口腔扁平苔藓患者血清中γ干扰素、白细胞介素4表达水平对免疫应答的调节作用

目的:探讨口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者血清中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)表达水平对免疫应答的调节作用。方法:选取2019年1月—2021年12月首都医科大学附属北京口腔医院王府井部收治的83例OLP患者为实验组,另纳入同期来院的61例健康志愿者为对照组。比较2组患者血清中IFN-γ、IL-4及免疫功能指标的表达情况,并分析实验组IFN-γ、IL-4表达水平与免疫功能指标的关系。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:实验组IFN-γ、IL-4水平显著高于对照组(P<0.05)。实验组网纹型OLP、糜烂型OLP患者的IFN-γ水平对比差异无统计学意义(P>0.05),实验组糜烂型OLP患者的IL-4水平显著高于网纹型OLP患者(P<0.05)。实验组CD3^(+)、CD4^(+)、CD16^(+)+CD56^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平显著低于对照组(P<0.05),实验组CD8^(+)、CD19^(+)水平显著高于对照组(P<0.05)。实验组IgG、IgM、CH50水平显著高于对照组(P<0.05),实验组IgA、C3、C4水平显著低于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,实验组IFN-γ水平与CD16^(+)+CD56^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关(P<0.05);实验组IL-4水平与CD16^(+)+CD56^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关(P<0.05),实验组IL-4水平与IgG呈正相关(P<0.05)。结论:OLP患者血清中IFN-γ、IL-4异常高表达且糜烂型OLP患者IL-4表达更高,OLP患者细胞免疫及体液免疫功能紊乱且与CD16^(+)+CD56^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、Ig G免疫应答调节有关。

白细胞介素-4及其受体基因多态性与哮喘儿童血清白细胞介素-4和总免疫球蛋白E含量的相关性

目的探讨白细胞介素-4(IL-4)-基因-589-位点及其受体基因多态性与哮喘患儿IL-4和总免疫球蛋白E(TIgE)含量的相关性。方法选取2017年9月至2020年12月上海市嘉定区中医医院儿科收治的90例哮喘发作患儿作为实验组,另入取同期90名健康体检儿童作为空白组,两组均应用聚合酶链反应(PCR)和DNA测序法进行基因分型。同时采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)法检测两组血清IL-4、TIgE水平,比较两组IL-4-基因-589位点C/T和IL-4R-基因-rs1801275位点A/G基因多态性检测结果、血清IL-4在IL-4-基因-589位点C/T和IL-4R-基因-rs1801275位点A/G不同基因型含量变化、血清TIgE在IL-4-基因-589位点C/T和IL-4R-基因-rs1801275位点A/G不同基因型含量变化。结果两组IL-4R-基因-rs1801275位点基因型频率和等位基因频率、IL-4-基因-589位点基因型频率比较差异无统计学意义;实验组C等位基因频率低于空白组,T等位基因频率高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组TT血清IL-4含量均高于CT、CC,CT均高于CC,且实验组CC、CT、TT血清IL-4含量均高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组GG血清IL-4含量高于AA、AG,AG高于AA,且实验组AA、AG、GG血清IL-4含量均高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组TT血清TIgE含量高于CT、CC,CT高于CC,且实验组CC、CT、TT血清TIgE含量均高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组GG血清TIgE含量均高于AA、AG,AG均高于AA,且实验组AA、AG、GG血清TIgE含量均高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论哮喘患儿IL-4基因-589位点和IL-4R-基因-rs1801275位点基因多态性与健康儿童相比未显示出明显差异,TT和GG基因型哮喘患儿IL-4和TIgE水平较其他对应基因型升高,哮喘发作机制需进一步研究。

白细胞介素-4在肝脏疾病中的研究进展

细胞因子是调节免疫细胞分化、增殖和功能的重要化学介质。白细胞介素-4在多种肝脏疾病的发病与病程进展中起着重要的免疫调节作用,作为一个有着悠久研究历史的细胞因子,近年来其在肝脏疾病的临床与基础研究中有新进展。本文对其在病毒性肝炎、自身免疫性肝病、药物性肝损伤、寄生虫性肝损伤、肝纤维化、肝硬化和原发性肝细胞癌的病程中的影响进行综述。

豚鼠过敏性休克死亡白细胞介素-4、白细胞介素-13与免疫球蛋白E的表达及法医学意义

目的:建立豚鼠过敏性休克死亡动物模型,探讨豚鼠血清中白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-13和免疫球蛋白E(Immunoglobulin E,IgE)的表达,旨在为临床和法医学诊断过敏性休克提供科学、客观的参考依据。方法:用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测30只过敏性休克豚鼠(实验组20只,对照组10只)血清IL-4、IL-13和IgE的表达情况。结果:实验组血清IL-4水平明显高于对照组(P=0.000);实验组血清IL-13水平明显高于对照组(P=0.000);实验组血清IgE水平明显高于对照组(P=0.000)。结论:实验组血清IL-4、IL-13与IgE水平明显高于对照组,为过敏性休克临床诊断及法医学鉴定提供了参考依据。

牙髓炎症中白细胞介素-17调节单核细胞功能和分化的研究

目的 探讨牙髓炎症中白细胞介素(IL)-17募集单核细胞并调节其分化的作用。方法 肿瘤坏死因子(TNF-α)刺激牙髓细胞,模拟炎症状态,实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)、酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-17的表达;IL-17重组蛋白刺激牙髓细胞,收集培养基上清,通过Transwell小室实验检测IL-17或受IL-17刺激的牙髓细胞培养基上清对单核细胞的趋化作用;采用结晶紫染色和吞噬实验分别检测IL-17或受IL-17刺激的牙髓细胞培养基上清对单核细胞贴壁和吞噬的影响;IL-17刺激人单核细胞系(THP-1)细胞,RT-qPCR和ELISA分别检测TNF-α、IL-1β的表达,流式细胞检测THP-1细胞表面标志物分子簇80(CD80)的表达变化。结果 牙髓炎症中IL-17表达上调,IL-17使单核细胞贴壁增多,吞噬功能增强,TNF-α、IL-1β及CD80表达上调。结论 IL-17在牙髓炎症中高表达,其本身对单核细胞有趋化作用,并可通过刺激牙髓细胞产生趋化因子2(CCL2)放大趋化作用;IL-17可以调控单核细胞向巨噬细胞分化。

γ-干扰素、白细胞介素4与CD25在角膜移植免疫排斥反应中的作用

目的:角膜移植免疫排斥反应是一个多因素参与的调节过程,近年来研究表明细胞因子在角膜移植免疫中起重要作用。实验拟验证γ-干扰素、白细胞介素4及CD25在大鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用。方法:①实验于2006-10/2007-05在南方医科大学南方医院实验动物中心完成。选用Wistar大鼠24只,SD大鼠54只,实验方法符合动物伦理学要求。②将54只SD大鼠按随机数字表法分为3组,正常组6只,角膜移植组及地塞米松组均24只。后两组制备Wistar→SD角膜移植大鼠模型,受体选择右眼手术,供体提供双眼角膜。③用裂隙灯观察移植排斥情况;利用反转录-聚合酶链反应检测植片内γ-干扰素、CD25mRNA的表达;应用酶联免疫吸附实验检测房水和血清中γ-干扰素、白细胞介素4含量;应用流式细胞术检测移植前后不同时相外周血淋巴细胞CD25的表达;术后第11天,应用免疫组织化学方法检测角膜CD4+,CD8+和CD25+T细胞的表达。结果:54只SD大鼠全部进入结果分析。①地塞米松组大鼠发生角膜移植排斥反应的时间长于角膜移植组(P=0.000)。②正常角膜植片无CD25、γ-干扰素mRNA表达,角膜移植组术后第11天角膜植片内γ-干扰素、CD25 mRNA的表达较地塞米松组增强(P<0.05)。③角膜移植组角膜移植术后6,11d血清γ-干扰素含量高于正常组(P<0.05);术后11d含量高于术后6,24d(P<0.01);地塞米松组术后6,11d低于同期角膜移植组(P<0.05)。④角膜移植组角膜移植术后6,11,24d房水γ-干扰素、白细胞介素4含量均高于正常组(P<0.05);地塞米松组术后6,11d均低于同期角膜移植组(P<0.05～0.01)。⑤地塞米松组术后6,11d外周血CD3+CD25+T/CD3+T比值低于同期角膜移植组(P<0.05)。⑥术后第11天角膜移植组植片内CD4,CD8及CD25明显表达,地塞米松组CD4,CD8及CD25表达明显减弱。结论:CD25、γ-干扰素和白细胞介素4在角膜移植免疫排斥反应过程中发挥重要的作用;促进白细胞介素4表达,抑制γ-干扰素及CD25产生,对降低角膜移植免疫排斥反应具有积极的作用。术后动态检测外周血CD25和γ-干扰素的表达有助于临床了解局部免疫反应程度并预测角膜移植排斥反应的发生。

猪白细胞介素4,6融合基因和CpG基序对猪蓝耳病疫苗免疫的强化效应

为探索新型高效安全的猪蓝耳病疫苗免疫佐剂,本实验用离子交联法制备壳聚糖纳米颗粒包裹猪融合基因PIL-46和CpG基序的真核表达质粒(CNP-(VRIL-46+VR1C)),将CNP-(VRIL-46+VR1C)肌注接种过猪蓝耳病灭活苗的长白川白杂交猪,接种后1、2、4、6和8周采取实验猪静脉血,用Sandwich ELISA检测血清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-6和IgG、IgA、IgM及特异抗体的含量,同时检测外周血液免疫细胞数量的变化。结果发现实验猪接种CNP-(VRIL-46+VR1C)后1～8周内,其血清中IL-2、IL-4、IL-6和IgG、IgA、IgM及特异抗体的含量较对照组均显著增多(P<0.05),淋巴细胞和单核细胞数量也明显升高(P<0.05)。这些表明接种CNP-(VRIL-46+VR1C)的实验猪的特异体液和细胞免疫水平均显著多于对照组,提示PIL-46基因和CpG基序组合能显著增强猪的特异体液和细胞免疫机能,明显提高其免疫防御力,具有研制为高效安全的分子免疫增强剂的应用前景。

哮喘患儿血清白细胞介素-4、12与细胞免疫的相关性

目的探讨不同病期哮喘患儿血清IL-12、IL-4水平、细胞免疫功能及其相互关系。方法随机选择哮喘患儿50例。婴幼儿哮喘13例,儿童哮喘37例。发作期30例,经吸入激素治疗后缓解期患儿20例。健康对照组22例。IL-12、IL-4测定采用酶联免疫双抗体夹心法(ELISA)。采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标试验(APAAP)检测T细胞亚群,采用郭氏法检测红细胞免疫功能。结果1.哮喘患儿发作期、缓解期和对照组IL-12水平分别为(24.44±13.26)、(42.30±12.65)、(44.68±28.28)ng/L,3组比较有显著性差异(F=8.92P<0.01),发作期明显低于其他两组,缓解期与对照组无显著性差异。2.IL-4在发作期、缓解期、对照组阳性率分别为70%、35%、9%,发作期明显高于缓解期(χ2=5.96P<0.05),缓解期仍高于对照组(χ2=4.17P<0.05)。3.哮喘患儿与健康儿童相比,CD3(t=3.18P<0.01)、CD4(t=5.51P<0.01)、CD8(t=10.38P<0.01)均降低,CD4/CD8升高(t=4.28P<0.01),RBC-C3bR降低(t=4.65P<0.01),RBC-IC增高(t=10.22P<0.01)。4.IL-4与IL-12呈显著负相关(r=-0.43P<0.05),与RBC-IC呈显著正相关(r=0.49P<0.05)。结论哮喘患儿存在Th1/Th2类细胞因子失衡和细胞免疫功能紊乱状态,哮喘患儿缓解期IL-12水平恢复至接近健康儿童,IL-4水平仍高于健康儿童。应坚持长期抗感染治疗。

从肺论治、从肠论治法对溃疡性结肠炎大鼠肺与结肠组织白细胞介素4、分泌型免疫球蛋白A表达的影响

目的通过溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠肺与结肠组织中白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobulinA,s-IgA)的表达研究从肺论治法、从肠论治法对UC大鼠肺功能损伤的分子生物学机制。方法利用2,4,6-三硝基苯磺酸建立UC大鼠模型,随机分为从肺论治组、从肠论治组、柳氮磺胺吡啶组各16只,模型组24只及正常组24只,分别于干预前取正常组、模型组各8只;干预后4、8周每组各取8只大鼠,处死大鼠,观察结肠及肺组织病理,检测s-IgA、IL-4的表达。结果(1)与正常组大鼠相比,UC大鼠结肠及肺组织中s-IgA表达显著升高(P<0.05),结肠组织中IL-4表达显著升高(P<0.05)。经从肺论治、从肠论治方药治疗后,UC大鼠结肠及肺组织中s-IgA表达显著降低(P<0.05),结肠组织中IL-4表达显著降低(P<0.05)。(2)肺肠组织病理结果显示,模型组大鼠可出现肺实变,肺间质充血等病理表现,中药从肺论治、从肠论治可减轻肺间质增宽,促进结肠黏膜溃疡愈合,减轻炎性细胞浸润等。结论UC模型大鼠肺与结肠组织黏膜中s-IgA均显著升高,且与结肠组织中IL-4含量呈正相关;中药从肺论治组和从肠论治组在减轻肺与结肠组织病理损伤以及调节免疫、抗炎修复方面疗效确定,与西药柳氮磺吡啶相比有一定优势。

猪白细胞介素2与融合白细胞介素4/6基因共表达的免疫效应研究

目的构建猪融合白细胞介素4/6与猪白细胞介素2基因的共表达载体,研究其共表达对小鼠免疫的协同效应。方法以2A自剪接技术首次构建猪融合白细胞介素4/6与白细胞介素2基因的共表达重组质粒,以壳聚糖纳米材料包裹制成纳米颗粒,进行体外转染HEK293细胞,提取总RNA进行RT-PCR分析,最后肌肉注射小鼠进行体内实验并分析。结果成功构建了重组共表达质粒VRIL4/6-2;壳聚糖包裹后转染HEK293细胞,48 h后收集细胞,RT-PCR检测显示目的基因能够在HEK293细胞中高效地转录与表达。小鼠接种实验结果表明,实验组血清中的IgG和IgG2a的含量比对照组显著增加,并且VRIL4/6-2-CS接种组的小鼠体液免疫水平明显增高(P<0.05);VRIL4/6-2实验组的CD4+淋巴细胞显著多于其它实验组(P<0.05);实验组IL-2、IL-4、IL-6、IL-23基因的表达水平明显高于对照组(P<0.05),实验组小鼠外周血白细胞、血小板和血红蛋白的含量均显著高于对照组(P<0.05)。结论 VRIL4/6-2共表达质粒能够更好的增强动物体液免疫和细胞免疫机能,可作为提高动物体液免疫和细胞免疫的经济高效安全新型免疫调节剂,具有潜在的重要应用前景。

白细胞介素-4放射免疫分析法的建立及其初步应用

采用重组人白细胞介素 -4 (IL -4 )免疫家兔 ,获抗IL -4抗血清。用Iodogen法制备1 2 5I标记IL -4 ,经SephadexG -5 0纯化。该法检测范围 0 .3 -2 4.3ng/mL ,批内CV <8% ,批间CV <15 %。 166名对照组血清IL-4含量为 0 .78± 0 .3 3ng/mL ;肝癌甲胎蛋白阳性患者血清IL -4含量同对照组没有显著差异 (P >0 .0 5 ) ,但原发性甲亢患者IL -4含量明显高于对照组 (P <0 .0 1)。

特异性免疫治疗对哮喘大鼠白细胞介素-10和CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞的影响

目的:探讨特异性免疫治疗(specific immunotherapy,SIT)对哮喘大鼠白细胞介素-10(IL-10)和CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tr)的影响。方法:40只健康雄性清洁级Wistar大鼠随机均分成正常对照组、哮喘组、SIT对照组和SIT治疗组,每组10只。通过卵蛋白(OVA)雾化吸入的方法对致敏大鼠进行SIT干预,观察各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数结果、血清和BALF中IL-10水平及外周血CD4+CD25+Tr百分率变化。结果:正常对照组BALF和血清中IL-10浓度分别高于哮喘组和SIT对照组(均为P<0.01),哮喘组和SIT对照组BALF和血清中IL-10浓度低于SIT治疗组(P<0.01,P<0.05);正常对照组外周血CD4+CD25+Tr百分率显著高于哮喘组、SIT对照组和SIT治疗组(P<0.01),而SIT治疗组CD4+CD25+Tr百分率分别高于哮喘组和SIT对照组(P<0.05)。结论:通过上调体内IL-10和CD4+CD25+Tr趋于正常状态可能是SIT治疗哮喘有效的重要机制。

白细胞介素—4及免疫球蛋白E在外源性支气管哮喘中的作用

目的 :对 35例急性哮喘发作组 ,31例哮喘缓解组和 32例健康对照组分别检测其血浆 Ig E,IL- 4,可观察到哮喘发作组 Ig E平均值为 (12 71.844± 711.94) mg/ L,哮喘缓解组 Ig E平均值为 (34 5 .2 14± 44 .0 5 ) m g/ L,其中哮喘发作组与哮喘缓解组比较 ,哮喘发作组与对照组比较 ,缓解组与对照组比较 ,均有显著差异 (P<0 .0 1) ,但各组 Ig E水平未发现与性别有关 ;对血浆 IL- 4(ng/ L)测定 ,可观察到哮喘发作组为 (37.2 0± 6 8.4) ng/ L,缓解组为 (35 .40± 39.4) ng/ L,对照组为 (2 0 .2 0± 2 6 .40 ) ng/ L。但发作组、缓解组与对照组之间无显著差异 (P>0 .0 5 ) ,然而 ,Ig E与 IL-

骨替代材料引导骨组织再生过程中白细胞介素4对破骨细胞分化的调控

背景:研究显示,一定剂量的白细胞介素4干预可以得到适宜比例的M1/M2巨噬细胞谱,产生利于骨愈合的微环境,促进骨再生。目的:探讨在骨替代材料引导骨组织再生的过程中,白细胞介素4对NLRP3炎性小体及破骨细胞分化的影响。方法:选取6-8周龄雄性SD大鼠48只,在左侧颅骨制备直径5 mm的骨缺损并同期植入Bio-Oss骨替代材料,缝合骨膜。术后第3天,采用随机数字表法分为实验组与对照组,每组24只,实验组、对照组分别于骨缺损区局部注射白细胞介素4或PBS,1次/d,连续注射5 d。注射后1,2周,取颅骨样本,免疫组织化学染色检测裂解caspase-1和白细胞介素1β蛋白的表达,免疫荧光染色观察M1表面标志物(诱导型一氧化氮合酶)、NLRP3指标(裂解caspase-1)的表达,RT-qPCR检测caspase-1、白细胞介素1β及组织蛋白酶K基因的表达,抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞分化及数量。注射后6,12周,取颅骨样本,行Micro-CT检测及苏木精-伊红染色。结果与结论:(1)免疫荧光染色显示,实验组注射后1,2周的诱导型一氧化氮合酶、裂解caspase-1双染细胞数量显著少于对照组(P<0.05);(2)免疫组织化学染色显示,实验组注射后1周的裂解caspase-1和白细胞介素1β蛋白的表达低于对照组(P<0.05);(3)RT-qPCR检测显示,实验组注射后1周的caspase-1 mRNA表达低于对照组(P<0.05),注射后1,2周的白细胞介素1β及组织蛋白酶K mRNA均低于对照组(P<0.05);(4)抗酒石酸酸性磷酸酶染色,实验组注射后1,2周的破骨细胞数量均明显少于对照组(P<0.05);(5)Micro-CT检测显示,实验组注射后6,12周的骨缺损部位骨体积分数、骨密度值均高于对照组(P<0.05);苏木精-伊红染色显示,注射后12周,实验组缺损中央形成多个骨化中心,散在成熟骨细胞及陷窝分布其中,可见材料周边成骨细胞大量排列成单层参与骨基质形成;(6)结果显示,白细胞介素4可能参与下调NLRP3炎性小体表达、抑制caspase-1的活化进而减少白细胞介素1β的分泌,减轻局部微环境炎性状态,同时抑制破骨细胞分化,发挥促进骨替代材料引导骨组织再生过程中新骨生成的作用。

白细胞介素4参与调控骨改建的研究进展

骨骼系统的稳定依赖骨改建的动态平衡,其受到体内复杂微环境的调控,免疫系统也参与其中。异常的免疫微环境会打破机体内骨改建的平衡,进而诱发多种骨相关疾病。白细胞介素4(IL-4)作为一种经典的适应性免疫调节细胞因子,通过多种途径直接或间接参与骨改建的调控,在很多骨相关疾病中发挥重要作用。IL-4可通过信号通路直接影响成骨细胞和破骨细胞,还可通过影响T细胞、B细胞和巨噬细胞间接调控骨改建,且参与骨相关疾病(关节炎、骨质疏松症、牙周炎、骨移植不良反应)的发生、发展。

壳聚糖纳米颗粒包裹猪白细胞介素2和融合白细胞介素4/6基因对猪圆环病毒2型疫苗免疫的强化

目的探讨猪Sus scrofa domesticus白细胞介素2(IL-2)和融合白细胞介素4/6(IL-4/6)基因的共表达对仔猪免疫应答的影响,为进一步研制新型免疫调节剂来加强仔猪抵御断奶后多系统衰竭综合征奠定基础。方法将猪IL-2和IL-4/6融合基因的共表达重组质粒,用壳聚糖材料包裹制成纳米颗粒,记作VRIL-4/6-2-CS。将仔猪分为2组,分别肌肉注射VRIL-4/6-2-CS(实验组)和生理盐水(对照组),2组均同时接种猪圆环病毒2型(PCV-2)疫苗,在接种后的第0、7、14、28天采集血样并分析免疫变化。结果实验组仔猪血清中的IgG2a抗体数量和血液中CD4^+、CD8+~T淋巴细胞数量均显著高于对照组(P<0.05);同时,实验组仔猪的IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α、TLRs(TLR-2,7)、STATs(STAT-1,2,3)基因表达水平也显著高于对照组(P<0.05)。尽管2组之间PCV-2特异性抗体的含量差异无统计学意义,但是实验组仔猪的生长速率显著高于对照组(P<0.05)。结论 VRIL-4/6-2-CS能促进仔猪对PCV-2疫苗的免疫应答,是一种安全有效的免疫佐剂。

变应性疾病患者血清白细胞介素4的酶免疫检测

采用酶免疫技术检测25例变应性疾病患者血清白细胞介素4(IL—4)水平(其中遗传过敏性皮炎8例、亚急性湿疹11例、过敏性鼻炎3例及支气管哮喘3例)。结果发现变应性疾病患者血清IL—4水平比正常人显著增高(P<0.01),说明变应性疾病的发病与IL—4产生失调,从而导致B细胞合成IgE增加有关。人IL—4酶免疫检测具有特异、敏感、相对简便及快速等优点。

牛白细胞介素-4真核表达载体的构建及免疫佐剂效应研究

应用RT-PCR技术从植物血凝素(PHA)活化的牛外周血淋巴细胞中扩增出牛白细胞介素4(IL-4)特异性目的片段,将其克隆到真核表达载体pVAX1,双酶切及测序鉴定正确后,将构建好的重组质粒pVAX1-IL-4应用脂质体LipofectamineTM2000转染至293T细胞,经RT-PCR检测IL-4可进行转录表达,且MTT检测其具有生物学活性,表明IL-4在转染细胞中可以成功表达。然后将构建好的pVAX1-IL-4作为基因佐剂来研究其对牛病毒性腹泻粘膜病毒(BVD)核酸疫苗pVAV1-E0的免疫增强作用。经ELISA和MTT检测结果表明,pVAX1-IL-4同pVAV1-E0联合免疫组小鼠的特异性抗体水平、淋巴细胞增殖水平与pVAV1-E0单疫苗免疫组相比差异显著(P<0.05)。证明重组质粒pVAX1-IL-4可作为佐剂与核酸疫苗共同作用来提高后者的免疫原性。

支气管哮喘患儿外周血单核细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-17和免疫球蛋白E水平与Toll样受体4表达的相关性

目的探讨支气管哮喘患儿外周血单核细胞(PBMC)培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)、免疫球蛋白E(IgE)水平与PBMC中Toll样受体4(TLR4)mRNA表达的相关性。方法选择2017年4月至2019年5月中国人民解放军空军军医大学第二附属医院收治的160例支气管哮喘患儿,其中急性发作期患儿91例(急性发作组),缓解期患儿69例(缓解组),另选择同期体检健康儿童160例为健康对照组。采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验测定PBMC培养上清液中TNF-α、IL-17、IgE水平,实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMC中TLR4 mRNA表达。结果急性发作组患儿PBMC培养上清液中TNF-α、IL-17、IgE水平高于缓解组和健康对照组,缓解组患儿PBMC培养上清液中TNF-α、IL-17、IgE水平高于健康对照组(P<0.05)。急性发作组TLR4 mRNA相对表达量高于缓解组及健康对照组,缓解组患儿PBMC中TLR4 mRNA相对表达量高于健康对照组(P<0.05)。急性发作组TLR4阻断后PBMC培养上清液中TNF-α、IL-17、IgE水平均低于阻断前(P<0.05)。支气管哮喘患儿PBMC培养上清液中TNF-α、IL-17、IgE水平与PBMC中TLR4 mRNA表达呈正相关(r=6.272、7.653、7.019,P<0.05)。结论支气管哮喘患儿PBMC培养上清液中TNF-α、IL-17、IgE表达升高,且与PBMC中TLR4表达呈正相关,TLR4可能通过调控TNF-α、IL-17、IgE的表达而参与支气管哮喘的发生和发展。