白介素13与白喉毒素融合蛋白靶向治疗活性的研究

目的研究白介素13与白喉毒素融合蛋白DT389-hIL13-13E13K对神经胶质瘤的靶向杀伤作用,为神经胶质瘤的无创性治疗和常规化疗的替代或补充治疗提供新的途径。方法通过诱导已构建的融合蛋白表达质粒,原核表达并获得IL-13与白喉毒素融合蛋白DT389-hIL13-13E13K。分别通过两种不同方法提纯后,用体内外实验研究不同浓度融合蛋白对神经胶质瘤的靶向杀伤活性。结果所得融合蛋白浓度纯度均达到95%以上。在体外活性实验中,两种复性纯化方法获得的融合蛋白DT389-hIL13-13E13K对神经胶质瘤均有很好的杀伤效果,半数抑制浓度(IC50)分别达到6×10-10mol/L和1×10-8mol/L,杀伤效果达到了国际水平。体内活性测定结果显示,融合蛋白DT389-hIL13-13E13K对神经胶质瘤有一定的抑制作用,但效果并未达到使肿瘤完全消退的水平。结论得到了在体内外都对神经胶质瘤有抑制杀伤作用的特异的靶向治疗融合蛋白。

白喉毒素抗肿瘤研究进展

白喉毒素(DT)是一种由感染β棒状噬菌体的白喉杆菌的外毒素。完整的DT分子由535个氨基酸组成,分子量为58.4kD。根据其结构和功能特点,自N端向C端可将其分为3个结构区:催化区(C区),由1～193氨基酸残基组成;跨膜区(T区),由205～378氨基酸残基组成;受体结合区(R区),由386～535氨基酸残基组成。R区能与真核细胞表面DT受体结合。T区在R区与受体结合后插入细胞膜中,使c区进入细胞内。C区含有ADP依赖的核糖体转移酶活性,能催化NAD+的ADP核糖基向延长因子(EF-2)转移,生成烟酰胺,使EF-2失活,阻断细胞蛋白质的合成。