不同刺激因子对人气道平滑肌细胞白细胞介素-22R1表达的影响

目的探讨哮喘血清、地塞米松、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)等不同刺激因子对人气道平滑肌细胞白细胞介素-22R1(IL-22R1)mRNA及蛋白表达的影响。方法用免疫荧光PCR检测不同因素刺激下人气道平滑肌细胞IL-22R1mRNA的表达,用Westernblot检测人不同因素刺激下的人气道平滑肌细胞IL-22R1蛋白的表达,比较不同组别之间的差异。结果哮喘血清刺激下的人气道平滑肌细胞IL-22R1mRNA升至对照组345倍,而蛋白表达明显增强(P<0.01);加用地塞米松后IL-22R1mRNA降至对照组10倍,蛋白表达较仅用哮喘血清刺激明显减弱(P<0.01)。IL-4、IFN-γ、TGF-β刺激后人气道平滑肌细胞IL-22R1mRNA及蛋白表达均显著性增加。结论 IL-22R1表达的改变可能参与支气管哮喘的病程,影响人气道平滑肌细胞IL-22R1受体的表达可能是地塞米松发挥其在支气管哮喘病程中作用的机制之一。IFN-γ、IL-4、TGF-β对气道平滑肌细胞IL-22R1的作用可能是其对支气管哮喘疾病产生影响的机制之一。

脑缺血再灌注对腹部手术大鼠海马神经元和小胶质细胞白细胞介素-1R1表达的影响

目的探讨脑缺血再灌注损伤对腹部手术大鼠海马神经元和小胶质细胞白细胞介素-1R1(IL-1R1)表达的影响。方法24只8~10月龄雄性SD大鼠分为3组:假手术组(Sham)、腹部手术组(Surg)、腹部手术+脑缺血再灌注组(Surg+IR)。分别予以只麻醉无手术、麻醉下腹部手术、麻醉下腹部手术同时颈总动脉结扎10 min松开这3种处理。术后48 h,大鼠深麻醉下心脏灌流剥离全脑,分离海马,固定切片后,进行免疫荧光染色和共聚焦显微镜观察拍照,采用Image J计数IL-1R1阳性的神经元和小胶质细胞个数。组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)。结果Sham组、Surg组和Surg+IR组大鼠海马DG区神经元的IL-1R1阳性染色数目分别为(37.50±5.63)、(42.62±5.73)、(86.00±6.35)个;与Sham组比较,Surg组阳性染色数目差异无统计学意义(F=3.25,P>0.05),Surg+IR组阳性染色数目显著高于Sham组(F=261.36,P<0.05);Surg+IR组阳性染色数目亦显著高于Surg组(F=205.83,P<0.05)。Sham组、Surg组和Surg+IR组大鼠海马DG区小胶质细胞的IL-1R1阳性染色数目分别为(24.00±3.55)、(24.87±3.80)、(103.37±9.35)个;与Sham组比较,Surg组阳性染色数目差异无统计学意义(F=0.23,P>0.05),Surg+IR组阳性染色数目显著高于Sham组(F=504.12,P<0.05);Surg+IR组阳性染色数目亦显著高于Surg组(F=484.16,P<0.05)。结论脑缺血再灌注损伤上调腹部手术大鼠海马神经元和小胶质细胞IL-1R1表达水平。

白细胞介素-1β,-1Rα对胚胎-内膜共培养体系分泌基质金属蛋白酶-9/细胞间黏附分子-1的影响

目的探讨白细胞介素(IL)-1β,-1Rα在胚胎-内膜共培养体系中的作用。方法选取昆明种雌性小白鼠30只(6～8周龄),雄性15只(12～16周龄)进行实验。30只雌鼠成功妊娠后,收集雌鼠8细胞期胚胎并进行子宫内膜腺上皮细胞原代培养。共培养成功7份原代子宫内膜细胞,每份细胞分别接种35孔(n=35×7)。5孔细胞培养液中不做任何处理(对照组,n=5×7),其余30孔根据上皮细胞培养液中所含IL-1β浓度不同以及IL-1β+IL-1Rα比例不同共分为6组,分别为1ng/mLIL-1β组,10ng/mLIL-1β组和100ng/mLIL-1β组,以及1ng/mLIL-1β+10μg/mLIL-1Rα组,10ng/mLIL-1β+10μg/mLIL-1Rα组,100ng/mLIL-1β+10μg/mLIL-1Rα组(每组样本量:n=5×7)。将发育正常的8细胞胚胎随机置入含以上不同培养液的细胞孔内,每孔6枚胚胎,培养48h后收集培养上清液,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测培养液中分泌蛋白基质金属蛋白酶(MMP)-9/细胞间黏附分子(ICAM)-1的表达水平。结果 1ng/mLIL-1β组与10ng/mLIL-1β组,可显著促进共培养体系MMP-9/ICAM-1的表达,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);而1ng/mLIL-1β组与10ng/mLIL-1β组,以及100ng/mLIL-1β组分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。10ng/mLIL-1β+10μg/mLIL-1Rα组MMP-9/ICAM-1水平显著低于对照组(P<0.05);而1ng/mLIL-1β+10μg/mLIL-1Rα组,100ng/mLIL-1β+10μg/mLIL-1Rα组分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);1ng/mLIL-1β+10μg/mLIL-1Rα组与100ng/mLIL-1β+10μg/mLIL-1Rα组比较,差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-1β/IL-1Rα的适当比例,可以调控胚胎着床。

IRAKM及IL-1Rα基因多态性与感染性休克的关联

目的 分析感染性休克与白细胞介素受体-1相关激酶-M(IRAKM)及白细胞介素-1受体α(IL-1Rα)基因多态性的关联。方法 选取2020年1月-2022年3月武汉市第一医院收治的感染性休克患者81例为研究组,脓毒症未合并感染性休克患者85例为对照组,其中感染性休克患者根据28 d死亡情况分为病死组和存活组。采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)和PCR技术检测外周血IRAKM、IL-1Rα(对应基因IL-1RN)基因多态性,比较各组上述基因分型结果,并分析其与急性生理与慢性健康Ⅱ(APACHEⅡ)评分、序贯器官衰竭(SOFA)评分及重症监护室(ICU)住院时间的关系。结果 研究组IRAKM+22148位点GG基因型及G等位基因分布、IL-1RN*1,2基因型及等位基因2分布频率高于对照组(P<0.05),IRAKM+22148位点GG基因型及G等位基因、IL-1RN*1,2基因型及等位基因2是感染性休克发生的危险因素(P<0.05);病死组IRAKM+22148位点G等位基因分布频率高于存活组(P<0.05),是感染性休克患者病死的危险因素(P<0.05);IRAKM+22148位点GG型患者APACHEⅡ、SOFA评分、CRP及PCT水平高于AA型、AG型(P<0.05);IL-1RN*1,2型SOFA评分、CRP及PCT水平高于1,1型、其他型(P<0.05)。结论 IRAKM+22148位点G等位基因、IL-1RN等位基因2与患者感染性休克密切相关,还会增加患者不良预后的风险。

EV71脑炎患儿血清和脑脊液IL-1β、IL-1rα的变化及临床意义

目的探讨EV71脑炎患儿血清和脑脊液中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-1rα水平的变化及其临床意义。方法根据临床表现将患儿分为普通病例组、重症病例组(再分为重症病例重型组和重症病例危重型组)。并设立对照组。应用双抗体夹心ELISA法分别检测各组患儿不同时期血清、脑脊液中IL-1β和IL-1rα的水平。结果重症病例组血清和CSF中IL-1β、IL-1ra水平均高于普通病例组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);重症病例危重型组血清和CSF中IL-1β、IL-1ra水平均高于重症病例重型组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);重症病例重型组CSF中IL-1ra的水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);重症病例组急性期血清和CSF中IL-1β、IL-1ra含量均高于恢复期和对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 IL-1β和IL-1rα可能参与EV71脑炎的发病机制,对EV71脑炎的病情严重性评估及预后判断有一定意义。