白细胞介素12B基因多态性与冠心病的关联研究

目的探讨白细胞介素12B(IL-12B)基因多态性与冠心病发生发展的相关性。方法选择新乡医学院第三附属医院心内科住院的256例冠心病患者为研究组,健康自愿者256例为对照组。应用聚合酶链反应(PCR)及单核苷酸多态性(SNP)技术分析两组IL-12B基因多态性,并测定冠状动脉狭窄度、内脂素、高敏C反应蛋白和心功能变化。结果 IL-12B基因rs15677380和rs14050311等位基因频率组间差异有统计学意义(χ2=6.19、7.24,P=0.045、0.021),rs15677380G等位基因和rs14050311C等位基因为冠心病的高危因素(OR=1.32、1.49)。结论 IL-12B基因与动脉粥样硬化的发生、发展有关,并参与冠心病的发展过程。

白细胞介素12B基因多态性与丙型肝炎病毒感染相关性的Meta分析

目的 探讨白细胞介素12B（interleukin 12B,IL-12B）基因3＇UTR A＞C多态性与丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）感染的相关性.方法 计算机检索PubMed、Cochrane Library、CBM、万方、知网、维普等数据库,收集1988年11月-2014年4月关于IL-12B基因3＇UTR A＞C多态性与HCV感染相关性的病例对照研究.由两名评价者独立评价纳入研究的质量并提取资料,并用Stata12.0软件进行Meta分析.结果 6项病例对照研究符合纳入标准,包括1 396例患者和1 254例对照者.Meta分析结果显示,人群中携带3＇UTR C等位基因者发生HCV感染的风险是非携带者的1.12倍（OR=1.12,95％ CI：0.90 ～ 1.39）,差异无统计学意义（Z=0.10,P＞0.05）.基于种族的亚组分析显示,亚裔人群中携带3＆#39;UTR C等位基因者发生HCV感染的风险是非携带者的1.04倍（OR=1.04,95％ CI：0.67～1.61）,差异无统计学意义（Z=0.18,P＞0.05）;非亚裔人群中亦未发现相关性（Z=1.56,P＞0.05）.结论 基于目前研究结果显示,IL-12B基因3＇UTR A＞C多态性与HCV感染风险无明显相关性.

膀胱癌组织中白细胞介素-12B基因启动子区甲基化的变化及其意义

目的研究膀胱癌组织中白细胞介素-12B基因(IL-12B)启动子区甲基化的变化及其临床意义.方法应用甲基化特异性聚合酶链反应、Western-blot检测膀胱癌及癌旁组织78例,比较IL-12B基因启动子区甲基化及其蛋白质与膀胱癌发生发展的关系.结果 (1)膀胱癌组织IL-12B启动子区甲基化产物明显多于癌旁组织,差异有统计学意义(χ2=14.8,P=0.001);(2)膀胱癌组织和癌旁组织IL-12B启动子区甲基化产物的PMR水平差异有统计学意义(t=3.42,P=0.001);(3)膀胱癌组织IL-12B蛋白的表达水平显著低于癌旁组织(t=2.832,P=0.012).结论 IL-12B基因启动子区甲基化及其编码蛋白质的失活与膀胱癌的发生相关.

白细胞介素-12B及其受体在炎症性肠病患者外周血和肠黏膜中的表达及意义

目的探讨白细胞介素(IL)-12B及其受体在炎症性肠病(IBD)患者外周血及肠黏膜中的表达和意义。方法通过结肠镜下收取结肠黏膜标本,其中活动期的克罗恩病(CD)患者、溃疡性结肠炎(UC)患者各60例,健康对照者50例。使用Western blot对活动期IBD患者发病部位肠黏膜蛋白水平进行检测,以同期结肠镜检查未见异常的患者作为对照。收集患者及健康体检者的外周血2 mL,留取血浆,提取血细胞总RNA,用Realtime PCR法检测IL-12B及其受体IL-12RB1的mRNA表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆IL-12p40的表达。结果外周血Real-time PCR结果显示IL-12B mRNA在CD、UC患者中的表达均增高,且差异有统计学意义(P<0.05);IL-12RB1的mRNA在CD、UC患者中表达也增高,但只有CD患者有统计学意义(P<0.05)。肠黏膜Real-time PCR结果显示IL-12B mRNA在CD、UC患者中的表达均增高,且差异有统计学意义(P<0.05);而IL-12RB1 mRNA的表达在3组之间差异无统计学意义(P>0.05)。外周血及肠黏膜的Realtime PCR结果显示IBD患者中Th细胞特异性转录因子(T-bet、GATA3、RORγ-t和Foxp3)的mRNA表达有不同程度的改变,且变化都有统计学意义。相关性分析显示,外周血IL-12B与T-bet的mRNA表达呈正相关(r=0.781,P<0.01);肠黏膜IL-12B与T-bet和RORγ-t的mRNA表达均呈强正相关(r=0.807,P=0.000;r=0.831,P=0.000)。血清ELISA结果显示IL-12p40在IBD患者中的表达均高于健康对照者,且差异有统计学意义(P<0.05)。CD患者IL-12p40表达高于UC患者(P<0.05)。肠黏膜Western blot结果示IL-12p40在CD、UC患者中的表达均高于正常对照组,但只有CD患者IL-12p40蛋白的表达高于UC患者(P<0.05),其受体IL-12RB1、IL-12RB2蛋白在CD、UC中表达也高于正常对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-12B mRNA和蛋白在活动期CD患者外周血及病变部位肠黏膜中表达均明显上调。IL-12B可能通过Th1和Th17途径在IBD患者尤其是CD患者炎症过程中发挥重要的促炎作用。

白细胞介素-12B基因多态性与原因不明复发性流产的相关性分析

目的分析白细胞介素-12B(IL-12B)基因启动子区多态性与原因不明复发性流产(URSA)的相关性。方法 URSA患者83例(URSA组),同期门诊体检健康妇女90例(对照组),采用RT-PCR法检测两组IL-12B基因多态性。结果在IL-12B基因启动子区共发现2个单核苷酸多态性,即-671G/T和-405G/T,两组IL-12B基因-671G/T、-405G/T多态性分布差异均无统计学意义(P均>0.05)。URSA组-671T/-405G单体型比例(0.65%)高于对照组(0.41%),P<0.05。结论 IL-12B基因启动子区单体型-671T/-405G基因型可能与URSA发生有关。

IL-12B基因多态性与肝硬化易感性的关联研究

目的探讨白细胞介素12B(IL-12B)基因多态性与肝硬化易感性的关联。方法收集肝硬化患者173例作为研究组,其生物学父母作为对照组。运用聚合酶链反应扩增及单核苷酸多态性的分子生物学技术,检测IL-12B基因rs15677380、rs14050311基因多态性,进行肝硬化与IL-12B基因多态性的关联分析和单体型相对风险率分析。结果 IL-12B基因单核苷酸多态性(SNP)位点rs15677380与肝硬化相关联(P=0.009),其中等位基因A为危险因素(Z=2.36),G是保护因素(Z=-2.36);rs14050311等位基因多态性与肝硬化相关联(P=0.013),其中等位基因C是保护因素(Z=-2.24),T为危险因素(Z=2.24)。rs15677380、rs14050311单体型的G/T、A/C与肝硬化有关联(P=0.021、0.015,Z=-1.85、2.16)。结论 IL-12B基因多态性与肝硬化的发生存在关联。

IL-12B mRNA在儿童及青少年Hp相关性胃十二指肠疾病中的表达

目的研究白细胞介素12B(IL-12B)mRNA在儿童及青少年幽门螺杆菌(Hp)相关性胃十二指肠疾病胃黏膜中的表达。方法采用RT-PCR方法检测胃黏膜IL-12B mRNA表达。血清Hp-IgG抗体检测、PCR、尿素酶实验及组织学检查作为确定Hp感染状态的依据。结果儿童及青少年Hp感染者胃窦黏膜IL-12B mRNA阳性表达率、相对表达水平均较无Hp感染者高。IL-12B mRNA相对表达水平与胃窦黏膜慢性炎症程度呈正相关。结论儿童及青少年Hp相关性胃十二指肠疾病胃窦黏膜IL-12B mRNA表达上调可能促进Th1细胞免疫反应从而增加黏膜破坏。

IL-12B基因多态性及血清表达水平与食管癌的关系

目的探讨白细胞介素（IL）-12B 3′UTR＋16974（A/C）位点单核苷酸多态性（SNP）及其血清表达水平与食管癌的关系。方法随机选取2013年6月~2014年6月在四川省南充市中心医院就诊的食管癌患者52例为试验组,术后收取患者肿瘤组织和癌旁组织,提取其基因组DNA,针对IL-12B基因3′UTR＋16974（A/C）SNP位点进行PCR,扩增产物测序,其中患者肿瘤组织DNA作为癌组织,癌旁3~5 cm组织DNA作为癌旁组织,分析IL-12B基因多态性与肿瘤发生的关系。选取同期健康体检者40例为对照组,同时收集患者和健康体检者血清,采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测IL-12 p40和IL-12血清表达水平。结果癌组织AA、AC、CC基因型频率分别是23.08%、15.38%、61.54%,癌旁组织AA、AC、CC基因型频率分别是15.38%、38.46%、46.15%,差异有统计学意义（P〈0.05）。癌组织A、C等位基因频率分别为30.77%（32/104）、69.23%（72/104）,癌旁组织A、C等位基因频率分别为34.62%（36/104）、65.38%（68/104）,差异无统计学意义（P〉0.05）。试验组IL-12 p40和IL-12血清表达水平均明显高于对照组（P〈0.01）。结论 IL-12B 3′UTR＋16974（A/C）位点CC基因型可能是食管癌的易感基因型,IL-12 p40和IL-12血清表达水平升高与食管癌发生有关。

白细胞介素-12B基因启动子多态性与儿童及青少年Hp相关性胃十二指肠疾病的关系

目的探讨IL-12B基因启动子多态性与儿童及青少年Hp相关性慢性胃炎、十二指肠溃疡的易感性和临床特征的关系。方法收集具有上消化道不适主诉症状的儿童及青少年患者132例(病例组,包括慢性胃炎100例及十二指肠溃疡32例),均行上消化内镜检查获取其胃黏膜活检标本。根据Sydney胃炎标准对HE染色活检组织的炎性反应及炎性反应活动度等指标进行评价。血清Hp-IgG抗体检测、尿素酶试验及组织学检查作为确定其Hp感染状态的依据。提取病例组和健康对照组(102例健康儿童)外周血或胃黏膜基因组DNA。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术和测序方法检测研究对象IL-12B基因+1188A/C多态性位点的基因型,分析该基因的基因型和等位基因频率在病例组和健康对照组中的分布及基因型分布与临床病理特征的关系。采用RT-PCR方法检测各组胃黏膜IL-12BmRNA的表达。结果IL-12B基因+1188A/C多态性位点的基因型和等位基因频率在病例组和健康对照组中的分布无显著性差异,亦与Hp易感性无关。IL-12B基因+1188A/C多态性不影响IL-12BmR-NA在胃黏膜中的表达水平,且与胃窦黏膜慢性炎性反应程度无相关性。结论IL-12B基因+1188A/C多态性与儿童及青少年慢性胃炎和十二指肠溃疡发生的易感性无关。

促吞噬肽衍生物TP对树突状细胞功能的影响

目的:探讨促吞噬肽衍生物TP对树突状细胞(DC)功能的影响。方法:分离、提纯小鼠骨髓来源DC,培养至第3 d弃上清,去除悬浮细胞,加入新鲜培养液,补充细胞因子,之后隔天半量换液,至第7 d获得DC;分别用TP和LPS刺激DC,Wright-Gimsa染色,用倒置显微镜观察细胞生长情况;流式细胞分析细胞表面分子CD80、CD83、CD86及CD11c的表达,鉴定细胞成熟度;q RT-PCR分析TP对DC分泌白细胞介素12b(IL-12b)的影响。结果:光镜及Wright-Gimsa染色的细胞形态学结果都显示TP可促进DC增殖及成熟,流式分析证明了这一结果,同时TP还促进DC大量分泌IL-12b。结论:TP不仅能促进DC增殖及成熟,还能影响DC的IL-12b表达;DC有可能是TP发挥抗癌作用的靶细胞之一。

广西肝细胞癌与TGF-β1及IL-12B基因多态性关系

目的探讨广西地区肝细胞癌遗传易感性与人群转化生长因子β1(TGF-β1)基因和白细胞介素12B(IL-12B)基因单核苷酸多态性关系。方法采用以医院为基础的病例对照研究,选取广西户籍的新发肝细胞癌患者608例,选取相同户籍地、年龄、性别和民族频数匹配的非肿瘤患者612例作为对照,采用TaqMan MGB实时荧光定量PCR方法检测TGF-β1 rs1800469(-509 C>T)位点和IL-12B rs3212227(3’UTR+1188A>C)位点基因单核苷酸多态性,比较不同基因型与肝细胞癌患病风险的关系。结果对照组IL-12B基因rs3212227位点的C突变等位基因频率为43.5%,病例组为48.9%,差异有统计学意义(P<0.05);与IL-12B基因rs3212227位点AA基因型相比,携带rs3212227 AC杂合子及携带rs3212227 CC突变基因型的个体发生原发性肝细胞癌的风险明显升高(分别校正OR=1.271,95%CI=0.976～1.655;校正OR=1.515,95%CI=1.092～2.102);IL-12B基因rs3212227位点AC+CC基因型可增加女性和<55岁者罹患肝细胞癌的风险(分别校正OR=2.036,95%CI=1.169-3.548;校正OR=1.529,95%CI=1.129～2.071);肝细胞癌患病风险与TGF-β1基因rs1800469位点多态性无明显关联。结论 IL-12B基因rs3212227位点与广西地区人群原发性肝细胞肝癌发病风险明显关联。

IL-12B多态性与卵巢子宫内膜异位症遗传易感性的关联研究

本研究通过病例-对照研究探讨了IL-12B多态性与卵巢子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)遗传易感性的关系。应用多重聚合酶连接反应-连接酶检测反应(polymerase chain reaction-ligase detection reaction,PCR-LDR)技术对700例卵巢EMT患者和700例健康对照者IL-12B rs17860508和rs3212227位点进行多态性检测。同时采用qRT-PCR技术检测45例携带不同基因型患者在位内膜组织中IL-12B mRNA表达水平。结果显示,IL-12B启动子区rs17860508多态性位点的基因型和等位基因频率在病例组和对照组间分布差异均有统计学意义(P=0.018,P=0.013)。与CTCTAA/CTCTAA基因型相比,GC/CTCTAA和GC/GC基因型能显著增加卵巢EMT的发病风险(OR=1.38,95%CI=1.07~1.78;OR=1.47,95%CI=1.09~1.98);携带GC等位基因的人群较携带CTCTAA等位基因者有较高的患病风险(OR=1.21,95%CI=1.04~1.41)。另外,携带GC/GC基因型的患者在位内膜组织中IL-12B mRNA的表达水平显著高于携带GC/CTCTAA和CTCTAA/CTCTAA基因型的患者(P=0.032)。而rs3212227位点基因型和等位基因频率在病例组和对照组人群中的分布差异无统计学意义。因此,IL-12B启动子区rs17860508多态性位点可能与卵巢EMT的发病风险有关。

宫颈上皮内瘤变组织IL-12B和E-cadherin 及ALOX12B与HPV感染的关系

目的探讨白细胞介素-12B(IL-12B)、上皮型钙黏素(E-cadherin)和12(R)-脂加氧酶(ALOX12B)在宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中的表达及其与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法选取2019年7月-2020年7浙江省台州医院收治的238例CIN患者为研究组,同期进行宫颈组织活检的188例宫颈炎患者为对照组。研究组患者根据宫颈病变程度,分为Ⅰ级组59例、Ⅱ级组137例、Ⅲ级组42例;根据HPV感染情况,分为无感染组38例、低危HPV感染组49例、高危HPV感染组151例,根据ALOX12B mRNA水平检测情况分为高表达组187例和低表达组51例。采用免疫组化法和聚合酶链反应(PCR)测定两组宫颈组织中IL-12B、E-cadherin和ALOX12B蛋白和表达mRNA含量,分析其与CIN级别、HPV感染的关系。结果研究组ALOX12B免疫组化乘积和mRNA含量均高于对照组,IL-12B和E-cadherin免疫组化乘积和mRNA含量均低于对照组(P<0.05)。Ⅲ级组患者ALOX12B免疫组化乘积,mRNA含量高于Ⅰ级组和Ⅱ级组;Ⅲ级组患者IL-12B和E-cadherin免疫组化乘积、mRNA含量均低于Ⅰ级组(P<0.05)。高危HPV感染组患者ALOX12B免疫组化乘积、mRNA含量均高于无感染组,IL-12B和E-cadherin表达低于无感染组(P<0.05)。ALOX12高表达患者CIN宫颈组织中PI3K、ERK1、Ki67的mRNA含量高于ALOX12B低表达组(P<0.05)。结论 CIN宫颈组织中ALOX12B表达上调、IL-12B和E-cadherin表达下调或缺失,可能参与高危HPV感染导致宫颈癌的发生发展过程。