肺炎支原体肺炎患儿血清单核细胞趋化蛋白-4、可溶性细胞间黏附因子-1、白细胞介素-33水平变化及与气道重塑和肺功能的相关性

目的 探究肺炎支原体肺炎患儿血清单核细胞趋化蛋白-4(MCP-4)、可溶性细胞间黏附因子-1(s ICAM-1)、白细胞介素-33(IL-33)水平变化及与气道重塑和肺功能的相关性。方法 选取扬州大学建湖临床医学院2022年1月至12月收治的96例肺炎支原体肺炎患儿为研究对象,根据是否合并哮喘分为哮喘组(30例)和肺炎组(66例)。另选取同期健康体检儿童96名为对照组。比较三组血清MCP-4、s ICAM-1、IL-33及第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、呼气流速峰值(PEF)、用力肺活量(FVC)、支气管壁厚度(WT)、支气管腔直径(LD)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、纤维粘连蛋白1(FN1);分析血清MCP-4、ICAM-1、IL-33与FEV_(1)、PEF、FVC、WT、LD、Col-Ⅰ、FN1的相关性。结果 哮喘组、肺炎组血清MCP-4、s ICAM-1、IL-33、Col-Ⅰ、FN1水平高于对照组,FEV_(1)、FVC低于对照组(P<0.05)。哮喘组血清MCP-4、s ICAM-1、IL-33、Col-Ⅰ、FN1水平高于肺炎组,FEV_(1)、FVC低于肺炎组(P<0.05)。血清MCP-4、s ICAM-1、IL-33与FEV_(1)、FVC呈负相关(r<0,P<0.05),与Col-Ⅰ、FN1呈正相关(r>0,P<0.05)。结论 血清MCP-4、s ICAM-1、IL-33在肺炎支原体感染肺炎患儿中表达水平异常升高,与气道重塑和肺功能情况密切相关。

2型糖尿病肾病大鼠白细胞介素-6、白细胞介素-10、转化生长因子-β_(1)、组蛋白去乙酰化酶4表达及其与血糖、尿蛋白-肌酐比值的相关性

目的探讨2型糖尿病肾病(DN)大鼠白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)表达及其与血糖、尿蛋白-肌酐比值(UACR)的相关性。方法采用随机数字表法将64只健康雄性Sprague Dawley大鼠分为对照组(n=32)和DN组(n=32)。DN组大鼠给予高脂高糖饲料及腹腔注射链脲佐菌素40 mg·kg^(-1)制备DN模型,DN模型大鼠造模成功后正常饮食饮水。对照组大鼠正常饮食饮水,经腹腔注射等剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。于造模后第0、4、8、12周分批处死2组大鼠,于每次处死前称大鼠体质量;使用血糖仪及配套试纸检测大鼠血糖;收集尿液,使用全自动生物化学分析仪检测大鼠尿微量白蛋白、尿肌酐水平,并计算UACR;于大鼠处死后立即取出双侧肾脏,其中一侧肾脏去除包膜后称肾质量,并计算肾脏指数(KI)。采用Western blot法检测2组大鼠肾组织中IL-6、IL-10、TGF-β_(1)、HDAC4蛋白表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组大鼠血清中IL-6、IL-10、TGF-β_(1)和HDAC4水平,采用Pearson相关分析DN大鼠血清IL-6、IL-10、TGF-β_(1)、HDAC4水平与血糖、UACR的相关性。结果造模后第0、4、8、12周,DN组大鼠血糖水平及UACR均显著高于对照组(P<0.05)。造模后第0周,2组大鼠的体质量比较差异无统计学意义(P>0.05);造模后第4、8、12周,DN组大鼠的体质量均显著低于对照组(P<0.05)。造模后第0、4周,2组大鼠的KI比较差异无统计学意义(P>0.05);造模后第8、12周,DN组大鼠的KI显著高于对照组(P<0.05)。造模后第0、4、8、12周,DN组大鼠血清中IL-6、HDAC4、TGF-β_(1)水平均显著高于对照组,IL-10水平显著低于对照组(P<0.05)。造模后第0周,DN组大鼠肾组织中IL-10相对表达量显著高于对照组(P<0.05);造模后第8周,DN组大鼠肾组织中IL-10相对表达量显著低于对照组(P<0.05);造模后第4、12周,2组大鼠肾组织中IL-10相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。造模后第0、4、8、12周,DN组大鼠肾组织中IL-6、HDAC4相对表达量均显著高于对照组(P<0.05)。造模后第0周,2组大鼠肾组织中TGF-β_(1)相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);造模后第4、8、12周,DN组大鼠肾组织中TGF-β_(1)相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,DN组大鼠血清IL-6、TGF-β_(1)水平与血糖呈正相关(r=0.614、0.514,P<0.05),血清IL-10水平与血糖呈负相关(r=-0.448,P<0.05),血清HDAC4水平与血糖无相关性(r=-0.177,P>0.05)。DN组大鼠血清IL-6、TGF-β_(1)水平与UACR呈正相关(r=0.405、0.470,P<0.05),血清IL-10、HDAC4水平与UACR无相关性(r=-0.134、-0.124,P>0.05)。结论DN大鼠IL-6、TGF-β_(1)、HDAC4表达上调,IL-10表达下调;DN大鼠血清IL-6、TGF-β_(1)水平与血糖、UACR呈显著正相关,血清IL-10水平与血糖呈显著负相关。

白细胞介素4诱导蛋白1(IL4I1)在免疫调节中的作用研究进展

白细胞介素4诱导蛋白1(IL4I1)是一种分泌型氨基酸氧化酶,由抗原提呈细胞产生,可将苯丙氨酸氧化为苯丙酮酸。IL4I1通过抑制T细胞增殖、分化并限制B细胞增殖,发挥免疫抑制作用;参与机体感染防御;作为肿瘤不良预后相关基因,参与肿瘤免疫逃逸;在自身免疫性脱髓鞘疾病中,调节小胶质细胞极化表型,促进髓鞘再生,但具体作用机制尚不明确。我们总结了IL4I1在机体中的免疫调节作用及机制,以期为感染、肿瘤和自身免疫性疾病的治疗提供新思路。

白细胞介素-1β对水通道蛋白4表达的影响及其在癫痫发作中的作用

目的:观察白细胞介素-1β(IL-1β)和戊四氮致急性癫痫大鼠大脑海马水通道蛋白4(AQP4)表达变化,探讨IL-1β调节AQP4表达参与癫痫发病的作用机制。方法:将大鼠随机分为5组,对照组、IL-1β组、戊四氮组、IL-1ra(IL-1受体拮抗剂)+戊四氮组、地塞米松+戊四氮组。记录60 min内各组大鼠痫性发作级别。免疫组织化学、RT-q PCR检测6、12、24、36 h海马AQP4的表达。结果:IL-1β组和戊四氮组重度癫痫发作;地塞米松+戊四氮组和对照组无明显发作;IL-1ra+戊四氮组较戊四氮组发作减轻(P<0.05)。免疫组化和荧光定量PCR显示:戊四氮组与对照组相比12 h后AQP4表达明显升高(P<0.05),发作后24 h达到高峰(P<0.001),IL-1ra+戊四氮组12～36 h的AQP4表达都低于戊四氮组同时间点(P<0.05),地塞米松+戊四氮组与对照组相比无统计学意义(P>0.05)。结论:促炎因子IL-1β可能通过上调海马AQP4表达,影响脑内局部水平衡,增加细胞外兴奋性氨基酸或离子的浓度,促进神经元放电。

骨形成蛋白4对单侧输尿管梗阻小鼠肾组织白细胞介素-1β表达及细胞凋亡的影响

目的:探讨骨形成蛋白4(BMP4)对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾组织白细胞介素-1β(IL-1β)表达及细胞凋亡的影响。方法:将32只雄性C57BL/6小鼠随机分为生理盐水-假手术组、生理盐水-UUO组、BMP4抗体-假手术组、BMP4抗体-UUO组各8只,各组均于手术日起每天分别给予小鼠抗人BMP4抗体200μL/g或等量生理盐水腹腔注射,术后7 d处死小鼠取材。采用免疫荧光法观察正常小鼠肾脏组织BMP4的表达与分布;实时荧光定量PCR检测小鼠肾脏组织IL-1βmRNA的表达;TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:正常小鼠肾组织表达BMP4,主要分布于肾小管。BMP4抗体-假手术组和生理盐水-假手术组的IL-1βmRNA表达、细胞凋亡率比较差异均无统计学意义(P均>0.05);BMP4抗体-UUO组IL-1βmRNA表达、细胞凋亡率低于生理盐水-UUO组(P均<0.05)。结论:BMP4可能参与了梗阻性肾病肾间质炎症及细胞凋亡过程,有可能作为肾脏疾病的治疗靶点。

Toll样受体4、丝切蛋白-1及可溶性白细胞介素-2受体在肝癌患者组织中的表达及意义

目的探讨Toll样受体(TLR)4、丝切蛋白(ADF)-1及可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)在肝癌组织中的表达及意义。方法纳入肝癌患者50例,取患者手术切除癌组织、癌旁组织标本。Western印迹法检测TLR4、ADF-1表达,酶联免疫吸附试验检测SIL-2R表达,对待测标本进行免疫组化染色。结果癌组织中TLR4、ADF-1、SIL-2R表达明显高于癌旁组织(P<0.05)。肿瘤体积≥5 cm^(3)、病理分期Ⅲ、Ⅳ期、有淋巴结转移、低分化患者TLR4、ADF-1、SIL-2R表达更高(均P<0.05)。肝癌组织中TLR4、ADF-1、SIL-2R表达呈正相关(P<0.05)。结论TLR4、ADF-1、SIL-2R在肝癌组织中呈现异常高表达,与肿瘤体积等病理参数具有相关性,且三者在肝癌组织中具有一定相关性,为肝癌的诊断、疗效评价、预后评估提供新的参考依据。

rhIL-1α/rhTGF-β1诱导下大鼠髁突软骨细胞PRG4的表达

目的:观察rhTGF-β1对rhIL-1α作用下大鼠髁突软骨细胞蛋白多糖4(PRG4)表达的影响。方法:酶消化法获取髁突软骨细胞,甲苯胺蓝染色鉴定。细胞上清液中加入10ng/ml的rhIL-1α,48h后加入10ng/ml的rhTGF-β1。不同时间点应用RT-PCR检测PRG4mRNA的表达情况,ELISA法检测PRG4蛋白的分泌变化。结果:加入rhIL-1α24、48、72h组的PRG4表达量与对照组均有统计学差异(P<0.05),且逐渐降低。48h组再加入rhTGF-β124h后PRG4表达量与对照组无统计学差异(P>0.05),而48h后与各组均有统计学差异(P<0.05),且最高。结论:rhTGF-β1可以上调髁突软骨细胞PRG4的表达,且可逆转IL-1α的下调作用。

哮喘儿童血清白细胞介素4、转化生长因子β_1及IgE水平的变化及临床意义

目的:探讨哮喘儿童血清白细胞介素4(IL4)、转化生长因子β1(TGFβ1)及IgE水平变化及临床意义。方法:对98例哮喘患儿应用双抗体夹心ELISA法,检测血清IL4、TGFβ1、IgE水平,其中发作期42例、缓解期56例;设正常对照52例。结果:在哮喘组,血清IL4、IgE水平明显高于对照组[(12.09±6.00)ng·L-1,(58.16±15.47)ng·L-1](P<0.05),TGFβ1水平显著低于对照组[(181.59±96.05)ng·L-1](P<0.05);在发作期血清IL4、IgE水平[(105.86±34.33)ng·L-1,(270.21±74.84)ng·L-1]均高于缓解期[(61.58±11.04)ng·L-1,(152.80±45.15)ng·L-1](P<0.05),在发作期血清TGFβ1水平[(41.97±12.77)ng·L-1]均低于缓解期[(63.40±23.40)ng·L-1](P<0.05)。IL4与IgE呈正相关(r=0.581,P<0.001),TGFβ1分别与IL4、IgE呈负相关(r1=-0.614,P<0.001;r2=-0.609,P<0.001)。结论:IL4可促进哮喘患儿IgE分泌,并抑制嗜酸性粒细胞产生TGFβ1,这一机理在哮喘发病中起重要作用。

曲安奈德对溃疡性直肠炎患者白细胞介素4和高迁移率族蛋白B1的影响观察

目的探讨曲安奈德对溃疡性直肠炎患者白细胞介素4和高迁移率族蛋白B1的影响。方法选择2011年6月～2012年10月四川省南充市中心医院治疗的40例溃疡性直肠炎患者，将其随机分为两组，观察组应用曲安奈德＋甲硝唑灌肠．对照组采用甲硝唑灌肠。观察两组治疗后7d的临床症状缓解情况，并对白细胞介素4和高迁移率族蛋白B1进行检测及对比。结果观察组临床症状缓解情况明显好于对照组，观察组治疗后7d的血清高迁移率族蛋白Bl水平[（2．17±0．19）μg／L]低于对照组[（3．36±0．38）μg/L]，自细胞介素4水平[（31．32±3．58）ng／L]高于对照组[（24．75±2．73）ng／L]，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论曲安奈德灌肠可缓解患者临床症状，其可能机制是降低高迁移率族蛋白B1的表达同时上调白细胞介素4的表达，从而起到抗炎性反应的作用。

白细胞介素1受体相关激酶4基因沉默抑制人成骨样细胞相关基因的表达

背景:造成假体周围骨溶解的完整分子机制目前尚未完全清楚。假体周围骨溶解、吸收是人工关节松动的典型病理生理过程。白细胞介素1通过MAPK信号通路影响骨吸收进程。目的:实验通过观察siRNA沉默白细胞介素1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor-associated kinase-4,IRAK-4)基因表达对人成骨样细胞株MG63的MAPK信号转导通路的影响,为防治人工关节置换后假体周围骨溶解提供实验基础。方法:以Lipofectamine 2000为载体将IRAK-4-siRNA转染入MG63细胞。实验分为3组,空白组不加入任何转染试剂;对照组以scrambled siRNA序列进行转染;沉默组以特异性IRAK-4-siRNA序列进行转染。Western blot检测靶细胞细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK基因的表达。结果与结论:与对照组相比,靶基因沉默组的IRAK-4 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。MG63细胞IRAK-4表达下调后,与空白组和对照组相比,c-Jun氨基末端激酶1/2P46、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2、磷酸化p38MAPK表达下调分别为62%,64%,68%(P<0.05)。结果证实,siRNA沉默IRAK-4基因抑制人成骨样细胞株MG63细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK基因的表达。

白细胞介素-1β、人附睾蛋白4及Sp1对上皮性卵巢癌的诊断及预后预测价值分析

目的探讨白细胞介素1β(IL-1β)、人附睾蛋白4(HE4)及转录因子Sp1对上皮性卵巢癌的诊断及预后评估价值。方法收集90例上皮性卵巢癌患者(恶性组)的卵巢癌组织标本、30例良性卵巢肿瘤患者(良性组)的良性卵巢肿瘤组织标本和30例良性妇科疾病患者(对照组)的正常卵巢组织标本。比较3组患者血清中的IL-1β、HE4水平和组织中Sp1的阳性表达情况。分析L-1β、HE4、Sp1对上皮性卵巢癌的诊断效能。采用多因素Logistic回归模型分析上皮性卵巢癌患者预后的影响因素。结果恶性组患者血清IL-1β、HE4水平及上皮性卵巢癌组织中Sp1的阳性表达率均高于良性组和对照组(P﹤0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,IL-1β、HE4及Sp1诊断上皮性卵巢癌的的曲线下面积(AUC)分别为0.872、0.918、0.817。截至随访结束,90例上皮性卵巢癌患者的4年生存率为33.33%(30/90)。多因素分析结果显示,肿瘤直径、临床分期、病理分化程度、淋巴结转移情况、IL-1β水平、HE4水平和Sp1阳性表达情况均是上皮性卵巢癌患者预后的影响因素(P﹤0.05)。结论上皮性卵巢癌患者血清中的IL-1β、HE4水平均较高,Sp1在上皮性卵巢癌组织中亦呈高表达,且与患者的预后密切相关,能够作为上皮性卵巢癌临床诊断和预后评估的重要辅助指标。

联合手术治疗变应性鼻炎的疗效及对IL-4、INF-γ和单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的观察联合手术和单纯下鼻甲部分切除术治疗变应性鼻炎的疗效及其对白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(INF-γ)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平的影响。方法将79例变应性鼻炎患者根据手术方式不同分为2组,观察组34例行联合切除术,对照组45例行下鼻甲部分切除术。3个月后观察2组疗效,治疗前后症状、体征评分和IL-4、INF-γ和MCP-1水平变化。结果观察组总有效率明显高于对照组(X2=4.401,P<0.05)。2组治疗前喷嚏、流涕、鼻塞、鼻痒评分及体征评分和血清IL-4、INF-γ和MCP-1水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05);治疗后2组喷嚏、流涕、鼻塞、鼻痒评分及体征评分和血清IL-4和MCP-1水平均较治疗前明显降低(P均<0.05),血清INF-γ水平较治疗前明显升高(P均<0.05),且观察组降低和升高水平较对照组更为明显(P均<0.05)。结论联合手术治疗变应性鼻炎疗效确切,其机制可能与恢复机体的细胞因子平衡有关。

IL4I1影响肝细胞癌发生发展的研究

目的:探讨肝细胞癌组织中白细胞介素4诱导蛋白1(IL4I1)的表达及其临床价值。方法:从TCGA公共数据库中下载肝细胞癌的相关样本资料,使用R软件和Perl软件进行数据分析整理,采用Wilcoxon秩和检验分析基因IL4I1在正常组织和肝细胞癌组织中的差异表达以及与临床病理特征的相关性,经单因素和多因素Cox回归分析肝癌患者预后的影响因素。以基因集富集分析(GSEA)方法分析基因IL4I1的调控网络,探究潜在机制。计数资料采用中位数(四分位数间距)表示。结果:基因IL4I1在肝细胞癌组织中的表达量显著高于正常组织﹝0.69(0.31,1.75)比0.22(0.15,0.51),P<0.05﹞。IL4I1表达量与肿瘤的组织学分级﹝G_(1)、G_(2)、G_(3)、G_(4)分别为0.31(0.19,0.76)、0.75(0.32,1.78)、0.93(0.42,2.14)、0.86(0.46,2.07),P<0.01﹞以及TNM分期中的T分期﹝T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4)分别为0.66(0.30,1.52)、0.92(0.36,2.79)、0.64(0.26,1.92)、1.57(0.84,2.91),P<0.05﹞呈正相关。GSEA提示,IL4I1参与了自然杀伤细胞介导的细胞毒性作用、细胞因子信号通路、抗原处理和提呈途径、T细胞受体信号通路、JAK-STAT信号通路和Notch信号通路。结论:IL4I1在肝细胞癌组织中呈高表达,与患者的不良预后密切相关,其可能通过JAK-STAT信号通路和Notch信号通路促进肝细胞癌的发生和发展。

毛柳苷在缺血性脑损伤中对白介素4诱导蛋白1表达和小胶质细胞激活及表型的影响

目的探讨毛柳苷在缺血性脑损伤后对白介素4诱导蛋白1(interleukin-4 induced protein 1,IL4I1)表达及小胶质细胞极化的影响。方法38只雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(4只)、毛柳苷组(17只)和生理盐水组(17只)。通过线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注模型(缺血60 min拔栓实现再灌注),再灌注10 min后,毛柳苷组与生理盐水组小鼠分别经尾静脉按照10 mg/kg剂量注射毛柳苷(1 mg/mL)与生理盐水,每天1次,持续28 d。ELISA法检测假手术组及模型组缺血再灌注后48 h、7 d、28 d血清中的IL4I1浓度。采用神经元特异核蛋白(neuronalnuclei,NeuN)抗体免疫荧光染色标记神经元,观察缺血再灌注后7 d脑梗死体积。采用CD16/32、CD206和离子化钙结合适配分子1(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1)免疫荧光染色观察缺血再灌注后7 d小胶质细胞极化状态及突起的长度、数量变化。通过细胞实验探究IL4I1与小胶质细胞不同表型之间的联系。培养小鼠BV2小胶质细胞,设置M0型细胞为空白对照组,使用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和INF-γ诱导BV2细胞极化为M1促炎型,使用IL-4和IL-13诱导BV2细胞极化为M2抗炎型细胞。BV2细胞诱导48 h后提取细胞蛋白,通过免疫印迹检测BV2细胞不同表型中IL4I1的表达情况。结果与假手术组相比,生理盐水组脑缺血再灌注后48 h血清中IL4I1浓度下降(P=0.0302);与生理盐水组相比,毛柳苷组脑缺血再灌注后7 d和28 d血清中IL4I1浓度增加(P=0.0229,P=0.0076)。毛柳苷组脑缺血再灌注后7 d脑梗死体积较生理盐水组降低(P=0.0389)。与生理盐水组相比,毛柳苷组脑缺血再灌注后7 d缺血区周围小胶质细胞突起长度、突起数量、突起的分叉点及终末端点数量均增加(P=0.0040,P<0.001,P<0.001,P<0.001),皮层与纹状体区域M1型小胶质细胞数量减少(P=0.0407,P=0.0032),皮层与纹状体区域M2型小胶质细胞数量增多(P=0.0206,P=0.0075)。体外细胞实验BV2小胶质细胞不同表型中,M1型与M2型较M0型IL4I1表达下降(P=0.0008,P=0.0155),与M2型相比,M1型IL4I1表达更低(P=0.0406)。结论毛柳苷可能通过增加脑缺血再灌注损伤后血清及缺血脑组织中IL4I1的表达,并使激活的小胶质细胞向M2抗炎表型转化,减少脑梗死体积,从而发挥神经保护作用。

三种不同方法体外诱导CD4^+T细胞向Th17细胞分化与增殖的效率

背景:研究认为Th17细胞参与了许多炎症性疾病的发生,但其体外诱导分化效率尚不明确。目的:比较采用3种不同方法在体外诱导CD4+T细胞向Th17细胞分化与增殖的效率。方法:分别采取以下3种方法体外诱导Th17细胞:①给予CD3及CD28抗体刺激,并在培养体系中加入白细胞介素6及转化生长因子β,培养3d。②在方法①的基础上加入白细胞介素1β及肿瘤坏死因子α,培养3d。③在方法②的基础上第3天洗去细胞因子,培养2d;再次给予CD3及CD28抗体刺激,并在培养体系中加入白细胞介素23,培养3d。结果与结论:3种方法培养后CD4+T细胞中Th17细胞的比例分别为(8.5±2.8)%,(26.9±4.3)%,(44.3±5.5)%,三组之间差异有显著性意义(P<0.01)。提示在培养体系中加入白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α及白细胞介素23,更有利于增加CD4+T细胞向Th17细胞分化的比例。

HIF-1α/BNIP3信号通路在IL-4减轻小鼠脑缺血再灌注损伤中的作用及其与自噬的关系

目的:探究低氧诱导因子-1α/Bcl-2/腺病毒E1B-19k Da相互作用蛋白3(HIF-1α/BNIP3)在IL-4减轻小鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)中的作用及其与自噬的关系。方法:将SPF级BALB/c小鼠采用随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注组(CIRI组)、IL-4组、HIF-1α抑制剂2ME2组(2ME2组)和IL-4+HIF-1α抑制剂2ME2组(IL-4+2ME2组)。采用线栓法构建CIRI组、IL-4组、2ME2组和IL-4+2ME2组大脑中动脉栓塞(MACO)模型,闭塞缺血60 min后再灌注24 h,假手术组除不阻断小鼠大脑中动脉外,其余操作同上。IL-4组、2ME2组、IL-4+2ME2组建模前30 min分别腹腔注射对应的IL-4C复合体溶液及尾静脉注射2ME2溶液。再灌注24 h后进行神经行为学评分,然后处死小鼠取脑组织。采用TTC染色检测脑梗死体积;干湿重法测定脑组织含水量;TUNEL染色检测细胞凋亡;透射电镜计数自噬小体;比色法测定SOD、MDA和ROS水平;Western blot检测HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ和Beclin-1表达。结果:与假手术组相比,CIRI组小鼠神经行为学评分、脑梗死体积、脑含水量、细胞凋亡率、自噬小体数量、MDA、ROS、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ和Beclin-1水平升高,SOD水平降低(P<0.05);与CIRI组相比,IL-4组神经行为学评分、脑梗死体积、脑含水量、细胞凋亡率、MDA、ROS水平降低,自噬小体数量、SOD、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ和Beclin-1水平升高(P<0.05);与IL-4组相比,2ME2组、IL-4+2ME2组神经行为学评分、脑梗死体积、脑含水量、细胞凋亡率、自噬小体数量、MDA、ROS、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ和Beclin-1水平降低,SOD水平升高(P<0.05)。结论:IL-4可通过激活HIF-1α/BNIP3信号通路,激活细胞自噬,减少细胞凋亡和氧化应激,从而减轻小鼠CIRI。

THP-1巨噬细胞热休克处理对单核细胞超化蛋白-1和白细胞介素表达的影响

目的:探讨热休克处理对THP-1巨噬细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-8(IL-8)的影响以及热休克蛋白70(HSP70)、TLR4/P38MAPK和TLR4/NF-κB在其中的作用。方法:实验前用佛波酯孵育THP-1细胞,使其诱导分化成巨噬细胞,换无血清培养基培养后加处理因素。实验分成A组:常温对照组;B组:热休克处理组。THP-1巨噬细胞在42℃水浴受热1h,37℃恢复6h;C组:热休克+抗TLR4抗体组,THP-1巨噬细胞加入anti-TLR42h后同B组;D组:热休克+P38MAPK抑制剂组,THP-1巨噬细胞加入P38MAPK特异性抑制剂SB20358030min后同B组;E组:热休克+NF-κB抑制剂组:THP-1巨噬细胞加入NF-κB特异性抑制剂PDTC30min后同B组;F组:热休克+抗HSP702h抗体组,THP-1巨噬细胞加入anti-HSP702h后同B组。用RT-PCR或westernblot或ELISA检测各组细胞HSP70、TLR4、MCP-1、IL-8mRNA或蛋白的表达。结果:热休克处理上调THP-1巨噬细胞HSP70、TLR4、MCP-1和IL-8的表达。SB203580、anti-TLR4可完全抑制热休克诱导的MCP-1和IL-8表达上调,而PDTC、anti-HSP70对上述效应起部分抑制作用。结论:THP-1细胞经热休克处理后通过HSP70、TLR4/P38MAPK、TLR4/NF-κB途径上调MCP-1和IL-8的表达。

特应性皮炎患者血清ApoA1、ApoB、ApoE、IL⁃4、IL⁃10、Linc00324水平及临床意义

目的探讨特应性皮炎患者血清载脂蛋白(Apo)A1、ApoB、ApoE、白细胞介素(IL)⁃4、IL⁃10、长链非编码RNA00324(Linc00324)的表达水平及其临床意义。方法选取2018年8月至2021年1月鹿邑真源医院收治的180例特应性皮炎患者(设为特应性皮炎组),以及同期于鹿邑真源医院接受健康体检的100名健康体检者(设为对照组)作为研究对象,对比两组研究对象血清ApoA1、ApoB、ApoE、IL⁃4、IL⁃10及Linc00324水平,分析血清ApoA1、ApoB、IL⁃4、IL⁃10、Linc00324水平与特应性皮炎的相关性以及ApoA1、ApoB水平与IL⁃4、IL⁃10、Linc00324水平的相关性。结果特应性皮炎组患者血清ApoA1、IL⁃4、IL⁃10、Linc00324水平均明显高于对照组(t=2.574、15.077、18.257、89.225,P=0.011、P<0.001、P<0.001、P<0.001),ApoB水平明显低于对照组(t=9.013,P<0.001),ApoE水平与对照组无明显差异(t=0.079,P=0.937)。Spearman相关系数分析结果显示,血清ApoA1、IL⁃4、IL⁃10、Linc00324水平与特应性皮炎呈显著正相关性(r=0.417、0.359、0.403、0.552,P均<0.001),ApoB水平与特应性皮炎呈显著负相关性(r=-0.362,P<0.001)。Pearson相关系数分析结果显示,血清ApoA1水平与IL⁃4、IL⁃10、Linc00324水平呈显著正相关性(r=0.511、0.523、0.623,P均<0.001),ApoB水平与IL⁃4、IL⁃10、Linc00324水平呈显著负相关性(r=-0.535、-0.412、-0.549,P均<0.001)。结论血清ApoA1、ApoB、IL⁃4、IL⁃10、Linc00324水平均与特应性皮炎的发生发展密切相关,可作为特应性皮炎早期诊断与病情评估的生物学指标以及病情防控靶点。

血清HMGB1、IL-4、IL-6、IFN-γ对难治性肺炎支原体肺炎患儿发生肺外并发症的预测价值

近年来,肺炎支原体(MP)的感染逐年上升,儿童机体免疫力较低,极易引发肺炎支原体肺炎(MPP),多数患儿经治疗后有效缓解病情,部分患儿可进展为难治性肺炎支原体肺炎(RMPP),治疗难度大,病情迁延不愈,多伴有各类肺外并发症,严重影响临床疗效及预后[1]。因此,肺外并发症的早期诊断、治疗对改善RMPP患儿预后极为重要。炎性反应在RMPP及肺外并发症的发生、发展中具有重要作用[2]。

柴桂沙麦汤对体虚外感肺系疾病模型小鼠免疫功能、IL-4及HMGB1的影响

目的:研究柴桂沙麦汤对体虚外感肺系疾病小鼠肺系数,外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、白细胞介素-4(IL-4)及肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响。方法:60只小鼠随机分为空白组、模型组及柴桂沙麦汤高、中、低剂量组,每组12只。空白组给予常规饮食饲养,室温18~22℃,相对湿度50%~60%;其余各组小鼠饲养于室温6~8℃、相对湿度20%~30%环境中,8%低蛋白饮食,每日2次冰水灌胃,每次0.2 mL,每隔两日禁食1次,每次1 d,同时每日予常温水力竭游泳实验建立体虚外感肺系疾病模型。造模时间持续4周。造模结束后,分别对各组小鼠进行灌胃给药,柴桂沙麦汤高、中、低剂量组分别予柴桂沙麦汤10.8 g/kg、5.4 g/kg、2.7 g/kg,模型组及空白组予生理盐水0.1 mL/10 g,每日1次,连续30 d。观察小鼠一般症状表现,计算小鼠肺系数,流式细胞仪检测小鼠外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)细胞比例并计算CD4^(+)/CD8^(+),酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血IL-4表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测肺组织HMGB1表达。结果:与空白组相比,模型组小鼠呼吸急促、明显消瘦、饮食减少、反应及行动迟缓、恶寒怕冷、拱背蜷缩、扎堆、皮毛失去光泽等,体虚及外感肺系疾病症状严重;肺系数升高(P<0.01),外周血CD3^(+)、CD8^(+)升高(P<0.05),CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)下降(P<0.05);IL-4表达升高(P<0.01);HMGB1蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组相比,柴桂沙麦汤高、中、低剂量组小鼠呼吸转平稳,体质量及饮食增加,反应、行动自如,恶寒怕冷、拱背蜷缩、扎堆情况好转,皮毛相对光泽,体虚及外感肺系疾病症状减轻,肺系数降低(P<0.05,P<0.01),外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均升高(P<0.05),高、中剂量组CD8^(+)下降(P<0.05);IL-4表达均降低(P<0.01);HMGB1蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论:柴桂沙麦汤可提高体虚外感肺系疾病小鼠外周血CD3^(+)、CD4^(+)细胞比例,降低CD8^(+)细胞比例,稳定CD4^(+)/CD8^(+),下调IL-4与HMGB1的表达,进而减少炎症因子释放,减轻机体炎症反应,降低肺系数,提高机体免疫功能,发挥扶正祛邪的功效。