携带小鼠白细胞介素-12基因的增殖型腺病毒对胃癌细胞的作用

目的观察携带小鼠白细胞介素12(mIL12)基因的增殖型腺病毒载体对胃癌细胞的杀伤作用及mIL12表达情况。方法以携带目的基因的增殖型腺病毒CNHK200mIL12感染人胃癌细胞株SGC7901、人正常肝细胞株L02。首先,通过荧光显微镜下观察、细胞杀伤实验等观察病毒对细胞的杀伤能力;其次,通过Westernblot分析及双抗体夹心法(ELISA)检测mIL12表达情况。结果CNHK200mIL12感染SGC7901后,当MOI=10时即可杀伤大部分的肿瘤细胞,与ONYX015相当,而对正常细胞无明显杀伤。ELISA检测表明mIL12基因表达量达(267.2±34.6)ng/5×105个细胞/48h,较复制缺陷型腺病毒载体高近百倍。结论CNHK200mIL12能在胃癌细胞中复制及增殖杀死胃癌细胞,并高水平表达目的基因。

烫伤后高迁移率族蛋白B1对树突状细胞分泌细胞因子的影响

目的观察烫伤后大鼠高迁移率族蛋白B1（HMGBl）对树突状细胞（DC）分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-12（IL-12）的影响及意义。方法将104只大鼠随机分为正常对照组（n=8）、假烫伤组（n=32）、烫伤组（n=32）和丙酮酸乙酯（EP）干预组（n=32），后3组实验动物按观察时间再分为4个亚组，分别于烫伤后1、3、5和7d分别处死各组动物留取脾脏。分离DC后培养24h，收集孵育液，采用酶联免疫吸附试验检测TNF-α和IL-12水平；采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测脾脏组织TNF-α、IL-12和HMGBl的基因表达。结果与相同时间点假烫伤组比较，伤后不同时间点烫伤组HMGBl mRNA表达显著升高（P均〈0．01），DC孵育液中TNF-α产生减少、IL-12的产生变化不明显，脾脏TNF-α mRNA于伤后1d显著升高，5～7d迅速降至假烫伤组水平，IL-12mRNA表达在伤后1d和3d显著下调，5d和7d则迅速增强（P〈0．05或P〈O．01）；与烫伤组比较，EP干预组HMGBl mRNA表达均明显受抑，脾脏DC分泌TNF-α和IL-12的能力以及脾脏IL-12mRNA表达均显著增强（P均〈O．01）。结论严重烫伤后HMGBl的表达异常升高，可导致脾脏DC分泌TNF-α和IL-12的能力下降，从而介导机体的免疫功能抑制。