白头翁皂苷B4对大鼠局灶节段性肾小球硬化的保护作用及机制研究

目的:通过单侧肾摘除联合多柔比星(ADR)诱导建立大鼠局灶节段性肾小球硬化(FSGS)模型,探讨白头翁皂苷B4对大鼠局灶节段性肾小球硬化的保护作用及其机制。方法:采用单侧肾摘除联合尾静脉注射ADR诱导建立FSGS模型;造模14 d后,白头翁皂苷B4连续给药28 d,每周测定血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Cre)、血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、尿蛋白含量;糖原染色(PAS)及马松染色(Masson)检查肾脏病理学变化;免疫组化检测肾脏caspas-3表达情况;Western Blot法检测肾脏组织中nephrin、podocin、p53、Bcl-2、Bax、caspase-3及尿液中nephrin和podocin蛋白表达水平。结果:白头翁皂苷B4可以升高FSGS大鼠血清中TP和ALB的水平(P<0.05),降低Cre、BUN含量,改善肾脏组织病理变化,减轻FSGS肾小球基底膜不规则增厚及肾小管损伤等病变;降低FSGS大鼠尿液中nephrin、podocin蛋白表达(P<0.01,P<0.05),提高肾脏nephrin、podocin蛋白表达(P<0.01,P<0.05);降低肾脏组织中caspasse-3、p53蛋白表达,上调Bcl-2/Bax蛋白比值(P<0.01,P<0.05)。结论:白头翁皂苷B4对ADR所致的FSGS具有显著保护作用,其作用机制可能通过改善肾小球足细胞nephrin、podocin的表达,抑制肾脏细胞凋亡实现。

白头翁皂苷B4对犊牛生长性能、消化代谢和瘤胃发酵的影响

【目的】通过探究白头翁皂苷B4对犊牛生长性能、消化代谢和瘤胃发酵参数的影响。为新型饲料添加剂的开发提供理论基础。【方法】试验选取60头新生荷斯坦公犊牛,随机分为4组(每组15头),分别饲喂0(C组)、15(A1组)、30(A2组)、45(A3组)mg·d^(-1)的白头翁皂苷B4。试验周期为56d。在犊牛14、28、42和56日龄晨饲前称量体重,并在28、42和56日龄晨饲后2 h采集瘤胃液,测定瘤胃发酵参数。分别在42和63日龄进行两期消化代谢试验,测定营养物质表观消化率和能氮代谢指标。【结果】(1)白头翁皂苷B4对哺乳期犊牛体重和干物质采食量无显著影响(P>0.05),但犊牛14—28日龄的平均日增重与白头翁皂苷B4呈显著正相关(P<0.05),饲料转化比与添加量呈显著负相关(P<0.05),其中A3组犊牛的平均日增重显著高于C组(P<0.05),饲料转化比显著低于C组(P<0.05)。(2)A3组犊牛7—56日龄和7—14日龄的粪便评分和腹泻率显著低于C组(P<0.05),A2组犊牛15—28日龄的粪便评分和腹泻率显著低于C组(P<0.05),白头翁皂苷B4的作用效果与添加剂量之间存在显著负相关性(P<0.05);29—42和43—56日龄犊牛的粪便评分和腹泻率在各组之间差异不显著(P>0.05)。(3)断奶前,A3组犊牛干物质采食量显著低于C组(P<0.05),A2组犊牛干物质采食量有低于C组的趋势(0.05≤P<0.10),犊牛的干物质采食量随白头翁皂苷B4添加量的增加显著降低(P<0.05),白头翁皂苷B4对犊牛干物质(DM)、粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)、中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)表观消化率的影响差异均不显著(P>0.05);断奶后,A2组犊牛的DM和NDF的表观消化率有高于A1组的趋势(0.05≤P<0.10),ADF表观消化率显著高于A1组(P<0.05);A2组犊牛EE的表观消化率有随白头翁皂苷B4添加量的增加而升高的趋势(0.05≤P<0.10)。(4)断奶前,C组犊牛摄入总能显著高于A3组(P<0.05),同时有高于A2组的趋势(0.05≤P<0.10),A1组犊牛摄入总能也显著高于A3组(P<0.05);断奶后,C组犊牛粪能有高于A2组的趋势(0.05≤P<0.10),A2组总能消化率有高于A1组的趋势(0.05≤P<0.10),总能代谢率显著高于A1组(P<0.05),且有高于C组的趋势(0.05≤P<0.10)。(5)断奶前,各组间粪氮、尿氮、氮消化率和氮沉积率差异不显著(P>0.05),C组摄入总氮显著高于A3组(P<0.05);断奶后,各组之间氮代谢指标差异不显著(P>0.05)。(6)四组犊牛瘤胃发酵参数差异不显著(P>0.05)。【结论】在哺乳期犊牛代乳品中添加白头翁皂苷B4可以显著提高哺乳期犊牛14—28日龄的平均日增重,降低料肉比和腹泻率,提高饲料转化效率,也可以提高断奶后犊牛的干物质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的表观消化率,促进对总能的消化率和代谢率,同时对犊牛瘤胃发酵指标没有不良影响。综合考虑,推荐添加剂量为45 mg·d^(-1)。

白头翁皂苷B4和PD-L1 siRNA共递送cRGD修饰靶向脂质体的制备及体外细胞摄取研究

目的制备白头翁皂苷B4(AB4)和程序性死亡配体1(PD-L1)小干扰RNA(siP)共递送环精氨酰甘氨酸天冬氨酸序列(cRGD)修饰靶向脂质体(AB4/siP-c-L),并考察其体外细胞摄取行为。方法采用乙醇注入法制备cRGD修饰的AB4靶向脂质体(AB4-c-L),将AB4-c-L与20 nmol/L的siP等体积混合,通过静电吸附得到AB4/siP-c-L。分别采用激光散射粒径测定仪、透射电子显微镜、超滤离心法、透析法、琼脂糖凝胶电泳法考察AB4/siP-c-L的粒径、Zeta电位、形态、包封率、药物含量、体外释放行为、血清稳定性。分别采用流式细胞术和共聚焦激光扫描技术评价小鼠Lewis肺癌细胞LLC对AB4/siP-c-L的摄取及其在细胞内的分布情况。结果AB4/siP-c-L的平均粒径为(187.4±3.1)nm,Zeta电位为(33.5±1.4)mV,形态呈类球形,AB4的包封率和含量分别为(95.2±0.4)%、(1.0±0.2)mg/mL;AB4/siP-c-L可较好地包裹siP,并具有较好的血清稳定性、pH敏感性以及缓释特性。LLC细胞对AB4/siP-c-L的摄取率显著高于游离药物,并能实现细胞质内富集。结论AB4/siP-c-L可有效实现AB4与基因药物siP共载,且对LLC细胞具有一定的体外靶向性。

白头翁皂苷B4基于调节巨噬细胞极化对小鼠溃疡性结肠炎的影响

目的探究白头翁皂苷B4基于调节巨噬细胞极化对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠的作用。方法将40只SPF级雄性C57BL/6小鼠(体重18~20 g)按随机数字表法分为对照组、模型组、B4组和阳性药组,每组10只。模型组、B4组和阳性药组连续给予3%DSS 5 d构建UC模型,造模成功后B4组灌胃白头翁皂苷B4(5 mg/kg,1次/d),阳性药组灌胃美沙拉秦(400 mg/kg,1次/d),对照组和模型组灌胃等量生理盐水,四组均连续干预7 d。观察干预期间小鼠体重的变化。干预结束后对小鼠结肠组织进行苏木精-伊红染色并进一步评估其病理组织学指数,并对四组炎症相关指标进行检测。qRT-PCR检测四组结肠组织中核因子κB(NF-κB)p50、p65及M1型巨噬细胞特异性指标诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、M2型巨噬细胞特异性指标精氨酸-1(Arg1)的mRNA表达水平。对四组结肠组织进行免疫组织化学染色,观察四组结肠组织中巨噬细胞极化的情况。结果模型组干预6、9、12 d的体重均低于对照组,B4组干预12 d的体重高于模型组(P<0.05或P<0.01)。对照组黏膜层肠腺排列整齐,无溃疡性病变;模型组肠黏膜层隐窝及上皮大部分丧失,并伴有大量炎症细胞浸润、炎症侵及黏膜层和黏膜下层;B4组结肠黏膜具有轻微炎症,溃疡和出血症状明显减少,上皮和隐窝较为完整,结肠黏膜损伤也得到显著改善。模型组病理组织学指数、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平及核因子κB(NF-κB)p50、NF-κBp65、iNOS mRNA表达水平高于对照组,IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)水平及Arg1 mRNA表达水平低于对照组(P<0.05)。B4组病理组织学指数、TNF-α、IL-1β、IL-6水平及NF-κBp50、NF-κBp65、iNOS mRNA表达水平低于模型组,IL-10、TGF-β水平及Arg1 mRNA表达水平高于模型组(P<0.05)。模型组M1型巨噬细胞比例高于对照组,M2型巨噬细胞比例低于对照组,B4组M1型巨噬细胞比例低于模型组,M2型巨噬细胞比例高于模型组(P<0.05)。结论白头翁皂苷B4可通过抑制M1型巨噬细胞极化,促进M2型巨噬细胞极化,改善肠道炎症环境,缓解UC。

产地加工对白头翁皂苷B_4含量的影响

目的:考察白头翁药材最佳产地加工方法。方法:2006年8月10日于凤阳县雷达山采集白头翁后,选用晒干、烘干(50℃)、105℃杀青后烘干、沸水杀青后烘干、放置2 d后烘干等5种干燥处理方法。采用高效液相色谱法测定不同加工方法的白头翁中皂苷的含量。结果:105℃杀青后50℃干燥的药材白头翁皂苷含量最高。结论:该研究对白头翁药材产地加工方法的选用提供了科学依据。

白头翁药材中白头翁皂苷B_4的测定

目的建立测定白头翁药材中白头翁皂苷B4的方法。方法比较回流法和药典超声提取法对白头翁药材中的白头翁皂苷B4的提取效果,筛选白头翁的最佳回流提取工艺。结果白头翁的最佳提取工艺为90%甲醇8倍量,回流提取3次,1.0 h/次。在选定色谱条件下,白头翁皂苷B4在15.31～459.36μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为99.46%,RSD为0.98%(n=6)。结论该方法简便易行,可用于白头翁药材中白头翁皂苷B4的测定。

复方白头翁汤结肠靶向片中白头翁皂苷B_4兔体内药动学研究

目的考察复方白头翁汤结肠靶向片(白头翁、关黄柏、黄连、秦皮)和非结肠靶向片药物代谢动力学的区别。方法 6只家兔随机分成复方白头翁汤结肠靶向组(结肠靶向)和复方白头翁汤组(非结肠靶向)。采用HPLC测定兔血浆中白头翁皂苷B4,并用DAS 2.1.1版药代动力学分析软件计算主要药动学参数。结果复方白头翁汤结肠靶向组中白头翁皂苷B4的血药浓度出现时间晚于复方白头翁汤组,其达峰时间延迟了6 h,最大血药浓度仅为复方白头翁汤组的17.59%。结论复方白头翁汤结肠靶向片与非结肠靶向片相比,具有结肠靶向的优势。

反相高效液相色谱法测定白头翁药材中白头翁皂苷B_4的含量

目的建立白头翁药材中白头翁皂苷B4的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法,色谱柱：Kromasil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈-0.1%磷酸（28∶72）为流动相,流速：1.0 ml.min-1,检测波长：205 nm,柱温：30℃。结果白头翁皂苷B4在29.4～147 mg.L-1内呈良好线性关系,相关系数为0.9999,平均回收率为99.7%,RSD为1.14%。结论该方法简便、准确、重复性好,可用于白头翁药材的质量控制。

HPLC-ELSD检测白头翁饮片中白头翁皂苷B_4的含量

目的：建立HPLC—ELSD检测白头翁饮片中白头翁皂苷B4含量方法，评价市售白头翁饮片质量；方法：采用Agilent Ecilpse XDB-C18色谱柱（4．6×250mm，5μm），以乙腈-水（29：71）为流动相，ELSD漂移管温度110℃，雾化气体（空气）流速1．6L／min，测定8批市售白头翁饮片中白头翁皂苷耽的含量；结果：白头翁皂苷B4在1．156～9．248μg范围内线性关系良好，回收率为99．4％（n=5，RSD=2．1％），8批白头翁饮片中白头翁皂苷B4的含量相差较大；结论：市售白头翁饮片质量参差不齐。

HPLC测定白头翁药材中白头翁皂苷B_4的含量

目的：建立白头翁药材白头翁皂苷B4的含量测定方法。方法：运用高效液相色谱法测定,色谱柱为Inertsil ODS-3 C18（5μm 250×4.6mm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（29：71）,流速0.8ml.min-1,柱温为常温;检测波长203nm。结果：白头翁皂苷B4在0.60～7.2μg之间线性关系良好,r=0.9 999。平均回收率为98.5%,RSD小于2.0%。结论：本法方便、准确、灵敏、重复性好,可以用于白头翁药材的质量控制。

HPLC法测定兽用白头翁颗粒中白头翁皂苷B_4含量

为了建立兽用白头翁颗粒中白头翁皂苷B4的含量测定方法.利用HPLC法,采用HypersilC18柱（250 mm×4.6 mm,5μL）,以乙腈—0.1％磷酸（27∶73,V/V）为流动相,检测波长为205 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃.以白头翁皂苷B4对照为参比,在白头翁颗粒色谱图中,对白头翁皂苷B4的保留时间及峰面积的RSD进行分析.采用外标法测定3批白头翁颗粒中白头翁皂苷B4的含量.试验结果显示,白头翁皂苷B4在0.1～2.0 mg/mL范围内呈良好的线性关系,（r=0.9995,n=6）,平均含量为11.29mg/g,平均回收率为99.28％ （RDS=2.09％,n=9）.该方法操作简便、结果准确,重复性好,可用于兽用白头翁颗粒的质量控制.

中药白头翁的皂苷 Ⅳ.主皂苷B_4和A_3结构的研究

白头翁皂苷B_4(1)经波谱及化学降解证实为双链苷,其结构为3(S),23-二羟基羽扇豆-20(29)-烯-28-酸的3-O-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基]-28-O-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖酯苷。白头翁皂苷A_3(6)为与1具有相同3-O-糖链结构的单链苷。

RP-HPLC法测定白头翁汤中白头翁皂苷B4的含量

目的建立白头翁汤中白头翁皂苷B4含量测定的RP-HPLC法。方法采用HypersilC18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm），以乙腈-水（体积比28：72）为流动相，流速为1．0mL·min^-1，检测波长205nm，柱温30℃，进样量10μL。结果白头翁皂苷B4质量浓度在0．1—1．5g·L^-1内线性关系良好（r=0．9998）；平均加样回收率为103．1％，RSD为1．2％（n=9）；重复性RSD为1．6％（n=5）。结论该方法简便、快速、准确、重现性好，为白头翁汤及其新剂型改进提供了一种质量控制方法。

白头翁皂苷B4对临床型奶牛乳房炎疗效和血清炎性因子、免疫因子的影响

为观察不同剂量白头翁皂苷B4对临床型奶牛乳房炎的疗效,及对血清炎性因子和免疫因子的影响,将36头患临床型乳房炎的奶牛随机分为低、中、高剂量3个试验组,同时选择12头健康奶牛作为对照组。试验组每日分别于颈部肌肉注射白头翁皂苷B40.025、0.05、0.1 mL·kg^(-1),连续注射6 d,对照组不注射任何药物。试验期间,观察试验组各奶牛的有效率和治愈率,同时采集对照组任意一天,及试验组1、3、5、7 d静脉血进行炎性因子和免疫因子检测,分别采集试验组1、7、12 d患病乳区奶样进行乳汁体细胞数(SCC)计数和病原微生物检测,整个试验观察至12 d,统计临床疗效。临床疗效试验结果表明,白头翁皂苷B4低、中、高3个剂量组的临床治愈率和总有效率分别为75.00%、75.00%、91.67%和100%、100%、100%,平均治愈时间分别为6.33、6.11、6.91 d。白头翁皂苷B4可显著(P<0.05)降低临床型奶牛乳房炎SCC。治疗前,36份奶样有34份检测出病原微生物,检出率为94.44%,主要为支原体、球菌和大肠埃希菌等;治疗12 d后,病原微生物总转阴率为52.94%,其中,杆菌、产色葡萄球菌、溶血葡萄球菌和大肠埃希菌的转阴率均达100%,支原体、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和球菌的转阴率分别为69.23%、60.00%、50.00%和33.33%。白头翁皂苷B4可显著(P<0.05)促使临床型奶牛乳房炎血清炎性因子CRP、SAA、HP、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α和免疫因子IgA、IgD、IgE、IgG、IgM恢复到健康水平。

白头翁皂苷B4、粉防己碱对奥沙利铂耐药的结肠癌细胞的耐药逆转作用及其机制

背景与目的:奥沙利铂(oraliplatin,L-OHP)是结直肠癌最常用的化疗药物之一,但临床上常见结直肠癌L-OHP化疗耐药。本研究旨在探讨中药单体白头翁皂苷B4(anemoside B4,AB4)以及粉防己碱(Tetrandrine,Tet)对人结肠癌L-OHP耐药细胞Lo Vo/L-OHP耐药的逆转作用,并初步研究其机制。方法:采用浓度梯度实验筛选无毒剂量的AB4、Tet,无毒剂量的AB4、Tet作用于Lo Vo/L-OHP细胞48 h后,检测Lo Vo/L-OHP细胞对L-OHP耐药的变化,检测处理后细胞凋亡、细胞周期变化情况,通过RT-PCR及Western blot检测相关基因P-gp、z DHHC9和SMAD4的m RNA及蛋白的表达水平。结果:AB4及Tet作用48 h后对Lo Vo/L-OHP细胞的5%抑制率浓度分别为0.71及0.45μg/m L,以此作为无毒剂量。L-OHP对Lo Vo/L-OHP细胞IC50为(112.5±23.6)μg/m L,分别加入0.71μg/m L AB4及0.45μg/m L Tet后,L-OHP对Lo Vo/L-OHP细胞的IC50值分别为(62.8±21.4)及(58.9±26.3)μg/m L,IC50值均显著下降(P值均<0.05)。细胞周期检测发现,AB4及Tet处理后G1期细胞略有减少,S期细胞略有增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。细胞凋亡检测发现AB4及Tet处理后凋亡率略有上升,但差异均无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR检测显示耐药细胞相对于亲本细胞,P-gp及z DHHC9基因表达升高,SMAD4表达降低(P值均<0.05),经过AB4处理后,耐药细胞P-gp基因表达下降。Western blot检测相关蛋白水平后发现,耐药细胞经过AB4处理后,P-gp蛋白表达下降,经过Tet处理后z DHHC9蛋白表达下调。结论:AB4及Tet能逆转Lo Vo/L-OHP耐药细胞对L-OHP的耐药,AB4逆转机制可能与降低P-gp表达有关,Tet逆转机制与降低z DHHC9表达水平有关。

白头翁皂苷B4体外抑制人肝癌细胞HepG2增殖并诱导其凋亡

目的筛查中药白头翁抗肝癌有效成分,探索其抗癌机制。方法分离白头翁皂苷成分,以人肝癌细胞HepG2为作用靶细胞,MTT法测定其对细胞增殖的抑制,流式细胞术检测细胞周期阻滞,DNA片断化方法检测细胞凋亡情况,检测半胱氨酸蛋白酶3酶活性,从信号通路的角度探寻其诱导凋亡的机制。结果白头翁药材含量较高的成分白头翁皂苷B4对HepG2具有显著的抑制作用,最大抑制率达到71.5%;通过细胞周期分布分析,发现最多有83.2%的细胞被阻滞在G2期;用流式细胞仪研究其凋亡情况发现,在40 mg/mL药物浓度作用下,细胞凋亡与孵育时间呈现依赖关系,随着时间从0到48 h,初期凋亡比例从接近于零最高增长到14.3%,并且发生了DNA片段化;进一步研究发现,白头翁皂苷B4处理后的HepG2细胞半胱氨酸蛋白酶3活性显著升高。结论白头翁皂苷B4调控肝癌细胞周期,阻滞G2/M期更替,诱导细胞凋亡,是肝癌治疗的潜在候选分子,奠定了白头翁药材用于肝癌治疗的理论基础。

白头翁皂苷B4对临床型乳房炎奶牛生理生化及抗氧化性指标的影响

为探究白头翁皂苷B4对临床型乳房炎奶牛生理生化及抗氧化性指标的影响,以12头健康奶牛为对照组(不注射药物)、12头临床型乳房炎奶牛为试验组,按体重0.05 mL·kg^(-1)颈部肌肉注射白头翁皂苷B4注射液,每天1次,连续6 d。试验期间,使用IDEXX ProCyte Dx全自动五分类血细胞分析仪检测对照组及试验组1、3、5、7 d血液常规指标,分别用BS-240VET全自动生化分析仪和ELISA法检测对照组任一天及试验组1、3、5、7 d血清生化指标血糖(GLU)、肌酐(CREA)、尿素(UREA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALKP)、谷氨酰转肽酶(GGT)、总胆红素(TBIL)、胆固醇(CHOL)、淀粉酶(AMYL)、脂肪酶(LIPA)和总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)水平。结果表明:(1)对照组和试验组奶牛血常规和血清生化指标均处于正常生理值范围,且试验组生理生化指标较对照组有显著改善;(2)白头翁皂苷B4显著或极显著促进临床型乳房炎奶牛抗氧化因子SOD、MDA、CAT和NOS恢复至健康水平(P<0.05或0.01),用药后7 d试验组除GSH-Px和T-AOC水平显著低于对照组外,其余各抗氧化性指标差异均不显著。综合而言,白头翁皂苷B4可促进临床型乳房炎奶牛血清生化指标均在生理范围内显著改善,有效减轻乳腺炎氧化损伤,有助于奶牛临床型乳房炎治疗。

白头翁皂苷B4对四氯化碳致急性肝损伤模型小鼠的保护作用及机制研究

目的:探讨白头翁皂苷B4保护四氯化碳(CCl_(4))致急性肝损伤模型小鼠的作用及分子机制。方法:将72只小鼠随机分为正常对照组、模型组、水飞蓟素(20 mg/kg)组及白头翁皂苷B4高(20 mg/kg)、中(10 mg/kg)、低(5 mg/kg)剂量组,12只/组,连续灌胃给药7 d,1次/d。采用腹腔注射CCl_(4)法复制小鼠急性肝损伤模型,24 h后测定相关指标。结果:白头翁皂苷B4能显著降低CCl_(4)致急性肝损伤模型小鼠脾指数、肝指数、肝组织MDA含量及血清TBIL、AST、ALT、TNF-α、IL-6、IL-1β水平,显著升高肝组织GSH-Px、SOD水平;HE染色结果显示白头翁皂苷B4能改善肝组织病理变化,显著降低肝组织病理学评分;此外白头翁皂苷B4还能降低肝组织Toll样受体-4(TLR-4)、核因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白表达。结论:白头翁皂苷B4对CCl_(4)致小鼠急性肝损伤具有保护作用,该作用与抑制TLR-4/NF-κB信号通路介导的炎症反应及抗氧化应激作用有关。

HPLC法测定白头翁中皂苷B4含量及其中药材标准化研究

目的:建立HPLC测定白头翁药材中白头翁皂苷B4含量的方法,并比较不同产地、不同生长年份对白头翁皂苷B4含量的影响,以评价白头翁药材质量。方法:HPLC流动相:乙晴∶水(28∶72);流速:1.0 mL/m in;分离柱采用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm),反相填料;柱温:室温;检测波长:205 nm。结果:皂苷B4进样量在0.312 5-10μg范围内与吸收峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 5,n=6),平均加样回收率为99.74%,RSD=3.28%(n=3)。结论:该方法简便、准确、重现性好,可用于白头翁皂苷B4的含量测定;白头翁中皂苷B4含量以安徽凤阳产药材较高,可作道地药材。