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人白细胞介素13重组蛋白表达载体的构建及其在大肠埃希菌的表达
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作者 黄庆 府伟灵 +1 位作者 张雪 黄君富 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 2002年第5期341-343,共3页
目的 构建人白细胞介素 13(rh IL- 13)重组蛋白表达载体 ,热诱导 rh IL- 13在 E.coli DH5 α表达。方法 经巢式 RT- PCR从非粘附贴壁生长的 PBMC活化细胞中克隆 h IL- 13成熟蛋白编码基因 ,随后构建 rh IL13- PBV重组蛋白表达质粒 ,... 目的 构建人白细胞介素 13(rh IL- 13)重组蛋白表达载体 ,热诱导 rh IL- 13在 E.coli DH5 α表达。方法 经巢式 RT- PCR从非粘附贴壁生长的 PBMC活化细胞中克隆 h IL- 13成熟蛋白编码基因 ,随后构建 rh IL13- PBV重组蛋白表达质粒 ,热诱导表达重组蛋白。结果 在 h IL13- PBV/ DH5 α工程菌热诱导全菌蛋白中检测到相对分子质量大小约为 10× 10 3的 h IL- 13重组蛋白 (rh IL- 13蛋白 )。结论  rh IL- 13的表达成功 ,为今后进一步研究 h IL-13的生物学功能 ,探讨其临床应用价值奠定了一定的物质基础。 展开更多
关键词 白细胞介素13重组蛋白 白细胞介素-13 基因工程 基因表达 大肠埃希菌
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重组人白细胞介素-11的胰蛋白酶切肽图分析 被引量:37
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作者 饶春明 张翊 +1 位作者 韩春梅 王军志 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期378-380,共3页
目的 建立标准肽图分析法 ,用于rhIL 11的质量控制。方法 应用AllianceHPLC系统及其温控自动进样器探索最佳胰蛋白酶切和色谱条件。结果 连续 3批rhIL 11样品的RP HPLC图谱完全一致 ,与rhIL 11对照品比较 ,有 2 0个峰与对照品吻合 ,... 目的 建立标准肽图分析法 ,用于rhIL 11的质量控制。方法 应用AllianceHPLC系统及其温控自动进样器探索最佳胰蛋白酶切和色谱条件。结果 连续 3批rhIL 11样品的RP HPLC图谱完全一致 ,与rhIL 11对照品比较 ,有 2 0个峰与对照品吻合 ,但第 6峰的峰高和峰面积均明显较小 ,且在第 9和第 10峰之间多一个峰 ,说明rhIL 11样品蛋白质结构与对照品比较存在细小差别。这种差别经多肽片段分离和氨基酸序列测定证明是由于样品N端多 2个氨基酸引起的。结论 本法精确度高、重复性好、自动化程度高 ,可用于rhIL 11的质量控制。 展开更多
关键词 重组白细胞介素-11 肽图 蛋白酶切
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重组人白细胞介素-4融合蛋白在大肠杆菌中诱导表达的影响因素 被引量:9
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作者 许艳 万敏 +4 位作者 程岩 张培因 吴秀丽 王燕媚 王丽颖 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期391-392,共2页
目的 提高人重组白细胞介素 4 (rhIL 4 )在大肠杆菌中的表达量。方法 研究rhIL 4的体外诱导条件 ,包括诱导时间、IPTG浓度、诱导温度、菌体密度对表达量的影响。结果 最佳表达条件是诱导时间为 4h ,诱导温度为 4 2℃ ,A6 0 0 为 0 ... 目的 提高人重组白细胞介素 4 (rhIL 4 )在大肠杆菌中的表达量。方法 研究rhIL 4的体外诱导条件 ,包括诱导时间、IPTG浓度、诱导温度、菌体密度对表达量的影响。结果 最佳表达条件是诱导时间为 4h ,诱导温度为 4 2℃ ,A6 0 0 为 0 7~ 1 0 ,而IPTG的浓度对表达量无显著影响。结论 诱导时间、诱导温度和菌体密度的优化能提高外源基因在大肠杆菌中的表达产量。 展开更多
关键词 重组蛋白 白细胞介素-4 融合蛋白 大肠杆菌 表达 基因
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哮喘患儿免疫球蛋白E、白细胞介素-13检测的意义 被引量:7
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作者 温志红 周薇雅 +2 位作者 胡琼燕 杜华 陆元奉 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第21期1621-1622,共2页
目的探讨IgE、IL-13在儿童哮喘发病中作用及血清与诱导痰IgE、IL-13的相关性。方法分别采用Pharmacia Un iCAP变应原检测系统、酶联免疫吸附法(ELISA)检测26例慢性持续期哮喘儿童血清、诱导痰IgE、IL-13水平,同时测定20例健康儿童血清Ig... 目的探讨IgE、IL-13在儿童哮喘发病中作用及血清与诱导痰IgE、IL-13的相关性。方法分别采用Pharmacia Un iCAP变应原检测系统、酶联免疫吸附法(ELISA)检测26例慢性持续期哮喘儿童血清、诱导痰IgE、IL-13水平,同时测定20例健康儿童血清IgE、IL-13水平作为对照。结果慢性持续期哮喘儿童血清IgE、IL-13明显高于健康对照组(P<0.001,0.05);血清IgE与诱导痰IgE无相关性(r=0.137 P>0.05),血清IL-13与诱导痰IL-13呈显著正相关(r=0.432 P<0.05);血清、诱导痰IgE与IL-13均呈正相关(r=0.577,0.462 P<0.01,0.05)。结论血清IgE、IL-13参与儿童哮喘发生、发展过程,而血清IL-13水平可反映呼吸道IL-13水平。 展开更多
关键词 免疫球蛋白E 白细胞介素-13 血清 诱导痰 哮喘 儿童
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白细胞介素1β对软骨细胞miR-27b和基质金属蛋白酶13蛋白表达的影响 被引量:5
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作者 石晶 李彤 +4 位作者 左灿辉 智良 魏戎 王伟民 刘营杰 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第29期4277-4283,共7页
背景:基质金属蛋白酶13对软骨细胞外基质中的Ⅱ型胶原蛋白的降解能力最为活跃,白细胞介素1β被认为是基质金属蛋白酶的诱导剂,参与关节软骨的降解和退变。目的:分析白细胞介素1β对大鼠软骨细胞miR-27b和基质金属蛋白酶13蛋白表达的影... 背景:基质金属蛋白酶13对软骨细胞外基质中的Ⅱ型胶原蛋白的降解能力最为活跃,白细胞介素1β被认为是基质金属蛋白酶的诱导剂,参与关节软骨的降解和退变。目的:分析白细胞介素1β对大鼠软骨细胞miR-27b和基质金属蛋白酶13蛋白表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠7只,体外分离培养软骨细胞,并分组为白细胞介素1β刺激组及对照组。对照组不采取任何刺激;白细胞介素1β刺激组采用10μg/L白细胞介素1β的无血清培养基培养大鼠软骨细胞,于第0,24,48小时分别采用倒置显微镜观察细胞生长情况,并收集细胞,提取RNA检测软骨细胞基质金属蛋白酶13表达以及不同的miR NAs的表达变化。结果与结论:(1)白细胞介素1β诱导大鼠软骨细胞0,24,48 h时基质金属蛋白酶13相对表达量逐渐增加(P<0.05);(2)白细胞介素1β诱导大鼠软骨细胞24,48 h时miR-27b、miR-31表达均逐渐下降(P<0.05);mi R-26a、miR-26b、miR-23和miR-204表达均逐渐加强(P<0.05),白细胞介素1β诱导大鼠软骨细胞48 h后,mi R-27b表达的降低最为显著(P<0.05);(3)结果说明白细胞介素1β诱导大鼠软骨细胞,miR-27b表达显著下降,靶定调控基质金属蛋白酶13的能力降低,导致软骨细胞的损伤,加剧了骨性关节炎的发病及进展。 展开更多
关键词 白细胞介素 基质金属蛋白13 微RNA 骨关节炎 组织构建 软骨细胞 白细胞介素 微小RNA 骨性关节炎 白细胞介素
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同时表达麻疹病毒L4株HA和F蛋白及人白细胞介素2(IL2)的重组痘苗病毒疫苗株的构建 被引量:7
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作者 杨克俭 阮力 +4 位作者 朱诚 孙朝辉 陆柔剑 徐水婵 朱既明 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期299-306,共8页
构建了同时表达麻疹病毒LA株HA和F基因及人白细胞介素2(IL2)的重组痘苗病毒疫苗株RVJMLHAFKIL2。Westemblot结果显示,HA、F和人IL2基因均在痘苗病毒中稳定有效表达,且产物与天然蛋白相近。H... 构建了同时表达麻疹病毒LA株HA和F基因及人白细胞介素2(IL2)的重组痘苗病毒疫苗株RVJMLHAFKIL2。Westemblot结果显示,HA、F和人IL2基因均在痘苗病毒中稳定有效表达,且产物与天然蛋白相近。HA分子有糖化的79kD和非糖化的田kD两种形式;F分子以60kD的前体F0、43kD的F1和18kD的F2三种形式存在。表达产物的血凝效价为1:8,血溶活性OD540的测定结果是O37。该重组病毒免疫新西兰白兔及C57小鼠,可以产生抗麻诊病毒HA和F蛋白的特异性ELISA(1:644~1600)、血凝抑制(1:256~512)、血溶抑制(1:80~160)和NT(1:640)抗体。接种兔及裸鼠后的毒力反应,明显低于只表达IL2的重组痘苗病毒疫苗株RVJ123,表现为兔皮肤红肿范围小,持续时间短,皮肤无坏死;裸鼠毒力的结果,表现出RVJMLHAFKIL2病毒只存留于接种局部,而且滴度大大降低,未发现该病毒向其它脏器播散和增殖。麻疹重组痘苗病毒疫苗株的构建为该疫苗株的人体免疫观察奠定了基础。 展开更多
关键词 麻疹病毒 融合蛋白 白细胞介素 重组痘苗病毒
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白细胞介素13刺激成纤维细胞胶原基因转录和胶原蛋白的合成 被引量:7
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作者 熊丽霞 石小玉 +2 位作者 李文林 周莹 唐洪林 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第23期4466-4469,共4页
目的:以成纤维细胞株3T3为实验对象,观察白细胞介素13对成纤维细胞株3T3胶原合成作用,探讨白细胞介素13对纤维化形成的作用机制。方法:实验于2005-03/2006-10在江西医学科学研究所江西省医学生物高技术重点实验室进行。实验材料:成纤维... 目的:以成纤维细胞株3T3为实验对象,观察白细胞介素13对成纤维细胞株3T3胶原合成作用,探讨白细胞介素13对纤维化形成的作用机制。方法:实验于2005-03/2006-10在江西医学科学研究所江西省医学生物高技术重点实验室进行。实验材料:成纤维细胞株3T3细胞为江西省医学科学研究所江西省医学生物高技术重点实验室保存。白细胞介素13购自Peprotech公司。实验方法:①3T3细胞培养:3T3细胞常规培养在含体积分数为0.15胎牛血清、100U/mL青、链霉素的DMEM培养液中,置于37℃、含体积分数为0.05的CO2孵箱中培养,并分为实验组和对照组,两组细胞均用无血清DMEM培养12~16h,实验组加入100μg/L白细胞介素13,作用24,48,72h后进行以下实验。②应用Van Gieson胶原纤维特殊染色观察白细胞介素13作用下,3T3细胞体外合成胶原纤维情况。细胞培养上清液采用羟脯氨酸实验检测细胞分泌的总胶原蛋白含量。采用RT-PCR检测3T3细胞Ⅰ型胶原α1基因(COL1A1)mRNA的表达。采用Western blotting检测白细胞介素13作用后成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果:①Van Gieson胶原纤维特殊染色观察白细胞介素13对成纤维细胞体外合成胶原纤维的影响:有胶原纤维地方被Van Gieson液染成红色,细胞核则为灰黑色。显微镜下可见成纤维细胞呈放射状、编织状或旋涡状排列,细胞体呈梭形或不规则三角形,胞质向外伸出大小不等的突起,核为椭圆形,位于胞浆的中央,在白细胞介素13孵育的3T3细胞中可观察到较多的胶原纤维。②羟脯氨酸实验检测白细胞介素13对成纤维细胞分泌总胶原含量影响:白细胞介素13刺激3T3细胞分泌的总胶原含量24h后即明显增高,持续至72h(t=6.751,P<0.01),明显高于对照组(t=3.019,P<0.05)。③RT-PCR检测白细胞介素13作用下3T3细胞Ⅰ型胶原α1mRNA水平:在511bp(β-actin)和378bp处(COL1A1)均可见一明显条带。④Western blotting检测白细胞介素13作用下Ⅰ型胶原蛋白表达情况:白细胞介素13作用3T3细胞0,24,48,72h后,Ⅰ型胶原蛋白表达逐渐增强,与actin蛋白相比,差异显著(P<0.05)。结论:白细胞介素13可促进3T3细胞胶原基因的转录和胶原蛋白的合成,可能在纤维化疾病发病机制中发挥重要作用。 展开更多
关键词 白细胞介素13 成纤维细胞 Ⅰ型胶原蛋白
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重组鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体内抗传染性法氏囊病病毒作用研究 被引量:8
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作者 程俊贞 闫若潜 +9 位作者 吴志明 赵明军 闫志玲 刘梅芬 赵雪丽 孔刚锐 陈慧娟 杨晓璐 张书阳 刘毅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期140-145,共6页
为研究原核表达的鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN--Linker-ChIL-2)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株与rChIFN--Linker-ChIL-2同时接种21日龄SPF鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV... 为研究原核表达的鸡干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN--Linker-ChIL-2)在SPF鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株与rChIFN--Linker-ChIL-2同时接种21日龄SPF鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV排毒率、带毒时间、在不同组织器官的动态分布及其体液和细胞免疫指标的检测以评价该重组融合蛋白抗IBDV的效果。结果显示:与IBDV攻毒对照组相比,融合蛋白与IBDV同时接种组鸡的发病率、死亡率和典型症状维持时间及排毒率、外周血持续带毒时间和不同组织器官带毒时间均显著低于对照组。但试验组鸡的IBDV抗体水平于7 dpc^42 dpc则极显著低于对照组(p<0.01)。然而,其血清中ChIFN-α、ChIFN-γ、ChIL-2、ChIL-6和ChIL-4表达水平(3 dpc^21 dpc)以及外周血T淋巴细胞(PBLC)增殖活性(7 dpc^21 dpc)、脾淋巴细胞增殖活性(7 dpc^14 dpc)均显著高于对照组(p<0.01)。结果表明:融合蛋白可以通过上调机体细胞因子的表达水平、增强鸡体PBLC和脾淋巴细胞增殖活性等方式增强机体的细胞免疫能力,从而发挥抗病毒作用和免疫增强作用。 展开更多
关键词 重组鸡干扰素 白细胞介素 2融合蛋白 传染性法氏囊病病毒 抗病毒 免疫增强 作用
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白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子α及基质金属蛋白酶13在骨性关节炎中的表达及相关性 被引量:33
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作者 黄媛霞 徐海斌 郭春 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第15期2301-2304,共4页
目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在骨性关节炎中的表达及相关性。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法及酶联免疫吸附(ELSIA)法检测72例骨性关节炎患者及32例正常对照者关节液中IL-... 目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在骨性关节炎中的表达及相关性。方法采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法及酶联免疫吸附(ELSIA)法检测72例骨性关节炎患者及32例正常对照者关节液中IL-1β、TNF-α及MMP-13的表达,对骨性关节炎患者病情严重程度进行美国纽约特种外科医院(HSS)评分,采用Pearson相关分析法分析骨性关节炎患者IL-1β、TNF-α与MMP-13的相关性以及它们与HSS评分之间的相关性。结果骨性关节炎患者关节液中IL-1β、TNF-α、MMP-13基因及蛋白表达水平均高于正常对照者(P<0.01),骨性关节炎患者关节液中IL-1β、TNF-α、MMP-13蛋白水平均与骨性关节炎严重程度呈正相关,IL-1β和TNF-α均与MMP-13蛋白水平呈正相关。结论 IL-1β、TNF-α及MMP-13与骨性关节炎发生、发展有密切关系,并且与病情严重程度相关,关节液中MMP-13的高表达可能是通过IL-1β及TNF-α等炎性细胞因子激活、上调。测定骨性关节炎患者关节液中IL-1β、TNF-α及MMP-13水平对骨性关节炎的诊断、病情判断和治疗具有重要意义。 展开更多
关键词 骨性关节炎 白细胞介素-1Β 肿瘤坏死因子-Α 基质金属蛋白酶-13
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哮喘患儿白细胞介素13及总免疫球蛋白E水平变化 被引量:4
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作者 赵凯姝 鲁继荣 +3 位作者 张云峰 成焕吉 赵芳兴 刘文东 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期212-213,共2页
目的 :探讨哮喘患儿白细胞介素 1 3( IL- 1 3)与总免疫球蛋白 E(总 Ig E)的变化。方法 :用双抗体夹心 ABC- ELISA方法检测哮喘患儿血清 IL- 1 3与总 Ig E水平 ,采用 SPSS统计分析软件进行数据处理 ,并分析二者之间的关系。结果 :血清 IL... 目的 :探讨哮喘患儿白细胞介素 1 3( IL- 1 3)与总免疫球蛋白 E(总 Ig E)的变化。方法 :用双抗体夹心 ABC- ELISA方法检测哮喘患儿血清 IL- 1 3与总 Ig E水平 ,采用 SPSS统计分析软件进行数据处理 ,并分析二者之间的关系。结果 :血清 IL - 1 3及总 Ig E水平发作组显著高于缓解组 ,P<0 .0 1 ;发作组与缓解组均显著高于正常对照组 ,P<0 .0 1。直线相关分析表明 ,血清 IL- 1 3水平及总 Ig E水平呈显著正相关。结论 :哮喘患儿存在 IL- 1 3及总 Ig 展开更多
关键词 哮喘/血液 白细胞介素13/血液 免疫球蛋白E/血液
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体外冲击波治疗兔膝骨关节炎:白细胞介素1β及基质金属蛋白酶13的表达 被引量:12
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作者 侯晓东 刘洪柏 刘克敏 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第15期2397-2402,共6页
背景:白细胞介素1β和基质金属蛋白13能促进软骨细胞的分解代谢,抑制软骨细胞的合成修复能力,引起细胞外基质的降解,在骨关节炎的发生中有十分重要的作用。目的:观察体外冲击波对兔膝骨关节炎软骨细胞中白细胞介素1β和基质金属蛋白酶1... 背景:白细胞介素1β和基质金属蛋白13能促进软骨细胞的分解代谢,抑制软骨细胞的合成修复能力,引起细胞外基质的降解,在骨关节炎的发生中有十分重要的作用。目的:观察体外冲击波对兔膝骨关节炎软骨细胞中白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13表达的影响。方法:将30只新西兰兔随机分为治疗组、模型组、对照组,每组10只。治疗组和模型组均采用改良伸直位固定6周,制备兔膝骨关节炎模型。治疗组造模后给予体外冲击波治疗1次,能流密度0.1 mJ/mm2,冲击次数1 000次。对照组不作任何处理。各组兔于治疗后4周处死,取膝关节液和关节软骨。苏木精-伊红染色和甲苯胺蓝染色法检测各组膝关节病理学形态改变,采用酶联免疫吸附法测定关节液白细胞介素1β水平,免疫组化法检测白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13的表达。结果与结论:治疗组和模型组关节液白细胞介素1β水平较对照组明显增高(P<0.01),治疗结束后治疗组关节液白细胞介素1β水平较模型组下降(P<0.05)。治疗组和模型组软骨组织Mankin评分较对照组明显增高(P<0.01),治疗结束后治疗组软骨组织Mankin评分较模型组下降(P<0.05)。治疗组和模型组软骨细胞白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13阳性表达率较对照组明显增高(P<0.01),治疗结束后治疗组软骨细胞白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13阳性表达率较模型组下降(P<0.05)。结果可见体外冲击波能下调膝骨关节炎软骨细胞白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13的表达,促进Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的合成,从而对膝骨关节炎起防治作用。 展开更多
关键词 组织构建 骨组织工程 体外冲击波 骨关节炎 白细胞介素 基质金属蛋白酶子13
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重组人白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素融合蛋白的纯化及复性 被引量:6
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作者 胡志明 林来兴妹 +2 位作者 周明乾 陈泽洪 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期206-207,214,共3页
目的探讨该所发明的新方法对重组人白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素(IL2-PE664Glu)融合蛋白进行纯化与复性的效果。方法采用该所发明的新方法提纯包涵体,包涵体复性后,样品经DEAE-SepharoseFF离子交换层析,获得融合蛋白纯品。结果获得的具... 目的探讨该所发明的新方法对重组人白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素(IL2-PE664Glu)融合蛋白进行纯化与复性的效果。方法采用该所发明的新方法提纯包涵体,包涵体复性后,样品经DEAE-SepharoseFF离子交换层析,获得融合蛋白纯品。结果获得的具有生物学活性的融合蛋白纯度达到95%,复性回收率为80%。结论此包涵体分离纯化技术简便、实用,可为中试研究和规模化生产提供基础。 展开更多
关键词 重组白细胞介素-2 绿脓杆菌外毒素 融合蛋白 纯化 复性
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豚鼠过敏性休克死亡白细胞介素-4、白细胞介素-13与免疫球蛋白E的表达及法医学意义 被引量:2
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作者 刘勇 陈小倩 +1 位作者 李航 余舰 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1322-1324,共3页
目的:建立豚鼠过敏性休克死亡动物模型,探讨豚鼠血清中白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-13和免疫球蛋白E(Immunoglobulin E,IgE)的表达,旨在为临床和法医学诊断过敏性休克提供科学、客观的参考依据。方法:用酶联免疫吸附测定(enzyme-l... 目的:建立豚鼠过敏性休克死亡动物模型,探讨豚鼠血清中白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-13和免疫球蛋白E(Immunoglobulin E,IgE)的表达,旨在为临床和法医学诊断过敏性休克提供科学、客观的参考依据。方法:用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测30只过敏性休克豚鼠(实验组20只,对照组10只)血清IL-4、IL-13和IgE的表达情况。结果:实验组血清IL-4水平明显高于对照组(P=0.000);实验组血清IL-13水平明显高于对照组(P=0.000);实验组血清IgE水平明显高于对照组(P=0.000)。结论:实验组血清IL-4、IL-13与IgE水平明显高于对照组,为过敏性休克临床诊断及法医学鉴定提供了参考依据。 展开更多
关键词 豚鼠 过敏性休克 白细胞介素4 白细胞介素13 免疫球蛋白E 法医学
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重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白体外活性评价方法研究 被引量:4
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作者 杨晓璐 闫若潜 +4 位作者 李勤楠 赵雪丽 谢彩华 刘梅芬 张书阳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第12期3153-3159,共7页
为建立稳定、便捷的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2蛋白,重组融合蛋白)体外活性评价方法,本研究分别采用ChIFN-α和ChIL-2ELISA方法检测重组融合蛋白与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应... 为建立稳定、便捷的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2蛋白,重组融合蛋白)体外活性评价方法,本研究分别采用ChIFN-α和ChIL-2ELISA方法检测重组融合蛋白与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应的活性;采用细胞病变抑制法检测重组融合蛋白在DF1细胞上抑制水疱性口炎病毒(VSV)和传染性法氏囊病病毒(IBDV)增殖活性;采用MTS法分别测定重组融合蛋白促鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)和脾淋巴细胞增殖活性。结果表明,重组融合蛋白可以与抗ChIFN-α单抗和抗ChIL-2单抗发生特异性免疫反应;重组融合蛋白在DF1细胞上具有明显抗病毒活性,其抗VSV活性高于抗IBDV活性,且均明显高于rChIFN-α蛋白对照;不同浓度的重组融合蛋白均具有明显的促鸡PBLC和脾淋巴细胞增殖活性,且其促增殖活性明显高于rChIFN-α蛋白对照。本研究成功建立了重组融合蛋白体外活性检测评价方法,为进一步探究重组融合蛋白在鸡体内协同作用奠定基础。 展开更多
关键词 鸡α干扰素 白细胞介素-2 重组融合蛋白 体外活性
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基质金属蛋白酶-13、白细胞介素-1在大鼠退变腰椎间盘组织中的表达及意义 被引量:8
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作者 孙东良 张胜强 于灵灵 《中国医药导报》 CAS 2012年第15期11-13,共3页
目的探讨基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、白细胞介素-l(IL-1)在去势大鼠退变腰椎间盘组织中的表达及临床意义。方法将30只3月龄Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机均分为基础对照组(BL组)、去卵巢手术组(OVX组)、假手术组(sham组)... 目的探讨基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、白细胞介素-l(IL-1)在去势大鼠退变腰椎间盘组织中的表达及临床意义。方法将30只3月龄Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机均分为基础对照组(BL组)、去卵巢手术组(OVX组)、假手术组(sham组),每组各10只;BL组在手术开始前处死大鼠,其余两组术后3个月处死大鼠,并与处死前10d和4d分别给予显色双荧光标记;L2-4椎体进行骨密度及硬组织切片分析,k4-5,进行HE常规染色、VG特殊染色及免疫组化检测MMP-13、IL-1的表达,观察椎间盘的病理学改变并据评分标准对腰椎间盘的退变程度(LVD)进行评分。结果大鼠腰椎骨量的下降及椎间盘的退化,OVX组较Sham组严重(P〈0.05):免疫组化结果显示。OVX组与sham组比较,大鼠椎间盘中MMP-13、IL-1表达明显升高(P〈0.05)。结论MMP-13、IL-1表达量的增加是腰椎间盘退变形成和发展的重要因素。 展开更多
关键词 椎间盘退变 免疫组化 基质金属蛋白酶-13 白细胞介素-1
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姜黄素对骨关节炎软骨细胞氧化应激和基质金属蛋白酶13、白细胞介素-6分泌的影响 被引量:7
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作者 宋永周 童九辉 +3 位作者 李明 马维 关健 苏瑞红 《河北中医》 2016年第9期1344-1347,1352,共5页
目的观察姜黄素对骨关节炎(OA)患者软骨细胞氧化应激和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、白细胞介素-6(IL-6)分泌的影响。方法无菌分离并体外培养OA患者的膝关节软骨细胞和正常关节软骨细胞;采用姜黄素干预培养细胞24 h,检测各组细胞培养液... 目的观察姜黄素对骨关节炎(OA)患者软骨细胞氧化应激和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、白细胞介素-6(IL-6)分泌的影响。方法无菌分离并体外培养OA患者的膝关节软骨细胞和正常关节软骨细胞;采用姜黄素干预培养细胞24 h,检测各组细胞培养液上清中的MMP-13、IL-6水平,检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;用Real-Time PCR和Western blot法检测细胞核因子E_2相关因子(2Nrf 2)mRNA及其蛋白表达水平。采用荧光共聚焦显微镜观察Nrf 2的核转位情况,分析姜黄素对炎症损伤细胞的干预作用。结果对关节炎软骨细胞,经姜黄素干预后,SOD、MDA、MMP-13、IL-6均有显著性变化。与正常软骨细胞组比较,关节炎软骨细胞组Nrf 2 mRNA及其蛋白表达水平下调,细胞核内Nrf 2活性增强。经姜黄素干预后关节炎软骨细胞Nrf 2 mRNA及其蛋白表达水平上调,细胞核内Nrf 2活性明显增强。结论姜黄素能部分纠正关节炎软骨细胞的氧化应激,减轻炎症反应,对软骨细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 骨关节炎 中药疗法 姜黄素 基质金属蛋白酶-13 白细胞介素6
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哮喘患儿白细胞介素13、γ-干扰素、免疫球蛋白E的变化及过敏原检测 被引量:2
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作者 赵凯姝 鲁继荣 +5 位作者 成焕吉 乔红梅 刘丽 付文永 崔桓 赵芳兴 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期785-786,共2页
目的 探讨哮喘患儿白细胞介素 13(IL 13)、γ 干扰素 (IFN γ)及免疫球蛋白E(IgE)的变化 ,了解长春市儿童哮喘常见过敏原。方法 用双抗体夹心ELISA法检测 5 0例哮喘患儿血清IL 13、IFN γ及IgE水平 ,并分析三者之间关系 ;用酶免法进... 目的 探讨哮喘患儿白细胞介素 13(IL 13)、γ 干扰素 (IFN γ)及免疫球蛋白E(IgE)的变化 ,了解长春市儿童哮喘常见过敏原。方法 用双抗体夹心ELISA法检测 5 0例哮喘患儿血清IL 13、IFN γ及IgE水平 ,并分析三者之间关系 ;用酶免法进行过敏原特异性IgE(sIgE)定性检测。结果 血清IL 13及IgE水平发作组显著高于缓解组 ,发作组与缓解组均显著高于正常对照组。血清IFN γ水平发作组与缓解组均显著低于正常对照组。直线相关分析表明 ,哮喘患儿血清IL 13水平与IgE呈正相关 ,IFN γ水平与IgE、IL 13均呈负相关。屋尘和尘螨是长春市儿童哮喘主要过敏原。结论 哮喘患儿发作期及缓解期均存在IgE、IL 13和IFN 展开更多
关键词 哮喘 白细胞介素13 Γ-干扰素 免疫球蛋白E 过敏原
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哮喘缓解期儿童血清白细胞介素-13与免疫球蛋白E水平变化 被引量:3
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作者 谢庆玲 焦伟 胡琼燕 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第22期1557-1558,共2页
目的探讨哮喘患儿IL-13及总IgE变化的意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法和Pharmacia UniCAP检测系统检测88例6~14岁的哮喘缓解期和40例正常对照儿童血清IL-13与总IgE水平。结果哮喘缓解期儿童临床症状和肺功能改善;血清IL... 目的探讨哮喘患儿IL-13及总IgE变化的意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法和Pharmacia UniCAP检测系统检测88例6~14岁的哮喘缓解期和40例正常对照儿童血清IL-13与总IgE水平。结果哮喘缓解期儿童临床症状和肺功能改善;血清IL-13水平高于正常儿童对照组(U=3.93 P〈0.01);血清总IgE水平仍明显高于正常儿童对照组(U=10.52 P〈0.01)。血清IL-13水平与总IgE水平呈显著正相关(r=0.2685 P〉0.05)。结论哮喘缓解期变态反应性炎症持续存在,血清高质量浓度的IL-13和IgE与哮喘的免疫病理相关。 展开更多
关键词 哮喘 白细胞介素-13 免疫球蛋白E 儿童
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重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白对鸡外周血T淋巴细胞亚群的影响研究 被引量:4
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作者 杨晓璐 闫若潜 +6 位作者 吴志明 刘梅芬 张代宝 张书阳 王淑娟 赵雪丽 刘毅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期175-178,共4页
为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)对SPF鸡外周血T淋巴细胞亚群含量影响,本研究采用流式细胞术对重组融合蛋白(第2组)和rChIFN-α蛋白(第3组)注射14日龄SPF鸡后不同时间对各试... 为了研究重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)对SPF鸡外周血T淋巴细胞亚群含量影响,本研究采用流式细胞术对重组融合蛋白(第2组)和rChIFN-α蛋白(第3组)注射14日龄SPF鸡后不同时间对各试验组鸡外周血T淋巴细胞(PBLC)中CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+百分含量以及CD4^+/CD8^+比值进行检测。结果表明,与对照组相比,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白在鸡体内接种后3~14d均可明显提高鸡外周血T淋巴细胞中CD3^+CD4^+细胞百分含量,降低CD3^+CD8^+细胞的百分含量,提高CD4^+/CD8^+比值;接种后3~7d期间,第2组鸡的CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+细胞含量及CD4^+/CD8^+比值与PBS对照组(第1组)相比差异均极显著(P〈0.01),第3组与第1组相比差异均显著(P〈0.05)。以上结果表明,重组融合蛋白和rChIFN-α蛋白接种鸡体后均可显著影响鸡PBLC中淋巴细胞亚群百分含量,提高CD4^+/CD8^+比值,增强机体的细胞免疫功能;重组融合蛋白对鸡淋巴细胞亚群百分含量、CD4^+/CD8^+比值影响程度和细胞免疫功能的增强作用优于rChIFN-α蛋白;重组融合蛋白在体内发挥了鸡α干扰素和白细胞介素-2对细胞免疫功能的协同增强作用。 展开更多
关键词 重组鸡α干扰素/白细胞介素-2融合蛋白 重组鸡α干扰素蛋白 T淋巴细胞亚群 CD4^+/CD8^+比值 免疫功能
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新生儿肺炎白细胞介素-10、-13与免疫球蛋白的关系 被引量:1
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作者 陈昌辉 李茂军 +5 位作者 叶长宁 邱练芬 毛晓兰 陈丽娜 阳倩 何海兰 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期380-382,共3页
目的 探讨新生儿肺炎白细胞介素 (IL) 10、 13与免疫球蛋白 (Ig)的关系。 方法 采用免疫酶法(ELISA)和速率散射比浊法检测新生儿肺炎患儿血IL 10、IL 13、IgG、IgA、IgM。以C反应蛋白 (CRP)≥ 2 0mg/L作为诊断细菌感染的界限值 ,结... 目的 探讨新生儿肺炎白细胞介素 (IL) 10、 13与免疫球蛋白 (Ig)的关系。 方法 采用免疫酶法(ELISA)和速率散射比浊法检测新生儿肺炎患儿血IL 10、IL 13、IgG、IgA、IgM。以C反应蛋白 (CRP)≥ 2 0mg/L作为诊断细菌感染的界限值 ,结合临床资料 ,将肺炎分为 4组进行结果分析。结果  1.肺炎组 8型常见病毒及支原体特异性IgM阳性 4 0份 (36 .0 % ) ;对照组 30份血清检测均阴性。病毒及支原体感染 (病毒感染 ) 2 3例(2 0 .7% ) ,细菌感染 4 5例 (4 0 .5 % ) ,混合感染 17例 (15 .3% ) ,不明病原感染 (其他感染 ) 2 6例 (2 3.4 % )。 2 .肺炎组IgA、IgM明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。其中病毒感染组IgA明显高于其他感染组和对照组 (P <0 .0 5 ) ;IgM含量为细菌感染组显著高于对照组 (P <0 .0 5 )。 3.病毒感染组IgG、IgA、IgM分别与IL 10有显著相关 (P<0 .0 5 )。混合感染组、细菌感染组和对照组IgM分别与其IL 13呈显著相关 (P <0 .0 5 )。结论 新生儿肺炎时 ,IgA是完成抗病毒体液免疫应答的重要成分 ,IL 10对IgA产生具有调节作用 ;IgM能在抗菌性体液免疫机制中发挥重要作用 ,IL 展开更多
关键词 新生儿 肺炎 白细胞介素-10 白细胞介素-13 免疫球蛋白
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