饲料中添加白术提取物对日本沼虾生长、健康和抗病力的影响

文章研究了饲料中添加不同水平的白术提取物(Extraction of Atractylodes macrocephala Koidz,EAMK)对日本沼虾(Macrobrachium nipponense)生产性能、器官指数、血液生化指标、抗氧化能力、消化系统健康和抗病力的影响。实验以初始体重为(0.21±0.05)g的日本沼虾为研究对象,设置6个饲料处理,白术提取物添加量为0、100、200、400、600和1200 mg/kg(Control、A100、A200、A400、A600和A1200)。每个饲料处理设6个重复,每个养殖缸放入60尾虾,实验周期为75d,每天记录采食量。养殖实验期间监测水体温度为(20±3)℃,pH为7.8—8.2,亚硝酸盐为0.16—0.2 mg/L,氨氮为0.02—0.1 mg/L,溶氧>6.0 mg/L。在实验结束后,分析日本沼虾生长性能、血清生化指标、肠道消化酶和免疫指标及肝胰腺抗氧化能力,观察日本沼虾的组织结构,用嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)进行攻毒并记录存活率。结果表明:饲料中添加200 mg/kg的白术提取物可以显著提高日本沼虾的增重率(WGR)和特定生长率(SGR),并显著降低饲料系数(FC;P<0.05)。各处理组间的肝体比、出肉率和体成分均无显著性差异(P>0.05);A100组的血清葡萄糖(Glu)含量显著高于对照组(P<0.05),并能显著降低谷丙转氨酶(ALT)活性(P<0.05);各白术提取物处理组的血清甘油三酯(TG)和总胆固醇含量(TC)均显著低于对照组(P<0.05);A400组的肝胰腺GSH-Px活性显著高于A100组和对照组(P<0.05),A600组的肝胰腺CAT活性显著高于其他各组(P<0.05),A200和400组的肠道iNOS的活性显著高于对照组(P<0.05);A400组的日本沼虾肠绒毛显著高于对照组(P<0.05),并且减轻了肝细胞的空泡化,促进了鳃的完整性;A100处理组的嗜水气单胞菌攻毒后存活率显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,白术提取物可以提高日本沼虾的生长性能和抗氧化能力,提高抗病力,在日本沼虾饲料中适宜添加量为100—400 mg/kg。

白术提取物生物学功能及其在动物生产中的应用研究进展

白术属于天然可饲用植物,其粉末与提取物可作为饲料添加剂应用于动物生产。白术提取物中富含多糖、内酯及挥发油等多种活性成分,具有增强机体免疫、抗氧化、保护肠胃及抗菌等生物学功能。文章总结了白术提取物中的活性成分及生物学功能,综述了白术在动物生产中的应用,为白术进一步在动物生产中的开发与应用提供参考。

党参白术提取物分别和合用诱导IEC-6细胞增殖分化的作用

目的 观察党参提取物 (D h)和白术提取物 (B t)对小肠隐窝细胞 (IEC 6 )增殖、分化的作用及其二者配伍对IEC 6细胞增殖的影响。方法 IEC 6细胞培养 2 4h ,加入不同剂量的D h、B t及二者的配伍溶液 ,2 4h后用MTT法观察细胞增殖 ,显微镜观察细胞分化的形态特征。结果 D h在 2 5 0mg·L-1以下剂量时对细胞增殖无影响 ,剂量提高到 5 0 0mg·L-1和 10 0 0mg·L-1时 ,明显促进细胞的增殖。B t各剂量均无促进细胞增殖的作用 ,在 5 0 0mg·L-1和10 0 0mg·L-1剂量时 ,细胞增殖反见减弱。二药配伍后 ,促进细胞增殖的作用明显增强 ,具有一定的剂量依赖关系 ,其效果优于D h ;IEC 6细胞在B t作用下 ,分化程度增高 ,低倍镜下细胞呈典型的上皮细胞形态 ,细胞排列呈条索状 ,部分呈腺管状排列。高倍镜下可观察到隐约有细胞连接样结构 ,上皮细胞似有微绒毛形成的趋势。D h处理的细胞分化程度较低 ,镜下所见多为未分化的梭状细胞 ,且排列不规则 ,无任何形成腺管的趋势和有细胞连接样结构。结论 D h能促进细胞增殖 ,B t可促进细胞分化 ,二者配伍后促进细胞增殖作用明显增强 。

白术提取物及其在抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方面的初步应用

目的考察白术提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的作用。方法采用先加入过氧化氢水溶液氧化,再掺入抗坏血酸保护氧化产物方法提取白术有效成分。通过用牛津杯法测定其抗菌活性、二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),再将中耳炎模型成功的小鼠分为6组,分别为白术提取物高剂量组、中剂量组、低剂量组、氧氟沙星滴耳液组、万古霉素组和空白模型组。结果采用先氧化再保护氧化产物的方法得到白术提取物的收率为9.50%,白术提取物的MIC为0.781 mg/ml。与空白模型组比较,各实验组在给药1天后,菌落数量急速下降;各种浓度的白术提取物组在给药的第2天,菌落数量也明显下降。虽然与氧氟沙星和万古霉素相比,白术提取物起效比较慢,但在动物体内实验中对MRSA有效,并且不同浓度的白术提取物对MRSA控制效果也有差异,浓度越高,抑菌作用越强。结论本方法获得白术提取物的方法简单易行,产率高,经过体内外实验证明,可以单独用于抗MRSA,并且可以推测白术提取物对MRSA抗菌作用为浓度依赖性的。

复方白术提取物对高脂血症大鼠脂质代谢、血液流变学和微循环的影响

目的观察复方白术提取物(CBE,白术精提取物、红曲提取物)对高脂血症模型大鼠脂质代谢、血液流变学和微循环的影响。方法采用高糖高脂饲料递增酒饮建立SD大鼠高脂血症模型,造模4周后分别灌胃给予高、中、低剂量(36、24、16 mg/kg)复方白术提取物,依折麦布作为阳性药。每2周测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和动脉粥样硬化指数(AI)水平;给药7周后测定大鼠尾部微循环血流量;给药10周后,测定大鼠血液流变学指标及血清卵磷脂胆固醇酯酰基转移酶(LCAT)水平,以及肝脏中TC、TG水平和羟甲戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、脂肪酸合成酶(FAS)、酯酰辅酶A-胆固醇酰基转移酶(ACAT)水平。结果复方白术提取物3组大鼠的血清TC、LDL-C、AI及肝脏TG、HMGCR、ACAT水平降低,血清LCAT水平及尾部微循环血流量升高,血液流变学指标明显改善;复方白术提取物高剂量组血清HDL-C水平升高及肝脏TC、FAS水平降低;中剂量组血清HDL-C水平升高;低剂量组肝脏FAS水平降低。结论复方白术提取物通过抑制胆固醇、脂肪酸合成和促进胆固醇转化来调节脂质代谢,从而改善血液的流变性和微循环。

白术提取物调控miR-96抑制AngⅡ诱导血管平滑肌细胞增殖、迁移和侵袭

目的研究白术提取物对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的人脐动脉平滑肌细胞(HUASMCs)增殖、迁移和侵袭的影响及潜在分子机制。方法用125 ng/ml、250 ng/ml和500 ng/ml白术提取物分别处理10^(-7) mol/L AngⅡ诱导的HUASMCs,四氮唑蓝(MTT)和Transwell实验分别检测HUASMCs增殖、迁移和侵袭,qRT-PCR检测HUASMCs中miR-96表达,Western印迹检测细胞中细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、鼠抗人E钙黏附蛋白单克隆抗体(E-cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP)-2的表达。结果AngⅡ诱导细胞增殖、迁移和侵袭,诱导HUASMCs中miR-96表达,白术提取物可抑制AngⅡ诱导的HUASMCs增殖、迁移和侵袭,抑制AngⅡ诱导的HUASMCs中miR-96表达;抑制miR-96可抑制AngⅡ诱导的HUASMC增殖、迁移和侵袭,过表达miR-96可逆转白术提取物对AngⅡ诱导的HUASMCs增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论白术提取物通过下调miR-96抑制AngⅡ诱导的HUASMCs增殖、迁移和侵袭。

白术、酸枣仁提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果研究

试验旨在研究菊科植物白术干燥根茎切片提取物(白术提取物)、鼠李科植物酸枣的种子提取物(酸枣仁提取物)单独和联合作用对金黄色葡萄球菌的抑菌效果。通过微量肉汤法测定抑菌浓度和抑制率;用酶标仪测定相应OD值以检测核酸和蛋白质含量、乳酸脱氢酶(LDH)活力及碱性磷酸酶(AKP)活力,以确定对细菌细胞膜和细胞壁的影响,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDSPAGE)凝胶电泳检测金黄色葡萄球菌菌体总蛋白含量变化;用结晶紫染色法检测对细菌生物膜的抑制作用。结果表明:0.4 mg/mL白术、酸枣仁提取物单独及0.1 mg/mL二者联合作用对金黄色葡萄球菌均具有显著抑菌效果;与对照组相比,白术、酸枣仁提取物单独和联合作用均使菌液上清液OD_(260)、OD_(280)数值和AKP活力显著增加,菌体LDH活力和总蛋白含量降低,抑制了生物膜的形成。说明白术、酸枣仁提取物单独和联合作用均可显著抑制金黄色葡萄球菌,且联合作用抑菌效果显著强于各药物单独作用。

白术乙醇提取物调节PPAR-γ信号通路促进小胶质细胞摄取及降解Aβ的作用机制研究

目的基于过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)信号通路研究白术乙醇提取物(EEAM)促进小胶质细胞摄取及降解β淀粉样蛋白(Aβ)的作用机制。方法以小鼠神经小胶质细胞BV2为研究对象,采用激光共聚焦荧光显微镜观察EEAM(低、中、高剂量分别为0.3、0.4、0.5 mg/mL,下同)对细胞摄取和降解Aβ的影响;利用人胚胎肾细胞HEK293考察EEAM对PPAR-γ萤光素酶转录活性的影响;采用免疫荧光法考察EEAM对PPAR-γ核移位的影响;以Aβ1-42诱导阿尔茨海默病BV2细胞模型,并采用定量聚合酶链式反应法考察EEAM对PPAR-γ下游靶基因(Lxra、Lxrb、Abca1、Abcg1、Cd36、Sra和Apoe)mRNA表达的影响。结果Aβ摄取实验结果显示,经中、高剂量EEAM干预后,BV2细胞中Aβ荧光强度均显著升高(P<0.05);Aβ降解实验结果显示,经中、高剂量EEAM干预后,BV2细胞中Aβ荧光强度均显著降低(P<0.05)。经各剂量EEAM干预后,HEK293细胞中PPAR-γ萤光素酶转录活性均显著升高(P<0.05),BV2细胞中和细胞核中PPAR-γ蛋白的荧光强度(低剂量组除外)均显著升高(P<0.05),BV2细胞中Lxra、Lxrb、Abca1、Abcg1、Cd36、Sra、Apoe mRNA的表达水平均显著升高(P<0.05)。结论EEAM可通过激活PPAR-γ信号通路,促进小胶质细胞对Aβ的摄取与降解作用,进而改善阿尔茨海默病。

白术提取物对IEC-6细胞迁移过程Rho GTPaes及肌球蛋白II表达的影响

目的观察白术提取物对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移多胺介导钾通道激活信号通路指标Rho GTPaes(Rho A、Rac1和Cdc42)表达的影响,对肌球蛋白II(myosinⅡ)分布和表达的影响,以探讨益气健脾中药白术对胃肠黏膜损伤修复的作用机制。方法荧光定量PCR法检测Rho A、Rac1和Cdc42 mRNA表达;Western blot法检测Rho A、Rac1和Cdc42蛋白表达;免疫荧光法检测myosinⅡ蛋白分布和表达。结果白术提取物能提高细胞迁移过程Rho A、Rac1、Cdc42 mRNA和蛋白表达,逆转多胺合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)所致的Rho A、Rac1、Cdc42 mRNA和蛋白表达抑制;提高细胞迁移过程myosinⅡ表达,从而增加细胞骨架应力纤维形成,改善DFMO所致的myosinⅡ蛋白表达和分布的抑制。结论白术提取物促进IEC-6细胞迁移的作用机制,与其影响多胺介导钾通道激活信号通路有关。

白术提取物对db/db小鼠降血糖作用及机制研究

目的:研究白术提物对2型糖尿病db/db小鼠的治疗作用及其与GLP-1R可能的相关机制。方法:50只db/db小鼠随机分为模型对照组、白术提取物50、100、200 mg/kg组、二甲双胍150 mg/kg组,另取10只db/m小鼠作为正常对照组,各组小鼠分别灌胃给予相应的药物,给药第18 d测定口服葡萄糖耐量(OGTT),第21 d检测小鼠血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等指标,计算血糖曲线下面积(AUC)、胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);HE染色观察肝脏细胞的病理改变情况,油红O染色观察肝细胞脂滴形成情况;Western blotting法检测小鼠肝组织中胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、叉头盒蛋白O1(FOXO1)与胰腺和十二指肠同源盒1(PDX-1)的蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组小鼠体质量增长显著增加(P<0.01),血清TG、TC、FBG、FINS、IL-1β和TNF-α含量显著升高(P<0.01),AUC和HOMA-IR显著升高而ISI显著降低(P<0.01),肝脏细胞明显病变,脂滴积聚,肝组织GLP-1R、p-PI3K和PDX-1蛋白表达显著下调,FOXO1的蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组相比,白术提取物100、200 mg/kg组小鼠体质量增长明显降低(P<0.05或P<0.01),血清TG、TC、FBG、FINS、IL-1β和TNF-α含量显著降低(P<0.01),AUC和HOMA-IR显著降低(P<0.01),ISI显著升高(P<0.01),小鼠肝脏细胞病变程度明显改善,肝脏脂滴积聚减少,肝脏GLP-1R、p-PI3K和PDX-1蛋白表达显著上调,FOXO1的蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论:白术提取物明显调节自发性2型糖尿病小鼠的糖脂代谢紊乱,增强胰岛素敏感性,改善炎症水平,缓解肝脏损伤和脂质沉积,其机制可能与上调肝组织GLP-1R的蛋白表达相关。

白术醇提取物对老年小鼠记忆障碍的改善作用

探讨白术醇提取物(AME)对老年小鼠记忆障碍的改善及海马乙酰胆碱酯酶(AChE)活力的影响。实验动物分为5组:对照组选用4月龄昆明种小鼠(12只),老年组与AME组选用18月龄昆明种小鼠(48只)。采用避暗实验检测小鼠的记忆能力,生化测定小鼠海马AChE活力的变化。结果显示:(1)避暗实验中,与对照组比,老年组小鼠的步入潜伏期明显缩短(P<0.05),错误次数明显增多(P<0.01);与老年组比,中、高剂量AME组小鼠的步入潜伏期明显延长(P<0.05,P<0.01),错误次数明显减少(P<0.05)。(2)生化测定表明,与对照组比,老年组小鼠海马AChE活力显著增加(P<0.01);与老年组比,中、高剂量AME组小鼠的ACh E活力显著降低(P<0.01)。结果提示AME对老年记忆障碍有一定的改善作用,机制可能与其降低海马AChE活力有关。

白术莪术提取物对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究白术莪术提取物对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤的影响。方法给予小鼠白术莪术提取物灌胃,连续7 d,腹腔注射CCl4-花生油溶液造模急性肝损伤,16 h后测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量、肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及其肝脏、脾脏指数。结果白术莪术提取物能显著降低急性肝损伤小鼠血清中ALT、AST含量及提高肝组织中SOD活性,减小肝脏指数(P<0.01)。结论白术莪术提取物对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤具有很好的保护作用。

白术黄芪汤乙酸乙酯提取物对巨噬细胞NLRP3炎症小体的作用研究

目的:观察白术黄芪汤乙酸乙酯提取物对巨噬细胞NOD样受体-3(NLRP3)炎症小体的影响。方法:用佛波酯(PMA)(10 ng·m L-1)刺激U937细胞48 h,诱导其成为巨噬细胞,观察不同剂量白术黄芪汤乙酸乙酯提取物(0,3.125,6.25,12.5,25,50,100μg·m L-1)对细胞活力的作用,并选择合适的浓度。采用实时荧光定量(RT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)测定细胞中NLRP3,半胱天冬酶-1(caspase-1)的含量,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-1β的含量。结果:细胞计数试剂盒(CCK-8)实验表明,当药物浓度低于25μg·m L-1时,对细胞活力没有影响,当药物浓度高于50μg·m L-1时,对细胞活力有抑制作用(P<0.05),选择25μg·m L-1浓度进行后续实验。与空白组相比,LPS组细胞中NLRP3,caspase-1表达明显增加(P<0.01),细胞培养上清中的IL-1β浓度也明显增高(P<0.01)。白术黄芪汤乙酸乙酯提取物作用后,NLRP3,caspase-1,IL-1β表达均明显下降(P<0.05)。结论:白术黄芪汤乙酸乙酯提取物对LPS刺激的巨噬细胞NLRP3炎症小体有抑制作用。

白术提取液及成分对唾液淀粉酶活性的影响

目的研究白术提取液及成分对唾液淀粉酶活性的影响。方法采用淀粉酶比色测量法,进行了白术的水煎液、醇提液、白术挥发油及白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ对酶活性影响的实验。结果白术水煎液能明显增加酶的活性,白术醇提液及白术内酯Ⅰ对酶活性也有增强作用,而白术挥发油及白术内酯Ⅲ却抑制酶的活性。结论白术内酯Ⅰ可以作为白术健脾运脾的效应成分之一。

黄芪注射液和白术提取部位对小肠上皮细胞移行的影响

目的 观察黄芪注射液 (Hi)及白术提取部位 (B1、B4、B9、B13)对小肠上皮细胞 (IEC- 6 )移行的影响 ,探讨其粘膜修复的机制。方法 IEC- 6接种于 6孔培养板 ,72 h后损伤细胞 ,并加入不同剂量的 Hi、B1、B4、B9和 B13溶液 10 0 μL,空白组加等量 D- PBS,阳性对照组加表皮生长因子 (EGF) ,加药后 2 4 ,4 8和 72 h观察细胞移行。结果 B4、B9、B13和 EGF均明显促进细胞移行 ,与对照组比较 2 4 ,4 8和 72 h均具有显著性差异 (P<0 .0 1) ,但B4、B9、B13作用不如 EGF强。B1和 Hi对细胞移行无明显促进作用 ,与 EGF比较 2 4 ,4 8和 72 h均具有显著性差异 (P<0 .0 1)。 B13和 Hi配伍应用后 ,对 IEC- 6细胞移行具有协同促进作用 ,与对照组、Hi和 B13组比较 2 4 ,4 8和 72 h均具有明显差异 (P<0 .0 5～ 0 .0 1)。结论 B4、B9、B13通过促进细胞移行在小肠粘膜损伤修复过程中发挥作用 ,可能是白术粘膜保护和修复作用的物质基础。 B13和

白术甲醇提取物对小肠上皮细胞增殖、迁移及磷脂酶C-γ1表达的影响

目的观察白术甲醇提取物(以下简称白术提取物)对小肠上皮细胞(IEC-6)增殖、迁移及磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)表达的影响,旨在探讨益气健脾中药白术促进胃肠黏膜损伤修复的作用机制。方法细胞分为空白组,精脒(5μmol/L)组,白术提取物(50、100、200 mg/L)组;负荷实验设α-二氟甲基鸟氨酸[(α-difluoromethylornithine,DFMO)多胺合成抑制剂]组,精脒+DFMO组,白术提取物(50、100、200 mg/L)+DFMO组。细胞贴壁培养24 h,给予受试药培养相应时间后,采用实时细胞分析仪(Real-time Cell Analyzer,RTCA)观察白术提取物对IEC-6细胞增殖的影响;划痕法检测白术提取物对IEC-6细胞迁移数目的影响;采用荧光定量PCR法和Western blot法检测PLC-γ1 m RNA及其蛋白表达。结果与空白组比较,白术提取物对细胞增殖无明显影响(P>0.05),精脒和白术提取物(100、200 mg/L)对细胞迁移均有促进作用(P<0.01),并能增加细胞迁移过程PLC-γ1 m RNA和蛋白表达(P<0.01)。与DFMO组比较,精脒、白术提取物(100、200mg/L)能逆转DFMO所致的细胞迁移抑制及PLC-γ1 m RNA及其蛋白表达的抑制作用(均P<0.01)。结论白术提取物可通过促进多胺介导的上皮细胞迁移发挥修复胃肠黏膜损伤作用,细胞增殖不是其主要药效作用。

采用HPLC法同时检测白术中酚酸类物质

试验比较不同来源白术提取物对水杨酸、间羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、对香豆酸、阿魏酸、丁香酸、肉桂酸、芥子酸和绿原酸9种酚酸物质的高效液相色谱法检测及白术来源对其酚酸物质含量的影响。试验采用ACQUITY UPLC?BEH C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A相为0.3%乙酸水溶液、流动相B相为90%甲醇水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,DAD检测波长为285 nm,柱温为40℃。检测方法显示:9种酚酸物质的检测线性范围为0.02~500 mg/L;检出限(S/N=3)在0.002~0.01 mg/kg之间;在加标浓度为10~80 mg/kg条件下,加标回收率(N=9)在77.78%~100.47%之间,检测方法灵敏有效;标准品进样6次的结果RSD均小于5%,表明精密度良好。检测结果表明,不同来源白术提取物得到的白术提取物中水杨酸、间羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、对香豆酸、阿魏酸、丁香酸、肉桂酸、芥子酸和绿原酸9种白术提取物酚酸物质的总含量以浙江新昌产白术提取物最高。

Caco-2细胞模型评价白术对人参皂苷Rg1肠吸收影响

目的:运用Caco-2细胞模型研究白术提取物对人参皂苷Rg1肠吸收的影响。方法:建立Caco-2细胞模型及使用高效液相色谱测定人参皂苷Rg1含量方法,考察在最适细胞生长浓度下,白术提取物对人参皂苷Rg1表观渗透系数(Papp)和转运量的影响。结果:本研究成功构建了Caco-2细胞模型及人参皂苷Rg1的高效液相色谱含量测定方法,研究显示,与正常对照组相比,模型对照组中200μg/mL白术提取物可显著促进400μg/mL人参皂苷Rg1在肠道的吸收,Papp增加超过3倍(P<0.01)。结论:提示白术提取物对人参皂苷Rg1肠吸收有较好的促进作用。

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