构建含人白介素10受体α(IL-10RA)基因的真核表达质粒p ENTER-IL-10RA-His,并在HEK293中进行真核表达,并用免疫共沉淀检测JAK1与IL10RA在细胞内的相互作用。在He La细胞中提取人总RNA,通过RT-PCR获得人IL10RA的基因全长,并将其克隆至真...构建含人白介素10受体α(IL-10RA)基因的真核表达质粒p ENTER-IL-10RA-His,并在HEK293中进行真核表达,并用免疫共沉淀检测JAK1与IL10RA在细胞内的相互作用。在He La细胞中提取人总RNA,通过RT-PCR获得人IL10RA的基因全长,并将其克隆至真核表达载体p ENTER-His中。经PCR扩增、双酶切、测序鉴定后,将重组质粒p ENTER-IL-10RA-His转染至HEK293细胞中。免疫印迹法检测IL-10RA蛋白在HEK293细胞中的表达。结果显示,经PCR扩增和双酶切,测序鉴定质粒克隆正确。免疫印迹可见63 k D的目的蛋白。共同转染JAK1和IL-10RA的质粒,免疫印迹可见分别为133 k D和63 k D的目的条带,免疫共沉淀鉴定了JAK1和IL-10RA的相互作用。IL-10RA基因成功构建在p ENTER-His中,并在HEK293细胞中成功表达,并成功共转染JAK1和IL-10RA质粒,免疫共沉淀检测两者的相互作用。这为JAK1和IL-10RA相互作用的机制研究奠定基础。展开更多
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染严重威胁人类健康和生活质量[1]。研究发现,辅助性T细胞(T helper,Th)介导免疫应答的强度和特异性可影响HCV病毒清除和感染恢复[2]。白介素-10(interleukin-10,IL-10)主要由Th2型细胞分泌...丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染严重威胁人类健康和生活质量[1]。研究发现,辅助性T细胞(T helper,Th)介导免疫应答的强度和特异性可影响HCV病毒清除和感染恢复[2]。白介素-10(interleukin-10,IL-10)主要由Th2型细胞分泌,是一种重要的免疫调节细胞因子,可抑制由病毒感染引起的炎症反应[3]。展开更多
文摘构建含人白介素10受体α(IL-10RA)基因的真核表达质粒p ENTER-IL-10RA-His,并在HEK293中进行真核表达,并用免疫共沉淀检测JAK1与IL10RA在细胞内的相互作用。在He La细胞中提取人总RNA,通过RT-PCR获得人IL10RA的基因全长,并将其克隆至真核表达载体p ENTER-His中。经PCR扩增、双酶切、测序鉴定后,将重组质粒p ENTER-IL-10RA-His转染至HEK293细胞中。免疫印迹法检测IL-10RA蛋白在HEK293细胞中的表达。结果显示,经PCR扩增和双酶切,测序鉴定质粒克隆正确。免疫印迹可见63 k D的目的蛋白。共同转染JAK1和IL-10RA的质粒,免疫印迹可见分别为133 k D和63 k D的目的条带,免疫共沉淀鉴定了JAK1和IL-10RA的相互作用。IL-10RA基因成功构建在p ENTER-His中,并在HEK293细胞中成功表达,并成功共转染JAK1和IL-10RA质粒,免疫共沉淀检测两者的相互作用。这为JAK1和IL-10RA相互作用的机制研究奠定基础。
文摘丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染严重威胁人类健康和生活质量[1]。研究发现,辅助性T细胞(T helper,Th)介导免疫应答的强度和特异性可影响HCV病毒清除和感染恢复[2]。白介素-10(interleukin-10,IL-10)主要由Th2型细胞分泌,是一种重要的免疫调节细胞因子,可抑制由病毒感染引起的炎症反应[3]。