白细胞介素18和白细胞介素18结合蛋白与自身免疫性肝炎相关性探讨

临床上约10％～20％肝炎病因未明，自身免疫性肝炎（AIH）可能是一个原因。目前AIH发病机制尚不完全明确，细胞因子、免疫细胞、遗传背景、免疫调节网络等因素综合作用，可能导致肝细胞受损。白细胞介素18（IL-18）在调节机体免疫反应中起重要作用；

血清白细胞介素-18结合蛋白检测联合腹部CT在原发性肝癌腹腔积液诊断中的价值研究

原发性肝癌（PHC）是临床常见的消化系统恶性肿瘤之一,居恶性肿瘤的第5位[1,2]。PHC的发生并不是单一因素引起,而是多种致病因素之间相互协同,相互制约的过程[3]。有研究报道,肿瘤的发生、发展与肿瘤免疫功能密切相关,免疫功能变化引起白介素（IL）-18结合蛋白（IL-18BP）水平的改变[4]。肝癌并发腹腔积液是肝癌晚期常见的并发症,有多数研究报道称。

白细胞介素-18结合蛋白联合骨髓来源间充质干细胞治疗肝纤维化的实验研究

目的：观察骨髓来源间充质干细胞（MSC）与白细胞介素-18结合蛋白（IL-18BP）联合治疗肝硬化大鼠的疗效。方法：由大鼠胫骨及股骨骨髓腔分离培养MSC，鉴定后制备成1×10^7／ml的细胞悬液。40只大鼠随机分为4组：正常对照组、肝硬化模型组、MSC治疗组和MSC＋IL-18BP治疗组。正常对照组不制模，其余3组采用四氯化碳（40ml／L）0．2ml／100g腹腔注射、每周2次、连续6周诱导大鼠肝硬化模型。MSC治疗组于制模后6周尾静脉注射MSCs 300μl；MSC＋IL-18BP组在给予MSCs的同时腹腔注射IL-18BP 0．5mg／kg；正常对照组和肝硬化模型组于相同时间给予等量磷酸盐缓冲液腹腔注射。4周后各组动物眼眶静脉取血检测血清白蛋白和丙氨酸转氨酶（ALT）水平；处死取肝组织，HE染色，光学显微镜下进行病理学观察及肝纤维化分级；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肝组织匀浆中Ⅰ型胶原蛋白基因的表达量。结果：病理学观察显示肝硬化模型组肝纤维化明显，与正常对照组比较，血清白蛋白水平明显下降，ALT明显上升，Ⅰ型胶原蛋白基因表达明显增强（P〈0．05）。MSC治疗组和MSC＋IL-18BP治疗组纤维化程度均减轻，ALT和血清白蛋白水平明显改善，Ⅰ型胶原蛋白基因表达明显下降，且MSC＋IL-18BP治疗组比MSC治疗组各指标改善更加明显（P〈0．05）。结论：MSC联合IL-18BP治疗肝硬化较单纯MSC治疗效果更加明显，能更有效地减轻肝纤维化。

白细胞介素18结合蛋白在老年炎性和自身免疫性疾病中的研究进展

白细胞介素18结合蛋白(IL-18BP)是组成型分泌蛋白,对IL-18有极高亲和力,二者结合后阻断IL-18生物学活性。IL-18是导致Th1细胞因子反应的早期信号,该反应是细胞毒性T细胞反应所必需,IL-18BP与IL-18结合后,可以抑制Th1细胞免疫应答的早期阶段,减少IFN-γ的产生。老年炎性疾病的严重程度与IL-18、IL-18BP的失衡有关,而二者的水平在老年自身免疫性疾病中均显著升高,与疾病的发生、发展关系密切。IL-18BP对IL-18的拮抗作用能为这两类疾病的治疗提供新策略。

紧密连接蛋白－1咬合蛋白及白细胞介素－18在急性重症胰腺炎肠黏膜中的表达

目的：观察急性重症胰腺炎（ severe acute pancreatitis ， SAP）肠黏膜紧密连接蛋白－1（ZO－1）、肠上皮咬合蛋白（Occludin）及白细胞介素（IL）－18的表达变化，探讨急性重症胰腺炎时肠道屏障功能损伤的机制。方法选择2012－06-2012－12在我院消化科住院治疗的急性重症胰腺炎患者和急性轻型胰腺炎患者各30例为胰腺炎组。选取正常健康人30例作为对照组。在急性胰腺炎患者置鼻空肠营养管同时，采集距离十二指肠乳头5 cm以上对侧十二指肠黏膜组织。采用免疫组织化学SP法检测肠组织ZO－1、Occludin、IL－18蛋白表达，采用Western blotting法进行肠组织ZO－1、Occludin、IL－18蛋白半定量检测。结果对照组、轻型胰腺炎组、重症胰腺炎ZO－1阳性率分别为56．7％、50．0％、40．0％，轻、重胰腺炎组ZO－1阳性率低于对照组（P＜0．05）。重症胰腺炎组ZO－1阳性率低于轻型胰腺炎组（P＜0畅05）。对照组及轻、重症胰腺炎组Occludin阳性率分别为50．0％、40．0％、33．3％，轻、重症胰腺炎组Occludin阳性率低于对照组（P＜0．05），重症胰腺炎组Occludin阳性率低于轻型胰腺炎组（P＜0．05）。对照组、轻型胰腺炎组、重症胰腺炎组IL－18阳性率分别为10．0％、46．7％、86．7％，轻、重症胰腺炎组IL－18阳性率高于对照组（P＜0．05），重症胰腺炎组IL－18阳性率高于轻型胰腺炎组（P＜0畅05）。结论急性重症胰腺炎时，ZO－1、Occludin表达降低，IL－18表达增高，可能共同参与了急性胰腺炎肠黏膜屏障功能损伤的病理过程。

IL-18BP重组蛋白对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞的作用研究

目的探讨人重组白细胞介素-18结合蛋白(rhIL-18BP)对肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导的内皮细胞炎症、凋亡的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),用20 ng/ml的TNF-α和不同质量浓度的rhIL-18BP孵育相应时间,提取mRNA并用PCR及实时定量PCR检测细胞因子(IL-6、IL-8)、黏附分子(ICAM-1、VCAM-1)的mRNA表达;ELISA法检测细胞上清液中细胞因子(IL-6、IL-8)、可溶性黏附分子(sICAM-1、sVCAM-1)的蛋白含量;流式细胞术检测细胞凋亡的变化。结果 1)IL-18BP可以抑制TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞中炎症因子的表达;2)IL-18BP能抑制TNF-α诱导的HUVECs的凋亡。结论 rhIL-18BP对TNF-α诱导的内皮炎症反应有抑制作用,并可以抑制TNF-α诱导的内皮细胞凋亡。

乙型肝炎病毒X蛋白上调白细胞介素-18基因的表达

目的 :了解乙型肝炎病毒 (HBV )X蛋白 (HBxAg)与白细胞介素 18(IL 18)基因表达的关系 ,研究HBxAg在HBV致病的分子生物学机制中的作用。 方法 :聚合酶链反应 (PCR)扩增人IL 18基因启动子DNA ,命名为IL 18P。以T A克隆法 ,将IL 18P基因片段连入载体pGEM T。将获得的质粒 pGEM T IL 18P ,与报告质粒pCAT3 basic分别用KpnⅠ和BglⅡ双酶切后构建IL 18启动子报告基因表达载体 pCAT3 IL 18P ,以重组表达质粒pCAT3 IL 18P和HBxAg表达载体 pcDNA HBxAg瞬时转染HepG2细胞 ,以转染 pCAT3basic的HepG2细胞为阴性对照 ,48小时后收获细胞。用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测细胞中氯霉素乙酰转移酶 (CAT)的表达活性 ,以了解乙型肝炎病毒X蛋白对IL 18基因表达的影响。结果 :构建的报告基因表达载体 pCAT3 IL 18P经过序列分析和酶切鉴定正确。真核表达载体pcDNA3 1(阴性 ) X和 pCAT3 IL 18P共转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3空载体的 6 2倍 ,是 pCAT3 IL 18P的 1 17倍。 结论 :乙型肝炎病毒X蛋白可上调IL 18启动子的转录活性 ,促进IL 18基因表达。

灯盏细辛对急性冠脉综合征老年患者血清C反应蛋白与白细胞介素-6、-12、-18、-23的影响

急性冠脉综合征包括不稳定型心绞痛、急性ST段抬高型心肌梗死和急性非ST段抬高型心肌梗死〔1〕。近年来人们发现急性冠脉综合征在病变发生和进展时出现明显的血清细胞因子的变化,如血清超敏C-反应蛋白(CRP)、白介素(IL)-6、-12、-18和-23等参与的系统性炎性反应在动脉粥样硬化的开始和发展各个阶段均扮演着重要的角色。部分炎症反应因子可以作为预测冠心病事件的独立影响因子〔2〕。有效降低CRP、IL-6、-12、-18、-23的表达对治疗有积极作用。

白细胞介素-18与基质金属蛋白酶-9在蛛网膜下腔出血患者中的动态演变及意义

目的:探讨白细胞介素-18(IL-18)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在蛛网膜下腔出血患者中的动态演变及意义。方法:选择29例蛛网膜下腔出血患者作为病例组并按病情及是否发生脑血管痉挛(CVS)分组,选择同期正常健康体检者20例作为对照组,分别于SAH后第1、4、14天采用ELISA法检测血清中IL-18和MMP-9的表达。结果:病例组血清中IL-18和MMP-9表达明显高于对照组(P<0.05),且随着病情恶化,其表达也有升高趋势;SAH患者血清炎症因子在不同时间点CVS组与无CVS组、预后良好组与预后不良组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SAH发生时,患者血清细胞因子的表达明显升高,并且二者表达有密切的关系,共同参与SAH的发生发展。

IL-18/IL-18BP介导NK-92MI细胞杀伤GTKO猪内皮细胞的初步研究

目的探讨白细胞介素(IL)-18/IL-18结合蛋白(BP)介导自然杀伤(NK)-92MI细胞杀伤α-1,3-半乳糖基转移酶(GGTA1)基因敲除(GTKO)猪内皮细胞的效应及可能机制。方法将NK-92MI细胞分为NK组、NK+IL-18组、NK+GTKO组、IL-18+NK+GTKO组和IL-18+IL-18BP+NK+GTKO组,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测NK-92MI细胞中炎症相关基因的信使核糖核酸(mRNA)表达,乳酸脱氢酶(LDH)法检测NK-92MI细胞对GTKO猪内皮细胞的杀伤效应,脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测GTKO猪内皮细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法检测具有杀伤效应的蛋白和凋亡相关蛋白的表达。结果与NK组、NK+IL-18组以及NK+GTKO组比较,IL-18+NK+GTKO组NK-92MI细胞中干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-8、IL-3、IL-6和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的mRNA表达水平均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与IL-18+NK+GTKO组比较,IL-18+IL-18BP+NK+GTKO组NK-92MI细胞中IFN-γ、TNF-α、IL-8、IL-3、IL-6和GM-CSF的mRNA表达水平均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与NK+GTKO组相比,IL-18+NK+GTKO组NK-92MI细胞中穿孔素、颗粒酶B和IFN-γ蛋白表达水平均升高,NK-92MI细胞对GTKO猪内皮细胞的杀伤率增加,GTKO猪内皮细胞凋亡率增加,GTKO猪内皮细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/Bcl-2和裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cleaved Caspase)-3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3的比例均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与IL-18+NK+GTKO组比较,IL-18+IL-18BP+NK+GTKO组穿孔素、颗粒酶B、IFN-γ蛋白表达水平均降低,NK-92MI细胞对GTKO猪内皮细胞的杀伤率降低,GTKO猪内皮细胞凋亡率下降,GTKO猪内皮细胞中Bax/Bcl-2和cleaved Caspase-3/Caspase-3的比例均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论IL-18BP可阻断IL-18诱导的NK-92MI细胞中炎症相关基因表达和NK-92MI细胞杀伤GTKO猪内皮细胞的效应。

重组鸡白细胞介素18对不同基因型新城疫病毒HN基因表达蛋白免疫活性的影响

白细胞介素18（IL-18）是被广泛研究的细胞因子佐剂之一。研究选择了IL-18作为纯化蛋白多肽的佐剂，观察其对多肽疫苗的免疫应答作用，从而为研制新型的多肽疫苗奠定一定的理论基础。

IL-18及IL-18结合蛋白、IFN-γ等血清炎性介质在囊型包虫病致Th1/Th2细胞偏移中的意义

目的探讨联合检测血清中白介素18(IL-18)和白介素18结合蛋白(IL-18BP)在囊型包虫病致Th1/Th2细胞偏移发生和发展中的作用。方法以25例健康者为HC组,28例囊性包虫病患者为CE组,28例囊性包虫病术后患者为PCE组。采用酶联免疫吸附法检测3组患者血清IL-18、干扰素γ(IFN-γ)、白介素2(IL-2)和IL-18BP、白介素4(IL-4)水平;采用免疫比浊法检测3组患者血清C反应蛋白(CRP)、补体3(C3)、补体4(C4)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白E(IgE)水平。结果 CE组血清IL-18、IFN-γ、IL-2、C3及C4水平明显低于HC组和PCE组,差异有统计学意义(P<0.05);CE组血清IL-18BP、IL-4、CRP、IgM、IgG及IgE水平明显高于HC组和PCE组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清IFN-γ、IL-18及IL-18BP在肝囊型包虫病所致的Th1/Th2偏移发生和发展过程中具有协同及相互制约的作用。

哮喘患者嗜酸性粒细胞富集群中IL-18及其结合蛋白和受体水平增加

目的探讨哮喘患者血液嗜酸性粒细胞富集群中白细胞介素18(IL-18)、白细胞介素18结合蛋白(IL-18BP)和白细胞介素18受体(IL-18R)的表达变化及其相关性。方法收集哮喘患者和门诊正常人群的外周静脉血,用蒿草花粉、尘螨和梧桐花粉粗提液刺激血液,流式细胞术检测嗜酸性粒细胞富集群中IL-18、IL-18BP及IL-18R的表达并分析其相关性。结果哮喘患者嗜酸性粒细胞富集群中IL-18+细胞比例较正常人升高达15倍。尘螨、梧桐花粉粗提液刺激哮喘患者血液后,嗜酸性粒细胞富集群中IL-18+细胞比例分别升高约1.3倍和1.5倍;梧桐花粉粗提液刺激哮喘患者血液后,嗜酸性粒细胞富集群IL-18BP^+细胞的平均荧光强度(MFI)升高约1.5倍,IL-18R+细胞比例升高约2倍。此外,哮喘患者血液经过敏原激发后嗜酸性粒细胞群中IL-18BP+细胞和IL-18R^+细胞的表达呈正相关(r=0.639)。然而,正常人血液嗜酸性粒细胞富集群中IL-18、IL-18BP和IL-18R的变化不明显。结论嗜酸性粒细胞表达的IL-18、IL-18BP和IL-18R可能与哮喘炎症反应有关。

来源于羊痘病毒的白介素-18结合蛋白基因的表达和活性研究

Some poxvirus genome of vaccinia subgenus encoded IL-18 binding prolein gene,which could block IL-18 activity but no sequence similarity to membrane IL-18 receptors.The sheep poxvirus genome subgenus also had this gene.A pair of primers spanning the ORF of goat IL-18 binding protein gene in sheep poxvirus genome were designed.This gene was cloned and expressed in E.coliwith pGEX-5X-3 plasmid.After being purified,the recombinant fusion protein could inhibit goat PBMC IFN- production induced by IL-18 in goat PBMC.

HBV感染者血清IL-18,IL-18BPa水平及外周血单个核细胞mRNA的表达

目的探讨白细胞介素18(IL-18)和白细胞介素18结合蛋白(IL-18BP)在乙型肝炎病毒(HBV)感染中的作用。方法分别用ELISA法及RT-PCR法检测93例HBV感染者(无症状携带者20例,慢性肝炎52例,重型肝炎21例)和18例正常对照血清IL-18,IL-18BPa亚群(IL-18BPa)的水平和外周血单个核细胞(PBMC)内IL-18 mRNA,IL-18BPa mRNA的表达水平。结果不同临床类型HBV感染者IL-18,IL-18mRNA表达水平的差异均有显著性(P<0.01),重型肝炎组最高,正常对照组最低,重型肝炎组和慢性肝炎组均明显高于正常对照组(P<0.01);重型肝炎组、慢性肝炎组IL-18BPa水平和IL-18BPa mRNA表达水平都显著高于无症状携带者、正常对照组,无症状携带者明显高于正常对照组(P<0.05或P<0.01),重型肝炎组和慢性肝炎组差异无显著性(P>0.05)。结论IL-18与IL-18BP可能参与了宿主对HBV的免疫应答,IL-18与病情严重程度相关,IL-18BP与IL-18的相对水平可能与转归和预后有关。

白细胞介素-18

IL-18是近年克隆鉴定的新型细胞因子,具有较广泛的免疫学活性。IL-18、IL-18R和 IL-18BP已经被广泛而深入地研究。文章综述 IL-18的生化和分子生物学及其生物学功能研究进展。

IL-18结合蛋白在慢性肝炎及肝癌中的表达意义

目的:检测原发性肝癌(肝癌)、慢性乙型肝炎(慢乙肝)、肝炎后肝硬化(肝硬化)和正常人血清白介素-18结合蛋白(IL-18BP)的浓度,并检测同期肝癌、癌周、慢乙肝、肝硬化和正常肝脏组织中IL-18BP的表达;探讨IL-18BP在慢乙肝、肝硬化及肝癌发病过程中的作用.方法:ELISA法检测肝癌25例、肝硬化20例、慢乙肝20例、正常人15例血清中IL-18BP的浓度.利用SP免疫组化染色法检测同期肝癌患者癌组织、癌周组织各41例;肝硬化组织11例;慢乙肝组织9例;正常5例(肝囊肿患者的正常肝组织)肝脏组织IL-18BP表达.结果:正常组、慢乙肝组、肝硬化组和肝癌组血清中IL-18BP的浓度分别为(3.3±0.5),(6.2±1.5),(14.9±1.4),(20.4±1.9)μg/L,4组间两两比较均有显著的统计学差异(P<0.01).肝癌的癌周组织、癌组织、肝硬化组织和慢乙肝组织阳性表达率分别为97.6%,34.2%,36.4%和22.2%;正常肝组织表达量极少;癌周组织评分值分别与癌组织、慢性肝炎组织、肝硬化组织比较有统计学差异(P<0.01).结论:随着炎症的进展,血清IL-18BP含量逐渐升高,但肝癌患者血清中IL-18BP含量最高.组织学检测结果提示肝癌癌周组织及癌组织中残存的肝细胞大量表达IL-18BP,肝癌组织有一定量的表达.IL-18BP高表达除受炎症因素的调控外,可能还参与调控肿瘤的生成和发展,血清或/和肝组织中IL-18BP水平检测,可能有助于疾病的早期诊断及预后评估.

原发性肝癌患者血清IL-18结合蛋白水平检测及意义

目的探讨原发性肝癌患者血清IL-18结合蛋白水平检测的意义。方法采用ELISA法检测原发性肝癌46例、乙型肝炎肝硬化41例及正常人15例血清IL-18结合蛋白水平,比较各组血清IL-18结合蛋白水平的差异。结果原发性肝癌患者血清IL-18结合蛋白水平为(12.36±9.96)ng/ml,明显高于乙型肝炎肝硬化组(7.69±3.22)ng/ml,(P=0.01);肝癌Ⅲ期患者血清IL-18结合蛋白为(18.53±11.77)ng/ml,明显高于肝癌Ⅱ期(7.62±3.95)ng/ml,(P<0.01);原发性肝癌伴腹水者血清IL-18结合蛋白为(15.35±11.35)ng/ml,明显高于不伴腹水者(7.27±1.89)ng/ml,(P<0.01)。结论检测外周血IL-18结合蛋白水平对判断原发性肝癌患者的病情有一定的帮助。

IL-18及IL-18结合蛋白在人正常月经周期子宫内膜的表达

目的探讨白细胞介素(IL)18及IL18结合蛋白(IL18BP)在人正常月经周期子宫内膜上的表达。方法取因子宫肌瘤或子宫脱垂行全子宫切除术的患者子宫内膜,按月经周期和子宫内膜形态学检查结果分为增生期和分泌期2组,每组10例。免疫组织化学法检测子宫内膜的IL-18及IL-18BP表达;实时定量聚合酶连锁反应(qRT-PCR)检测子宫内膜IL-18及IL-18BP mRNA的表达。结果 IL-18、IL-18BP在人增生期和分泌期子宫内膜中均有表达,且随着月经周期其表达呈现时空性变化。IL18在增生期表达于腔上皮、腺上皮细胞膜及基质细胞,与增生期相比,分泌期基质细胞IL18的阳性表达显著降低(MOD值0.33±0.07 vs.0.52±0.12,P<0.05),而IL18BP的表达则显著增加(MOD值0.33±0.20 vs.0.10±0.07,P<0.05)。qRT-PCR结果显示,在增生期和分泌期子宫内膜标本均有IL18和IL18BP mRNA表达,与增生期相比,分泌期IL18表达显著下降(P<0.05),IL18BP表达显著增强(P<0.05),IL18BP/IL18比值显著增高(P<0.05)。结论 IL18和IL18BP在整个月经周期人子宫内膜上均有表达,且其表达呈现时空性的变化,可能与月经周期过程中子宫内膜的崩解修复有关。

白介素18结合蛋白研究进展

白介素 １８结合蛋白（ＩＬ-１８ＢＰ）是新近发现的一种糖蛋白；属免疫球蛋白超家族成员；目前已发现有６种ＩＬ—１８ＢＰ的同工蛋白。ＩＬ—１８ＢＰ可以在体内外有效抑制ＩＬ－１８的作用，因而被认为是ＩＬ-１８的天然拮抗剂。另外发现几种痘病毒编码的蛋白质与ＩＬ－１８ＢＰ有高度同源性，其病毒产物可减弱ＩＬ－１８诱导的Ｔｈｌ反应。利用ＩＬ－１８ＢＰ拮抗ＩＬ－１８的作用进行基因治疗将为某些自身免疫性疾病的治疗开辟一条新的途径。