丁酸钠经AMPK/Nrf2/HO-1信号通路调节脂多糖诱导肺泡巨噬细胞极化的作用机制

目的探讨丁酸钠(sodium butyrate,SB)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导肺泡巨噬细胞极化的影响及其作用机制。方法小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S细胞)随机分为对照(Control)组、LPS组、SB组、LPS+SB(LB)组、LPS+SB+腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂(Compound C)(LC)组、LPS+SB+核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385)(LM)组。通过CCK8检测MH-S细胞活力,筛选出最佳的1000 ng/mL LPS、1 mmol/L SB、10μmol/L Compound C、5μmol/L ML385药物浓度进行后续实验;实时荧光定量(qRT-PCR)检测MH-S细胞白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞分化抗原86(CD86)、巨噬细胞甘露糖受体(CD206)、AMPK、Nrf2和血红素加氧酶1(HO-1)的mRNA表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养基上清IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-10蛋白含量;流式细胞术测定M1和M2型巨噬细胞相关标记物CD86和CD206的表达。各组数据通过单因素方差分析和Tukey法进行检验。结果通过CCK8选取了1000 ng/mL LPS、1 mmol/L SB、10μmol/L Compound C和5μmol/L ML385进行造模和干预。qRT-PCR和ELISA结果一致显示,与LPS组比较,LB组M1型巨噬细胞相关促炎细胞因子IL-6、TNF-α、IL-1β显著降低(均P<0.01),但M2型巨噬细胞相关抑炎细胞因子IL-10显著升高(均P<0.01)。qRT-PCR和流式细胞术结果一致显示,与Control组比较,LPS组CD86水平显著升高(均P<0.01),SB组差异无统计学意义;与LPS组比较,LB组CD86表达水平显著降低(均P<0.01),但M2型巨噬细胞标记物CD206的变化趋势与CD86相反。qRT-PCR结果显示,与LPS组比较,LB组促进AMPK/Nrf2/HO-1的表达(均P<0.05);与LB组比较,LC组降低了AMPK/Nrf2/HO-1的表达(均P<0.05),LM组降低了Nrf2/HO-1的表达(均P<0.05)。流式细胞术结果显示,与LB组比较,LC组和LM组逆转了SB对CD86水平的抑制作用(均P<0.01);M2型巨噬细胞标记物CD206的表达趋势与M1型巨噬细胞标记物CD86相反。结论SB通过激活AMPK/Nrf2/HO-1信号通路,抑制LPS诱导的M1型、促进M2型肺泡巨噬细胞极化,改善了炎症反应。

小青龙颗粒联合沙美特罗丙酸氟替卡松干粉对支气管哮喘患者的疗效及血清sCD86、S100A4水平的影响

目的探讨应用小青龙颗粒联合沙美特罗丙酸氟替卡松干粉治疗支气管哮喘患者的临床疗效,对其血清可溶性白细胞分化抗原86(sCD86)、钙离子结合蛋白A4(S100A4)水平的影响。方法选择2019年12月至2020年12月该院收治的64例支气管哮喘急性发作期患者作为研究对象,通过随机数字表法分为研究组和对照组,每组32例。两组患者均给予西医内科常规治疗,对照组在常规治疗的基础上给予沙美特罗丙酸氟替卡松干粉吸入剂吸入治疗,研究组在对照组基础上联合小青龙颗粒口服治疗,均治疗1周。比较两组患者治疗前后血清sCD86、S100A4、肺功能指标、免疫球蛋白水平及哮喘控制测试(ACT)评分变化,综合分析临床疗效。结果研究组治疗有效率为93.75%,明显高于对照组的78.13%(χ^(2)=4.267,P<0.05);治疗后,研究组ACT评分明显高于对照组(t=2.865,P<0.05);治疗后,研究组第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、最大呼气流量(PEF)高于对照组(t=3.012、2.369,P<0.05);治疗后,研究组患者IgA、IgG水平明显高于对照组(t=4.588、3.639,P<0.05);治疗后,研究组血清sCD86及S100A4水平明显低于对照组(t=2.744、11.724,P<0.05);两组患者在治疗期间均未出现明显不良反应,血常规、肝肾功能及凝血指标等检查均未见异常。结论小青龙颗粒联合沙美特罗氟替卡松可有效改善支气管哮喘急性发作期患者的临床症状,改善患者肺功能和免疫功能,降低血清sCD86及S100A4水平,且安全性较高,值得临床推广应用。

茯苓多糖对小鼠肠道分泌型免疫球蛋白A,CD80,CD86表达的影响

目的:观察茯苓多糖对卵清白蛋白(OVA)诱导的小鼠肠道黏膜免疫应答的影响,探讨其对黏膜免疫的调节作用及其相关机制。方法:BALB/c小鼠随机分为2组:对照组和茯苓多糖组,对照组口服给予等体积生理盐水,茯苓多糖组每日按体重口服给药1次,剂量为200 mg·kg-1,2组小鼠给药1周后,1次性给予每只小鼠口服抗原卵清白蛋白(OVA)5 mg进行免疫,分别于免疫后1,2,3周,收集小鼠粪便样本,ELISA检测小鼠粪便OVA特异性分泌型免疫球蛋白A(sIgA);2组小鼠给药1周后,分离小鼠派氏结,流式细胞术检测派氏结(Peyer’s patches)中B淋巴细胞共刺激分子CD80,CD86表达。结果:对照组小鼠粪便中OVA特异性sIgA在1,2,3周时分别为(19.39±2.89),(17.60±5.65),(14.48±4.55)μg·L-1,茯苓多糖组为(28.44±3.72),(42.24±5.14),(26.29±4.82)μg·L-1,与对照组比较有统计学意义(P<0.05)。对照组小鼠派氏结B细胞CD80,CD86表达率(%)分别为1.84±0.11和16.50±1.47;茯苓多糖组表达为2.76±0.29,22.02±1.89,高于对照组,有统计学意义(P<0.05)。结论:茯苓多糖对肠道sIgA分泌具有调节作用,这与其活化派氏结B淋巴细胞有关。