生理状态下外周血白细胞干扰素、白细胞介素2、白细胞介素4和白细胞介素10基因表达的荧光定量PCR检测

目的:建立干扰素-γ(IFN-γ),白细胞介素-2(IL-2),白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10)基因表达的绝对定量实时PCR检测技术。方法:应用实时定量PCR方法检测25名健康运动员生理状态下外周血白细胞IFNγ-、IL-2、IL-4和IL-10 mRNA的表达。结果:应用实时定量PCR方法能够对健康受试者外周血白细胞IFNγ-、IL-2、IL-4和IL-10的mRNA表达进行定量分析,相关系数r>0.99。结论:从分子水平为检测运动过程中细胞因子的改变、评估运动员免疫机能状态提供了简易和准确的检测手段。

重组白细胞介素-4增强日本血吸虫组织蛋白酶B核酸疫苗诱导小鼠的保护力

目的探讨重组白细胞介素-4(IL-4)真核表达质粒增强日本血吸虫组织蛋白酶BDNA疫苗对小鼠的免疫保护效果。方法将小鼠IL-4基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1以构建小鼠重组IL-4表达质粒,并联合日本血吸虫组织蛋白酶B的表达质粒DNA(VR1012-Sj31)肌注免疫小鼠,设重组IL-4表达质粒、组织蛋白酶B表达质粒和2种空载体质粒对照组。免疫组化检测IL-4和组织蛋白酶B在小鼠肌细胞内的表达,末次免疫3周后攻击感染,用减虫率及减卵率表示保护力。结果重组IL-4和组织蛋白酶BDNA均在小鼠肌细胞表达,重组IL-4和组织蛋白酶BDNA联合免疫小鼠,产生43.2%的减虫率和76.6%的减卵率,与组织蛋白酶BDNA单独免疫相比差异有显著性(P<0.01,P<0.05)。结论重组IL-4能提高日本血吸虫组织蛋白酶B核酸疫苗的抗血吸虫保护力作用,具有佐剂的免疫效应。

农杆菌介导的人白细胞介素-4基因转化甘蓝的研究

以结球甘蓝‘92-1012-3-11’自交系种子转白细胞介素-4(IL-4)基因T0代材料为试材,研究了通过农杆菌介导法将人IL-4基因导入甘蓝后代的遗传转化情况。结果表明:共得到抗草铵磷(PPT)抗性再生植株396株,聚合酶链式反应(PCR)阳性植株137株,其中带柄子叶转化率为8.1%,下胚轴分化率为5.8%。通过对转基因阳性株T0代的PPT抗性筛选、PCR、PCRSouthern杂交检测获得IL-4阳性甘蓝植株,表明IL-4基因已转入甘蓝受体中。经ELISA和Western检测,说明IL-4基因已整合到甘蓝基因组,但表达量很低(0.23～2.81ng/mL),且各植株间的表达量差异极大。

基因工程人可溶性白细胞介素4受体（sIL-4R）

白细胞介素-4(IL-4)作为一种多功能的细胞因子在哮喘等变态性炎症反应中具有关键作用。IL-4通过结合细胞表面的白介素-4受体(IL-4R)发挥其生物学效应。sIL-4R缺少跨膜和胞内结构域，结合IL-4后不能产生信号传递介导IL-4的生物学活性，但sIL-4R与IL-4结合的高度特异性和极高的亲和力使它非常适合作为理想的IL-4拮抗剂应用于哮喘等疾病的治疗。国外已经应用重组sIL-4R蛋白进行治疗哮喘的临床研究，美国Immunex公司制备的sIL-4R重组蛋白(商品名为NuvanceIM)己进入临床Ⅱ期研究，结果显示了良好的治疗效果，无副作用，

白细胞介素-4基因转化胡萝卜的研究

以胡萝卜‘长城红玥’与‘开拓者’胚轴为受体材料,研究了菌种、预处理、农杆菌菌液浓度、侵染时间和共培养时间对胡萝卜胚轴转化率的影响。结果表明:C58C1菌株对胡萝卜胚轴伤害较小;‘长城红玥’以7日龄无菌苗于4℃预处理3d,经3.2×107个/mL农杆菌菌液侵染6min,共培养3d,转化率可达60%;‘开拓者’以7日龄无菌苗于4℃预处理3d,经4.8×107个/mL农杆菌菌液侵染10min,共培养4d,或7日龄无菌苗于4℃预处理10d,经3.2×107个/mL农杆菌菌液侵染10min,共培养2d转化率可达100%;但2个品种均以7日龄无菌苗于4℃预处理3d,经1.6×107个/mL农杆菌菌液侵染2min,共培养2d,可得最多转化苗。

肿瘤坏死因子α、超敏C反应蛋白、白细胞介素-4和白细胞介素-10在支气管哮喘患者中检测的临床价值分析

目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)水平在支气管哮喘患者中检测的临床价值。方法:抽取支气管哮喘患者46例(支气管哮喘组),健康体检者40例(对照组)的血清,检验并分析TNF-α、IL-4、IL-10和hs-CRP水平的变化。结果:支气管哮喘急性发作期和缓解期患者血清中hs-CRP、IL-4、TNF-α水平明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),而IL-10在急性期明显降低,与缓解期和对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:测定TNF-α、IL-4、IL-10和hs-CRP的水平可作为判断支气管哮喘疾病程度的重要参考指标,为临床治疗提供参考依据。

白细胞介素4及其受体在呼吸道合胞病毒所致婴幼儿肺炎中的相关性研究

目的:探讨IL-4及其受体(IL-4R)在呼吸道合胞病毒所致婴幼儿肺炎中的相关性。方法:应用酶联免疫吸附试验检测45例呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎患者及51例正常对照组中血清中的IL-4及IL-4R浓度。结果:(1)RSV肺炎组和正常对照组中IL-4浓度分别为(294.68±90.65)ng/L和(146.75±37.26)ng/L,两组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。(2)RSV肺炎组和正常对照组中IL-4R浓度分别为(17.60±13.80)μg/L和(7.47±4.29)μg/L两组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:IL-4及IL-4R在RSV所致肺炎中含量明显增高,且随病情进展受体浓度增加,表明RSV肺炎病情的严重程度与IL-4及IL-4R含量增加呈正相关。

白细胞介素-4基因多态性与糖尿病的相关研究进展

糖尿病是慢性高血糖为特征的代谢性疾病。随着人民生活水平的提高、人口老化,发病率呈逐渐升高的流行趋势。糖尿病发病机制到目前仍不十分明确,糖尿病发病机制是现在的热点话题。白细胞介素-4(IL-4)(10 kb)位于染色体5q31.1上,有4个多态性的等位基因,它们具有很强的连锁不平衡。本文就白细胞介素-4(IL-4)基因多态性与1型糖尿病、2型糖尿病、糖尿病并发症的相关性进展展开论述。

肺结核患者血清中可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(sTim-3)和IL-4水平升高但IFN-γ水平降低

目的检测肺结核患者血清中可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(sTim-3)、γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)水平。方法收集48例肺结核患者和20例健康体检者外周血,ELISA检测血清中sTim-3水平;流式细胞微球捕获芯片技术(CBA)检测血清中IFN-γ、IL-4水平。Pearson法分析肺结核患者血清中sTim-3、IFN-γ及IL-4水平的相关性。结果与对照组相比,肺结核患者血清中sTim-3和IL-4水平显著升高,IFN-γ水平显著降低;Pearson分析显示:sTim-3与IFN-γ、IFN-γ与IL-4呈负相关;而sTim-3与IL-4呈正相关。结论肺结核患者血清中sTim-3和IL-4水平升高、但IFN-γ水平降低。

微量营养素对糖尿病大鼠淋巴细胞IL-4、IL-10表达的影响

目的 : 研究微量营养素硒、铬、钒、维生素 E(VE)的联合生物学效应在胰岛素依赖性糖尿病 (IDDM)发病过程中对淋巴细胞白细胞介素 - 4(IL- 4)、白细胞介素 - 1 0 (IL- 1 0 )表达的调节作用及对 IDDM发生发展的影响。方法 : 以链脲佐菌素 (STZ)小剂量、多次注射方法 ,制造大鼠IDDM模型 ,用流式细胞仪检测、比较不同组合给予硒、铬、钒、VE对 IL- 4、IL- 1 0表达调控的影响及与血糖、活性氧产生等指标的关系。结果 : IDDM大鼠外周血和脾脏表达 IL- 4、IL- 1 0淋巴细胞数目总体偏低于非糖尿病大鼠 (P<0 .0 5～ 0 .0 1 )。联合给予一定剂量的硒、铬、钒、VE可不同程度地明显提高 IL- 4、IL - 1 0的表达 (P<0 .0 5～ 0 .0 1 ) ,降低升高的血糖水平 (P<0 .0 1 )和减少组织活性氧的产生 (P<0 .0 5～ 0 .0 1 )。结论 : 微量营养素可通过上调 IL- 4、IL- 1 0的表达减轻胰岛β细胞自身免疫性损害 ,防治 IDDM的发生发展。

消痤方对Ⅳ度痤疮患者细胞因子IL-4及IFN-γ水平的影响

目的:观察消痤方对Ⅳ度痤疮患者血清白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)水平的影响。方法:40例Ⅳ度痤疮患者口服自拟消痤方治疗,每天1剂,疗程8周。检测用药前后血清中IL-4和IFN-γ水平,设30例健康人为对照组。结果:治疗组患者在服用消痤方前血清IL-4、IFN-γ水平与对照组比较,明显高于对照组(P<0.01)。治疗组治疗前后血清IL-4、IFN-γ水平比较均有明显差异(P<0.01),治疗后血清IL-4、IFN-γ与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:消痤方能够调节Ⅳ度痤疮患者IL-4和IFN-γ细胞因子水平。

拉米夫定对慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ、IL-4的影响

目的观察拉米夫定治疗慢性乙型肝炎过程中血清γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)等细胞因子的动态变化。方法用酶联免疫吸附(ELISA)方法分别检测117例慢性乙型肝炎患者在拉米夫定治疗前,治疗后第13、26、39、52周时的血清IFN-γ和IL-4水平。结果拉米夫定治疗后完全应答组IFN-γ/IL-4水平接近或高于对照组;部分应答组和无应答组IFN-γ/IL-4水平则低于对照组。结论拉来夫定治疗慢性乙型肝炎过程中,随着治疗时间的延长,乙型肝炎患者Th1类细胞因子IFN-γ水平逐渐增高;Th2类细胞因子IL-4水平逐渐降低,提示拉米夫定治疗慢性乙型肝炎不但抑制病毒繁殖,而且长时间治疗可增强Th1类细胞优势应答,抑制Th2类细胞功能。

急性肝衰竭大鼠血清TNF-α和IFN-γ/IL-4表达

目的研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ-干扰素/白细胞介素4(IFN-γ/IL-4)在D-氨基半乳糖/内毒素所致大鼠急性肝衰竭中的表达。方法取30只Wistar大鼠,腹腔内注射D-氨基半乳糖/内毒素诱导大鼠急性肝衰竭模型(AHF组);另取30只腹腔内注射等量生理盐水为正常对照组(N)。2组动物于建模后3,6,12,24,48,72 h各取5只动物检测其血清丙氨酸转氨酶(ALT)并观察肝组织的病理形态学变化。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测不同时间点动物血清中TNF-α和IFN-γ/IL-4水平的变化。结果结果显示,AHF组肝组织炎性细胞浸润和明显坏死的急性肝衰竭特征,且各时间点血清ALT值均明显高于对照组(P<0.05);AHF组与对照组比较,血清内TNF-α在3 h(P<0.01)、6 h(P<0.05)增高;IFN-γ在3 h(P<0.01)、6 h(P<0.01)增高;IL-4水平在各时间点无明显变化(P>0.05)。结论在D-氨基半乳糖/内毒素所致大鼠急性肝衰竭模型中,TNF-α和IFN-γ对急性肝衰竭早期损伤起重要作用;IL-4可能不参与此种动物模型的病理过程。

盆炎丸对解脲支原体感染小鼠血清IL-2、IL-4表达的影响

目的研究盆炎丸对解脲支原体(UU)感染小鼠血清白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)表达的影响,探讨盆炎丸防治UU感染的部分免疫学机制。方法选取SPF级8周龄BALB/c雌性小鼠40只,随机分为空白组(8只)和造模组(32只),造模组造模成功后随机分为中药组、西药组和模型组,分别予以盆炎丸、克拉霉素和等量生理盐水灌胃,14 d后取小鼠阴道分泌物行UU培养,观察小鼠血清IL-2、IL-4表达水平。结果西药组小鼠全部转阴,清除率100%,中药组小鼠UU清除率为78%。1IL-2含量:西药组IL-2值最高,其次是中药组,模型组IL-2值最低。两两比较:与空白组比较,模型组差异无统计学意义(P>0.05),中药组和西药组差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,中药组和西药组差异有统计学意义(P<0.05);中药组与西药组比较,两组差异无统计学意义(P>0.05)。2IL-4含量:中药组IL-4值最低,其次是西药组,模型组IL-4值最高。两两比较,与空白组比较,模型组、中药组、西药组差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,中药组和西药组差异均有统计学意义(P<0.05);与西药组比较,中药组差异无统计学意义(P>0.05)。结论盆炎丸可促使UU感染小鼠阴道分泌物UU培养转阴,可通过升高IL-2水平、降低IL-4水平,发挥免疫调节作用。

慢性牙周炎患者治疗前后患牙中IL-6、IL-22及IL-4表达水平的研究

目的:探讨白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-22(IL-22)、白细胞介素-4(IL-4)与慢性牙周炎的关系。方法:选取我院进行治疗的48例慢性牙周炎患者为治疗组,全部常规治疗,正常健康对照组32例,记录正常对照组及治疗组治疗前、后的临床指数,采用ELISA检测治疗组治疗前、后及正常对照组龈沟液(GCF)及血清中IL-6、IL-22及IL-4的含量,并讨论与临床指数的相关性。结果:IL-6、IL-22及IL-4含量与正常对照组比较,治疗组治疗前及治疗后6周差异有统计学意义(P均<0.01),治疗后12周接近正常对照组值,差异无统计学意义(P均>0.05);治疗后两组与治疗前比较,各项指标差异均有统计学意义(P均<0.01)。IL-6、IL-22及IL-4含量与牙周探诊深度(PD)治疗前、后比较均有线性显著相关(P均<0.05),与菌斑指数(PⅡ)治疗前、后比较均无线性显著相关(P均>0.05);IL-6与IL-22、IL-4与IL-22分别比较,均有线性显著负相关(P均<0.05),IL-6与IL-4含量在治疗前、后比较有线性显著正相关(P均<0.05)。结论:IL在牙周炎的免疫保护或免疫病理过程中起着重要作用。

肾综合征出血热患者IFN-γ、IL-4水平变化及意义

目的 探讨肾综合征出血热(HFRS)患者血清中干扰素α(IFN-γ)、白细胞介素-4 (IL-4 )的水平变化与HFRS患者病情转归之间的关系。方法 用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定46名正常对照者和49例不同治疗时期的HFRS患者血清中IFN-γ、IL-4的含量。结果 HFRS患者血清中IFN -γ、IL 4的水平明显高于对照组(P<0. 05);重症患者发热期血清中IFN γ的含量明显高于恢复期,差异亦有显著性(P<0. 05);轻症患者发热期血清中IL 4的含量明显高于恢复期,差异有显著性(P<0. 05)。结论 HFRS患者血清中IFN γIL 4的含量明显升高,随着病情的好转,血清中IFN γ、IL 4的含量逐渐趋向正常,IFN γ和IL 4的检测有利于HFRS病情的观察和治疗。

香菊胶囊对变应性鼻炎患者IgE、IL-4、IL-8及EOS的影响

目的：探讨香菊胶囊对变应性鼻炎（AR）患者血清免疫球蛋白E（IgE）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-8（IL-8）水平及鼻腔分泌物嗜酸性粒细胞（EOS）计数的影响。方法：选取2014年10月～2015年10月来我院就诊的70例AR患者为研究对象，随机分为观察组与对照组；对照组口服盐酸左西替利嗪片5mg／次，1次／d，布地奈德鼻喷剂1～2喷／次，2次／d喷鼻，观察组在对照组基础上口服香菊胶囊3粒／次，3次／d，两组均连续用药4周；观察治疗前后血清IgE、IL-4、IL8水平及EOS计数。结果：治疗后两组血清IgE、IL-4、IL-8水平及鼻腔分泌物EOS计数明显下降，观察组优于对照组，差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论：香菊胶囊联合盐酸左西替利嗪及布地奈德鼻喷剂治疗AR，能够显著改善血清中IgE、IL-4、IL-8水平，从而改善机体细胞免疫状态，降低鼻腔分泌物EOS计数，达到有效的治疗效果，香菊胶囊服用方便，毒副作用低，可作为治疗AR的临床用药。

抗IL-4全人源单链抗体的筛选和鉴定

目的表达人白细胞介素4(IL-4),从全人源单链抗体(sc Fv)文库中筛选抗IL-4全人源sc Fv并鉴定其特异性。方法采用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导p ET102/IL-4/BL21表达IL-4,进行纯化鉴定。利用全人源噬菌体抗体文库表达抗IL-4全人源sc Fv,用表达的IL-4作为抗原,筛选阳性克隆菌株经PCR、酶切及测序鉴定。采用斑点杂交检测抗IL-4sc Fv的特异性。结果表达的IL-4融合蛋白相对分子质量(Mr)为27 000。采用该抗原筛选出了表达抗IL-4的阳性克隆,PCR结果显示,在约1000 bp处有扩增的目的条带。酶切结果显示,有2株克隆的指纹图谱相同,其余均不同。选取指纹图谱不同的且与IL-4结合能力强的4个sc Fv的克隆进行测序,显示有3个的序列正确。斑点杂交显示,这3株克隆表达的sc Fv均具有特异性。结论成功筛选到抗IL-4全人源sc Fv。

大肠癌患者围手术期血清IFN-γ和IL-4水平变化及意义

目的探讨大肠癌患者围手术期血清干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平的变化及其临床意义。方法采用ELISA法分别测定58例大肠癌患者手术前后血清IFN-γ和IL-4水平,并与健康对照组比较分析。结果大肠癌组治疗前IFN-γ水平降低(98.9±11.3pg/ml),而IL-4水平增高(128.3±14.8pg/ml),与对照组血清IFN-γ水平(157.5±17.0pg/ml)和IL-4水平(84.8±10.9pg/ml)比较均有显著性差异(P<0.01);且与淋巴结转移和肿瘤临床TNM分期有明显相关性(P<0.05)。行根治性手术组术后IFN-γ水平显著性增高(P<0.05),IL-4显著性降低(P<0.05);而姑息性手术组IFN-γ水平则无显著性增高(P>0.05),IL-4水平则无显著性降低(P>0.05)。结论大肠癌患者血清IFN-γ和IL-4水平的变化与肿瘤的浸润转移和病程有关,检测大肠癌患者血清IFN-γ和IL-4水平的变化,有助于估计患者的治疗效果和预后。

清热化瘀汤对过敏性紫癜患者IL-4及IFN-γ水平的影响

目的:观察清热化瘀汤对过敏性紫癜患者血清白细胞介素-4(IL-4)及γ-干扰素(IFN-γ)水平的影响。方法:对30例过敏性紫癜患者采用清热化瘀汤治疗,采用ELISA法进行检测用药前后血清细胞因子IL-4和IFN-γ水平,并以20例健康患者作对照。结果:治疗后,观察患者血清IL-4和IFN-γ细胞因子水平较治疗前显著改善(P<0.01),且治疗后IL-4和IFN-γ细胞因子水平与对照组相当(P>0.05)。结论:清热化瘀法能够调节过敏性紫癜患者IL-4和IFN-γ细胞因子水平,改善患者免疫功能。