白细胞介素7剪接变异体蛋白的表达、复性和纯化

目的表达、复性和纯化重组人白细胞介素7剪接变异体蛋白(interleukin-7 splice variants,IL-7splice variants),为下一步功能研究奠定基础。方法在IL-7剪接变异体(IL-7δ4/5以及IL-7δ3/4)cDNA克隆的基础上进行亚克隆,插入细菌表达载体pET-21b中,构建相应的原核表达载体,阳性克隆测序,证实其构建成功,转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,对各蛋白表达条件进行优化、复性及纯化,利用Western blot鉴定重组蛋白。结果各表达蛋白与预期相对分子质量(10.3 ku、9.3 ku)相符,纯化后蛋白纯度高达95%以上,并经免疫印迹鉴定证实表达的蛋白为IL-7δ4/5和IL-7δ3/4。结论成功获得高纯度的IL-7剪接变异体复性蛋白。

白细胞介素7剪接变异体的克隆和序列分析

目的:克隆白细胞介素-7(IL-7)剪接变异体,筛选出在IL-7开放阅读框内剪接变异体,为其生物活性的研究打基础。方法:运用自行设计的IL-7引物,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,分离正常培养的肝癌细胞株HepG2、结肠癌细胞株HT29IL-7mRNA,再对电泳所获条带进行克隆、测序和分析。结果:肝癌细胞株HepG2、结肠癌细胞株HT29都能检测到IL-7mRNA,而且从培养癌细胞株分离出多条新带,经亚克隆及测序,证实这些条带是来源人IL-7基因、但缺乏不同外显子的IL-7剪接变异体cDNA;通过和IL-7cDNA比对分析,发现其中5个剪接变异体在IL-7开放阅读框内。结论:IL-7剪接变异体广泛存在于各种肿瘤细胞中。对其进一步的研究,将为癌症病人的免疫调节紊乱和临床免疫治疗提供新的研究方向。

白细胞介素-7选择性剪接变异体的研究

目的 寻找人肿瘤细胞选择性的白细胞介素 7(Interleukin 7,IL 7)剪接变异体。方法 运用自行设计的IL 7引物 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,分离正常肝组织、原发肝癌组织、正常胃组织和胃癌组织IL 7mRNA ,再对电泳所获条带进行克隆、测序。结果 正常肝组织、原发肝癌组织、正常胃组织和胃癌组织都能检测到IL 7mRNA ,而且从肝癌组织、胃癌组织中各分离出一条新带 ,经亚克隆及测序 ,证实这两条带分别是人IL 7基因cDNA第 4外显子 (肝癌组织 )和第 5外显子 (胃癌组织 )缺乏所致。结论 肝癌组织和胃癌组织存在不同选择性IL 7剪接变异体。这些变异体的发现 ,为肿瘤病人的免疫调节紊乱以及肿瘤病人的临床免疫治疗提供了新的研究方向。

人肝肿瘤细胞选择性白细胞介素-7剪接变异体cDNA的克隆和序列测定

目的 :寻找人肝肿瘤细胞选择性的白细胞介素 - 7(IL - 7)剪接变异体。方法 :运用自行设计的IL -7引物 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)技术 ,分离正常肝组织、原发肝癌组织、培养肝癌细胞株IL - 7mRNA ,再对电泳所获条带进行克隆、测序。结果 :正常肝组织、原发肝癌组织、培养肝癌细胞株 (BEL - 74 0 2和SMMC - 772 1)都能检测到IL - 7mRNA ,而且从肝癌组织、培养肝癌细胞株分离出 1条新带 ,经亚克隆及测序 ,证实该条带系人IL -7基因cDNA第 4外显子缺乏所致。结论 :肝癌组织及培养的肝癌细胞株存在选择性IL - 7剪接变异体。该变异体的发现 。

白细胞介素7(IL-7)选择性剪接变异体的筛选和序列测定

目的:寻找人肿瘤细胞选择性的白细胞介素7(Interleuk in-7)剪接变异体。方法:运用自行设计的IL-7引物,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,分离正常肝组织、原发肝癌组织、正常胃组织和胃癌组织IL-7 mRNA,再对电泳所获条带进行克隆、测序。结果:正常肝组织、原发肝癌组织、正常胃组织和胃癌组织都能检测到IL-7 mRNA,而且从肝癌组织、胃癌组织中各分离出一条新带,经亚克隆及测序,证实这两条带分别是人IL-7基因cDNA第四外显子(肝癌组织)和第五外显子(胃癌组织)缺乏所致。结论:肝癌组织和胃癌组织存在不同选择性IL-7剪接变异体。这些变异体的发现,为肿瘤病人的免疫调节紊乱以及肿瘤病人的临床免疫治疗提供了新的研究方向。

人白细胞介素4剪接变异体的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的:获取一株重组人白细胞介素4选择性剪接变异体(IL-482)蛋白的高效表达菌株,为研究变态反应性疾病的发病机制以及阻滞IL-4的生物学效应奠定基础。方法:分离人外周血琳巴细胞,提取mRNA,RT- PCR获得人IL-482基因后,克隆入大肠杆菌表达载体,构建高效表达人IL-482的重组菌株。结果:成功构建了人IL-482的高效表达菌株(TNFHis-hIL-482),序列测定与文献报道一致。SDS-PAGE分析显示此菌株所表达的目的蛋白产物的相对分子质量为3．4×104,与预期结果相符。光密度扫描重组hIL-482蛋白质占细菌总蛋白的30％。结论:在大肠杆菌中成功地表达了hIL-482基因。

雄激素受体剪接变异体7检测方法的研究进展

去势抵抗型前列腺癌(CRPC)治疗方法包括:以紫杉烷为基础的化疗、新型内分泌治疗、免疫疗法和镭233。目前尚无能预测CRPC患者治疗疗效并指导用药的临床生物标志物,大量研究显示雄激素受体剪接变异体(AR-V7)与阿比特龙、恩杂鲁胺耐药相关,而与紫杉烷类药物的耐药不相关,有望成为预测临床疗效、指导用药选择的一种临床实用的肿瘤标志物。然而,AR-V7的检测方法成为其应用于临床的挑战之一。本文就现有的AR-V7检测方法做一综述,并对AR-V7临床应用进行展望,以期推进AR-V7从实验室走向临床。

Eur Urol:雄激素受体剪接变异体7预测激素敏感型前列腺癌患者雄激素剥夺疗法的短期应答

雄激素剥夺疗法(androgen deprivation therapy,ADT)是初发转移性前列腺癌(prostate cancer,PCa)的基石性治疗,但绝大多数患者在接受治疗1~2年内仍不可避免地会出现疾病反弹,进展成难治的去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC),成为患者死亡的主要原因。雄激素受体剪接变异体7(androgen-receptor splice variant 7,AR-V7)是雄激素受体的一种异常剪接体,可表达一种C-端连接区域缺失、N-端区域仍保留转录活性的一种特殊蛋白,其异常表达可能是导致PCa发生去势抵抗的原因之一。

转移性去势抵抗性前列腺癌临床治疗标志物——雄激素受体剪接变异体7

随着越来越多的转移性前列腺癌患者对去势治疗抵抗,进入去势抵抗性前列腺癌(CRPC)阶段,治疗方案的合理选择及对治疗效果的预测变得越来越重要。大量研究发现雄激素受体变异体7(ARV7)参与CRPC发生与进展的过程。研究发现ARV7在CRPC中表达水平明显高于激素敏感性前列腺癌,在对阿比特龙、恩扎鲁胺治疗抵抗以及紫杉烷类药物化疗逃逸的机制中发挥了重要作用。此外,部分临床研究发现,ARV7的水平可提示不同治疗方案的预后:循环肿瘤细胞(CTC)ARV7阴性预示新型内分泌治疗与紫杉烷类化疗效果有效,而CTC ARV7阳性则预示新型内分泌治疗效果不佳。这些发现预示ARV7可成为临床医生对于CRPC治疗方案的选择以及判断预后等方面的生物标志物。

雄激素受体剪接变异体7在去势抵抗性前列腺癌中的作用及其临床意义

去势抵抗性前列腺癌(CRPC)是经过初次持续内分泌治疗后仍然进展的前列腺癌。CRPC的发生和发展机制极其复杂,目前尚未完全研究清楚,但雄激素受体(AR)信号的持续激活仍是重要因素。雄激素受体剪接变异体7(AR-V7)是AR重要的变异体之一,其与CRPC发生、发展存在密切联系,在促进AR的再活化、肿瘤的生长转移以及耐药性的产生中起着重要作用,与内分泌治疗的敏感性和总体存活率降低相关,是一种潜在评价指标,深入研究AR-V7与CRPC的关系,不仅可以指导现阶段CRPC的用药,还可以为CRPC的治疗提供新的途径和方向。

缺第4外显子的IL-7剪接变异体的表达、纯化与活性研究

目的构建、表达和纯化缺乏第4外显子的IL-7剪接变异体IL-7δ4(interleukin-7 splice variant lacking exon4,IL-7δ4),并对其生物活性进行初步研究。方法将TA克隆成功的IL-7δ4基因克隆至p ET-21b载体中,构建p ET-21b-IL-7δ4的原核表达载体,阳性克隆经测序正确后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,进行IL-7δ4重组蛋白的表达、复性、纯化、Western blot法鉴定,分析其对外周血单核细胞凋亡蛋白BCL-2表达及凋亡的影响。结果成功构建重组原核表达质粒p ET-21b-IL-7δ4,表达蛋白的相对分子质量为12 400,与预期大小一致;复性效率较高(约65%),纯化后获得的蛋白纯度大于95%,Western blot证实其为rh IL-7δ4;与对照组比较,rh IL-7δ4能明显诱导外周血单核细胞凋亡蛋白BCL-2的表达,并抑制其凋亡(P<0.01)。结论成功表达高纯度且具有生物活性的rh IL-7δ4复性蛋白,它能明显上调外周血单核细胞凋亡蛋白BCL-2的表达,起抑制PBMCs凋亡作用。

前列腺癌组织中雄激素受体剪接变异体7的表达及临床意义

目的探讨雄激素受体剪接变异体7(AR-V7)在前列腺癌组织中的表达及临床意义。方法收集2017年3月至2019年3月大连医科大学附属大连市中心医院泌尿外科48例患者的组织标本。其中良性前列腺增生18例(良性增生组)、局限性前列腺癌18例(局限癌组)、前列腺癌骨转移12例(骨转移癌组)。免疫组化染色检测各组AR-V7阳性表达;qRT-PCR检测各组AR-V7 mRNA的表达。结果免疫组化结果显示3组比较AR-V7阳性表达存在统计学差异(P<0.05)。qRT-PCR检测结果显示,与良性增生组比较,局限癌组AR-V7 mRNA表达增高(P<0.05);与良性增生组和局限癌组比较,骨转移癌组AR-V7 mRNA表达增高(P<0.05)。结论前列腺癌组织中AR-V7表达增高,且与前列腺癌的临床进展相关,提示AR-V7可能参与前列腺癌的临床进展和骨转移的发生。

小胶质细胞不同极化状态下P2rx7剪接变异体差异化表达

目的P2X7受体(P2rx7)的选择性剪切影响P2rx7基因外显子的表达,是调节P2rx7功能的主要方式之一。本研究分析小胶质细胞M1/M2极化状态下P2rx7不同剪接异构体的差异表达。方法培养并增殖BV2永生化小鼠小胶质细胞,利用药物脂多糖(LPS,100 ng/mL)或白细胞介素-4(IL-4,40 ng/mL)分别刺激BV2细胞,培养48 h后通过流式细胞仪分析确定细胞M1/M2极化状态,并采用实时定量PCR分析小鼠P2rx7-v1、-v2、-v3、-v4和-vk等5种P2rx7剪接异构体的表达量。结果正常培养条件下小鼠小胶质细胞系BV2中所有P2rx7各转录本均可在mRNA水平检测到,其中P2rx7-v1是BV2细胞系中表达的主要形式,P2rx7-v2、-v3、-v4和-vk等异构体表达量相对较少或几乎没有。应用LPS刺激培养BV2细胞48 h后,显著抑制了M2相关标志物CD206的表达(P<0.01),M1相关标志物CD86的表达略有升高但差异无统计学意义(13.0%vs.78.8%,P=0.054),此时P2rx7-v1、-v2、-v3、-v4和-vk等异构体表达量均有明显增加(P<0.01),P2rx7-v4表达量增加相对较小(15.8%,P<0.05)。IL-4刺激培养BV2细胞48 h后,M2相关标志物CD206表达显著增加(280.2%,P<0.01),而M1相关标志物CD86表达明显减少(47.6%,P=0.035),进一步检测显示P2rx7-v1、-v4异构体表达量明显减少(64.9%vs.52.9%,P<0.01),P2rx7-v3的表达量则略有增加(61.7%,P<0.01)。结论小胶质细胞M1/M2极化状态下5种P2rx7剪接异构体呈现不同程度表达改变,进一步研究不同P2rx7剪接异构体的结构功能是否影响小胶质细胞极化状态很有必要。

miR-141-3p、KLF9异常表达对前列腺癌细胞株药物敏感性和雄激素受体表达的影响及靶向关系

目的观察miR-141-3p、Krüppel样因子9(KLF9)对前列腺癌细胞株药物敏感性、雄激素受体(AR)表达的影响,验证miR-141-3p、KLF9之间的靶向关系,以探讨miR-141-3p、KLF9对PCa药物敏感性的调控作用及机制。方法选择雄激素敏感且表达AR的LNCaP细胞株。将细胞分为miR-141-3p低表达组、miR-141-3p正常组、KLF9过表达组、KLF9正常组,采用脂质体转染法分别转染miR-141-3p-inhibitor、inhibitor阴性对照物(inhibitor-NC)、KLF9过表达质粒、空白质粒。上述各组细胞加入不同浓度(0、10、25、50、75、100µmol/L)比卡鲁胺或(0.5、1.0、2.5、5.0 nmol/L)多西他赛后培养48 h,检测各组细胞OD值,计算细胞增殖率(反映药物敏感性)。采用qRT-PCR和Western blotting法检测各组细胞中AR及AR-V7。采用TargetScan数据库预测miR-141-3p与KLF9是否存在结合位点,然后采用荧光素酶报告基因实验验证miR-141-3p与KLF9的靶向调控关系[将LNCaP细胞株分别分为A、B、C、D组,A组先后转染野生型KLF9荧光素酶报告基因质粒(KLF9-WT)、inhibitor-NC,B组先后转染KLF9-WT、miR-141-3p-inhibitor,C组先后转染突变型KLF9荧光素酶报告基因质粒(KLF9-Mut)、inhibitor-NC,D组先后转染KLF9-Mut、miR-141-3p-inhibitor,转染24 h后检测各组荧光素酶活性]。通过细胞功能回复实验进一步验证miR-141-3p通过靶向调控KLF9抑制前列腺癌细胞药物敏感性[将LNCaP细胞株分别分为a、b、c、d组,a组先后转染si-KLF9阴性对照(si-Ctrl)、inhibitor-NC,b组先后转染si-Ctrl、miR-141-3p-inhibitor,c组先后转染si-KLF9、inhibitor-NC,d组先后转染si-KLF9、miR-141-3p-inhibitor,转染24 h后分别使用75µmol/L比卡鲁胺或2.5 nmol/L多西他赛处理细胞48 h,使用CCK-8法检测细胞OD值,并计算细胞增殖率]。结果LNCaP细胞培养48 h,在无药物加入时,miR-141-3p低表达组细胞增殖率低于miR-141-3p正常组(P均<0.05),KLF9过表达组细胞增殖率低于KLF9正常组(P均<0.05);随着药物浓度升高,各组细胞增殖率呈下降趋势(P均<0.05);在同等药物浓度情况下,miR-141-3p低表达组细胞增殖率低于miR-141-3p正常组(P均<0.05),KLF9过表达组细胞增殖率低于KLF9正常组(P均<0.05)。LNCaP细胞培养48 h,与不加入药物的miR-141-3p正常组相比,加入75、100µmol/L比卡鲁胺的miR-141-3p正常组AR相对表达量升高(P均<0.05),加入50、75、100µmol/L比卡鲁胺的miR-141-3p正常组AR-V7相对表达量升高(P均<0.05);加入0.5、1.0、2.5、5.0 nmol/L多西他赛的miR-141-3p正常组AR及AR-V7相对表达量升高(P均<0.05)。miR-141-3p低表达组的AR及AR-V7相对表达量低于加入同药物浓度的miR-141-3p正常组(P均<0.05),KLF9过表达组的AR及AR-V7相对表达量低于加入同药物浓度的KLF9正常组(P均<0.05)。TargetScan数据库预测miR-141-3p与KLF9存在结合位点,双荧光素酶报告实验显示,B组的相对荧光活性高于A组、C组及D组(P均<0.05)。功能回复实验结果显示,d组的细胞增殖率高于b组(P均<0.05),低于c组(P均<0.05),但与a组差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-141-3p低表达、KLF9过表达均可增强LNCaP细胞株的药物敏感性,并可抑制LNCaP细胞株AR和AR-V7的表达,miR-141-3p和KLF9存在靶向关系,miR-141-3p可靶向KLF9抑制LNCaP细胞药物敏感性,可能是通过促进AR-V7的表达实现的。

IL-13及其变异体真核表达载体的构建表达与亚细胞定位

目的:体外构建野生型人白细胞介素-13(whIL-13)及变异型人白细胞介素-13(mhIL-13)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融和蛋白真核表达载体,分析其在COS-7细胞中的表达和亚细胞定位。方法:以RT-PCR方法扩增whIL-13、mhIL-13全长编码基因,构建EGFP-whIL-13、EGFP-mhIL-13融和蛋白真核表达载体,转染C0S-7细胞,以激光扫描共聚焦显微镜观察融合蛋白的表达及其在细胞内的分布情况。结果:两种融和蛋白表达载体均构建正确,将其转染COS-7细胞后,在阳性克隆胞浆内均可见明亮的绿色荧光,胞核空虚。结论:成功构建EGFP-whIL-13、EGFP-mhIL-13融和蛋白表达载体,并在COS-7细胞中得到表达,表达的两种融和蛋白细胞内分布特征没有区别,均位于胞浆内。

AR-V7水平改变与转移性前列腺癌患者应用地塞米松联合阿比特龙治疗的敏感性及其与预后的关系

目的:探讨雄激素受体剪接变异体7(AR-V7)表达改变与转移性前列腺癌(mPC)患者应用阿比特龙联合地塞米松(AA+D)治疗的敏感性及其与预后的关系。方法:选取80例mPC患者为研究对象,依照免疫组织化学检测结果分为AR-V7阳性组(n=29)与AR-V7阴性组(n=51),两组患者均予以AA+D治疗。比较两组患者临床病理特征及预后,分析影响预后的相关因素。结果:AR-V7阳性组病程长于AR-V7阴性组(P<0.05);舒张压水平、浸润深度、mGPS评分高于AR-V7阴性组(P<0.05);肿瘤最大径≥2 cm、有吸烟史、淋巴结转移患者比例高于AR-V7阴性组(P<0.05)。随访1~5年,AR-V7阳性组PFS及OS短于AR-V7阴性组(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,T分期和AR-V7阳性是影响mPC患者总生存期的独立因素(P<0.05)。结论:AR-V7表达情况与mPC患者的病情严重程度紧密相关,同时影响地塞米松联合阿比特龙的治疗效果,可作为衡量mPC预后的敏感标志物之一。

AR-V7在前列腺癌细胞耐药中的作用

目的:探讨雄激素受体剪接变异体7(AR-V7)在前列腺癌细胞耐药中的作用及分子机制。方法:运用Lipofectamine2000转染法将AR-V7 siRNA(siAR-V7)转染至4株前列腺癌细胞中,命名为PC3-siAR-V7、DU145-siAR-V7、LNCaP-siAR-V7和ArCaP-siAR-V7细胞,以转染无关序列(NC siRNA)为阴性对照。运用real-timePCR和Westernblot实验分别检测转染前后细胞中AR-V7的mRNA和蛋白表达水平;运用MTT法和Transwell法分别检测细胞活力和细胞迁移率;运用萤光素酶报告基因实验和Western blot实验分别检测AR的启动子活性及下游靶基因前列腺特异性抗原(PSA)和FK506结合蛋白5(FKBP5)的蛋白表达。构建耐比卡鲁胺的前列腺癌细胞系LNCaP-DR,运用免疫荧光观察LNCaP、LNCaP-siAR-V7和LNCaP-DR细胞中AR和AR-V7的亚细胞定位;运用蛋白质免疫共沉淀实验检测AR-V7与热休克蛋白90(HSP90)的相互作用。结果:4株前列腺癌细胞中的AR-V7 mRNA水平显著高于正常前列腺上皮细胞RWPE-1(P<0.05);PC3-siAR-V7、DU145-siAR-V7、LNCaP-siAR-V7和ArCaPsiAR-V7细胞中AR-V7蛋白水平、细胞活性及细胞迁移率显著低于NCsiRNA转染的细胞(P<0.05)。随着比卡鲁胺剂量的增加,所有细胞活力逐渐降低,而下调AR-V7表达显著增强前列腺癌细胞对比卡鲁胺的敏感性(P<0.05)。Westernblot结果显示下调AR-V7表达显著抑制AR启动子活性,其下游PSA和FKBP5蛋白水平明显降低(P<0.05)。免疫荧光结果发现AR和AR-V7主要存在于前列腺癌细胞核内,AR少量存在于细胞质中;下调AR-V7表达则抑制AR的核转运;AR存在于耐药细胞核中,AR-V7在耐药细胞中高表达。免疫共沉淀结果显示内源性AR-V7与HSP90相互作用。结论:AR-V7在前列腺癌细胞中高表达,下调AR-V7的表达显著抑制前列腺癌细胞活力和迁移;前列腺癌细胞耐药与AR-V7高表达相关,其机制可能通过AR-V7与HSP90相互作用介导AR-V7的核转运,激活AR信号通路调控下游靶基因的转录活性最终导致细胞耐药。

雄激素受体变异体7在去势抵抗性前列腺癌中的功能和调节机制

雄激素受体(AR)在去势抵抗性前列腺癌(CRPC)的发生过程中具有关键的调控作用,其中以雄激素受体变异体7(AR-V7)为代表的组成型活性变异体水平在CRPC进展过程中不断升高,可以作为判断CRPC患者疾病进展和预后的分子标志物,是克服去势抵抗、提高患者生存质量和生存期的重要靶标。研究结果表明,AR-V7的生成与AR基因结构重排、基因扩增和AR基因转录本选择性剪接有关,且受转化生长因子-β(TGF-β)等多个信号通路分子的协同调节;AR-V7改变了AR蛋白的转运与核定位机制,并进一步影响下游靶基因的转录表达。AR-V7抗AR活性而阻断AR和雄激素驱动的分化过程,阻遏抑癌基因的表达,刺激肿瘤细胞增殖,从而促进前列腺癌进展。相关靶向研究目前主要集中在AR-V7蛋白降解、mRNA表达抑制和N端结构域靶向干预等3个方面。随着研究的深入开展,AR-V7在前列腺癌进展中的分子机制将逐步阐明,将对CRPC的预防和治疗起到更大的推动作用。

前列腺癌组织中雄激素受体剪接变异体7表达对转移性前列腺癌患者激素敏感时间的预测作用

目的 探讨前列腺癌组织中雄激素受体剪接变异体7（AR-V7）的表达对转移性前列腺癌患者激素敏感时间的预测作用.方法 回顾性收集2002年1月至2010年6月经前列腺穿刺活检确诊的113例晚期转移性前列腺癌患者的临床病理资料.确诊时年龄43 ～ 84岁,中位年龄70岁.确诊时血清PSA值3.0～6 006.2 μg/L,中位值120.0 μg/L.临床分期M1a期5例（4.4％）,M1b期94例（83.2％）,M1.期14例（12.4％）.患者均接受内分泌治疗.利用免疫组化技术和鼠抗人AR-V7特异性抗体检测前列腺癌组织中AR-V7的表达.利用Cox比例风险模型分析患者确诊年龄、确诊PSA值、确诊Gleason评分、临床分期、内分泌治疗过程中PSA最低值、到达PSA最低值时间以及PSA半衰期对激素敏感时间的预测作用.采用Kaplan-Meier法分析AR-V7的表达对激素敏感时间的影响,并用Log-rank法对结果进行显著性检验.结果 本组患者内分泌治疗过程中PSA最低值为0.0～143.0tμg/L,中位值0.7μg/L.到达PSA最低值的时间为0.9～71.0个月,中位时间8.1个月.PSA半衰期为0.1～41.0个月,中位值1.0个月.经过中位27（2～132）个月的随访后,100例患者进展至去势抵抗性前列腺癌,中位激素敏感时间为24（2～ 132）个月.113例前列腺癌组织中,23例（20.4％）阳性表达AR-V7.Cox多因素分析结果显示,前列腺癌组织中AR-V7的表达（P=0.004,HR=2.223）和内分泌治疗过程中PSA最低值（P=0.035,HR=1.011）是晚期转移性前列腺癌患者激素敏感时间的独立预测因素.前列腺癌组织中表达AR-V7和不表达AR-V7组患者的中位激素敏感时间分别为（16.0±3.4）和（30.0±6.0）个月,差异有统计学意义（P=0.001）.结论 前列腺癌组织中AR-V7的表达和内分泌治疗过程中PSA最低值为晚期转移性前列腺癌患者激素敏感时间的独立预测因素.AR-V7可能为晚期前列腺癌的治疗新靶点.

雄激素受体剪接变异体7与雄激素受体比值预测前列腺癌预后的意义分析

目的:探讨雄激素受体剪接变异体7(AR-V7)与雄激素受体(AR)比值(AR-V7/AR)对前列腺癌预后的预测价值。方法:选择2013年3月至2018年3月广东省高州市人民医院收治的105例接受内分泌初治的前列腺癌患者,以免疫组织化学法检测活检穿刺标本的AR、AR-V7表达情况,分析AR、AR-V7、AR-V7/AR与患者预后的关系,并对影响前列腺癌预后相关因素采用Cox模型进行分析。结果:AR阳性率为59.0%(62/105),AR-V7阳性率为19.0%(20/105)。随访15~61(44.8 ± 10.1)个月,AR-V7阳性者的无进展生存时间(PFS)以及总生存时间(OS)均较阴性者明显缩短[(10.8 ± 2.2)个月比(25.0 ± 3.4)个月、(20.3 ± 5.1)个月比(42.8 ± 7.4)个月],差异有统计学意义( P<0.01),而高AR-V7/AR者的PFS以及OS较低AR-V7/AR者亦明显缩短[(12.5 ± 3.2)个月比(24.9 ± 5.5)个月、(22.5 ± 4.6)个月比(42.1 ± 8.3)个月],差异有统计学意义( P<0.01)。Cox多因素分析提示T 4期( HR = 2.618,95% CI 1.362 ~ 4.986, P<0.01)、高AR-V7/AR( HR = 5.799,95% CI 2.541 ~ 13.253, P<0.01)可作为影响前列腺癌不良预后的独立危险因素。 结论:接受内分泌初治的前列腺癌患者如AR-V7阳性、高AR-V7/AR时则PFS、OS可缩短,高AR-V7/AR可成为评估该类患者预后不良的相关危险因素。