黄芪多糖联合替加环素对白细胞减少性鲍曼不动杆菌感染肺炎大鼠的疗效及机制研究

目的:探讨黄芪多糖联合替加环素对白细胞减少性鲍曼不动杆菌感染肺炎大鼠的疗效及机制。方法:实验开始前,将75只大鼠分为五组,即空白对照组、模型组、黄芪多糖组、替加环素组、黄芪多糖联合替加环素组。除空白对照组,其余四组均进行造模,动物造模后,黄芪多糖组给予1 ml/100 g黄芪多糖,替加环素给予1 ml/100 g替加环素,黄芪多糖联合替加环素组给予1 ml/100 g黄芪多糖+1 ml/100 g替加环素,正常对照组和模型组大鼠给予等量的0.9%氯化钠溶液进行灌胃,五组均连续灌胃给药7 d。分析五组大鼠的造模结果、精神活动状况及大鼠的生存时间、湿干比、白细胞计数、细菌含量、血清细胞因子、检测Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)相对表达量。结果:75只大鼠造模成功率86.67%(65/75)。所有大鼠给药7 d内均存活,黄芪多糖联合替加环素组的生存时间明显较黄芪多糖组、替加环素组、模型组高,黄芪多糖组、替加环素组明显较模型组高(均P<0.05),黄芪多糖组与替加环素组比较无统计学意义(P>0.05)。给药第1天,模型组、黄芪多糖组、替加环素组、黄芪多糖联合替加环素组的湿干比、细菌含量、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、TLR4、NF-κB明显较空白对照组高,白细胞计数明显较低(均P<0.05);模型组、黄芪多糖组、替加环素组、黄芪多糖联合替加环素组组间的湿干比、白细胞计数、细菌含量、MMP-9、IL-6、TNF-α、TLR4、NF-κB比较无统计学意义(均P>0.05);给药第3天、第5天、第7天,模型组的湿干比、细菌含量、MMP-9、IL-6、TNF-α、TLR4、NF-κB明显较空白对照组、黄芪多糖组、替加环素组、黄芪多糖联合替加环素组高,白细胞计数明显较低;黄芪多糖组、替加环素组的湿干比、细菌含量、MMP-9、IL-6、TNF-α、TLR4、NF-κB明显较空白对照组、黄芪多糖联合替加环素组高,白细胞计数明显较低;黄芪多糖联合替加环素组的湿干比、细菌含量、MMP-9、IL-6、TNF-α、TLR4、NF-κB明显较空白对照组高,白细胞计数明显较低(均P<0.05);黄芪多糖组、替加环素组的湿干比、白细胞计数、细菌含量、MMP-9、IL-6、TNF-α、TLR4、NF-κB比较无统计学意义(均P>0.05)。结论:黄芪多糖联合替加环素对白细胞减少性鲍曼不动杆菌感染肺炎大鼠有一定疗效,可能与其可通过TLR4/NF-κB通路改善炎症水平有关。

Tim-3信号通路调控巨噬细胞极化在鲍曼不动杆菌性肺炎免疫致病和免疫防治中的作用

目的探讨T细胞免疫球蛋白及粘蛋白-3(T-cell Ig-mucin-3,Tim-3)信号通路调控巨噬细胞极化在鲍曼不动杆菌性肺炎免疫致病和免疫防治中的作用。方法选取正常小鼠,定为正常组20只,将小鼠感染为鲍曼不动杆菌毒性临床菌株和疫苗菌株,检查生存率,细菌定量,组织病理等,用Real-time PCR检测细胞因子,用流式检测BALF炎症细胞浸润,分别建立小鼠鲍曼不动杆菌肺炎模型组20只和鲍曼不动杆菌疫苗接种模型组20只。通过ELISA法、Western blot技术检测Tim-3信号通路抑制巨噬细胞极化方向的影响。结果与正常组相比,临床株组IL-1β、TNF-α、IL-6、TGF-β显著升高(P<0.05),与临床株组相比疫苗组IL-1β、TNF-α、IL-6、TGF-β显著降低(P<0.05),差异有统计学意义。正常组肺组织结构正常,无明显病变;临床株组肺组织肺泡结构受损严重,可见血管充血、炎性细胞浸润等现象;与临床株组相比,疫苗组肺组织结构损坏得到缓解。临床株组与正常组比较鲍曼不动杆菌性肺炎性老鼠肺组织巨噬细胞的MI标记基因TNF-a的表达有所减少,但CD32的表达有所增加。M2标记基因CD206和IL-10的表达增加(p)(P<0.05);Tim-3通路抑制巨噬细胞后CD32、TNF-α基因的相对表达量升高,CD206表达升高,IL-10表达降低(P<0.05)。结论Tim-3信号通路调控巨噬细胞极化方向,在鲍曼不动杆菌性肺炎致病中起到免疫防治作用。

囊性肝包虫病包囊内一株鲍曼不动杆菌的分离鉴定及病原性分析

为探索囊性肝包虫病包囊自然退化而死亡的细菌感染机制。方法 在本次研究中,我们收集了囊性肝包虫病患者手术后的包囊样本,并对其进行了细菌的分离、纯化、生理和生化鉴定、耐药性的研究、16SrRNA基因序列的分析以及小鼠的致病性感染实验,并对其中一株菌株进行了体外药物敏感性试验。结果 包囊样本在BHI琼脂培养基中生成了多个菌落,挑取其中一株纯化精炼培养,通过革兰氏染色法检查确定其为阴性杆菌,综合16SrRNA Gene的测序事实,结合生理与生物化学实验结果,可明确此菌为鲍曼不动杆菌。且此菌株对小鼠的LD50(半数致死剂量)为9.60 x 108 cfu/ml。收集并分离失去生命体征小鼠病变部位的菌株,获得的菌株与原先分离的菌株一致。结果 兼表明,被分离的菌株对恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星高度敏感。结论 这项研究首次从包囊内容物中分离出鲍曼不动杆菌,为阐释包囊自然退化提供了实验数据,具有重要临床意义。

鲍曼不动杆菌抗药基因检测及对消毒剂抗性研究

目的研究临床分离的鲍曼不动杆菌携带抗药基因qacE△1-sulI情况及对消毒剂抗性水平。方法采用PCR法和肉汤稀释法分别检测临床分离鲍曼不动杆菌qacE△1-sulI基因和对消毒剂抗性变化,并与大肠杆菌标准菌株进行比较。结果临床分离的7株鲍曼不动杆菌中,4株qacE△1-sulI基因阳性,3株阴性。醋酸氯己定对7株鲍曼不动杆菌的MIC值为2mg/L^4mg/L,MBC值为4mg/L^125mg/L,均高于大肠杆菌标准株。对氯间二甲基苯酚对7株鲍曼不动杆菌的MIC值为78mg/L^156mg/L;苯扎溴铵对7株鲍曼不动杆菌的MIC值为9.8mg/L^19.5mg/L;聚维酮碘与聚醇醚碘对7株鲍曼不动杆菌的MIC值与标准菌株相同,分别为1000mg/L和500mg/L,均未超过标准菌株。结论鲍曼不动杆菌携带qacE△1-sulI基因携带率较高,抗药基因阳性的菌株对多数消毒剂耐受浓度增加。

多重耐药鲍曼不动杆菌随机多态性DNA分型与院内感染相关性研究

目的了解导致院内感染的多重耐药鲍曼不动杆菌(Multi-drug resistance Acinetobacter baumannii,MDRAB)的同源性及院内流行特征,为临床控制MDRAB感染、制定合适的防控措施提供依据。方法运用随机扩增多态性DNA(Ran-dom amplified polymorphic DNA,RAPD)技术对院内感染MDRAB菌株进行基因分型,用聚类分析软件进行同源性分析。结果 72株MDRAB分为7个基因型;A型:22.2%;B型:4.2%;C型:40.3%;D型:2.8%;E型:2.8%;F型:1.4%;G型:26.4%;A、C、G型MDRAB在ICU及神经外科发生3次感染暴发。结论 MDRAB在ICU及神外科病房易发生交叉感染;RAPD是院感暴发及流行病学的较好的研究手段。

纸片扩散法与微量肉汤稀释法检测鲍曼不动杆菌对替加环素体外敏感性的比较

目的比较微量肉汤稀释法和纸片扩散法对耐药饱曼不动杆菌替加环素敏感性试验检测结果。方法收集临床分离的非重复鲍曼不动杆菌42株,其中MDR菌株11株,XDR菌株31株,采用微量肉汤稀释法和纸片扩散法进行替加环素药物敏感性试验,比较检测结果的符合性。结果微量肉汤稀释法检测替加环素的敏感率、中介率和耐药率分别为97.6%、2.4%和0%,MIC500.5μg/mL,MIC902μg/mL。纸片扩散法药敏检测,不同药敏折点替加环素的敏感率从高到低依次为:Jones标准为28.6%,Kulah C标准为16.7%,FDA标准为2.4%,3种折点标准的中介率都很高,在45.2%～61.9%之间。与微量肉汤稀释法比较,不同药敏折点标准的总误差分别为Jones标准71.4%,Kulah C标准83.3%,FDA标准97.6%。以抑菌环直径≥12 mm作为敏感折点时总误差最小。结论耐药鲍曼不动杆菌的替加环素药敏检测中,纸片扩散法与微量肉汤稀释法之间存在差异,稀释法仍是首选检测手段,如只能行纸片法检测,建议以抑菌环直径≥12 mm判定为敏感。

鲍曼不动杆菌多态性DNA指纹图与药敏谱对医院感染管理的指导作用

目的建立鲍曼不动杆菌(Acinetobacterbaumannii,AB)药敏谱及基因分型指纹图谱,探讨其对医院感染管理的指导作用。方法收集2006年9月至2007年9月神经外科病房住院患者标本中分离的29株AB以及同年从该病房环境中分离的21株AB,以3个月为一期,采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对医院环境中AB和临床标本中分离的AB进行基因分型并建立DNA指纹图谱,同时结合WHO推荐的K-B法进行药敏试验,建立药敏谱,比较临床标本中AB与环境中分离的AB药敏谱与RAPD型间差异,判断相关性,并从中分析对医院感染管理的作用。结果临床标本中AB的药敏谱及分型指纹图谱与环境中AB的药敏谱及分型指纹图谱呈现相关关系。29株临床分离的AB共分12种基因型,15种抗菌药物药敏谱分18个型;呈单一对应关系有10种,一对二的对应关系有2种;二对一的对应关系有一种。21株环境中分离的AB共分10种基因型,15种抗菌药物药敏谱分14个型;呈单一对应关系的有8种,一对二的对应关系的有3种,多株临床标本中AB与环境中AB具有同源性。结论依据AB药敏谱及DNA分型指纹图谱对感染源的确定、防止耐药菌传播和制定一系列防治措施具有极为重要的指导意义。

耐碳青霉烯药鲍曼不动杆菌耐药性及相关耐药基因研究

目的了解临床分离出的对亚胺培南和美罗培南耐药的96株鲍曼不动杆菌耐药基因及耐药敏感性情况。方法对临床分离的96株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌进行碳青霉烯酶表型分析,PCR扩增耐药基因及电泳成像分析,药敏试验分析该菌对哌拉西林/他唑巴坦等15种药物的敏感情况。结果标本主要来源:下呼吸道59株(61.5%),静脉血18株(18.75%),引流液8株(8.3%);主要科室:ICU科室75株(78%),康复医学科5株(5.2%),神经科5株(5.2%);改良Hodge试验阳性菌株69株(71.9%);酶抑制试验显示与表型不相符,存在复合耐药机制;该菌对替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦和环丙沙星的耐药水平达100%,对其余药物如复方新诺明、头孢吡肟、妥布霉素、头孢哌酮/舒巴坦、左旋氧氟沙星、多西环素、头孢他啶耐药水平分别为83.3%、85.4%、88.4%、91.7%、96.9%、98.9%、99.0%,对多粘菌素耐药率为1.1%,替加环素耐药率为4.2%,米诺环素耐药率为36.8%;检出耐药基因OXA-2395株,OXA-5193株,KPC 3株,其余耐药基因未检出。结论碳青霉类耐药鲍曼不动杆菌表现多重耐药及泛耐药现象,OXA-23、OXA-51基因为该院临床碳青霉烯酶主要耐药基因。

鲍曼不动杆菌肺部感染及药物敏感性测定

为了解鲍曼不动杆菌肺部感染患者及其药物敏感性。方法 鲍曼不动杆菌的分离和鉴定用 ATB细菌鉴定仪 ,以琼脂稀释法对分离菌株行药物敏感测定。结果 发现感染者多为慢性阻塞性肺病 (COPD)、多为RICU入院者 ;临床及 X线表现无特异性 ;但均有吸氧、吸痰史 ,8例行气管插管 ,机械通气 7例。药物敏感性测定提示对亚胺培南 (亚胺硫霉素 )、妥布霉素多数敏感 ,而环丙沙星、阿米卡星 (丁胺卡那霉素 )、奈替米星、增效磺胺、庆大霉素、头孢他啶敏感率稍低。结论 感染率较高 ,提示与老年、有基础病及合并症、广谱抗生素及激素应用、呼吸道侵袭性操作、呼吸器具及空气消毒不严格 ,医务人员检查病员、行操作前后未彻底洗手有关。

鲍曼不动杆菌替加环素不同药敏检测方法敏感性对比分析

目的比较采用不同药敏检测方法检测替加环素对鲍曼不动杆菌敏感性的差异。方法 2013年临床分离碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌60株,采用微量肉汤稀释法、MTS测试条法、Vitek2仪器检测法、纸片扩散法分别检测替加环素对鲍曼不动杆菌的敏感性。结果微量肉汤稀释法替加环素敏感性为100.00%,未检测到中介和耐药菌株;MTS测试条法敏感性为81.67%,中介率为18.33%,未检测到耐药菌株;Vitek2仪器法敏感性为50.00%,中介率为43.33%,耐药率为6.67%;纸片扩散法敏感性为45.00%,中介率为45.00%,耐药率为10.00%。结论替加环素对碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌具有较好的抗菌活性,但检测方法的局限性对结果的报告影响较大,以微量肉汤法为标准,MTS测试条法的符合率最高,Vitek2仪器法和纸片扩散法的敏感性显著降低。

基于依从性监测的加强干预对鲍曼不动杆菌感染的防控效果

目的研究基于依从性监测的加强干预措施对重症监护病房(ICU)鲍曼不动杆菌(AB)感染的预防控制效果。方法选取某三甲医院综合ICU 2019年1月—2020年12月住院患者及医务人员为研究对象。2019年1—12月(干预前)进行基线调查,掌握患者AB感染定植的基础情况。2020年1—12月(干预后)实施加强的多重耐药菌防控策略,成立多部门协作管理小组,进行防控措施依从性监测,比较干预前后防控措施依从性、抗菌药物使用情况、医院感染发病率、AB耐药率的变化。结果干预后医务人员防控措施的依从性有所提高,单间隔离执行率由干预前15.52%提高至干预后27.71%,医务人员手卫生、戴手套、穿隔离衣的依从率、环境表面荧光标记清除率均有不同程度提高,差异均有统计学意义(均P<0.001)。干预后抗菌药物使用率(74.24%)低于干预前(80.06%),差异有统计学意义(P=0.002)。干预后抗菌药物使用强度DDDs值低于干预前。干预后患者的医院感染发病率、AB医院感染构成比、耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)医院感染发病率降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。干预前后患者检出主要病原菌均为AB,干预后AB检出构成比(21.24%)低于干预前(30.77%),差异有统计学意义(P<0.05)。AB对亚胺培南、美罗培南的耐药率分别由干预前的76.32%、74.34%下降至干预后的60.58%、58.39%,对替加环素的耐药率由干预前的10.53%下降至干预后的1.46%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论基于依从性监测的加强防控措施对降低ICU内AB医院感染和耐药具有良好的效果。

鲍曼不动杆菌随机扩增多态性DNA法基因分型

目的建立鲍曼不动杆菌(A.baumannii)随机扩增多态性DNA(RAPD)法基因分型图谱。方法以优化的随机引物和反应体系对临床分离的176株鲍曼不动杆菌进行RAPD法基因分型,并按DNA条带数及片段大小绘制指纹图谱。结果176株临床分离鲍曼不动杆菌共得122种RAPD指纹图谱,以第68、58和66型为主要型别,分别为18、15和10株。结论RAPD技术可将临床分离鲍曼不动杆菌分型122种,本院的主要流行基因型为第68、58和66型。

4起耐药鲍曼不动杆菌医院感染聚集性病例调查

目的探讨耐药鲍曼不动杆菌(DRAb)引起医院感染聚集性病例(NICC)的原因。方法对4起DRAb NICC的临床资料及流行病学调查结果进行分析和统计学描述。结果 4起14例DRAb NICC均发生在气候炎热季节,分布于重症监护室(ICU);其中危重患者10例(71.43%),老年患者(>65岁)6例(42.86%);入住ICU时间的中位数为8 d;发生DRAb感染前局部生理屏障均受到破坏。12例(85.71%)为肺部感染(呼吸机相关性肺炎占64.29%);11例(78.57%)为泛耐药Ab感染。发生医院感染前,9例(64.29%)患者有长期联合使用抗菌药物史;感染源2起是输入性的医院感染。结论 DRAb NICC的发生与患者的易感性、隔离与消毒、病区医院感染监控、抗菌药物使用以及Ab的生物学特性等有关。

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对消毒剂抗性试验观察

目的研究临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对消毒剂的抗性水平。方法采用载体定量杀菌试验方法 ,以铜绿假单胞菌标准株做比较,进行实验室观察。结果含有效氯25mg/L消毒液作用1min,对8株临床分离耐亚胺培南鲍曼不动杆菌,杀灭对数值全部>5.00;含有效氯25mg/L消毒液作用1min,对铜绿假单胞菌标准株杀灭对数值>5.00。含有效碘75mg/L消毒液作用3min,对8株临床分离耐亚胺培南鲍曼不动杆菌杀灭对数值全部>5.00;含有效碘75mg/L消毒液作用3min,对铜绿假单胞菌标准株杀灭对数值>5.00。结论未发现临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对本院常用消毒剂产生抗性。

鲍曼不动杆菌感染分布及耐药性分析

目的了解鲍曼不动杆菌的感染分布及其耐药性变化。方法对达州市中心医院2007年1月至2009年12月从临床患者标本中分离的377株鲍曼不动杆菌进行耐药性分析,并用WHONET软件进行数据处理。结果分离的鲍曼不动杆菌主要分布在重症监护病房(ICU)(38.5%),痰标本中分离的鲍曼不动杆菌最多见(74.3%)。鲍曼不动杆菌除对亚胺培南和多黏菌素敏感率较高外,对临床常用的头孢3代和氟喹诺酮类抗菌药物的耐药率大于55.0%。ICU分离株耐药率明显高于普通病房。结论鲍曼不动杆菌对多种抗菌药物耐药,且以ICU分离株最为明显,应加强细菌耐药性监测,合理使用抗菌药物,有效预防和控制感染。

2006～2008年鲍曼不动杆菌感染分布特征及耐药性分析

目的了解鲍曼不动杆菌在本院的分布,动态观察其耐药性发展情况,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法采用回顾性方法统计分析2006～2008年本院178株鲍曼不动杆菌的标本来源及耐药状况。结果本院分离的鲍曼不动杆菌痰标本检出率最高(86.0%)。鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物具有明显的耐药性,除亚胺培南、美罗培南等少数药物敏感率较高外,对其他抗菌药物耐药率较高,哌拉西林、头孢他啶、复方新诺明等耐药率高达60%以上。结论多重耐药的鲍曼不动杆菌感染在临床上呈上升趋势,因此对鲍曼不动杆菌进行规范的连续的耐药监测,及时发现耐药菌株,对临床调整治疗方案、预防医院感染的发生是十分重要的。

鲍曼不动杆菌致医院获得性肺炎88例临床分析

目的探讨鲍曼不动杆菌医院获得性肺炎的临床特点。方法将2003年6月～2006年6月收治的88例鲍曼不动杆菌所致的医院获得性肺炎的临床表现及细菌培养结果加以分析。结果鲍曼不动杆菌肺炎多发生在年老体弱、伴随基础疾病住院的老年患者。鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率最低。结论鲍曼不动杆菌是医院获得性肺炎多重耐药的致病菌,临床上应根据药敏结果选择抗生素。

144株鲍曼不动杆菌耐药性分析

目的了解某院鲍曼不动杆菌的耐药现状及标本分布，为治疗提供依据。方法监测该院2003年1月-2005年12月临床分离的144株鲍曼不动杆菌的耐药性，并对其标本分布进行分析。结果144株鲍曼不动杆菌中有90株（62．50％）来源于痰标本。2003年鲍曼不动杆菌在全年总检出菌株数中构成比为1．70％，2004年为2．10％，2005年为2．60％，三年比较，差异有显著性（P〈0．05）。鲍曼不动杆菌对亚胺培南3年均保持最高的敏感性，耐药率由15．62％逐年下降至5．17％；其次为美罗培南，耐药率为14．00％；对氨苄西林耐药率最高，为96．88％～100．00％；对氨曲南的耐药率由2003年65．62％上升至2005年的100．00％。结论该院近3年鲍曼不动杆菌以呼吸道标本检出为主，分离率逐年升高，以亚胺培南抗菌活性最强，其次为美罗培南。临床医师应慎用抗菌药物，避免多重耐药的鲍曼不动杆菌在医院内传播。

医院感染鲍曼不动杆菌连续4年耐药性分析

目的了解鲍曼不动杆菌在医院感染中的流行及药敏特征,为临床抗感染治疗提供依据。方法对2001-2004年间某院临床送检标本中分离的439株鲍曼不动杆菌的分布及药敏结果进行回顾性分析。结果鲍曼不动杆菌检出科室分布以重症监护病房构成比最高,为31.66%,其次为移植科23.24%;感染部位以呼吸道和手术切口为主,分别占49.91%和40.82%。鲍曼不动杆菌对阿米卡星、头孢哌酮等12种抗菌药的耐药率逐年升高,对左氧氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦、氨苄西林/克拉维酸耐药率无变化,对磷霉素、氨曲南耐药率逐年下降;左氧氟沙星、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦和氨苄西林/舒巴坦耐药率低,可作为抗菌治疗用药。结论鲍曼不动杆菌是目前医院感染重要的条件致病菌,其耐药率呈逐步升高趋势,且多重耐药率高,应引起临床重视。

多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药性和同源性研究

目的了解重症监护病房(ICU)的多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药谱特征及其同源性,为临床防治和控制院内感染提供依据。方法收集该院重症监护病房2007年3～9月分离出的14株鲍曼不动杆菌,采用E-test法测定15种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)并采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析其耐药株的同源性。结果14株菌对头孢菌素类,氨基甙类和氟喹若酮类等抗菌素均显示出较高水平的多重耐药性;RAPD分型11株菌有高度同源性。结论分离自ICU的鲍曼不动杆菌多重耐药率较高,且大多数菌株有高度同源性。