芬太尼通过ILF3-AS1/miR-132对卵巢癌细胞生长和转移的影响

目的探讨芬太尼对卵巢癌细胞生长和转移的影响及分子机制。方法2018年8月至2019年10月,体外培养卵巢癌细胞A2780,用浓度分别为0、0.5、5、50、500 ng/mL的芬太尼处理,作为不同浓度芬太尼处理组。将过表达的白细胞介素增强结合因子3反义RNA1(ILF3-AS1)(pcDNA3.1-ILF3-AS1、对照pcDNA3.1)、抑制微小RNA(miRNA/miR)-132表达(抗-miR-132、对照anti-miR-NC)的载体分别转染A2780细胞,并以500 ng/mL芬太尼处理,记为芬太尼500+pcDNA3.1-ILF3-AS1组、芬太尼500+pcDNA3.1组、芬太尼500+anti-miR-132组、芬太尼500+anti-miR-NC组。将pcDNA3.1、pcDNA3.1-ILF3-AS1、si-NC、si-ILF3-AS1转染至A2780细胞中,记为pcDNA3.1组、pcDNA3.1-ILF3-AS1组、si-NC组、si-ILF3-AS1组。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;Transwell检测细胞迁移和侵袭;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测ILF3-AS1和miR-132的表达水平;荧光素酶报告实验检测ILF3-AS1和miR-132的靶向关系。结果与0 ng/mL芬太尼处理组相比,5、50、500 ng/mL的芬太尼处理的A2780中miR-132表达水平显著升高[(1.39±0.13)、(1.68±0.17)、(2.34±0.23)比(1.00±0.10)],细胞存活率[(86.14±8.25)%、(71.03±7.11)%、(43.26±4.34)%比(100.01±10.01)%]、克隆形成数、迁移、侵袭细胞数显著降低,ILF3-AS1表达水平显著降低[(0.78±0.08)、(0.54±0.05)、(0.30±0.03)比(1.01±0.10)](P<0.05)。过表达ILF3-AS1和抑制miR-132表达均逆转了芬太尼对A2780增殖、迁移、侵袭的抑制作用。且ILF3-AS1靶向调控miR-132的表达。结论芬太尼浓度大于5 ng/mL时可抑制卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与ILF3-AS1及miR-132有关。

长链非编码RNA ILF3-AS1在临床常见恶性肿瘤中的研究进展

恶性肿瘤起病隐匿,缺乏特异性症状和有效的诊断和治疗手段,确诊时多为晚期且预后不良。高通量测序技术的发展使得针对突变基因的个体化精准治疗成为新的方向。长链非编码RNA(lncRNA)在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用。白细胞介素增强子结合因子3-反义RNA 1(ILF3-AS1)作为一种新近发现的lncRNA在诸多临床常见恶性肿瘤中表达异常。lncRNA ILF3-AS1通过多种调控机制及信号通路促进恶性肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮-间充质转化过程,其表达水平与患者临床预后密切相关。因此,未来对lncRNA ILF3-AS1进行深入研究有助于相关恶性肿瘤的早期诊断、靶向治疗和预后评估。

lncRNA LEF1-AS1通过miR-212-5p影响IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及炎性因子分泌

为探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)淋巴增强因子1反义RNA 1(lymphatic enhancer factor 1 antisense RNA 1,LEF1-AS1)靶向miR-212-5p对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡和炎性因子分泌的影响,采用qRT-PCR分析骨关节炎(osteoarthritis, OA)患者软骨细胞中LEF1-AS1和miR-212-5p的表达。用10 ng/mL的IL-1β处理人正常软骨细胞建立体外OA细胞模型。运用FACS分析软骨细胞凋亡率;ELISA检测培养上清液中IL-6、TNF-α、IFN-γ水平;qRT-PCR检测LEF1-AS1和miR-212-5p表达水平。同时,将LEF1-AS1小干扰RNA、miR-212-5p模拟物转染软骨细胞,并检测抑制LEF1-AS1或过表达miR-212-5p对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及炎性因子分泌的影响。qRT-PCR和双荧光素酶报告基因试验分析LEF1-AS1与miR-212-5p的靶向关系。结果显示,IL-1β处理显著增加软骨细胞的凋亡率(P<0.05),增加IL-6、TNF-α和IFN-γ的分泌量(P<0.05),上调LEF1-AS1表达(P=0.000),下调miR-212-5p表达(P=0.000)。抑制LEF1-AS1表达或过表达miR-212-5p可降低IL-1β诱导的软骨细胞的凋亡率(P<0.05),抑制IL-6、TNF-α和IFN-γ的分泌量(P<0.05)。miR-212-5p是LEF1-AS1的靶基因。抑制miR-212-5p表达能够减弱抑制LEF1-AS1对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及炎性因子分泌的影响(P<0.05)。该研究提示,抑制lncRNA LEF1-AS1可通过上调miR-212-5p减少IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及炎性因子分泌。

胃癌患者血清S100P、ILF3和PARP1水平与肿瘤病理特征的相关性分析

目的探讨胃癌患者血清S100钙结合蛋白(S100P)、白细胞介素增强结合因子3(ILF3)、聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)水平与肿瘤病理特征的相关性。方法选取2017年10月至2019年1月该院确诊胃癌患者93例为研究组,选择同期93例胃部良性肿瘤患者为对照组。比较两组患者血清S100P、ILF3和PARP1水平,分析血清S100P、ILF3、PARP1水平与胃癌病理特征的关系,以及诊断胃癌的效能。结果研究组血清S100P水平低于对照组,ILF3和PARP1水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌低分化患者血清S100P水平低于中高分化患者,ILF3和PARP1水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);临床Ⅰ~Ⅱ期患者血清S100P水平高于Ⅲ~Ⅳ期患者,ILF3和PARP1水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);淋巴结转移阳性患者血清S100P水平低于阴性患者,ILF3和PARP1水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌分化程度和TNM分期与血清S100P水平呈正相关(P<0.05),与ILF3和PARP1水平呈负相关(P<0.05);淋巴结转移与血清S100P水平呈负相关(P<0.05),与ILF3和PARP1水平呈正相关(P<0.05)。研究组随访1年死亡患者血清S100P水平低于存活患者,ILF3和PARP1水平升高(P<0.05)。血清S100P、ILF3、PARP1联合预测胃癌患者死亡的曲线下面积(AUC)为0.871,大于各指标单独预测的AUC(0.804、0.821和0.792)。结论血清S100P、ILF3、PARP1是胃癌诊断的重要生物标志物。