转染BL21（DE3）原核表达菌，诱导表达scFv-LAAO融合蛋白，用SDS-PAGE法检测scFv-LAAO融合蛋白的分子量，用Western blotting法检测scFv-LAAO融合蛋白的His-tag表达。②设空白对照组、环磷酰胺组和融合蛋白组（包括高、中、低剂量融合蛋白组），分别用培养基、2．0 mg／mL环磷酰胺及4．0、2．0、1．0 mg／mL的scFv-LAAO融合蛋白培养人肺腺癌H460细胞，用MTT法测算环磷酰胺组和高、中、低剂量融合蛋白组细胞增殖抑制率。取75只小鼠，建立荷肺腺癌动物模型，随机分为空白对照组、环磷酰胺组和融合蛋白组（包括高、中、低剂量融合蛋白组），分别腹腔注射生理盐水、0．1 mL／10 g体质量的环磷酰胺和100、50和20 mg／kg的scFv-LAAO融合蛋白，1次／d，连用10 d后停药，停药7 d后称量各组小鼠瘤重，计算环磷酰胺组和高、中、低各剂量融合蛋白组抑瘤率；同时统计存活时间。结果 scFv-LAAO融合基因长度2000～3000 bp。用融合基因转染BL21（DE3）原核表达菌后，将细菌裂解从裂解液中分离出的蛋白分子量86 kD，与scFv-LAAO融合蛋白分子量相符，且用Western blotting法在分离到的蛋白中检出scFv-LAAO融合蛋白组氨酸标签。环磷酰胺组和高剂量融合蛋白组人肺腺癌H460细胞增殖抑制率、小鼠抑瘤率和生存时间相比，P均＞0．05；环磷酰胺组和高剂量融合蛋白组H460细胞增殖抑制率、小鼠抑瘤率和生存时间高于低、中剂量融合蛋白组，P均＜0．05；低剂量融合蛋白组H460细胞增殖抑制率、小鼠抑瘤率和生存时间低于中剂量融合蛋白组，P均＜0．05。结论成功制备scFv-LAAO融合蛋白。scFv-LAAO融合蛋白可以抑制人肺腺癌细胞H460、小鼠肺腺癌增殖。