龙胆泻肝汤氯仿提取物抑制白念珠菌VVC临床株水解酶活性

该研究探讨龙胆泻肝汤氯仿提取物(CELX)对白念珠菌VVC临床株外分泌水解酶的影响。分别采用牛奶培养基、蛋黄培养基、聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温-80)培养基对15株白念珠菌VVC临床株进行分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap)、磷脂酶(PL)、脂肪酶(Lip)阳性菌株的筛选;牛奶平板法、蛋黄平板法、吐温-80平板法分别检测CELX干预后,Sap,PL与Lip的活性变化;qRT-PCR检测基因SAP1~7,10,PLB1~2,LIP3~6的表达量。结果可见,15株VVC临床株的Sap,PL均为阳性,11株Lip阳性菌株。随着CELX剂量的递增,与空白对照组相比,各含药培养基(牛奶培养基、蛋黄培养基、吐温-80培养基)上菌落的沉淀圈逐渐减小,当药物达256 mg·L-1时,菌落沉淀圈几乎消失,酶活力显著减弱。qRT-PCR结果显示,256mg·L-1CELX时,除SAP5,SAP6外,SAP1,SAP2,SAP3,SAP4,SAP7,SAP9,SAP10分别下调了62%,55%,62%,84%,61%,51%,68%;PLB1下调了67%;LIP3,LIP4,LIP6分别下调了51%,54%,55%。研究表明,CELX能抑制白念珠菌重要毒力因子天冬氨酸蛋白酶、磷脂酶与脂肪酶的活性。

氟康唑与5-氟胞嘧啶体外联合抗白念珠菌临床分离株的研究

目的评价白念珠菌临床分离株对氟康唑和5-氟胞嘧啶联合用药的敏感性及判断两药物之间相互作用的方式。方法采用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)M27-A推荐的棋盘微量稀释法,检测了30株白念株菌临床分离株对氟康唑、5-氟胞嘧啶及两药联合的体外药物敏感性,同时对两药的作用方式进行判定。结果联合用药时显著减少了每一药物MIC值的几何均数,在40%受试菌表现为协同作用方式,在53.3%的受试菌株表现为相加作用方式,在6.7%受试菌株表现为无关作用方式,未观察到拮抗作用出现。结论氟康唑和5-氟胞嘧啶联合比单一药物体外抗白念珠菌的活性高。

白念珠菌对唑类药物的耐药与对策

随着广谱抗生素、化疗药的广泛使用,器官移植手术和患有基础疾病的人群数量的激增,白念珠菌已成为人类真菌感染的最常见的病原菌。一线抗真菌药氟康唑等唑类药物的长期应用,白念珠菌的耐药株已广泛出现,引起临床医生的广泛关注。

白念珠菌临床株FLU1基因表达与氟康唑耐药的关系

近年来，深部真菌感染发生率逐渐增高．其中以白念珠菌（Candida albicans）的感染最为常见。由于氟康唑的生物利用度高（〉90％），不良反应小，常被作为首选药物，广泛用于念珠菌感染的预防和治疗。随着氟康唑的长期、大量使用，念珠菌耐药性的问题日益突出。白念珠菌主要耐药机制包括，细胞对药物外排能力的不断增强、药物作用靶点编码基因突变或高度表达等。本研究针对编码药物外排泵蛋白的FLU1基因，采用实时定量PCR技术检测白念珠菌氟康唑耐药株和敏感株的FLU1基因的表达差异．初步探讨FLU1基因表达与氟康唑耐药的关系。

主动外排系统与白念珠菌耐药关系研究

目的 了解国内白念珠菌的耐药与主动外排系统的关系。方法 通过检测若丹明 6G在敏感株和耐药株中的蓄积动力学 ,以明确白念珠菌的耐药与主动外排系统有关 ;以逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测主动外排基因cdr1和cdr2的表达水平。结果 所有菌株在能量耗竭时 ,若丹明快速进入细胞内 ,耐药株和敏感株相似 ,在加入葡萄糖提供能量后 ,耐药株外排若丹明明显 ,而敏感株细胞外液中的若丹明含量仍继续下降。RT PCR发现临床分离的耐药株和诱导耐药株主动外排基因cdr1和cdr2的表达水平均显著高于敏感株 ,回复株上述基因表达水平介于两者之间。结论 国内临床分离白念珠菌的耐药性与主动外排系统高表达有关。氟康唑具有诱导主动外排基因cdr高表达的作用 ,主动外排基因cdr的高表达可使菌株获得多重耐药性 ,但该诱导效应是可逆的。