白念珠菌菌丝相随机扩增多态性DNA分析

目的 以白念珠菌菌丝相为研究对象 ,比较对氟康唑敏感程度不同的白念珠菌之间随机扩增多态性DNA(RAPD)图谱的差异。方法 用随机引物 5′ TCACCACGGT 3′对同一亲本来源的 16株白念珠菌菌丝相基因组DNA进行扩增 ,扩增产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳并拍照。结果 菌株CA 1～CA 13的电泳带型一致 ,均有 6条电泳带 ;CA 14～CA 17的电泳带型一致 ,均有 7条电泳带 ;CA 14～CA 17比CA 1～CA 13多 1条约 45 0bp的电泳带。

高通量GLGI鉴定及分析白念珠菌LongSAGE标签

目的鉴定并初步分析白念珠菌长片段基因表达序列分析(LongSAGE)标签。方法建立了一种高通量鉴定LongSAGE标签的技术,应用该技术可批量扩增白念珠菌LongSAGE标签,使其由17bp扩增至相应的3'cDNA末端,扩增产物TA克隆后进行测序及序列分析(GLGI)。结果30条多重匹配标签中28条得到稳定有效的扩增,40个无匹配标签中30条得到有效扩增,其中21条证实为新表达序列标签(EST),可能代表新的基因,9条和已知基因有一定同源性,可能是已知基因或其同一家族基因。结论应用高通量GLGI技术成功鉴定了白念珠菌LongSAGE标签,为进一步研究白念珠菌菌相转换机制奠定了基础。

婴儿头部念珠菌病1例及病原菌的FCM和RAPD分析

目的 报告 1例婴儿头部念珠菌病 ,并对其病原菌进行流式细胞 (FCM )和随机扩增多态性DNA(RAPD)分析。方法 对患儿皮损进行真菌镜检和培养 ,真菌经芽管试验、科玛嘉念珠菌显色培养基、API 2 0CAUX系统鉴定 ;FCM方法测量真菌细胞的总DNA含量、细胞周期及增殖指数 (PI) ,RAPD分析其基因指纹图。并以一白念珠菌标准珠为对照。结果 本例和对照白念珠菌菌株稳定生长阶段细胞的总DNA含量相等 ,G0 /G1期及G2 M期细胞数相差较少 ,S期细胞数及增殖指数相差较多 ;两株白念珠菌的扩增条带数量和片段大小无差异。结论 婴儿头部念珠菌病其病原菌进入DNA合成期的细胞多 ,增殖活性高 ,发生了致病力的变化 ,但在致病过程中基因基本稳定。