中国栽培白灵侧耳的RAPD和IGS分析

以RAPD和IGS为分子标记,研究了中国栽培白灵侧耳Pleurotus nebrodensis菌株的遗传多样性,RAPD结果表明,供试菌株间存在多态性;对供试菌株的IGS分析表明,白灵侧耳P. nebrodensis的IGS1区域较保守,菌株间没有多态性;IGS2区域进化较快,菌株间具丰富的多态性。IGS2-RFLP可应用于白灵侧耳的菌株鉴定鉴别,较RAPD更稳定,更具可操作性。

白灵侧耳优良菌株筛选及ITS序列标记

对白灵侧耳的5个引种菌株和1个从PDA培养基上形成的原基组织分离菌株Pn622的生育期,子实体产量和形态特征进行比较试验,结果Pn622菌株出发菌株Pn6的生育期提早了11d,子实体产量增加11 76%;较其他4个菌株增产8 88%～70 40%,表明Pn622是一个优良的商业化栽培菌株。6个白灵侧耳菌株的子实体形态分为手掌形和长柄漏斗形两类。对Pn622菌株进行了ITS4＆5序列分析,建立了ITS序列分子标记。

温度胁迫对白灵侧耳菌丝保护酶活性的影响

以白灵侧耳(Pleurotus nebrodensis)菌株中农一号(CAAS 1)为试验材料,研究了温度胁迫(4℃和35℃)对菌丝体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性的影响。结果表明,温度胁迫导致3种保护酶活性均发生显著的变化。SOD活性随温度胁迫时间的延长先急剧升高后下降,在胁迫12 h时均达到最大值(低/高温胁迫分别为46.23 U/g和50.33 U/g);POD活性呈现先升高后缓慢下降的趋势,在胁迫处理24 h时达到最高值(低/高温胁迫分别为6.86 U/g和7.22 U/g);CAT活性在胁迫处理12 h内迅速上升,之后平稳上升。

不同配方培养料对白灵侧耳生长的影响

在供试的白灵侧耳培养料配方中,配方1以棉籽壳为主料(棉籽壳80%,麦麸18%,蔗糖1%,石膏1%,含水量60%),白灵侧耳菌丝生长速度最快,生长势最强,子实体产量最高,生物学效率达到94.39%,与其余5个供试培养料配方比较,差异均达到极显著水平。

白灵侧耳木质素酶、纤维素酶高活性菌株的诱变选育

通过对白灵侧耳进行原生质体制备和紫外线诱变处理,筛选出1株木质素酶、纤维素酶高产菌株B203,与出发菌株相比,羧甲基纤维素酶活力在营养生长期和子实体形成期分别是出发菌株的2.2倍和2.47倍,滤纸酶活力分别是出发菌株的1.75倍和1.68倍,漆酶、愈创木酚氧化酶和邻苯二酚氧化酶活力在营养生长期分别是出发菌株的1.54倍、1.21倍和1.25倍;在现蕾期分别是出发菌株的1.49倍、1.81倍和1.15倍,对木质素、纤维素的降解率分别比出发菌株提高了6.87%和5.65%.

白灵侧耳研究进展

从白灵侧耳的分类地位、遗传学、栽培技术、营养生理、营养成分与药用价值等方面的研究现状进行综述,并指出目前研究中存在的主要问题,对提高白灵侧耳产量和质量、促进产业发展等进行展望。

白灵侧耳交配型遗传研究

控制白灵侧耳(Pleurotusnebrodensis)担孢子单核体交配行为的交配系统由A、B两个互不连锁的因子组成。在白灵侧耳的有性生殖过程中,除可按孟德尔定律产生标准的四种交配型的担孢子外,构成B因子的遗传单位还可以发生因子内的遗传重组,产生两种新的、不同于亲本的B因子,重组率为14.1%。未发现重组型A因子。

矿质元素对白灵侧耳和鲍鱼侧耳菌丝生长的影响

研究了培养基中添加不同无机盐及其不同浓度对白灵侧耳(Pleurotus nebrodensis)和鲍鱼侧耳(Pleurotusabalonus)菌丝生长的影响。结果表明,KH2PO4、MgSO4促进白灵侧耳菌丝生长的适宜浓度分别为0.3%、0.1%,NaCl、KCl、CaSO4.2H2O的适宜浓度均为0.5%,H3BO3对白灵侧耳菌丝生长的影响较小;KH2PO4、MgSO4、NaCl、KCl、CaSO4.2H2O、H3BO3促进鲍鱼侧耳菌丝生长的适宜浓度分别为0.2%、0.1%、0.1%、0.5%、0.2%、0.01%,H3BO3对菌丝生长的促进作用微小;CaSO4.2H2O对白灵侧耳和鲍鱼侧耳菌丝生长的促进作用最大;ZnSO4.7H2O对两种侧耳菌丝生长均有明显的抑制作用。

混料设计优化白灵侧耳栽培配方

采用混料配比的设计方法,研究白灵侧耳(Pleurotus nebrodensis)栽培料的最佳配比。以棉籽壳、麦麸、玉米芯和木屑为主料,以产量和栽培周期为主要考核指标,设计4因素15种配方,分别建立产量、栽培周期与配方的回归方程,确定高产配方为:麸皮27.8%、棉籽壳36.2%、玉米芯19.7%、木屑9.3%时,产量可以达到198.3 g;最短周期配方为:麸皮14.0%、棉籽壳18.5%、玉米芯9.3%、木屑51.2%,预计得到最短周期值是146.5 d。配方验证试验表明,混料设计可用于白灵侧耳栽培配方优化。

白灵侧耳子实体多糖抗肿瘤活性研究

从白灵侧耳子实体中提取多糖 ,研究其体内抗肿瘤活性。结果显示 :用 0 .2g kg、0 .4g kg、0 .8g kg三个剂量组对荷S - 180实体瘤的昆明小鼠进行灌胃 ,对肿瘤的抑制率分别为 6 5 .4%、6 8.7%和 5 0 .1%,同时能明显提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数 ,表明白灵侧耳子实体多糖是一种具有开发前途的抗肿瘤活性多糖。

白灵侧耳菌渣中漆酶的分离纯化与酶学性质

依次采用离子交换层析(DEAE-Sepharose、CM-Sepharose和SP-Sepharose)和凝胶过滤层析(Superdex 75 HR10/300)从白灵侧耳(Pleurotus tuoliensis)菌渣中分离纯化得到一种漆酶,该酶比活力为176.1 U/mg,纯化倍数为90.7;采用EDMAN降解法和HPLC-LTQ-Orbitrap测序得到该漆酶的N端和3条肽段序列分别为LHGTHAAIGP和PGVLVQGNKGDN、ISMSCDPNFTFS、DSIQIFAGQRYSFVLNAN;对该漆酶的理化性质进行研究,结果表明:该酶相对分子质量为7.0×10^4,最适反应温度为50℃,最适反应pH为4.0,具有较好的酸耐受性,在pH 2~4孵育1 h后能保持90%以上的活性。Cd^2+、Pb^2+、Hg^2+、Zn^2+、Fe^3+、Cu^2+和Fe^2+在1.25~10 mmol/L浓度下对该酶活性具有抑制作用。

白灵侧耳栽培技术研究

白灵侧耳可以在棉籽壳、木屑、玉米芯等多种培养料上生长。以棉籽壳 (5 0 %～30 % )与木屑 (5 0 %～ 70 % )混合培养料菌丝生长最快 ,子实体产量最高。白灵侧耳培养料必须经过灭菌处理 ,充分发菌后的菌袋于 4℃低温下保存 1年仍可以出菇 ;若保存于常温下 ,则必须经过 2个月以上的菌丝后熟期才能出菇。生物学效率 (鲜品 )可高达 90 %以上。

不同营养条件对白灵侧耳菌丝生长的影响

研究了不同碳源、氮源、碳氮比、无机盐及其浓度对白灵侧耳菌丝生长的影响。结果表明,白灵侧耳菌丝生长的最适碳源是葡萄糖;最适氮源是蛋白胨;最适碳氮比为20∶1;促进菌丝生长的最适KH2PO4、MgSO4浓度分别为0.3%、0.1%;最适NaCl、KCl、CaSO4.2H2O浓度均为0.5%;CaSO4.2H2O对菌丝生长的促进作用最大;H3BO3对菌丝生长的影响最小;ZnSO4.7H2O对白灵侧耳菌丝生长有明显的抑制作用。

白灵侧耳菌株间的RAPD分析

采用CTAB法提取白灵侧耳菌丝基因组DNA,利用RAPD技术分析13个白灵侧耳菌株间的亲缘关系。结果表明,从80个随机引物筛选出11个引物,共扩增出66条带,其中多态条带50条,多态性程度为75.76%。D=0.46时,聚类分析结果可以将供试材料分为2个类群,即子实体形态为小漏斗型、柄较长的菌株聚为一类,子实体形态为手掌或马蹄型、柄很短的菌株聚为一类。揭示了白灵侧耳菌株间的亲缘关系。

白灵侧耳菌袋不同后熟期及栽培模式对产量的影响

白灵侧耳菌袋发满菌丝后,在22～25℃,通风阴暗处经30～40天的后熟处理,白灵侧耳出菇快,产量高,商品性好.最佳栽培方式为半脱袋竖立畦栽且覆土至菌棒3/4处品质好,生物转化率可达122.67%.

白灵侧耳发酵全液多糖提取及抗肿瘤活性研究

液体发酵白灵侧耳,从发酵全液中提粗多糖,研究其体内抗肿瘤活性。用0.2、0.4、0.8g/kg三个剂量组对荷S180小鼠进行灌胃。结果发现,白灵侧耳发酵全液粗多糖得率为0.97g/100ml,多糖含量为32.9%;低中高三个剂量组对肿瘤的抑制率分别为46.15%、55.42%和58.67%,同时能提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数。白灵侧耳发酵全液多糖具有抗肿瘤活性。

不同环境条件对白灵侧耳菌丝生长的影响

对白灵侧耳(Pleurotus nebrodensis)菌丝生长适宜的温度、培养料含水量、pH值进行了研究.结果表明,白灵侧耳菌丝生长的适宜温度范围为22～28℃,最适温度28℃;培养料适宜绝对含水量65%～75%,最适绝对含水量75%;适宜pH值为5.02～7.24,最适pH值5.79.

白灵侧耳菌丝营养生理特性研究

研究了白灵侧耳菌丝营养生理特性。结果表明,白灵侧耳菌丝生长适宜的碳源是葡萄糖和甘露醇;适宜的氮源是酵母膏和蛋白胨;适宜的无机盐为KH2PO4和ZnSO4;菌丝生长的最佳温度为23.8℃,最适pH为6.6,培养料最适含水量为68.6%。

白灵侧耳栽培菌株遗传多样性研究

应用分子生物学技术对白灵侧耳栽培菌株进行遗传多样性研究,在DNA水平上分析白灵侧耳栽培菌株的种质遗传学差异,为白灵侧耳菌株鉴定提供快速有效稳定的技术和方法。

pH值对白灵侧耳菌丝生长的影响

研究了不同培养基pH值对白灵侧耳菌丝生长的影响。结果表明,适宜白灵侧耳菌丝生长的培养基为培养基Ⅰ,即马铃薯200 g,蔗糖20 g,琼脂20 g,蛋白胨4 g,蒸馏水1 000 ml,最适pH值为5.79。