白细胞介素-6受体亚单位gp80和gp130在骨质疏松症中的基因表达(英文)

目的观察骨质疏松症骨髓白细胞介素-6(IL-6)受体(IL-6R)亚单位gp80和gp130基因表达的变化,探讨IL-6R复合系统在雌激素缺乏所致骨质疏松中的作用。方法12周龄雌性SD大鼠20只犤体重(200±20)g犦随机分为骨质疏松组(10只)和空白对照组(10只)。分别于造模后0、12周,测定大鼠骨髓gp80和gp130mRNA水平。结果gp130mRNA水平(pg/μgtotalRNA):术后0、12周空白对照组无明显变化犤(80±3)和(82±4),t=0.85,P>0.05犦,骨质疏松组明显增加犤(80±3)和(290±40),t=6.46,P<0.01犦。gp80mRNA水平(pg/μgtotalRNA):术后0、12周空白对照组无明显变化增加犤(85.4±2.7)和(85.6±2.8),t=0.35,P>0.05犦,骨质疏松组明显增加犤(85.2±2.7)和(210±40),t=6.32,P<0.01犦。结论卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨髓IL-6R亚单位gp80和gp130基因表达增加。

转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α、可溶性白细胞介素2受体及T细胞亚群与肺尘埃沉着病分期和肺功能的关系

目的 探讨外周血和支气管肺泡灌洗液（BALF）中转化生长因子-β1 （TGF-β1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）水平及外周血T细胞亚群与肺尘埃沉着病（简称尘肺）分期和肺功能的关系.方法 选择2010年4月～2012年7月在郑州煤炭工业集团有限责任公司总医院治疗的尘肺患者68例为尘肺组,另选择同期接尘组和对照组各35例,采用酶联免疫吸附法检测三组外周血及尘肺组BALF中TGF-β1、TNF-α、sIL-2R水平,采用流式细胞技术检测三组外周血T细胞亚群并检测尘肺组肺功能.结果 尘肺组、接尘组和对照组血清TGF-β1和sIL-2R水平差异有统计学意义（P＜0.05）,尘肺组不同分期血清TGF-β1、TNF-α、sIL-2R水平差异有统计学意义（P＜0.05）,不同尘肺分期血清TGF-β1、sIL-2R水平均显著高于接尘组和对照组（P＜0.05）,Ⅱ、Ⅲ期血清TNF-α水平显著低于接尘组和对照组（P＜ 0.05）；血清TGF-β1、sIL-2R水平与尘肺分期呈正相关（P＜0.05）,血清TNF-α水平与尘肺分期呈负相关（P＜0.05）.不同分期尘肺患者BALF中TGF-β1、TNF-α、sIL-2R水平差异均有统计学意义（P＜0.05）,尘肺患者BALF中TGF-β1、TNF-α水平与分期无显著相关（P＞0.05）,尘肺患者BALF中sIL-2R水平与分期呈正相关（P＜0.05）.尘肺组、接尘组和对照组外周血CD8＋及CD4＋/CD8＋差异有统计学意义（P＜0.05）,不同尘肺分期外周血CD4＋、CD8＋及CD4＋/CD8＋差异有统计学意义（P＜0.05）,Ⅱ、Ⅲ期尘肺外周血CD4＋及CD4＋/CD8＋显著低于接尘组和对照组（P＜0.05）,Ⅰ、Ⅲ期尘肺外周血CD8＋百分百显著高于接尘组和对照组（P＜0.05）；外周血CD4＋、CD8＋百分百与尘肺分期无显著相关（P＞0.05）,而CD4＋/CD8＋与尘肺分期呈负相关（P＜0.05）.外周血TGF-β1水平与FVC、FEV1/FVC及DLCO呈负相关,sIL-2R与FVC、DLCO呈负相关,TNF-α水平与肺功能无显著相关,CD4＋百分百与FEV1/FVC、DLCO呈正相关,CD8＋百分百与FVC呈负相关,CD4＋/CD8＋与FVC、DLCO呈正相关.外周血TGF-β1水平与CD8＋呈正相关,与CD4＋/CD8＋呈负相关,TNF-α与CD4＋/CD8＋呈正相关,sIL-2R与CD4＋、CD4＋/CD8＋呈负相关,与CD8＋呈正相关.结论 不同分期尘肺患者均可能存在细胞免疫抑制状态,外周血TGF-β1高表达可能参与了尘肺的纤维化过程和肺功能的损害,TNF-α与尘肺分期有关可能与肺功能损害无关,sIL-2R高表达及CD4＋/CD8＋倒置形成的免疫抑制参与尘肺分期进展和肺功能损害.

白细胞介素12的p35和p40在大肠埃希菌中的克隆表达

目的用基因工程的方法在大肠埃希菌中克隆表达白细胞介素12(IL12)的两个亚单位基因p35和p40。方法从乳腺癌患者全血中分离淋巴细胞,利用RTPCR扩增获得了IL12的2个亚单位基因p35和p40,分别转化到大肠埃希菌中,获得了高效表达。结果薄层扫描分析结果表明,在BL21(DE3)中表达的重组蛋白IL12P35和IL12P40分别占菌体裂解液中蛋白总量的39%和30%。结论该实验结果为IL12在体外的批量生产奠定了基础。

胎盘生长因子可溶性血管内皮生长因子受体-1及白细胞介素-12在子痫前期患者中的表达水平及临床意义

目的分析胎盘生长因子(PLGF)、可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)及白细胞介素-12(IL-12)在子痫前期患者中的表达水平及临床意义。方法收集2019年3月—2020年3月义乌市中心医院收治的子痫前期患者68例(子痫前期组),依据病情严重程度再分亚组:轻度组(轻度子痫前期46例)、重度组(重度子痫前期22例),依据发病孕周再分亚组:早发组[早发型子痫前期29例(发病孕周<34周)]、晚发组[晚发型子痫前期39例(发病孕周≥34周)]。另选取同期同院住院建立产检档案的孕妇63例作为对照组。统计子痫前期组胎儿结局,对比不同组PLGF、sFlt-1及IL-12表达水平。采用Pearson相关性分析法分析PLGF、sFlt-1及IL-12与子痫前期患者不良胎儿结局的关系。结果对照组PLGF、sFlt-1及IL-12表达水平分别为(125.16±15.31)ng/L、(8.14±1.36)ng/ml、(121.54±8.15)pg/ml;子痫前期组PLGF、sFlt-1及IL-12表达水平分别为(65.07±11.54)ng/L、(18.86±2.87)ng/ml、(166.86±8.64)pg/ml。子痫前期组患者sFlt-1、IL-12表达水平均高于对照组,而PLGF表达水平则明显低于对照组(均P<0.05)。早发组PLGF、sFlt-1及IL-12表达水平分别为(51.24±9.71)ng/L、(21.36±3.45)ng/ml、(209.87±12.64)pg/ml;晚发组PLGF、sFlt-1及IL-12表达水平分别为(75.36±9.54)ng/L、(17.01±3.31)ng/ml、(134.88±12.57)pg/ml。早发组患者sFlt-1、IL-12水平均高于晚发组,而PLGF水平则明显低于晚发组(均P<0.05)。重度组患者sFlt-1、IL-12水平均高于轻度组,而PLGF水平则明显低于轻度组(均P<0.05)。68例子痫前期患者中,18例患者出现胎儿结局不良。不同胎儿结局子痫前期患者sFlt-1、IL-12水平由高到低为:胎儿生长受限[(10.69±2.30)ng/ml,(133.69±10.37)pg/ml]<胎儿窘迫[(15.88±2.47)ng/ml,(158.27±10.82)pg/ml]<新生儿窒息[(24.15±3.71)ng/ml,(199.34±12.39)pg/ml]<新生儿死亡[(30.22±3.64)ng/ml,(239.62±13.87)pg/ml],PLGF水平由高到低为:胎儿生长受限[(83.65±8.21)ng/L]>胎儿窘迫[(60.34±8.34)ng/L]>新生儿窒息[(45.12±6.13)ng/L]>新生儿死亡[(29.16±4.87)ng/L],差异均有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示:sFlt-1、IL-12水平与胎儿不良结局呈正相关,PLGF与胎儿不良结局呈负相关(均P<0.05)。结论PLGF、sFlt-1及IL-12表达水平与子痫前期患者病情及妊娠结局之间有紧密联系,监测三者水平变化对预测患者病情严重程度及不良妊娠结局有重要参考价值。

血清SIGIRR、sTRAIL与传染性单核细胞增多症患儿外周血T细胞亚群和肝脏损伤的关系研究

目的 探讨传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis, IM)患儿血清单免疫球蛋白白细胞介素1相关受体(single immunoglobulin interleukin-1 related receptor, SIGIRR)、可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(soluble tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand, sTRAIL)与外周血T细胞亚群和肝脏损伤的关系。方法 选取2020-01/2023-01月作者医院收治的95例IM患儿为IM组,另选取同期100例体检健康儿童为对照组。根据IM患儿是否发生肝脏损伤分为肝脏损伤组(n=49)和无肝脏损伤组(n=46)。采用酶联免疫吸附试验法检测血清SIGIRR、sTRAIL水平,流式细胞术检测外周血T细胞亚群(CD3^(+)、CD16^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))。通过多因素Logistic回归分析探讨IM患儿肝脏损伤的影响因素,受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线分析血清SIGIRR、sTRAIL对IM患儿肝脏损伤的预测价值。结果 与对照组健康儿童比较,IM组患儿血清SIGIRR水平和外周血CD16^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)降低,血清sTRAIL水平和外周血CD3^(+)、CD8^(+)升高(P均<0.05)。Pearson相关性分析显示,IM患儿血清SIGIRR水平与外周血CD16^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)呈正相关关系,与CD3^(+)、CD8^(+)呈负相关关系(P<0.05),血清sTRAIL水平与外周血CD16^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关关系,与CD3^(+)、CD8^(+)呈正相关关系(P<0.05)。单因素分析结果显示,病程、白细胞计数、CD3^(+)、CD16^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、SIGIRR水平、sTRAIL水平为IM患儿肝脏损伤的影响因素(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,CD3^(+)、CD16^(+)、sTRAIL升高为IM患儿肝脏损伤的独立危险因素,CD4^(+)/CD8^(+)、SIGIRR升高为其保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清SIGIRR、sTRAIL单独和二者联合预测IM患儿肝脏损伤的曲线下面积(area under the curve, AUC)分别为0.786、0.737、0.836,二者联合对IM患儿肝脏损伤预测效能的AUC大于SIGIRR、sTRAIL单独的预测效能。结论 IM患儿血清SIGIRR水平降低和sTRAIL水平升高与外周血T细胞亚群异常、肝脏损伤密切相关,血清SIGIRR、sTRAIL水平联合检测对IM患儿肝脏损伤的预测价值更高。

再生障碍性贫血患者CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞及T淋巴细胞亚群表达的研究

[目的]探讨再生障碍性贫血（AA）患者CD4＋ CD25＋ CD127low/-调节性T细胞（Treg）和T淋巴细胞亚群的表达及其在疾病发生发展过程中的意义.[方法]采用流式细胞术分别检测本院28例AA患者和20例健康对照组外周血CD4＋ CD25＋ CD1271ow/-Treg的比例以及T淋巴细胞亚群的表达.[结果]AA患者组CD4＋ CD25＋ CD127low/-/CD4＋ Treg为（4.60±2.11）％,健康对照组为（7.50±1.62）％,两组比较差异具有显著性（P＜0.05）.外周血T淋巴细胞亚群的表达AA组为CD3＋ CD4＋/CD3＋ （Th）：（42.47±5.22）％,CD3＋ CD8＋/CD3＋ （Ts）：（47.46±7.06）％,Th/Ts：0.92±0.19,健康对照组分别为CD3＋ CD4＋/ CD3＋（Th）：（53.28±4.92）％,CD3＋ CD8＋/CD3＋ （Ts）：（37.06±6.08）％,Th/Ts：1.52±0.33,两组比较差异均具有显著性（P＜0.01）.[结论]AA患者CD4＋ CD25＋ CD127low/-Treg细胞数量的减少可能使免疫活性细胞逃避机体对它们的免疫调节,导致体内诱导免疫耐受机能不足,从而促进疾病的发生发展.AA患者存在T淋巴细胞亚群的失调,CD4＋T淋巴细胞减低,CD8＋T淋巴细胞增多导致CD4＋/CD8＋比值降低可能是其重要的免疫学发病机制,进行CD4＋ CD25＋ CD127low/-Treg和T淋巴细胞亚群的检测有助于评估AA患者免疫功能状态及辅助诊断和指导治疗.

IL-12双亚基共表达载体的构建及其在人骨髓间充质干细胞中的表达

目的构建人IL-12(hIL-12)p40和p35双亚基真核共表达载体并转染人骨髓间充质干细胞(hMSC)。方法根据hIL-12p40和p35亚基全长cDNA序列分别设计合成引物行PCR扩增,将扩增所得p40和p35片段采用overlapPCR法拼接,获得的rhIL-12融合基因与pGEM-TEasy质粒连接,将鉴定正确的pGEM-T/rhIL-12重组质粒克隆至pcDNA3.1(+)真核表达质粒中,构建pcDNA3.1(+)/rhIL-12真核表达载体,并进行测序鉴定。将鉴定正确的pcDNA3.1(+)/rhIL-12经脂质体介导转染hMSC,同时以转染pcDNA3.1(+)空质粒作为对照组,在倒置显微镜下观察细胞生长形态;在转染后第4天采用蛋白质印迹法检测细胞培养上清液中rhIL-12融合基因的表达;另分别在转染后第2、4、6、8、10、12、14天,采用ELISA方法检测细胞培养上清液中rhIL-12融合基因的表达水平。结果PCR扩增结果显示特异性扩增出p40(1000bp)、p35(600bp)、rhIL-12(1600bp)片段,均与预期DNA表达片段大小一致。pcDNA3.1(+)/rhIL-12测序显示克隆的rhIL-12基因序列与报告序列完全相同。倒置显微镜下观察,可见转染pcDNA3.1(+)/rhIL-12的hMSC生长形态和生长速度与对照组hMSC相比均无明显差异。蛋白质印迹和ELISA检测显示,转染pcDNA3.1(+)/rhIL-12的hMSC培养上清液中可见rhIL-12融合蛋白的持续表达;而对照组中均未检测到rhIL-12融合蛋白表达。结论成功构建了hIL-12p40和p35双亚基真核共表达载体pcDNA3.1(+)/rhIL-12,为利用hIL-12进行非病毒载体抗肿瘤基因治疗奠定了基础。目的构建人IL-12(hIL-12)p40和p35双亚基真核共表达载体并转染人骨髓间充质干细胞(hMSC)。方法根据hIL-12p40和p35亚基全长cDNA序列分别设计合成引物行PCR扩增,将扩增所得p40和p35片段采用overlapPCR法拼接,获得的rhIL-12融合基因与pGEM-TEasy质粒连接,将鉴定正确的pGEM-T/rhIL-12重组质粒克隆至pcDNA3.1(+)真核表达质粒中,构建pcDNA3.1(+)/rhIL-12真核表达载体,并进行测序鉴定。将鉴定正确的pcDNA3.1(+)/rhIL-12经脂质体介导转染hMSC,同时以转染pcDNA3.1(+)空质粒作为对照组,在倒置显微镜下观察细胞生长形态;在转染后第4天采用蛋白质印迹法检测细胞培养上清液中rhIL-12融合基因的表达;另分别在转染后第2、4、6、8、10、12、14天,采用ELISA方法检测细胞培养上清液中rhIL-12融合基因的表达水平。结果PCR扩增结果显示特异性扩增出p40(1000bp)、p35(600bp)、rhIL-12(1600bp)片段,均与预期DNA表达片段大小一致。pcDNA3.1(+)/rhIL-12测序显示克隆的rhIL-12基因序列与报告序列完全相同。倒置显微镜下观察,可见转染pcDNA3.1(+)/rhIL-12的hMSC生长形态和生长速度与对照组hMSC相比均无明显差异。蛋白质印迹和ELISA检测显示,转染pcDNA3.1(+)/rhIL-12的hMSC培养上清液中可见rhIL-12融合蛋白的持续表达;而对照组中均未检测到rhIL-12融合蛋白表达。结论成功构建了hIL-12p40和p35双亚基真核共表达载体pcDNA3.1(+)/rhIL-12,为利用hIL-12进行非病毒载体抗肿瘤基因治疗奠定了基础。

携带抗白细胞介素-2受体α单抗靶向超声微泡和对比超声结合评价肾缺血-再灌注损伤

目的探讨携带抗白细胞介素-2受体α(IL-2Rα)单抗靶向超声微泡和对比超声结合评价肾缺血再灌注损伤(IRI)的可行性。材料与方法采用"亲和素-生物素"桥接法构建携抗IL-2Rα靶向超声微泡(MBIL-2Rα)和携同型抗体对照微泡(MB)。10只左肾缺血50min的小鼠,再灌注24h后,随机先后注入MBIL-2Rα和MB(间隔30min),分别于注入5min后行对比超声检查,并测量肾的声强度(VI)。结果对比超声图像显示MBIL-2Rα组左肾造影显著增强,VI值高达21.6±4.8U,而在MB组左肾仅见轻度造影增强,VI值为9.7±2.9U,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。但无论是MBIL-2Rα组还是MB组左肾VI值均明显高于右侧肾脏VI值(3.8±1.5U,3.7±1.7U,P<0.05)。两组右侧肾脏之间VI值未见明显差异。结论 MBIL-2Rα和对比超声相结合能够有效评价肾IRI,从而对肾移植后的排斥反应提供有价值的信息。

固有淋巴细胞亚群及其活化因子水平与高血压性基底节区脑出血术后颅内感染的关系研究

目的探讨外周血固有淋巴细胞(ILCs)亚群及其活化因子水平与高血压性基底节区脑出血患者术后颅内感染的关系。方法选取高血压性基底节区脑出血术后颅内感染患者(感染组,n=105)和未感染患者(未感染组,n=105)作为研究对象,根据术后颅内感染严重程度将感染组患者分为轻度感染组(n=33)、中度感染组(n=50)和重度感染组(n=22),根据不同预后将感染组患者分为预后良好组53例和预后不良组52例。比较各组外周血ILCs亚群(ILC1、ILC2、ILC3)、白细胞介素(IL)-12、IL-33、IL-1β水平。分析各指标与颅内感染程度的相关性及对感染患者预后不良的预测价值。结果与未感染组比较,感染组ILC2、ILC3水平均降低,IL-12、IL-33和IL-1β水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。感染患者ILC2、ILC3水平随着感染程度的增加而下降,IL-12、IL-33和IL-1β水平随着感染程度的增加而上升,差异有统计学意义(P<0.05)。颅内感染患者ILC2、ILC3水平均与感染严重程度呈负相关(r=-0.721、-0.596,P<0.001),IL-12、IL-33、IL-1β水平均与感染严重程度呈正相关(r=0.576、0.483、0.553,P<0.001)。外周血ILC2、ILC3、IL-12、IL-33、IL-1β联合预测感染患者预后不良的AUC(0.930)和特异度(84.91%)大于或高于各指标单独预测。结论高血压性基底节区脑出血术后颅内感染患者外周血ILC2、ILC3、IL-12、IL-33和IL-1β水平均与感染严重程度有关,5项指标联合检测对感染患者不良预后具有良好的预测价值。

白细胞介素8受体

IL—8受体主要存在于人中性粒细胞表面,可分为高亲和力和低亲和力两种类型,除IL—8外,NAP—2和gro/MGSA也能直接与IL—8受体作用。由cDNA克隆表达出的IL—8受体分子含350个氨基酸残基,属G蛋白偶联受体超级家族。IL—8能动态地调节自身受体在中性粒细胞表面的表达。IL—8受体所介导的信号传递涉及细胞膜钙通道的开放、对PTX和CTX敏感的G蛋白亚单位的转导、PKC的激活和磷脂酰肌醇代谢的参与。

口腔扁平苔藓组织中白细胞介素35受体的表达及意义

目的通过检测白细胞介素35受体(IL-35R)两亚基糖蛋白130(gp130)、白细胞介素12受体β2(IL-12Rβ2)及信号转导和转录激活因子(STAT)1、STAT4在口腔扁平苔藓(OLP)组织中的表达,探讨IL-35R在OLP病损形成和发展中的作用及意义。方法收集41例OLP组织(OLP组)和15例正常口腔黏膜组织(对照组)为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测组织中gp130、IL-12Rβ2、STAT1、STAT4 mRNA的表达水平,免疫组织化学(IHC)检测组织中gp130、IL-12Rβ2蛋白的表达及分布,并分析gp130、IL-12Rβ2蛋白表达与OLP临床特征的关系。结果1)OLP组gp130、IL-12Rβ2、STAT1、STAT4 mRNA的相对表达量均高于对照组(P<0.05)。2)OLP组gp130、IL-12Rβ2蛋白的阳性表达率均高于对照组(P<0.05),且gp130、IL-12Rβ2蛋白在OLP组织中的表达呈正相关(r=0.984,P<0.001)。3)糜烂型OLP组织gp130、IL-12Rβ2蛋白的阳性表达率高于非糜烂型(P<0.05)。结论IL-35R及STAT在OLP组织中表达上调,且IL-35R的表达与OLP的临床分型有关,提示IL-35R可能在OLP病损形成及发展中起重要作用。

HBV相关肝细胞癌患者中LAIR-1的表达变化及与T细胞亚群和IL-10的关系

目的探究血清可溶性白细胞相关免疫球蛋白样受体1(Soluble leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor-1,sLAIR-1)在HBV相关肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)患者中的表达变化及其与患者中的含量变化及其与T细胞亚群、IL-10和临床病理学参数间的关系。方法选取31例HBV相关HCC患者为研究对象,同时选取25例慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者和同期健康体检者(healthy control,HC)作为对照组,3组人群年龄和性别构成比无显著差异。酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定血清sLAIR-1和IL-10;流式细胞术检测外周血T细胞亚群频率。结果与CHB和HC组相比,HCC患者血清sLAIR-1和IL-10均显著上调,CD3+CD4+T和CD4+T/CD8+T则显著下降,而CD3+CD8+T在3组间无显著差异。血清sLAIR-1水平与HCC患者年龄、性别和肿瘤大小无相关性,而淋巴结转移、肝硬化以及TNM分期密切相关。相关性分析发现HCC患者血清sLAIR-1与IL-10呈显著正相关性。结论血清sLAIR-1在HBV相关HCC中异常上调,且与淋巴结转移、肝硬化及TNM分期相关,并与免疫抑制因子IL-10呈显著正相关性临床病理学参数及IL-10相关,可能参与了HCC的发生发展过程。

α7亚单位的N型乙酰胆碱受体对急性呼吸窘迫综合征小鼠CD11b和炎症因子的影响

目的探讨α7亚单位的N型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptorsα7,α7nAChR)对急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distresssyndrome,ARDS)小鼠CD11b、白细胞介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)的影响。方法健康清洁级雄性Balb/C小鼠40只(6周),完全数字随机分为正常组(N组)、生理盐水对照组(NS组)、ARDS组(A组)、ARDS+段离颈部两侧迷走神经给予乙酰胆碱受体激动剂组(J组),每组各10只正常饲养。用HE染色观察各组小鼠右肺结构,检测肺组织湿重/体质量比值(LWW/DW比值),采用流式细胞仪检测小鼠肺泡灌洗液CD11b的百分比,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测左肺组织IL-1βmRNA、IL-18 mRNA和TNF-αmRNA的表达,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)双抗体夹心法测定各组小鼠血清IL-18含量。结果N组和NS组小鼠右肺HE染色显示结构正常,而A组小鼠肺间质有大量的炎性细胞浸润,肺泡壁增厚、肺泡结构破坏明显,肺泡腔融合。J组小鼠肺泡结构较完整、有少许破损、肺泡腔存在。A组小鼠肺泡灌洗液CD11b百分比高于其他3组,分别与N组、NS组、J组比较差异有统计学意义(P<0.05)。J组小鼠左肺IL-1βmRNA、IL-18 mRNA和TNF-αmRNA的表达分别与N组、NS组、A组比较差异有统计学意义(P<0.05),A组小鼠血清IL-18水平高于其他3组,分别与N组、NS组、J组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论激活α7nAChR可以直接抑制肺组织CD11b的释放,减少炎症因子的集聚;同时还可以直接抑制肺组织炎症因子IL-1βmRNA、IL-18m RNA和TNF-αmRNA的表达和IL-18的释放,从而抑制ARDS的炎症反应,减轻ARDS病理变化。

白细胞介素12亚单位p40基因1188A／C多态与多发性硬化的关系

目的探讨中国南方人群中白细胞介素12亚单位p40（IL-12B）基因＋1188A／C位点多态与复发缓解型多发性硬化（RRMS）的相关性。方法收集中山大学附属第三医院神经内科就诊的RRMS患者94例，以145名性别、年龄相匹配的健康体检者为对照，采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）方法检测IL-12B基因＋1188A／C位点多态，并进行统计学分析。结果RRMS患者IL-12B基因＋1188A／C位点A等位基因频率（64．4％）高于健康对照组（53．8％），差异有统计学意义（Х^2=5．228，P=0．022）。携带A等位基因增加RRMS发病的危险性（OR=1．551，95％CI 1．064—2．262）。结论IL-12B基因＋1188A／C位点多态与RRMS相关，A等位基因可能是中国南方人群RRMS发生的危险因素。

阻断白介素12p40功能的新型治疗性单克隆抗体的开发

目的设计并利用抗体工程方法构建并制备全新序列的阻断白介素12(IL-12)p40功能的单克隆抗体MAB1,并对其生物学活性进行鉴定,以制备可应用于治疗多种自身免疫病的IL-12通路的阻断剂。方法根据已有的IL-12 p40蛋白序列,设计、构建并制备了全新的单克隆抗体MAB1,利用间接ELISA测定其与抗原结合的亲和力,并用细胞学方法鉴定它的生物学活性。结果抗体MAB1与p40抗原的结合亲和力为0.0399 nmol/L,并能明显抑制IL-12诱导的人皮肤淋巴细胞相关抗原(CLA)水平上调。其抗原结合能力以及抑制IL-12生物学活性能力与美国强生公司抗体药Stelara(ustekinumab)相当或更优。结论全新构建的单克隆抗体MAB1可作为IL-12通路的高亲和力阻断剂,从而成为自身免疫疾病(例如斑块型银屑病)治疗用新药的临床候选药物。

骨质疏松大鼠骨髓白细胞介素6受体亚单位gp80和gp130基因的表达

以竞争性RT PCR研究骨质疏松模型大鼠骨髓白细胞介素 6受体亚单位gp80和 gp13 0基因的表达。结果表明这些骨质疏松大鼠的 gp80和gp13 0mRNA基因表达增加 ,该变化可能为雌激素丢失所致骨质疏松的形成机制之一。

乙酰胆碱受体对急性呼吸窘迫综合征小鼠T细胞亚群和炎症因子的影响

目的探讨乙酰胆碱受体对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠T细胞亚群CD3^(+)、CD25^(+)Foxp3^(+)T细胞、CD11b和炎症因子IL-1β、TNF-α的影响。方法健康清洁级雄性balb/C小鼠50只(6周),完全数字随机分为正常组(N组)、生理盐水对照组(NS组)、ARDS组(A组)、ARDS^(+)断离颈部两侧迷走神经组(D组)、ARDS^(+)断离颈部两侧迷走神经给予乙酰胆碱受体激动剂组(A^(+)J组),每组各10只正常饲养。HE染色观察各组小鼠右肺结构,采用流式细胞仪检测小鼠支气管肺泡灌洗液中CD11b、CD3^(+)、CD25^(+)Foxp3^(+)T细胞占T淋巴细胞的百分比。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测左肺组织IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的表达水平。结果N组和NS组小鼠右肺HE染色显示结构正常,而A组和D组小鼠肺间质有大量的炎性细胞浸润,肺泡壁增厚、肺泡结构破坏明显,肺泡腔融合。A^(+)J组小鼠肺泡结构较完整、有少许破损、肺泡腔存在。A组和D组小鼠支气管肺泡灌洗液CD11b、CD3^(+)、CD25^(+)Foxp3^(+)T细胞百分比高于其他3组,A^(+)J组CD11b(10.77±2.41)、CD3^(+)(5.94±0.27)、CD25^(+)Foxp3^(+)T(5.00±1.15)细胞百分比分别与D组(15.32±1.56,9.78±0.88,9.84±1.11)、A组(13.49±2.06,8.55±1.07,8.98±0.91)比较,均差异有统计学意义(t=3.04,2.61,2.87,3.87,2.54,2.53;均P<0.05)。A^(+)J组小鼠左肺IL-1βmRNA(198.98±54.05)和TNF-αmRNA(52.41±12.26)的表达分别与A组(384.26±69.03,96.84±20.02)和D组(397.26±64.31,99.45±18.34)比较,均差异有统计学意义(t=94.42,99.54,91.32,98.57,P<0.05)。结论激活胆碱能抗炎通路的乙酰胆碱受体不仅抑制肺组织T淋巴细胞的释放,还可以抑制肺组织IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的表达以及CD11b的释放,从而抑制ARDS的炎症反应,减轻ARDS病理变化。

核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域亚家族成员3炎症小体的活化调节与牙周疾病的关系

核苷酸结合寡聚化结构域样受体热蛋白结构域亚家族成员(NLRP)3炎症小体是一种位于细胞质内的多蛋白质复合体,由其核心成分感知病原体和宿主危险信号后组装而成,通过激活半胱氨酸天冬酰胺特异蛋白酶-1致促炎因子白细胞介素(IL)-1β成熟与分泌参与免疫炎症反应。牙周病是由宿主和微生物因素相互作用导致的局部炎症反应,而IL-1β又是牙周炎发病的关键因素之一。IL-1β的成熟和分泌与NLRP3炎症小体密切相关,且牙周致病菌可调节该炎症小体的表达及活化,因此NLRP3炎症小体对牙周疾病的发生发展和治疗具有重要意义。本文就NLRP3炎症小体的生物学功能、活化机制及其在牙周病学领域的研究进展作一综述。

NLRP12自身炎症性疾病2例及文献复习

目的探讨NLRP12自身炎症性疾病(NLRP12-autoinflammatory disease,NLRP12-AD)的临床特点,提高临床医师对本病的认识。方法分析北京协和医院2例NLRP12-AD患者的诊治过程。结果本文2例患者为首次报道的中国人汉族患者,主要表现为周期性发热、荨麻疹样皮疹、肌痛、关节痛/炎,激素治疗有效。基因检测均为NLRP12基因F402 L(c.1206 C>G)杂合突变。结论文献报道NLRP12-AD患者共26例,多为高加索人,多数NLRP12-AD患者有家族史(16/28,57%),也有散发病例。大部分患者幼年时期起病,少数成年起病(7/28,25%)。主要表现为周期性发热、荨麻疹样皮疹、肌痛、关节痛/炎、淋巴结肿大和脾大,部分患者出现头痛、感音神经性耳聋等中枢神经系统表现,还可出现胸痛、腹痛/腹泻等症状。发作时多数患者急相反应物质升高。NLRP12基因突变最常见的是p.F402L(c.1206 C>G)(15例,54%)。激素及抗组胺药物有效。NLRP12-AD是一种少见的常染色体显性遗传性自身炎症性疾病,成人起病者并不罕见。本文首次报道2例成人起病的中国人汉族NLRP12-AD。临床医师应提高对自身炎症性疾病的认识,基因检测有助于此类单基因自身炎症性疾病的确诊。

白介素-6对NMDA损伤的小脑颗粒神经元NR1和IP3R1蛋白表达的影响

目的:观察白介素-6(IL-6)对N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)损伤小脑颗粒神经元NMDA受体亚单位1(NR1)和三磷酸肌醇受体1(IP3R1)蛋白表达的影响。方法:取出生后8 d SD大鼠小脑进行小脑颗粒神经元(CGNs)体外培养。在培养液中加入IL-6(40或120 ng/mL),培养8 d后,用NMDA(100μmol/L)损伤神经元30 min,建立神经元损伤模型。Western Blot法检测NR1和IP3R1蛋白的表达。结果:IL-6下调NR1的蛋白表达,并抑制NMDA诱导的IP3R1的蛋白表达增高。结论:IL-6通过抑制NMDA受体和IP3受体实现神经保护作用。