牙髓炎症中白细胞介素-17调节单核细胞功能和分化的研究

目的 探讨牙髓炎症中白细胞介素(IL)-17募集单核细胞并调节其分化的作用。方法 肿瘤坏死因子(TNF-α)刺激牙髓细胞,模拟炎症状态,实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)、酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-17的表达;IL-17重组蛋白刺激牙髓细胞,收集培养基上清,通过Transwell小室实验检测IL-17或受IL-17刺激的牙髓细胞培养基上清对单核细胞的趋化作用;采用结晶紫染色和吞噬实验分别检测IL-17或受IL-17刺激的牙髓细胞培养基上清对单核细胞贴壁和吞噬的影响;IL-17刺激人单核细胞系(THP-1)细胞,RT-qPCR和ELISA分别检测TNF-α、IL-1β的表达,流式细胞检测THP-1细胞表面标志物分子簇80(CD80)的表达变化。结果 牙髓炎症中IL-17表达上调,IL-17使单核细胞贴壁增多,吞噬功能增强,TNF-α、IL-1β及CD80表达上调。结论 IL-17在牙髓炎症中高表达,其本身对单核细胞有趋化作用,并可通过刺激牙髓细胞产生趋化因子2(CCL2)放大趋化作用;IL-17可以调控单核细胞向巨噬细胞分化。

转化生长因子β_1、白细胞介素2、7与卵巢上皮性癌患者腹腔局部免疫功能的关系

目的:探讨转化生长因子β1(TGFβ1)和白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-7(IL-7)与卵巢上皮性癌腹腔局部免疫功能的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法,测定49例卵巢上皮性癌,18例卵巢良性上皮性肿瘤患者血清、腹腔液中TGFβ1和IL-2、IL-7水平,比较两组之间各细胞因子水平的差异性及其相互关系。结果:卵巢上皮性癌患者血清中TGFβ1、IL-2水平与良性对照组差异无显著性(P>0.05),IL-7水平则高于对照组(P<0.05);腹腔液中TGFβ1水平明显高于对照组(P<0.01),IL-2水平明显低于对照组(P<0.05),IL-7水平则与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。Ⅲ期患者腹腔液中TGFβ1水平明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.01)。卵巢上皮性癌患者血清与腹腔液中TGFβ1、IL-2相关性不显著,而IL-7水平存在正相关;卵巢上皮性癌患者血清中TGFβ1;、IL-2和IL-7水平两两之间均无明显相关性;但腹腔液中TGFβ1与IL-2、IL-7水平均存在显著的负相关,IL-2与IL-7水平则无明显相关性。结论:卵巢癌存在腹腔局部免疫缺陷,腹腔液中TGFβ1、IL-2和IL-7参与这一过程,且3者之间可能存在一定的关系。

白细胞介素12的生物学功能与药理学作用

白细胞介素12(IL-12)是由巨噬细胞等抗原提呈细胞产生的细胞因子。IL-12对T细胞、自然杀伤细胞具有免疫调节作用,促进Th1介导的细胞免疫反应。研究证实,IL-12对小鼠的肿瘤和各种感染性疾病等有治疗作用。国内外学者采用不同的治疗途径及不同的联合方案进行了大量的尝试。本文对目前IL-12的生物学功能及药理学作用作一综述。

白细胞介素-2放射免疫测定的临床意义

白细胞介素(Interleukin, IL)是一组参与淋巴细胞分化诱导和免疫调节作用的白细胞生长因子或淋巴因子。自1979年第二届国际淋巴因子专题会议把这类生长因子命名为白细胞介素以来,该领域的研究十分活跃,先后发现了15种白细胞介素(IL-1～15),其特性与功能已被遂渐阐明。其中白细胞介素-2(IL-2)是调节免疫功能最主要的淋巴因子之—;它是由T细胞产生,由133个氨基酸组成的糖蛋白,分子量约15000。在基础研究与临床上测定白细胞介素-2的含量是研究其体内代谢动力学及诊断与人免疫系统相关疾病的重要辅助指标。通过测定人外周血、尿液或人激活淋巴细胞悬浮培养液中的白细胞介素-2水平,可以作为对艾滋病、肿瘤,心血管病、何金氏病、肝炎、肝硬化、红斑狼疮、麻风病等疾病诊断、预后及观察疗效的有效方法,同时也可用于器官移植后有无排异反应的早期诊断。白细胞介素-2水平的测定有生物法、放射免疫法(RIA)、酶联免疫吸附法(ELISA)等。

卵巢上皮性癌患者白细胞介素-7测定的临床意义

目的 探讨卵巢上皮性癌患者血清和腹腔液白细胞介素 - 7(interleukin- 7,IL- 7)测定的意义。方法 EL ISA检测 32例卵巢上皮性癌患者外周血、腹腔液及 3例原代培养细胞上清液 IL- 7水平 ,并将 16例健康妇女血清和 16例良性卵巢上皮性肿瘤患者血清、腹腔液作为对照组。结果 原代培养卵巢癌细胞上清液不能测得 IL- 7;卵巢癌患者血清 IL- 7水平显著高于健康妇女及良性对照组 (P<0 .0 5 ) ,卵巢癌患者腹腔液 IL- 7水平与良性对照组相比差异无显著性 (P>0 .0 5 )。卵巢癌和良性对照组的血清和腹腔液 IL- 7水平之间均存在正相关 (P<0 .0 5 ) ;卵巢癌患者血清和腹腔液 IL- 7水平与相应 CA1 2 5值相关性不显著 (P>0 .0 5 )。结论 卵巢癌细胞不分泌 IL- 7,但可刺激宿主免疫细胞分泌 IL- 7;腹腔 IL- 7无显著升高可能与卵巢癌腹腔局部免疫抑制有关。

松果体摘除及褪黑素对大鼠胸腺上皮细胞白细胞介素-7表达的影响

目的探讨松果体摘除及褪黑素对大鼠胸腺上皮细胞白细胞介素7(IL-7)表达的影响及其意义。方法1.培养大鼠胸腺上皮细胞,应用广谱角蛋白抗体进行免疫细胞化学显色鉴定;MTT法观察褪黑素(1×10-3～10-9mol/L)干预对细胞生长的影响;细胞分空白对照组、褪黑素10-8mol/L处理组和褪黑素10-6mol/L处理组,RT-PCR法观察细胞IL-7mRNA的表达;2.选用清洁级雄性SD大鼠110只,分为正常对照组、假手术对照组、松果体摘除组、松果体摘除+褪黑素7.5mg/(kg.d)腹腔注射组和松果体摘除+褪黑素15mg/(kg.d)腹腔注射组。术后4周和8周取材,运用免疫组织化学和RT-PCR方法观察胸腺上皮细胞IL-7表达的变化。结果褪黑素干预对大鼠胸腺上皮细胞的生长无显著影响,但能使IL-7mRNA的表达水平呈剂量依赖性升高;松果体摘除对大鼠胸腺上皮细胞表达IL-7无显著影响,补充褪黑素15mg/(kg.d)4周后IL-7表达显著增高,8周后均下降至正常水平。结论松果体及褪黑素可能通过影响大鼠胸腺上皮细胞IL-7的表达,从而调节胸腺细胞的分化发育。

小鼠白细胞介素18基因克隆、测序及重组质粒pIRES-IL18-B7.1的构建

目的 :克隆小鼠白细胞介素 1 8( m IL- 1 8)编码区的 c DNA序列并构建其表达载体。方法 :利用逆转录多聚酶链反应 ( RT- PCR)法 ,以小鼠脾细胞 m RNA为模板 ,扩增获得全长 m IL-1 8,与 p MD1 8T连接作全自动测序 ,并利用基因重组技术构建包含 m IL- 1 8和 B7.1的双基因表达质粒 p IRES- IL1 8- B7.1。结果 :经测序证实获得的 m IL- 1 8序列与文献报道完全一致 ,并成功构建了表达质粒。结论 :成功克隆了 m IL- 1 8的 c DNA,并构建了双基因表达载体 p IRES- IL1 8- B7.

Dectin-1受体、白细胞介素-17及白细胞介素-12在小鼠巨噬细胞活化后真菌性角膜炎中的表达

目的检测小鼠活化巨噬细胞真菌性角膜炎中的人树突状细胞源性C型凝集素样受体-1(Dectin-1)受体、白细胞介素-17(IL-17)及白细胞介素-12(IL-12)的表达水平。方法分别向小鼠角膜创口内注入乳胶微粒液或PBS液构成实验组与对照组。于感染后第1,3,5,7,9d,裂隙灯显微镜下观测各组小鼠真菌性角膜炎特点,H-E染色观测其病理特征;通过Realtime-PCR检测小鼠角膜中Dectin-1受体、IL-17及IL-12基因mRNA的表达。结果 (1)实验组角膜浸润混浊,于第7天多发穿孔,未发现新生血管;对照组角膜混浊,于第5天广泛分布新生血管,未发现穿孔。(2)实验组角膜大量炎症细胞汇集,第5天基质细胞排列紊乱,破坏严重。(3)Realtime-PCR结果表明感染后第3,5,7,9d,实验组Dectin-1受体、IL-17、IL-12基因mRNA的表达量显著高于对照组(P<0.05)。结论 Dectin-1受体、Th1及Th17细胞免疫可能在角膜抵御真菌感染的机制中发挥重要作用。

人白细胞介素7重组蛋白原核表达载体在大肠杆菌中的表达和鉴定

目的:构建重组人白细胞介素7(rhIL-7)的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并鉴定。方法:以RT-PCR方法扩增编码IL-7的cDNA片段,插入至pET-3d载体中,构建rhIL-7的原核表达载体,阳性克隆经测序鉴定,转化至大肠杆菌BL21(DE3),优化rhIL-7表达条件,利用免疫印迹鉴定重组蛋白。结果:重组载体经DNA测序显示包含正确的rhIL-7编码序列,重组载体转入大肠杆菌后,经IPTG诱导后外源蛋白表达,相对分子质量为17 400,与IL-7理论分子质量一致;免疫印迹显示,外源蛋白可以被人IL-7特异性抗体识别,表明在原核表达的外源蛋白是rhIL-7。rhIL-7主要表达于包涵体中,包涵体表达优化条件为:温度为37℃、IPTG浓度为0.4 mmol/L、诱导时间为4h。结论:成功的构建了rhIL-7的原核表达载体。

白细胞介素分子生物学研究进展

白细胞介素(Interleukin,IL)是介导细胞间相互作用的一组免疫细胞因子,在免疫系统中起重要的调控怍用。近年来,随着分子生物学研究的飞速进展,对IL的研究已从蛋白质水平进入到基因水平,特别是分子克隆和基因工程技术的应用,使人们对IL的功能与结构的认识有了新的飞跃,为大批量生产和应用IL基因工程产品提供了基础。本文结合本室有关工作,重点介绍这一领域研究工作的新进展。

肾虚及正常大鼠的正畸致牙根吸收易感性比较及组织内白细胞介素17的表达差异

背景:正畸致牙根外吸收的发生机制目前尚不明确,且它有较大的个体差异。肾虚体质已被证明与多种细胞因子介导的骨性疾病有直接联系,白细胞介素17为目前研究出的参与牙根外吸收的重要细胞因子之一。明确肾虚体质是否与牙根吸收相关及白细胞介素17是否参与其中,有助于正畸致牙根吸收的病因学研究。目的:探讨正畸移动大鼠牙过程中肾虚体质及白细胞介素17与牙根吸收的关系。方法:选择36只Wistar大鼠,随机分为2组,每组18只。肾虚组应用大鼠药物诱导法建立肾虚模型,对照组给予生理盐水。肾虚模型建立后,所有大鼠右侧上颌建立正畸加力模型,左侧上颌不加力。正畸加力3,7,14 d时全麻下分批处死大鼠,苏木精-伊红染色、免疫组化检测观察第一磨牙近中根压力侧组织形态及白细胞介素17的表达变化。结果与结论:1组织学结果:肾虚加力组牙根压力侧吸收,牙釉质表面不同程度的破骨细胞吸收陷窝,吸收程度随加力时间延长而加重;对照加力组牙槽骨吸收、牙周膜增宽;肾虚不加力组及对照不加力组未见牙槽骨及牙根吸收;2免疫组化结果:白细胞介素17在肾虚组加力组牙根压力侧表达高于对照加力组,在肾虚不加力组的表达高于对照不加力组;3结果表明,肾虚体质下进行正畸治疗易发生牙根吸收,且肾虚体质较正常体质更易产生白细胞介素17,其造成牙根吸收的机制可能与白细胞介素17相关。

人白细胞介素—7基因克隆及表达

在人骨髓基质原代培养细胞ｍＲＮＡ中，利用ＲＴ－ＰＣＲ和克隆技术，获得了白细胞介素－７基因的编码区片段，经测序证实此克隆片段包含了完整的ＩＬ－７编码区基因共５３８个碱基。使原核表达技术，已使该基因在大肠肝菌中得到了初步表达。

白细胞介素7与15在抗结核感染中的作用及应用

白细胞介素（IL）-7与IL-15作为IL-2家族细胞因子，近年来由于其调控T细胞分化与增殖及其在免疫记忆形成与维持过程中的重要作用而备受关注。IL7和IL-15均具有与IL-2相似的异三聚体结构，共同参与两面神激酶（Januskinase，JAK；是一类非跨膜型的酪氨酸激酶）／信号转导子和转录激活子（signal transducer and activator of transcription，STAT）信号通路，并参与调节辅助性T淋巴细胞（Th）1／Th2型细胞因子的平衡。相对于IL-2，IL-7和IL-15在维持机体T淋巴细胞抗结核感染中可持续发挥作用，且在结核病发生发展过程中的动态变化使其有望实现对结核病的鉴别诊断。此外，IL-7和IL-15能提高机体二次免疫应答的水平，因而在结核病预防或治疗性疫苗研究方面发挥的作用亦值得期待。

白细胞介素6与肿瘤免疫

由多种不同细胞产生的白细胞介素6(IL-6),在机体免疫应答调节网络中发挥广泛的生物学效应,其中抗肿瘤活性则是近几年研究并证实的IL-6又一重要功能。IL-6可通过多种途径直接或间接地产生抑瘤或杀瘤活性,是继IL-2、IFN、TNF 等抗癌细胞因子之后发现的又一重要生物反应调节剂。

白细胞介素-17介导牙髓基质金属蛋白酶表达和调节牙髓炎症的机制初探

目的:探究白细胞介素(IL)-17在牙髓炎症过程中时空表达,研究IL-17对牙髓炎可能的调节机制。方法:构建大鼠牙髓炎模型,苏木精-伊红(HE)染色观察牙髓组织结构形态,免疫组织化学染色检测牙髓中IL-17表达;培养人牙髓细胞,肿瘤细胞坏死因子(TNF)-α刺激模拟炎症状态,RT-qPCR检测IL-17基因表达,ELISA检测IL-17的蛋白表达;IL-17重组蛋白刺激牙髓细胞,RT-qPCR检测MMP-1、MMP-2、MMP-3和MMP-13的表达,胶原酶谱和明胶酶谱检测MMP-1和MMP-2酶活性;Western blot检测信号通路表达。结果:IL-17在牙髓炎症过程中持续高表达,体外TNF-α刺激可升高牙髓细胞IL-17的表达。IL-17刺激牙髓细胞,上调MMP-1和MMP-2的酶活性,并激活丝裂原蛋白激酶(MAPK)信号通路。结论:IL-17在炎症牙髓表达上调,并可通过升高MMP-1和MMP-2的表达,激活MAPK信号通路发挥促炎作用。

白细胞介素12与免疫

白细胞介素１２与免疫刘楠，章金钢（长春解放军农牧大学军事兽医研究所病毒室１３００１２）１概述白细胞介素（ＩＬ）是指在白细胞间发挥作用的淋巴因子。自１９７２年Ｇｅｒｙ等发现当时称为淋巴细胞激活因子的ＩＬ－１以来，这一领域一直是人们研究的热门课题之一。目...

白细胞介素-7调控T细胞表面TIM-3的表达在冠状动脉粥样硬化性心脏病中的作用

目的观察T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域的分子-3(TIM-3)和白细胞介素(IL)-7在冠心病患者中的表达变化,以及IL-7对T细胞表面TIM-3的调控作用,为阐明炎症应答在冠心病发病中的机制提供实验依据。方法 82例冠心病患者[包括:稳定性心绞痛(SA)22例、不稳定性心绞痛(UA)39例、急性心肌梗死(AMI)21例]和20例健康志愿者入组本研究。利用流式细胞术检测T细胞表面TIM-3的水平,利用酶联免疫吸附试验检测血清IL-7的水平。应用重组人IL-7刺激外周血单个核细胞后观察T细胞表面TIM-3的变化,并应用Western blot法检测IL-7信号通路中STAT-5磷酸化和SOCS3的水平。结果 T细胞表面TIM-3表达的平均荧光强度(mean fluoresent intensity,MFI)在SA(118.7±16.50)、UA(246.8±70.62)和AMI(332.7±55.92)中均较健康志愿者(40.60±9.76)显著升高(P<0.001)。CD4^+T细胞表面TIM-3的比例在SA(1.32%±0.51%)、UA(2.35%±1.66%)和AMI(5.72%±1.79%)中均较健康志愿者(0.76%±0.24%)显著升高(P<0.05),CD8^+T细胞表面TIM-3的比例在SA(0.98%±0.35%)中与健康志愿者(0.77%±0.26%)无明显变化,而在UA(1.23%±0.39%)和AMI(1.64%±0.55%)中显著升高(P<0.05)。血清IL-7的水平在SA(47.11 pg/ml±33.90 pg/ml)和UA(43.76 pg/ml±25.20 pg/ml)中与健康志愿者(35.17 pg/ml±13.30 pg/ml)未见明显升高,而在AMI(66.64 pg/ml±26.38 pg/ml)中显著升高(P=0.004 5)。重组人IL-7刺激可显著提升AMI患者CD4+和CD8^+T细胞表面TIM-3的表达,而仅升高健康志愿者CD8^+T细胞TIM-3的表达。同时,IL-7刺激可促进外周血单个核细胞中STAT-5的磷酸化和SOCS3的表达。结论 IL-7可升高TIM-3的表达,在冠心病中可能发挥抑制炎症应答的作用,预防疾病的进展恶化。

白细胞介素－2在狂犬病免疫保护及细胞免疫检测上的作用

狂犬病疫苗免疫人外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）分泌白细胞介素－２（ＩＬ－２）。ＩＬ－２具有增强狂犬病疫苗保护力的佐剂效能，在疫苗免疫后对机体免疫系统发挥调节作用。ＩＬ－２在狂犬病免疫保护和免疫检定上的作用尤为重要。在接种疫苗后，狂犬病免疫对象的ＰＢＬ，在体外受特异性抗原刺激产生的ＩＬ－２水平，是检定狂犬病疫苗免疫原性与保护效力及评价机体免疫状况──细胞介导免疫（ＣＭＩ）水平的简易科学新指标。ＩＬ－２诱生水平测定，可能替代经典ＮＩＨ小鼠攻毒试验，而与病毒中和抗体（ＶＮＡｂ）水平测定和糖蛋白含量分析，一并用于评价狂犬病疫苗保护力。