鱼类白介素(IL-1β)及干扰素(IFN)重组质粒构建及联合应用研究

为增强鱼类自身防病抗病能力,本研究人工合成了细胞因子白介素(IL-1β)及干扰素(IFN)基因序列,分别与p IRES2-EGFP真核表达载体连接,构建荧光表达质粒。两种质粒分别接种Hela细胞,倒置于荧光显微镜下观察,确定质粒在细胞内的表达情况。之后将两种质粒注射免疫鱼体,于免疫后第2周抽样采集腹水、肌肉组织及血清,通过荧光、RT-PCR及SDS-PAGE方法检测目的蛋白表达情况。最后将两种质粒联合免疫待产虹鳟亲鱼,同时在人工授精过程中进行二次免疫,抽样采集孵化出的虹鳟鱼苗,检测目的蛋白表达情况。结果表明,两种质粒转染Hela细胞均可见荧光反应,空白对照无荧光,表明两种质粒在细胞内成功表达;室内动物试验结果表明只有两试验组腹水中检测到荧光信号,RT-PCR结果可见两试验组每组10尾均可检测到目的片段,空白组未检测到目的片段。SDS-PAGE显示,两试验组在40KD处可见目的条带;中试试验幼鱼可检测到荧光蛋白表达;试验组繁殖成活率97%,空白对照组繁殖成活率56%。以上结果证明人工合成IL-1β、IFN荧光质粒免疫鱼体,显著提高了鱼体自身免疫力,可有效的增强鱼体自身防病抗病能力。

白介素-1β基因敲除对小鼠行为的影响

白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)是脑内一种常见的促炎因子,在生理水平下由小胶质细胞和神经元释放并维持在较低表达量。文章选用成年小鼠为实验对象,采用不同的行为学范式研究IL-1β基因敲除对小鼠行为的影响。研究发现,IL-1β基因敲除不会影响小鼠的基本运动能力,但显著减少了小鼠进入Y迷宫新臂和新物体识别测试中嗅探新物体的时间和次数,增加了小鼠在悬尾以及强迫游泳测试中的静止时间。结果表明敲除IL-1β基因降低了小鼠的学习记忆能力,同时诱导了小鼠的焦虑抑郁样行为。该研究证明了IL-1β基因敲除会对小鼠的基本认知行为和情绪行为造成损害,为后续研究生理条件下炎症因子的正常表达对脑功能的作用提供了重要依据。

小白菊内酯对膝骨性关节炎兔模型血清及关节液肿瘤坏死因子-α和白介素-1β水平的影响

目的通过观察小白菊内酯对兔膝骨性关节炎(OA)模型血清及关节液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β水平的影响,探讨其治疗OA的作用机制。方法健康纯种新西兰兔32只,随机8只为正常组,其余的24只采用右后肢伸直位管型石膏固定法,建立OA模型。造模后随机分为3组:模型组、小白菊内酯组、盐酸氨基葡萄糖组,每组8只。小白菊内酯组兔予小白菊内酯灌胃,盐酸氨基葡萄糖组予盐酸氨基葡萄糖灌胃,其余两组予生理盐水灌胃,连续治疗6 w后,测定各组兔治疗前后血清、膝关节液TNF-α、IL-1β表达水平。结果小白菊内酯组、盐酸氨基葡萄糖组关节液及血清中的TNF-α、IL-1β浓度均明显降低(P<0.05或P<0.01),且小白菊内酯组降低幅度明显大于盐酸氨基葡萄糖组(P<0.05)。结论小白菊内酯可能通过抑制TNF-α、IL-1β的分泌而产生免疫调节作用,其抗炎疗效优于盐酸氨基葡萄糖。

人β防御素2和白介素1β在中耳黏膜上皮的表达

目的研究人β-防御素-2(HBD-2)、白介素-1β(IL-1β)在中耳黏膜上皮中的表达情况,探讨其在中耳炎病理发展过程中的作用。方法应用免疫组织化学方法检测慢性中耳炎中耳黏膜上皮及正常外耳道皮肤中HBD-2、IL-1β的表达。结果 HBD-2和IL-1β在中耳炎中耳黏膜的表达较正常外耳道皮肤中上调,有显著性差异(P<0.05);HBD-2和IL-1β在中耳黏膜中的表达有一定的相关性(r=0.9117,P<0.05)。结论中耳炎症状态下,中耳黏膜上皮HBD-2、IL-1β表达上调并可能相互影响,在中耳炎病理发展中发挥一定的作用。

柴胡止血液对人置器后子宫异常出血者子宫内膜组织白介素-1β的影响

目的:研究柴胡止血液治疗宫内节育器所致子宫异常出血症的机理。方法:观察了柴胡止血液对置IUD子宫异常出血者子宫内膜组织白介素-1β含量的影响,并与中药归脾丸以及西药消炎痛进行比较。结果:柴胡止血液能够降低置IUD子宫异常出血者子宫内膜组织白介素-1β的含量,其中大剂量效果最好,与空白组比较P<0.05。结论:柴胡止血液可能通过改善子宫局部组织白介素-1β的活性,促进子宫内膜组织的修复,从而治疗置IUD所致子宫异常出血。

白介素-1β在2型糖尿病胰岛炎症中的研究进展

近年来,糖尿病的发病率逐年增高,目前我国糖尿病患病率达到9.6%,糖尿病患病总人数已经超过7千万,成为世界上糖尿病人口最多的国家[1],其中2型糖尿病（type 2 diabetes ellitus,T2DM）患者占全部糖尿病患者的95%。

异维Α酸对痤疮患者的白介素1α的影响

目的:观察异维Α酸对痤疮患者的IL -1α影响。方法:选择确诊寻常痤疮患者3 0例,口服异维Α酸胶丸(商品名泰尔丝,上海延安制药厂生产) ,每次1 0mg,每日3次,4周为1个疗程,观察临床疗效及比较用药前后的IL-1α水平,另外选择2 0名非痤疮患者作为测定指标的正常参考值。结果:治疗前痤疮患者的IL -1α水平明显高于非痤疮患者水平(t=9. 5 5 ,P <0 . 0 1 ) ;治疗后痤疮患者的IL -1α水平与治疗前比较明显降低(t=2 4. 0 4,P <0. 0 1 )。结论:异维Α酸能明显降低痤疮患者的IL -1α水平。

芦荟及其复方制剂对衰老小鼠脂质过氧化及白介素水平的影响

目的 观察芦荟及其复方制剂在抗脂质过氧化、调节免疫因子方面的抗衰老作用 ,为芦荟在老年医学中应用及发掘抗衰老药物提供依据。方法 二级昆明种小白鼠 4 8只 ,随机分为 4组 ,三个衰老组用D 半乳糖法造衰老模型 ,其中两个试验组分别灌胃芦荟液和复方芦荟液 ,衰老模型对照组和正常对照组均灌胃等量 0 .9%NaCl溶液。用药 2 8d后 ,测全血MDA含量、SOD、GSH -Px活性及血清IL 1、IL 6、IL 8水平。结果 衰老模型组与正常对照组比较MDA含量明显升高 ,SOD、GSH -Px活性和血清IL 1、IL 6、IL 8水平降低 ,且体重减轻。应用芦荟和复方芦荟组则使衰老小鼠上述指标明显恢复 ,与衰老模型组比较 ,差异显著。结论 芦荟及其复方制剂在对衰老动物实验模型的应用中有抗脂质过氧化 ,增强自由基清除以及升高已降低的IL 1、IL 6、IL

甲基-苯基四氢吡啶对脑不对称小鼠纹状体内多巴胺和白介素含量的影响

为探讨甲基-苯基四氢吡啶(MPTP) 注射后脑不对称小鼠纹状体内多巴胺降低程度,及纹状体内细胞因子水平变化,C57BL/6J小鼠经过伸爪取食试验,筛选为反映脑不对称的左利鼠和右利鼠,并接受25 mg/kg MPTP腹腔注射连续5天,检测注射后的第1天,第3天和第14天纹状体内多巴胺及代谢物含量和细胞因子IL-1茁、IL-6的动态水平. 结果表明,无论在左利鼠还是右利鼠,纹状体内多巴胺含量在MPTP注射后每个检测时间点都显著降低,纹状体内IL-1茁水平在第1天显著降低,纹状体内IL-6水平在MPTP注射后每个检测时间点也显著降低. 实验结果同时表明,左利鼠和右利鼠IL-1茁和IL-6的基础水平有显著不同. MPTP注射后,与右利小鼠相比,左利小鼠有较高的多巴胺翻转降低和较低的细胞因子表达,而且,纹状体内多巴胺水平与纹状体内IL-6水平呈正相关. 这些结果提示,MPTP诱导多巴胺丢失伴随着黑质纹状体系统内细胞因子水平的改变,而且,脑不对称有可能通过影响纹状体内细胞因子水平而进一步影响MPTP诱导的多巴胺降低的程度.

透骨消痛胶囊含药血清对退变关节软骨细胞表达TNF-α、IL-1β的影响

目的观察透骨消痛胶囊含药血清对体外培养的大鼠退变软骨细胞表达肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)的影响,探讨透骨消痛胶囊防治骨性关节炎的作用机制。方法 4周龄SD大鼠膝关节软骨建立体外培养的软骨细胞,采用Ⅱ型胶原原位杂交法对第3代软骨细胞进行鉴定。用10 ng.mL-1IL-1β干预第3代软骨细胞复制退变软骨细胞模型。模型复制成功后,随机分为模型组和透骨消痛胶囊含药血清组,分别在培养24、48、72 h后用TaqMan real-time PCR法检测各组mRNA表达。结果透骨消痛胶囊含药血清组TNF-αmRNA、IL-1βmRNA相对表达量随着干预时间的延长逐渐下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论透骨消痛胶囊治疗骨性关节炎的部分作用机制是有效抑制退变软骨细胞TNF-α、IL-1β的表达。

电针夹脊穴对急性心肌缺血大鼠血清NO、ET及IL-1β的影响

目的研究电针夹脊穴对急性心肌缺血大鼠血清中一氧化氮(NO)、内皮素(ET)及白介素-1β(IL-1β)含量的影响。方法将Wistar大鼠随机分为五组:假手术组、模型组、电针夹脊组、电针内关组、电针阳陵泉组,每组8只。采用结扎左冠状动脉前降支的方法制备大鼠急性心肌缺血模型。用酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定血清中NO、ET、IL-1β的含量。结果与模型组比较,电针内关组大鼠血清中NO含量明显升高(P<0.05),电针夹脊组大鼠血清中ET含量明显降低(P<0.01),电针夹脊组和电针内关组大鼠血清中IL-1β含量均明显降低(P<0.01)。电针夹脊组改善ET含量作用明显优于电针内关组(P<0.01)。结论电针内关穴能促进急性心肌缺血大鼠血清舒血管物质NO的释放;电针夹脊穴能抑制缩血管物质ET的释放;电针夹脊穴和内关穴均能抑制致炎因子IL-1β的释放。

消退素D1对牙周炎大鼠牙龈组织中IL-1β、IL-6表达的影响

目的:研究消退素D1(RvD1)对牙周炎大鼠牙龈组织中IL-1β、IL-6炎症因子表达的影响。方法:选取30只雄性SD大鼠,采用双侧上颌第二磨牙绑线法构建大鼠牙周炎模型。建模成功后,将大鼠随机分为5组(1个对照组和4个实验组)(n=6),并采用单次尾静脉注射法给药,4个实验组分别注射1、10、50、100 ng/mL的RvD1,对照组注射等量生理盐水。用药后4周处死所有大鼠,取其双侧上颌第二磨牙周围2 mm的牙龈组织,并制作石蜡切片后,用SP免疫组化染色法检测各组大鼠牙龈组织中IL-1β、IL-6的表达水平。结果:与对照组相比,50、100 ng/mL RvD1组均能明显抑制大鼠牙龈组织中IL-1β、IL-6的表达水平(P <0. 05); 10 ng/mL RvD1组仅明显抑制IL-1β的表达水平(P <0. 05),对IL-6无明显抑制作用(P> 0. 05);最低浓度(1 ng/mL) RvD1对上述两种炎症因子的表达均无影响。不同浓度RvD1对IL-1β的抑制作用依次为100 ng/mL> 50 ng/mL> 10 ng/mL> 1 ng/mL,各浓度组间两两相比均有统计学差异(P <0. 05)。结论:消退素D1可有效抑制牙周炎大鼠牙龈组织中IL-1β、IL-6的表达,且具有浓度依赖性。

传统中医药补肾固筋方对中老年膝骨关节炎患者IL-1、iNOS水平的影响和临床意义

目的观察补肾固筋方治疗膝骨关节炎IL-1、iNOS水平的研究。方法实验分两组进行,每组病例各92例,治疗8周,中药组口服补肾固筋方,西药组口服美洛昔康胶囊。收集患者治疗前后关节滑液及空腹血清,采用酶联免疫吸附法检测IL-1、iNOS的水平,观察治疗效果和不良反应。结果治疗前中药组和对照组IL-1、iNOS水平较治疗前显著增高;治疗后中药组关节液和血清IL-1、iNOS相比对照组显著降低(P<0.05);治疗后两组均未见明显血常规和肝肾功能异常。结论补肾固筋方在治疗中降低了IL-1、iNOS的水平及比值,不良反应少见,提示中药补肾固筋方通过调节细胞因子的表达水平来调控细胞凋亡和减轻软骨破坏,改善膝关节骨关节炎发生及发展。

地塞米松对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型TNF-α和IL-1β的影响

目的:探讨地塞米松(dexamethasone,dexasone DEX)对大鼠脑缺血再灌注损伤的干预作用及其作用机制。方法:建立SD大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,参照改良Nagasawa大脑中动脉线栓法,随机将50只雄性SD大鼠分为5个组(n=10),分别为假手术组、脑缺血再灌注模型组、DEX注射液小剂量治疗组、DEX注射液中剂量治疗组、DEX注射液大剂量治疗组。各组大鼠分别在脑缺血2h再灌注60h后进行神经行为学评分,测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-1β(IL-1β)含量,测定脑梗死面积。结果:①脑缺血再灌注模型组的神经功能缺损评分和梗死灶体积均高于假手术组(P<0.01);而DEX注射液各治疗组的此两项指标较模型组均有降低(P<0.01)。②脑缺血再灌注模型组血液的TNF-α、IL-1β等生化指标的含量较假手术组均有升高(P<0.01),而DEX注射液各治疗组以上生化指标的含量较脑缺血再灌注模型组,含量均降低(P<0.05)。结论:DEX注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其机制可能通过抑制脑缺血再灌注后多种炎症相关细胞因子的级联性表达。

高压氧治疗重型颅脑损伤的疗效及对血清IL-1β和IL-6的影响

目的探讨高压氧疗法对重型颅脑损伤患者的治疗效果,以及对患者血清白介素-1β和白介素-6水平的影响及意义。方法随机将我院收治的164例重型颅脑损伤患者分成治疗组和对照组各82例。所有患者在积极手术的同时,给予脱水降颅压、抗炎、营养脑细胞等药物治疗,待其生命体征趋向平稳后,治疗组给予高压氧治疗。分别于治疗的第1、11、21天测定2组静脉血中IL-1β和IL-6水平,同时在第1、14、180天采用格拉斯哥昏迷量表评定状态。结果治疗组第180天GCS评分12.35±3.69,明显高于对照组的9.84±3.42;治疗组IL-1β水平在第11、21天分别为(268.53±18.42)pg/mL、(127.64±17.54)pg/mL,均低于同期对照组;治疗组和对照组的IL-6水平第11天分别(227.51±18.2l)pg/mL、(287.36±15.48)pg/mL,第21天分别为(90.78±13.93)pg/mL、(100.32±12.27)pg/mL,治疗组血清IL-6水平均显著低于同一时间对照组(P<0.05)。结论高压氧治疗能改善重型颅脑损伤患者的昏迷状态,抑制IL-1β和IL-6的产生和释放,对脑细胞具有保护作用。

TFHL对慢性脑缺血大鼠海马Caspase-3、TNF-α、IL-1β的影响

目的:探讨山楂叶总黄酮(TFHL)对慢性脑缺血大鼠海马Caspase-3、TNF-α和IL-1β的影响。方法:SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、TFHL组和银杏叶片组,采用永久性双侧颈总动脉结扎法制备慢性脑缺血模型。免疫组化法检测大鼠海马Caspase-3蛋白的表达,ELISA法检测海马组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的含量。结果:与模型组比较,TFHL组大鼠海马Caspase-3蛋白的表达和TNF-α、IL-1β的含量明显降低(P<0.05)。结论:TFHL对慢性脑缺血大鼠脑组织具有保护作用,其机制可能与TFHL减轻炎症反应、下调Caspase-3蛋白表达有关。

二样膏对急性软组织损伤家兔PGE2和IL-1β的影响

目的:研究二样膏对家兔急性软组织损伤PGE2和IL-1β的影响及作用机制。方法:将健康普通家兔45只随机分为五组:空白组,模型组,阳性对照组(扶他林软膏组),二样膏低剂量组,二样膏高剂量组。除空白组外,其余各组采用打击法建立家兔急性软组织损伤模型,并按分组给药。给药后第1、3、5天取软组织,组织匀浆后ELISA法测定PGE2和IL-1β含量。结果:模型组家兔损伤软组织PGE2和IL-1β含量明显高于空白组(P<0.01);二样膏组家兔损伤软组织中PGE2和IL-1β含量明显低于模型组(P<0.01)。结论:二样膏可抑制损伤软组织中PGE2的合成和炎性因子IL-1β的产生。

心理评估对乳腺癌患者诊治的临床价值及化疗前后血清IL-1β、TNF-ɑ水平变化和临床意义

目的探究心理评估对乳腺癌患者诊治的临床价值及化疗前后血清中IL-1β、TNF-ɑ水平变化和临床意义。方法通过观察临床中收集的乳腺癌患者140例,将其分为单纯化疗药物治疗对照组70例(A组);心理评估组70例(B组);两组患者均进行常规化疗药物治疗,B组患者在治疗过程中进行心理水平评估,并据此对治疗方案进行调整并给予适当的心理干预治疗,并检测两组患者血清中IL-1β、TNF-ɑ水平并比较检测值结果的变化差异来探讨其临床意义与治疗效果的关系。结果两组患者经治疗后IL-1β、TNF-ɑ的含量较治疗前均明显降低(P<0.05),B组较A组降低明显(P<0.05);A、B两组患者治疗后心理抑郁状态都有所改善,B组较A组心理评分更低。结论 (1)在临床治疗过程中,心理评估联合化疗治疗乳腺癌疗效优于单纯化疗患者。应将对乳腺癌患者进行心理评估运用到临床治疗中去,及时进行治疗方案的调整会明显改善患者的生活质量及临床症状,提高临床疗效;(2)在诊治过程中,对患者进行心理方面评估将更好的指导临床治疗,对患者的预后有更清晰的认识,更有益于改善患者的远期预后及生活质量,也为临床工作者提供了新的治疗方法;(3)临床工作中可以通过IL-1β、TNF-ɑ的异常变化来预测乳腺癌患者的治疗效果、疾病的严重程度及预后。

姜黄素对IL-1β损伤的大鼠海马神经元的功能性保护作用及机制

目的:探讨姜黄素对IL-1β损伤的大鼠海马神经元的功能性保护作用及其机制。方法:应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位(EPSP),给予Schaffer侧支高频电刺激(HFS)诱发长时程增强(LTP),观察不同药物处理组EPSP起始斜率的变化情况。结果:与对照组相比,IL-1β和N-甲基D-天冬氨酸(NM-DA)对大鼠海马脑片的LTP产生明显的抑制作用(P<0105);而姜黄素可部分拮抗IL-1β和NMDA对海马脑片LTP的抑制作用,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05);IL-1β、姜黄素和NMDA对大鼠海马神经元的基础突触传递无影响。结论:姜黄素对海马神经元具有功能性保护作用,其机制可能是作用于神经元细胞膜上的NMDA受体,拮抗IL-1β引起神经元功能异常。