白细胞介素13受体在脑胶质瘤靶向治疗中的应用研究

针对胶质瘤细胞表面的特异性标记物进行靶向治疗是目前肿瘤治疗的一个新途径,国外文献报道将免疫毒素与肿瘤细胞表面特异性标记物的单克隆抗体或其配体结合构建融合蛋白可用于肿瘤治疗。白细胞介素13受体(interleukin-13 re-ceptor,IL-13R)是在胶质瘤表面表达的特异性的分子标记物,并与胶质瘤的恶性度呈正相关。国外学者已开展了应用IL-13R在脑胶质瘤靶向治疗中的临床试验研究,笔者对这方面的最新研究进展进行简要综述。

白细胞介素13受体在脑胶质瘤诊断中的应用

目的评价白细胞介素13受体(IL-13R)α2的免疫组织化学检测结果对脑胶质瘤辅助诊断的应用价值。方法收集脑胶质瘤、脑膜瘤、癫病灶组织和正常脑组织标本共103例,制作成组织芯片,分别运用免疫组织化学和原位杂交方法检测人IL-13Rα1、α2及GFAP的表达情况。结果 (1)免疫组织化学方法检测IL-13Rα1、α2在各组中的阳性率分别为:胶质母细胞瘤(5/14;6/14)、间变型星形细胞瘤(1/4;3/4)、间变型少突-星形细胞瘤(1/4;3/4)、Ⅱ级星形细胞瘤(5/15;8/15)、Ⅱ级少突-星形细胞瘤(0/3;3/3)阳性表达IL-13Rα1、α2;而在毛细胞型星形细胞瘤(0/1)、脑膜瘤(0/24)、癫病灶组织(0/19)、正常脑组织(0/1)中均无表达。(2)原位杂交方法检测IL-13Rα1、α2的表达结果与免疫组化结果基本一致(x2检验,P=0.115)。(3)免疫组织化学和原位杂交方法检测IL-13Rα1表达的阳性细胞百分比在高、低度恶性胶质瘤之间无显著性差异(IHC,P=0.566;ISH,P=0.317),IL-13Rα2表达的阳性细胞百分比在两组之间有显著性差异(P=0.041;P=0.043)。(4)免疫组化检测GFAP与IL-13Rα1、α2在脑肿瘤表达的阳性率的一致性检验,Kappa值分别为0.496和0.682。(5)IL-13Rα2免疫组化检测方法诊断星形细胞瘤的灵敏度为60.5%,特异度为100%,与病理诊断结果的一致性检验Kappa值为0.659。结论 (1)IL-13Rα1、α2主要在星形细胞来源的胶质瘤中表达。(2)IL-13Rα2在高度恶性星形细胞瘤的表达量高于低度恶性星形细胞瘤。(3)IL-13Rα2的免疫组化检测结果与原位杂交结果基本一致,且与病理诊断结果一致性较高,有可能用于胶质瘤的辅助诊断。

局灶节段性肾小球硬化患者肾小管上皮细胞白细胞介素13受体表达与组织损伤的关系

目的:FSGS以足细胞损伤为突出特点,但肾小管上皮细胞损伤在这类患者很常见,而且蛋白尿的程度不足以解释其原因。由于足细胞和肾小管上皮细胞分享许多共同的分子,因此我们推测,这可能是导致FSGS状态下足细胞和肾小管上皮细胞同时损伤的分子基础。有关研究显示,IL-13可以通过作用于足细胞膜上的IL-13R,导致足细胞的损伤。本研究对FSGS患者肾小管上皮细胞IL-13R表达和分布情况进行观察,以期对上述问题加以探讨。方法:选择肾活检明确诊断的特发性FSGS(n=41)患者,并排除继发性因素。对照选取伴大量蛋白尿的IgA肾病(IgAN,n=11)和膜性肾病(MN,n=10)患者。正常对照选择肾移植供体(n=5)。FSGS患者小管间质病变分为:"正常"、急性病变、急性+慢性病变、慢性病变。IL-13R和RANTES染色采用间接免疫荧光法。IL-13R表达分布和强度采用评分方法。IL-13R与N-cadherin免疫荧光双标观察IL-13R在小管上皮细胞的分布。结果:正常对照组近端肾小管上皮细胞表达IL-13R,但分布局限,而且强度弱。疾病对照组仅少数肾小管上皮细胞可见中等量IL-13R表达,但强度较弱。FSGS患者近端肾小管上皮细胞IL-13R表达总评分≥4的比例明显高于正常对照和疾病对照。小管间质‘正常’的患者IL-13R表达总评分均≥4,分布于小管的基底和侧面细胞膜。小管间质急性病变患者IL-13R表达总评分≥4比例为88.9%,分布于基底和侧面细胞膜。小管间质急性+慢性病变患者IL-13R表达总评分≥4比例为50.0%,分布于基底和侧面细胞膜,以基底面为主。小管间质慢性病变患者IL-13R表达很少,IL-13R表达总评分均≤2,主要分布于基底面细胞膜。FSGS患者IL-13R高表达的小管上皮细胞同时表达趋化因子RANTES,而且上皮细胞标志物N-cadherin表达减少。结论:首次证实人肾活检组织近端小管上皮细胞表达IL-13R。FSGS患者近端小管上皮细胞IL-13R表达的范围和强度高于具有同等程度蛋白尿的IgAN和MN患者。FSGS患者小管IL-13R的表达范围和强度与肾小管病变性质相关。FSGS患者IL-13R的表达增强启动了小管上皮细胞的损伤过程。本研究表明,FSGS患者肾小管上皮细胞IL-13R高表达参与肾小管间质的损伤,而且有助于进一步探讨FSGS患者足细胞与肾小管上皮细胞损伤的共同分子基础。

溶血磷酯酸诱导白细胞介素13受体α2 mRNA表达并抑制胶原蛋白合成

目的探讨溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)对人肺成纤维细胞(HFL-1)白细胞介素-13受体α2(IL-13Rα2)表达和Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,COLAⅠ)合成的影响。方法细胞培养,显微镜观察LPA对HFL-1细胞生长的影响,提取HFL-1细胞总RNA,用RT-PCR检测LPA对HFL-1细胞IL-13Rα2 mRNA和COLA I mRNA表达的影响。用免疫组化方法检测LPA和白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)对HFL-1细胞COLA I蛋白表达的影响。图像分析RT-PCR电泳条带和免疫组化图像,统计学处理。结果①LPA诱导HFL-1细胞IL-13Rα2 mRNA的表达,并呈时间依赖性。②1μmol.L-1 LPA刺激HFL-1细胞,IL-13Rα2 mR-NA的表达增强。③LPA作用HFL-1细胞,对IL-13Rα1的表达无影响。④LPA抑制HFL-1细胞COLA I mRNA的表达,IL-13促进COLA I mRNA的表达,LPA+IL-13混合组COLA I mRNA表达水平比LPA组高,比IL-13组低。⑤免疫组化结果与RT-PCR结果一致。结论溶血磷脂酸诱导人肺成纤维细胞表达IL-13 Rα2 mRNA,并下调人肺成纤维细胞合成COLAⅠ。

溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的影响

背景:白细胞介素13受体α2与白细胞介素13结合后,不介导白细胞介素13功能,对白细胞介素13起负调控作用。有研究表明,溶血磷脂酸能增加人支气管上皮细胞白细胞介素13受体α2的表达,从而抑制白细胞介素13的作用。目的:验证溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的诱导作用。设计、时间及地点:mRNA水平的观察对照实验,于2007-07/2008-11在南昌大学医学院和江西省医学生物高技术重点实验室完成。材料:人肺成纤维细胞HFL-1购于中科院上海生化和细胞生物研究所。方法:培养HFL-1细胞,行时间依赖和剂量依赖实验。时间依赖实验采用1μmol/L溶血磷脂酸刺激细胞,分别于0,6,12,24h收集细胞。剂量依赖实验分别用0,0.1,1,10μmol/L的溶血磷脂酸刺激细胞,12h收集细胞。主要观察指标:显微镜下观察溶血磷脂酸对HFL-1细胞生长的影响,提取HFL-1细胞总RNA,用反转录-聚合酶链反应及图像分析法检测溶血磷脂酸对HFL-1细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的影响。结果:溶血磷脂酸不影响HFL-1细胞生长。1μmol/L溶血磷脂酸刺激HFL-1细胞,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达增高,并呈时间依赖性。随着溶血磷脂酸浓度的增加,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达明显增加。1μmol/L溶血磷脂酸刺激HFL-1细胞,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达可达高峰。溶血磷脂酸对HFL-1细胞白细胞介素13受体α1的表达无影响。结论:溶血磷脂酸能促进人肺成纤维细胞HFL-1白细胞介素13受体α2 mRNA的表达。

可溶型白细胞介素-13受体α2对成纤维细胞胶原蛋白合成的抑制作用

目的应用可溶型IL-13受体α2(sIL-13Rα2)抑制成纤维细胞胶原合成,探索生物治疗纤维化的新途径。方法构建pMSCV/sIL-13Rα2载体和表达sIL-13Rα2的细胞模型,分子量(0.2×106)滤膜离心浓缩培养液,Ni2亲和层析,SDS-PAGE分析sIL-13Rα2,Western blot检测sIL-13Rα2,RT-PCR和羟脯氨酸法显示成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果构建的重组体pMSCV/sIL-13Rα2成功转染入HEK293细胞,并表达sIL-13Rα2。50μg.L-1 IL-13促进人瘢痕成纤维细胞系CRL-1762生成Ⅰ型胶原蛋白,50μmol.L-1 sIL-13Rα2能有效抑制IL-13刺激CRL-1762细胞合成Ⅰ型胶原蛋白。结论 sIL-13Rα2靶向IL-13抑制成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的合成。

白细胞介素-13及其受体与恶性肿瘤的关系

白细胞介素-13(IL-13) 是一类由P600 cDNA 编码的细胞因子,与哮喘病和肾病的关系甚为紧密。但近年来国外学者发现与肿瘤尤其是恶性肿瘤也有着密切的关系,如IL-13在恶性肿瘤的发生发展过程中起重要作用,其受体在许多恶性肿瘤如肾细胞癌、Kaposi 肉瘤、多形性胶质母细胞瘤等细胞表面存在特异性高表达,可以将IL-13及其受体应用于某些恶性肿瘤的诊断和免疫治疗等。

白细胞介素13与白细胞介素13受体α2及11β羟类固醇脱氢酶2信号通路在结肠癌肝转移中的作用及其机制研究

目的探讨白细胞介素13(interleukin-13,IL-13)、IL-13受体α2(interleukin-13 receptorα2,IL-13Rα2)、11β羟类固醇脱氢酶2(11β-hydroxysteroid dehydrogenase 2,11βHSD2)信号通路在结肠癌肝转移中的作用及其机制。方法采用回顾性病例对照研究分析2015年1月至2018年12月华中科技大学同济医学院附属同济医院手术治疗的结肠癌80例患者的临床资料。患者均门诊或电话随访至2019年8月30日,统计治疗和随访期间肝转移发生率,根据肝转移发生情况分为转移组(n=22)和非转移组(n=58)。实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、蛋白免疫印迹实验检测比较两组癌组织和癌旁组织的IL-13、IL-13Rα2、11βHSD2、环氧合酶2、蛋白激酶B的mRNA相对表达量、蛋白表达水平的差异。以11βHSD2的抑制剂甘草次酸抑制结肠癌细胞株HCT-8的11HSD2活性,在甘草次酸添加前和添加24 h两个时间点,实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹实验检测IL-13、IL-13Rα2、11βHSD2、环氧合酶2、蛋白激酶B的mRNA相对表达量、蛋白表达水平,分析比较其差异。结果转移组和非转移组结肠癌组织中的IL-13(0.79±0.11、0.40±0.10)、IL-13Rα2(0.72±0.13、0.46±0.11)、11βHSD2(0.84±0.26、0.60±0.08)、环氧合酶2(0.70±0.25、0.37±0.04)、蛋白激酶B(0.76±0.13、0.42±0.06)的mRNA相对表达量均高于其癌旁组织(0.09±0.01、0.10±0.06,0.09±0.02、0.09±0.03,0.09±0.01、0.09±0.02,0.13±0.02、0.12±0.07,0.05±0.02、0.05±0.03),差异有统计学意义(t值分别为28.36、23.20、22.07、24.88、16.47、47.86、18.55、24.55、26.20、44.40,P均<0.001);转移组和非转移组结肠癌组织中的IL-13(0.48±0.11、0.32±0.07)、IL-13Rα2(0.52±0.11、0.36±0.11)、11βHSD2(0.63±0.12、0.48±0.11)、环氧合酶2(0.45±0.15、0.27±0.09)、蛋白激酶B(0.50±0.12、0.29±0.08)的蛋白表达水平均高于其癌旁组织(0.12±0.02、0.13±0.01、0.10±0.02、0.10±0.02、0.14±0.06、0.13±0.05、0.10±0.03、0.10±0.04、0.10±0.03、0.10±0.02),差异有统计学意义(t值分别为15.63、21.15、17.71、17.28、11.01、18.14、10.55、13.12、15.76、18.90,P均<0.001);转移组癌组织中mRNA相对表达量、蛋白表达水平均高于非转移组(t值分别为15.15、3.01、8.97、2.52、6.34、2.26、9.82、2.52、16.02、3.57,P均<0.05)。相对于甘草次酸添加前,甘草次酸添加24 h后,IL-13、IL-13Rα2的mRNA相对表达量、蛋白表达水平无明显变化(P均>0.05),而环氧合酶2和蛋白激酶B的mRNA相对表达量、蛋白表达水平(添加前:0.725±0.159、0.639±0.162、0.741±0.178、0.668±0.145,添加后:0.108±0.085、0.116±0.048、0.122±0.063、0.119±0.066)则均降低(t值分别为18.744、16.954、17.956、18.875,P均<0.01)。结论IL-13、IL-13Rα2、11βHSD2信号通路的激活可促进结肠癌肝转移,其机制可能是结肠癌中11βHSD2高表达促进环氧合酶2表达、激活PI3K/蛋白激酶B通路等癌细胞侵袭和迁移相关信号通路而促进结肠癌肝转移。

白细胞介素13诱导Dami细胞分化并下调转录因子c-myc表达

目的:研究重组人白细胞介素13(recombinant human interleukine-13,rhIL-13)对巨核细胞白血病细胞株Dami细胞分化的影响,以及Dami细胞白细胞介素13受体α1(Interleukine-13receptor alpha1,IL-13Rα1)的表达,探讨IL-13诱导Dami细胞分化的机制。方法:Dami细胞经无血清培养20小时后,以rhIL-13分别作用不同时间,提取总RNA,用RT-PCR检测Dami细胞IL-13受体α1mRNA、GPⅡb mRNA、c-myc mRNA表达水平。流式细胞仪检测在rhIL-13作用下,Dami细胞GPⅡb表达。免疫组化法检测在rhIL-13作用下,Dami细胞c-myc的表达。图像分析仪对结果进行分析。结果:①Dami细胞表达IL-13Rα1mRNA,rhIL-13作用Dami细胞4小时,IL-13Rα1mRNA表达降低,12小时IL-13Rα1mRNA表达恢复。②rhIL-13作用Dami细胞后,巨核细胞的分化标志物GPⅡb mRNA和蛋白质表达增加。③rhIL-13作用Dami细胞,c-myc mRNA和蛋白质表达降低。结论:白细胞介素13下调c-myc表达。

结直肠癌肝转移患者癌细胞白细胞介素-13受体α2的表达及其与骨髓源性抑制细胞的关系

目的探讨白细胞介素-13受体α2(IL-13Rα2)在结直肠癌肝转移患者细胞中的表达及其与骨髓源性抑制细胞(MDSCs)的关系。方法回顾性分析2000—2013年复旦大学附属华山医院手术的68例结直肠癌肿瘤患者石蜡切片,使用常规免疫染色方案,切片观察IL-13Rα2表达。采用抗CD11B抗体和抗CD33抗体进行双重染色,采用荧光抗体、山羊抗兔免疫球蛋白(H+L)抗体和山羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)抗体对CD33进行显示。3位病理专家进行双盲独立评估IL-13Rα2染色载玻片。结果结直肠癌肝转移患者IL-13Rα2阳性率最高(90.8%),其次为脑转移(65.0%)、原发病灶(60.0%)、其他转移(53.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。在肝转移病例中,IL-13Rα2表达与MDSCs数量呈线性相关(r=0.740,P<0.05)。48例远处转移病例的平均生存期为(12.6±5.2)个月。结论IL-13Rα2水平升高提示结直肠癌远处转移患者的预后较差,推测IL-13Rα2通过调节结直肠癌细胞来诱导MDSCs增殖并促进肿瘤肝转移。

IL-13受体在白血病Dami细胞中的表达及IL-13对其表达的影响

目的研究巨核细胞白血病Dami细胞是否表达IL-13受体α1和IL-4受体α以及IL-13对其表达的影响。方法无血清培养Dami细胞,提取Dami细胞总RNA,反转录,形成第1条cDNA链,PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测,Quantity One软件分析电泳条带光密度,数据进行统计学处理。结果Dami细胞表达IL-13Rα1 mRNA。4hIL-13组Dami细胞IL-13Rα1 mRNA的表达明显低于血清组、混合组和空白对照组(P<0.05)。12hIL-13组IL-13Rα1 mRNA表达与血清组、混合组和空白对照组IL-13Rα1mRNA表达无明显区别(P>0.05)。Dami细胞表达IL-4Rα mRNA,且不受IL-13的影响。结论Dami细胞表达IL-13Rα1 mRNA,IL-13短暂下调Dami细胞IL-13Rα1 mRNA表达。

IL-13Rα2、VEGF和PTEN在星形细胞瘤中的表达及临床意义

目的:测定白细胞介素13受体α2(IL-13Rα2)、血管内皮生长因子(VEGF)和PTEN在星形细胞瘤中的表达,探讨三者与星形细胞瘤的临床病理学特征及生物学行为的关系,对预后进行评估。方法:采用免疫组化法对37例人脑星形细胞瘤石蜡标本中的IL-13Rα2、VEGF和PTEN的表达进行检测。结果:①IL-13Rα2、VEGF和PTEN在不同级别星形细胞瘤中的阳性表达率差异有统计学意义。②IL-13Rα2和VEGF的表达之间存在正相关关系,IL-13Rα2、VEGF分别与PTEN的表达之间存在负相关关系。③IL-13Rα2、VEGF和PTEN的表达在不同病人性别和肿瘤大小之间差异无统计学意义。结论:检测IL-13Rα2、VEGF和PTEN对判定肿瘤恶性程度有一定的临床意义,IL-13Rα2、VEGF和PTEN这三种因子在肿瘤发生、发展的作用机制上存在某种联系。

蕈样肉芽肿白细胞介素13及其受体表达

目的 探讨白细胞介素13（IL-13）及其受体在蕈样肉芽肿（MF）皮损中的表达及临床意义。方法 2010 年1月至2016年3月收集杭州市第三人民医院皮肤科经临床、病理、免疫表型和（或）T细胞受体基因重排检测确诊的MF石蜡组织标本 34份，ⅠA期5例，ⅠB期9例，ⅡA期17例和ⅡB期3例。选择正常皮肤组织10份作为对照。应用免疫组化方法分别检测IL-13、IL-13Rα1及IL-13Rα2的表达。结果 IL-13、IL-13Rα1和IL-13Rα2表达于各期MF皮损组织的异形淋巴样细胞和亲表皮性淋巴样细胞，IL-13Rα2几乎高表达于所有的MF皮损组织。正常皮肤组织及淋巴细胞均不表达IL-13及其受体。随着MF病程的进展，皮损组织IL-13及其受体表达率升高。IL-13、IL-13Rα1及IL-13Rα2的表达率在Ⅰ期MF皮损（分别为10.00% ± 3.14%、21.43% ± 6.88%、31.14% ± 6.38%）均显著低于Ⅱ期MF皮损（分别为27.50% ± 11.00%、39.45% ± 9.43%、44.40% ± 11.15%），差异均有统计学意义（P 〈 0.05），但在ⅠA期与ⅠB期之间以及ⅡA期与ⅡB期之间差异均无统计学意义（P 〉 0.05）。结论 IL-13及其受体尤其是IL-13Rα2有望成为MF早期诊断和生物学行为预判的标志物。

IL-4/IL-13诱导小鼠支气管上皮细胞中IL-13Rα2基因转录的调节

目的 了解支气管哮喘发病中白细胞介素 13受体α2 (IL 13Rα2 )基因转录的调节作用。方法 采用PCR扩增hIL 13Rα2基因启动子区不同长度的基因片段F1～F6 ,其中F1和F2含有信号转导子和转录活化子 6 (STAT6 )的结合区域。将F1～F6连入载体pGEM Teasy中 ,转化 ,获得菌落 ,经鉴定后将pGEM Teasy构建体的插入部分F1～F6连入增强载体pGL3中 ,转化 ,获得菌落 ,再以pGL3构建体 (F1～F6 ,mock)转染入小鼠支气管上皮细胞TGMBE 0 2 3。转染 2 4h后 ,给予小鼠IL 4 (mIL 4 ,10 μg/L)和小鼠IL 13(mIL 13,5 0 μg/L)处理 ,2 4h后进行荧光分析。 结果 (1)基因组DNA(编号BCI0 0 1)IL 13Rα2启动子区的碱基序列与GeneBank中登录的序列完全一致。 (2 )各构建体转染后 ,对照组与mIL 4或mIL 13刺激组的相对荧光活性无显著差异 (P均 >0 .0 5 )。结论 IL 4、IL 13的刺激不影响hIL 13Rα2基因的转录活性。

可溶性白细胞介素-5与白细胞介素-13受体联合应用对哮喘小鼠气道高反应性及气道炎症的影响

目的观察可溶性白细胞介素-5受体α(Soluble interleukin 5 receptorα,sIL-5Rα)与可溶性白细胞介素-13受体α2(sIL-13Rα2)联合应用对哮喘小鼠气道高反应性(Airway hyperresponsiveness,AHR)及气道炎症的影响。方法将40只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、sIL-5Rα组、sIL-13Rα2组和sIL-5Rα+sIL-13Rα2组,除正常对照组外,其余各组以鸡卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)致敏和激发,建立哮喘模型,sIL-5Rα、sIL-13Rα2和sIL-5Rα+sIL-13Rα2组每次激发前30 min分别经腹腔注射sIL-5Rα100μg、sIL-13Rα2 100μg和sIL-5Rα100μg+sIL-13Rα2 100μg,正常对照组及哮喘组则用生理盐水替代。末次激发24 h后,检测各组小鼠经不同浓度氯化乙酰胆碱激发后的肺阻力,对支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavagefluid,BALF)进行细胞计数,HE染色观察肺组织的病理变化,ELISA法检测BALF中IL-5和IL-13水平。结果与正常对照组相比,经氯化乙酰胆碱激发后,哮喘组肺阻力显著增加(P<0.01);与哮喘组相比,sIL-13Rα2和sIL-5Rα+sIL-13Rα2组肺阻力显著降低(P均<0.01),sIL-5Rα+sIL-13Rα2组降低更明显(P<0.01)。与正常对照组相比,哮喘组BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞(Eosinophil,EOS)数均显著增加(P均<0.01),肺组织损害明显;与哮喘组相比,3个治疗组BALF中白细胞总数和EOS数均显著降低(P均<0.01);与sIL-5Rα和sIL-13Rα2组相比,sIL-5Rα+sIL-13Rα2组BALF中白细胞总数和EOS数进一步降低(P均<0.01);3个治疗组炎症细胞浸润明显减轻,炎症反应轻微,其中sIL-5Rα+sIL-13Rα2组病理变化进一步减轻。与正常对照组比较,哮喘组小鼠BALF中IL-5和IL-13水平显著升高(P<0.01);与哮喘组相比,sIL-5Rα+sIL-13Rα2组小鼠IL-5和IL-13水平均显著降低(P<0.01)。结论 sIL-5Rα与sIL-13Rα2联合应用可明显降低哮喘小鼠AHR,减轻气道炎症。

IL-13Rα2在胃癌及癌前病变中的表达及其临床意义

目的:长期的炎症微环境促进胃上皮的萎缩、肠上皮化生、异型增生以及胃癌的发生,但目前其中机制尚不清楚。本研究旨在检测白细胞介素13受体α2(interleukin-13 receptorα2,IL-13Rα2)在胃癌及癌前病变中的表达情况,并探讨其临床意义。方法:210例活检组织分为慢性非萎缩性胃炎组(CNAG组,n=30)、慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生组(CAG/IM组,n=50)、胃黏膜低级别异型增生组(LGD组,n=30)、胃黏膜高级别异型增生组(HGD组,n=30)和胃癌组(GC组,n=70),采用免疫组织化学EnVision两步法检测上述各组中IL-13Rα2蛋白的表达。另外,再检测120例胃癌根治性组织中IL-13Rα2蛋白的表达,分析IL-13Rα2蛋白的表达与胃癌临床病理特征的关系。结果:CNAG组、CAG/IM组、LGD组、HGD组和GC组中IL-13Rα2的阳性率分别为3.3%、42.0%、13.3%、6.7%、84.3%;与CNAG组比较,CAG/IM组的IL-13Rα2阳性表达率升高(P<0.05);与CAG/IM组比较,LGD和HGD组的IL-13Rα2阳性表达率均降低(均P<0.05),GC组的IL-13Rα2阳性表达率升高(P<0.001)。在根治性标本中,与癌旁组织相比,胃癌组织中IL-13Rα2的阳性表达率显著升高(P<0.001);临床病理分析显示:胃癌组织中IL-13Rα2阳性表达与Lauren分型有关[其在肠型胃癌中表达高于弥漫型、实性型和混合型胃癌,差异均有统计学意义(均P<0.001)];而与患者的年龄、性别、幽门螺杆菌感染状态、临床分期和淋巴结转移情况无明显相关性(均P>0.05)。结论:IL-13Rα2在胃肠上皮化生中呈弱阳性表达,在胃癌中呈强阳性表达。IL-13Rα2在胃癌尤其是肠型胃癌中呈特异性高表达,有望成为胃癌治疗的新靶点。

小鼠白细胞介素-13受体α2胞外区的原核表达与纯化

目的原核表达并纯化小鼠白细胞介素-13受体α2胞外区(sIL-13Rα2)。方法将sIL-13Rα2基因克隆入原核表达载体pROEXHTa,构建重组表达质粒pROEXHTa/sIL-13Rα2,经双酶切鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。薄层扫描分析目的蛋白的表达量,并对其进行表达形式分析及Westernblot鉴定。镍柱亲和层析纯化目的蛋白。结果重组表达质粒经双酶切鉴定证明构建正确。表达的sIL-13Rα2蛋白相对分子质量约为36200;诱导6h,重组蛋白的表达量最高,约占菌体总蛋白的45%;重组蛋白以包涵体形式存在,可与大鼠抗小鼠sIL-13Rυ2单克隆抗体发生特异性反应;纯化后纯度大于95%。结论已成功表达并纯化了sIL-13Rα2,为进一步探讨其治疗支气管哮喘奠定了基础。

恶性胶质瘤中IL-13Rα2和PCNA的表达及其与病理特征和预后的关系

目的:检测人脑恶性胶质瘤组织中IL-13Rα2和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达强度,分析其与患者临床病理特点和预后之间的关系。方法:选取2002-2006年温州医学院附属第一医院手术治疗的43例恶性胶质瘤标本;采用免疫组织化学法检测并用图像分析系统分析IL-13Rα2和PCNA在恶性胶质瘤组织中的表达,分析两者间的相关性;分析它们与临床特征和预后的关系。结果:(1)43例恶性胶质瘤标本有40例(93%)IL-13Rα2阳性表达和36例(84%)PCNA阳性表达;(2)IL-13Rα2和PCNA表达强度与肿瘤部位和肿瘤大小无相关性(P>0.05);在WHOⅢ级与Ⅳ级间两者表达强度差异均有统计学意义(P=0.031,P=0.002);在生存时间≤6个月与>6个月患者间IL-13Rα2表达强度差异有统计学意义(P=0.028)。(3)IL-13Rα2和PCNA的表达强度呈显著的正相关(r=0.653,P=0.000)。结论:人恶性胶质瘤组织中IL-13Rα2和PCNA均高表达,前者表达强度与肿瘤恶性分级和患者预后密切相关,在恶性胶质瘤的诊断和预后判断中具有潜在的临床应用价值。

IL-13Rα2在脑胶质瘤中的表达及其临床诊断意义

目的探讨白细胞介素13受体α2(IL-13Rα2)在脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤恶性程度的关系。方法免疫组化染色检测59例脑胶质瘤、3例脑膜瘤、3例癫痫病灶组织、5例正常脑组织及U251细胞中IL-13Rα2蛋白的表达,分析其与肿瘤恶性程度的关系。结果正常脑组织、脑膜瘤及癫痫病灶中均无IL-13Rα2的表达;而59例胶质瘤组织中33例IL-13Rα2表达阳性,阳性率55.9%;胶质瘤组织IL-13Rα2阳性表达率显著高于非胶质瘤组织(P<0.05)。高级别胶质瘤(Ⅲ、Ⅳ级)IL-13Rα2阳性表达率为78.1%(25/32),低级别(Ⅰ、Ⅱ级)胶质瘤为29.6%(8/27),两者相较差异显著(P<0.05)。U251细胞IL-13Rα2表达阳性。结论本结果提示胶质瘤中IL-13Rα2蛋白表达与其恶性程度有关。

IL-13Rα_2在人脑胶质瘤分子靶向及免疫治疗中的应用

脑胶质瘤是脑内最具破坏的肿瘤之一,患者预后不容乐观。近年来随着分子生物学及免疫学的不断发展,脑胶质瘤的分子靶向及免疫治疗不断得到重视。白细胞介素13α2受体(IL-13Rα2)作为人脑胶质瘤的特异表达肽,其作为特异靶点分子靶向治疗,同时可与树突状细胞联合免疫治疗胶质瘤已不断得到应用。现就IL-13Rα2在人脑胶质瘤分子靶向及免疫治疗中的应用予以综述。