HPLC测定猫爪草不同部位的白头翁素及原白头翁素

目的 建立猫爪草中的白头翁素及原白头翁素含量测定方法,分析猫爪草不同部位的白头翁素及原白头翁素.方法 采用HPLC,色谱柱为ODS C18柱（200 mm×4.6 mm,2.5μm）;流动相为甲醇-水（25∶75）;检测波长：白头翁素220 nm,原白头翁素260 nm;体积流量0.8 mL/min,柱温：34℃.结果 白头翁素在7.6～486.4 ng（r=0.999 8）,原白头翁素在45～714 ng（r=0.999 6）有较好的线性关系;平均回收率分别为95.6％、96.8％.结论 猫爪草的不同药用部位,含量差别很大,猫爪草鲜茎叶中含原白头翁素、白头翁素,而干燥块根中未检出这两种成分.

白头翁素对腹泻小鼠肠黏膜修复因子EGFR和TGFβ1的影响

白头翁素是白头翁的主要成分,对腹泻具有显著的防治效果。本试验利用猪轮状病毒和大肠杆菌混合感染建立腹泻模型,通过免疫组织化学方法和RT-PCR方法研究白头翁素对腹泻小鼠肠黏膜修复因子EGFR和TGFβ1表达的影响,揭示白头翁素防治腹泻的肠黏膜修复机制。结果显示:小鼠腹泻初期,自愈组、治疗组和预防组黏膜修复因子EGFR和TGFβ1的蛋白表达量均有所升高,其中预防组较空白对照组差异显著(P<0.05),EGFR和TGFβ1的mRNA表达量较空白对照组也显著升高,且差异极显著(P<0.01)。腹泻后期,表达量逐渐下降直至正常。试验结果表明:白头翁素对轮状病毒和大肠杆菌混合感染性腹泻良好的预防效果可能与其调节黏膜修复因子EGFR和TGFβ1的表达有关,从而促进肠黏膜的修复。

原白头翁素生物活性中心的研究

根据原白头翁素的结构是带γ-亚甲基的共轭不饱和五元环内酯设计合成了五种辅助化合物:α-当归内酯、β-当归内酯、α-亚甲基-γ-丁内酯、β-亚甲基-γ-丁内酯γ-亚甲基-γ-丁内酯,以研究原白头翁素的结构与其生物活性的关系。通过五种辅助化合物和原白头翁素的生物活性实验,得出了原白头翁素的抗菌生物活性中心为连在五元环内酯上的亚甲基(甲叉,methylene CH_2=)的结论。

白头翁素对PRV、E.coli混合感染性腹泻肠道超微结构的影响

白头翁素是白头翁的主要成分,对腹泻具有显著的防治效果。试验利用猪轮状病毒和大肠杆菌混合感染建立腹泻模型,采用电镜技术动态观察白头翁素对腹泻小鼠肠道显微结构变化的影响,揭示白头翁素防治腹泻的机制。结果显示,感染小鼠肠绒毛损伤严重,表现萎缩脱水、空泡化和绒毛顶端膨大基底缩小的特征。白头翁素防治组小鼠肠道损伤明显减轻,肠道粘膜恢复时间显著缩短。结果表明,白头翁素对轮状病毒和大肠杆菌混合感染性腹泻具有显著防治功效,机制可能与其减轻肠道粘膜损伤并加速粘膜修复有关。

白头翁素对鸡内毒素性损伤的影响及其机制研究

为了探讨白头翁素对鸡内毒素性损伤的影响及其机制,本试验将60只海蓝灰公鸡随机分为白头翁素治疗组、自愈组和对照组。内毒素攻毒后,利用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸比色法测定血清SOD和MDA值,切片、HE染色观察组织损伤。结果表明,攻毒6 h后,治疗组和自愈组SOD值极显著低于对照组(75.16、75.94、137.7,P<0.01);白头翁素治疗54 h后,SOD值与对照组差异不显著;78 h后,治疗组SOD值极显著高于对照组(P<0.01)。攻毒6 h后,治疗组和自愈组MDA含量极显著高于对照组(1.50、1.48、0.61,P<0.01)。灌服白头翁素后MDA值下降,至78 h时与对照组差异不显著。治疗组15%的死亡率显著低于自愈组的35%。攻毒后肝细胞变性、肾小管上皮细胞坏死,72 h后逐步恢复,治疗组的恢复明显优于自愈组。表明白头翁素对鸡内毒素性损伤明显的治疗作用,可能与其增强组织的抗氧化损伤相关。

拟原白头翁素A防治小麦赤霉病和水稻白叶枯病研究

拟原白头翁素 Ａ 的化学名称为α－ 甲基－ γ－ 甲叉－ γ－ 丁内酯，结构式为 Ｃ Ｈ３ Ｏ Ｏ改进工艺路线的产品，通过几个不同生态类型地区的大田试验证明：防治小麦赤霉病按３００ｇ ａ ．ｉ／ｈ ｍ ２ ，于小麦盛花期１ 次喷雾施药，具有较好的防效和增产率，与多菌灵相比较，除表现保护作用和治疗作用的内吸杀菌剂特性外，较低的剂量更为突出。防治水稻白叶枯病按６００ｇ ａ ．ｉ／ｈｍ ２ 于病害流行期１ 次喷雾施药，７ 天后与噻枯唑（４００ ～５６２５ｇ ａ ．ｉ／ｈ ｍ ２） 相比较，药效略高，且表现在相同剂量下有更高的增产率。大田药效证明，拟原白头翁素 Ａ 对作物及天敌优势种群安全。

原白头翁素衍生物对人乳腺癌MCF-7细胞的抗增殖与诱导凋亡作用

目的探讨原白头翁素衍生物(溴甲基呋喃酮)体外对乳腺癌MCF-7细胞株的抗增殖及诱导凋亡作用。方法应用MTT法、倒置显微镜、HE染色、扫描电镜技术、吖啶橙/溴化乙锭荧光染色方法以及流式细胞技术检测原白头翁素衍生物对体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞的诱导凋亡及细胞形态学改变。结果MTT法示不同浓度原白头翁素衍生物对MCF-7细胞株均有抗增殖作用,并呈时间—浓度依赖性。倒置显微镜、HE染色、扫描电镜观察示核固缩、碎裂、凋亡小体形成等典型形态学改变。AO/EB双染色结果显示细胞死亡主要以凋亡为主。流式细胞示随着药物浓度的增加细胞凋亡率亦逐渐升高,S期细胞所占比例增大。结论原白头翁素衍生物在体外对人MCF-7乳腺癌细胞株有抗增殖及诱导凋亡作用。

拟原白头翁素A毒性试验研究

目的为了对拟原白头翁素Ａ进行初步毒理学安全性评价。方法采用大鼠急性经口和经皮毒性试验，大鼠皮肤和大白兔眼粘膜刺激试验，Ａｍｅｓ试验，小鼠骨髓微核试验，小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验。结果大鼠急性经口ＬＤ５０４．６７３９（ＩＣ４．０６１４～５．３７８７）ｇ·ｋｇ－１，经皮ＬＤ５０＞２．０ｇ·ｋｇ－１，根据化合物毒性分级为低毒；对大鼠皮肤无刺激作用，对大白兔眼粘膜有中等刺激；Ａｍｅｓ试验、小鼠骨髓微核试验和小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验阴性。结论拟原白头翁素Ａ为低毒、致突变试验阴性的化合物。

拟原白头翁素的合成与杀菌活性研究

作者的前期工作发现拟原白头翁素对水稻白叶枯病菌和小麦赤霉病菌的杀菌活性比原白头翁素更高、结构更稳定．该文继续报道拟原白头翁素系列化合物的合成，并通过离体和大田小区试验测定其对小麦赤霉病菌和水稻白叶枯病菌的杀菌活性。

促渗剂对白头翁素体外经皮渗透的影响

目的:考察几种常用促渗剂对白头翁素体外经皮渗透性能的影响,为白头翁素经皮给药系统的开发提供参考。方法:采用TK-6A型透皮扩散仪,供应室加含不同促进剂的白头翁素样品,用人皮进行体外经皮渗透实验;以HPLC测定一定时间点接受室中药物浓度,求算累积渗透量及稳态透皮速率。结果:白头翁素饱和水溶液的稳态渗透速率为(1.17±0.03)μg.cm-2.h-1,含30%、50%乙醇和3%月桂氮酮-5%聚山梨酯20、30%乙醇-3%月桂氮酮-5%聚山梨酯20的白头翁素溶液稳态渗透速率为(9.30±0.32),(18.56±0.58),(7.29±0.35),(13.77±0.16)μg.cm-2.h-1,分别使白头翁素的经皮渗透速率提高了7.9,15.9,6.2,11.8倍。结论:乙醇和月桂氮酮能显著促进白头翁素的经皮渗透,白头翁素有望开发成经皮给药制剂。

三种毛茛科植物提取物及原白头翁素的活性研究

采集打破碗花花、毛茛和白头翁3种毛茛科植物样品76个,以水、人尿、乙醇等作溶剂,用浸泡法、蒸馏法和回流萃取法等方法提取,进行生物测定,结果表明:上述植物提取物具有较低的杀虫活性,较高的离体抑菌活性,对鱼低毒从植物中提取或人工合成的原白头翁素、白头翁素(经UV、IR、NMR分析与文献值符合)等样品16个。研究证明,原白头翁素,在水溶液中性质不稳定,容易发生聚合反应,其聚合物的生物活性明显下降,但以乙醇为溶剂时,则较为稳定。

拟原白头翁素A的生殖与胚胎毒性作用研究

目的 研究拟原白头翁素A的生殖毒性作用。方法 小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验、精子畸形试验和致畸试验。结果 小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验、精子畸形实验结果为阴性。致畸试验高剂量组孕鼠体重增长减缓 (与阴性及溶剂对照组比较 ,P <0 0 5、P <0 0 1)。各剂量组胎仔体重、身长、尾长与阴性和溶剂对照组比较均有显著性差异 (P <0 0 5、P <0 0 1)。结论 拟原白头翁素A无诱发小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变和精子畸形的作用 ;高剂量对孕鼠有母体毒性 ,各剂量组均可引起胚胎发育迟缓 ,但无畸形发现。

拟原白头翁素910512－5的安全性

大鼠经口和大白兔经皮急性毒性试验、大鼠皮肤和大白兔眼刺激试验以及Ａｍｅｓ试验证明：拟原白头翁素９１０５１２－５低毒（ＬＤ（５０）：经口为４６７３．９ｍｇ／ｋｇ。经皮＞２０００ｍｇ／ｋｇ）、对皮肤无刺激性、对眼粘膜有中度刺激作用、系非致突变剂，空内毒，力测定表明。异色瓢虫成虫每头忍受剂量＞９１５０μｇ／ｍｌ，大田常规喷雾有效成分２０ｇ／６６６．７ｍ２剂量下，不影响瓢虫等天敌昆虫种群密度的动态变化。同时根据对鱼低毒的报道，可以初步认为拟原白头翁素９１０５１２－５使用是安全的。

白头翁素对腹泻小鼠肠黏膜修复因子PCNA和TGFα表达的影响

本试验利用猪轮状病毒和大肠杆菌混合感染建立腹泻模型,通过免疫组织化学方法研究白头翁素对腹泻小鼠肠黏膜修复因子蛋白表达的影响,揭示白头翁素防治腹泻的黏膜修复机制。结果显示:小鼠腹泻96h内,自愈组、治疗组和预防组黏膜修复因子PCNA和TGFα的蛋白表达量均有所升高,其中预防组显著高于空白对照组(P<0.05),腹泻96h后,表达量逐渐下降直至正常。结果表明,白头翁素防治小鼠轮状病毒和大肠杆菌混合感染性腹泻的显著效果可能与其调节黏膜修复因子PCNA和TGFα的表达有关,从而促进了肠黏膜的修复。

白头翁素凝胶剂的体外经皮渗透及小鼠抗炎试验

目的:设计白头翁素凝胶剂,考察不同浓度羟丙甲基纤维素(HMPC)及月桂氮芯卓酮对白头翁素体外经皮渗透的影响,观察优选处方的抗炎作用。方法:制备不同组分的白头翁素含醇凝胶剂,采用TK-6A型透皮扩散仪,用人皮进行体外渗透试验;用HPLC法测定各时间点接受室中药物浓度,求算经皮渗透的相关参数。用二甲苯使小鼠耳壳致肿,测定白头翁素凝胶剂对肿胀的抑制作用。结果:HPMC含醇凝胶剂作为基质时白头翁素经皮渗透速率1%HPMC>3%HPMC>5%HPMC;月桂氮芯卓酮对其有显著的透皮促进作用;含3%月桂氮芯卓酮的白头翁素1%HMPC凝胶剂可明显抑制二甲苯引起的耳壳肿胀。结论:白头翁素凝胶剂有望开发成为一种新型的中药抗炎经皮吸收制剂。

白头翁素贴片的制备与体外经皮渗透试验

目的制备白头翁素贴片,为白头翁素经皮制剂的开发提供依据。方法采用Eudragit E100为骨架材料,流涎工艺制备骨架型贴片。以HPMC醇性凝胶为储库递质,EVA为控释膜,热封法制备储库型贴片。采用TK-6A型透皮扩散仪,用人皮进行体外渗透实验;采用高效液相色谱法测定各时间点接受室中药物浓度,求算经皮渗透的相关参数。结果白头翁素骨架型贴剂经皮给药的稳态透皮速率[(1.72±0.02)mg.(cm2)-1.h-1]是其饱和水溶液的1.47倍,是储库型贴剂的2.30倍。结论白头翁素骨架型贴剂制备简单,具有较高的经皮渗透速率,有望开发成一种新型的经皮给药制剂。

白头翁素对小鼠腹腔巨噬细胞释放IL-6及TNF的影响

白头翁素为承气合剂组分之一，本实验通过体外细胞培养观察了白头翁素对小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍφ）分泌细胞因子的影响，结果表明白头翁素可抑制由内毒素（ＬＰＳ）诱导的Ｍφ释放白细胞介素６（ＩＬ－６），但对肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的分泌无影响。

拟原白头翁素A大田防治小麦赤霉病药效试验

通过合肥市、六安市两地大田试验证明：由拟原白头翁素 Ａ 加工配制成的４０％ 科农１ 号乳油，在小麦开花期使用剂量１５０、３００ 和６００ｇ／ｈｍ ２ａｉ一次地面茎叶穗部喷雾施药，均能很好地控制小麦赤毒病的流行和具一定的增产作用。与多菌灵相比，科农１ 号具有使用剂量低和对小麦穗期植株、天敌昆虫安全等特点。

原白头翁素衍生物的合成及其抑菌活性

以间硝基苯甲醛、4-甲氧基苯甲醛、3,4,5-三甲氧基苯甲醛和乙酰丙酸乙酯为原料,经过Stobbe缩合、环合两步反应合成了化合物4-(3-硝基苯甲基)-5-亚甲基-2(5H)-呋喃、4-(4-甲氧基苯甲基)-5-亚甲基-2(5H)-呋喃和4-(3,4,5-三甲氧基苯甲基)-5-亚甲基-2(5H)-呋喃。同时观察了合成的这3种化合物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性。结果表明,合成的这3种化合物对2种病原菌具有较好的抑菌效果。

拟原白头翁素910512－5鱼毒研究

拟原白头翁素９１０５１２—５对鱼类属低毒化合物。采用室内半静态法测定了它对鲤鱼的急性毒性，其结果表明：９６小时ＴＬｍ为３５．９３，２４小时、４８小时和７２小时各值依次为６３．３９、４４．３７和３７．６２（μｇ／ｍｌ）．