牛白细胞粘附缺陷病(BLAD)的调查

牛白细胞粘附缺陷病（BLAD）是一种常染色体单基因隐性遗传疾病，病因为白细胞表面整合素CD18亚单位基因突变所致。为了解我国奶牛群中BLAD的携带和发生情况，本研究采用RT—PCR扩增CD18基凶片段后，用TaqⅠ内切酶对扩增产物进行酶切的方法榆测了1000头1～6岁的奶牛，结果有19头奶牛为BLAD携带牛，即BLAD携带率为1．9％：1头为BLAD病牛。

黑龙江省某牛场种公牛牛白细胞粘附缺陷病(BLAD)的调查

BLAD（Bovine Leukocyte Adhesion Deficiency）是一种遗传免疫缺陷性疾病,能够引起牛持续感染和严重影响牛生长发育,已给养牛业造成了巨大的经济损失。为了解黑龙江省家畜繁育指导站种公牛BLAD携带及其发生情况,采用RT-PCR扩增牛CD18部分基因片段后,用TaqⅠ对扩增产物进行酶切方法抽样调查了该繁育指导站3~6岁的100头种公牛,调查比例为76.5%,结果没有发现BLAD携带牛和BLAD病牛,说明该单位种公牛不存在BLAD和BLAD携带。

牛白细胞粘附缺陷病(BLAD)检测方法的建立

为了准确诊断牛白细胞粘附缺陷病(bovine leukocyte adhesion deficiency,BLAD),根据BLAD病因,建立RT-PCR(reverse transcriptase PCR)、再进行TaqⅠ酶切扩增产物作为本病检测技术。临床应用表明该方法具有简便、快速、特异性好等优点,所以,该方法建立不仅为BLAD检测带来了方便,同时也给人和其他动物疾病的诊断提供了有利参考。

MGB双探针实时荧光PCR检测牛白细胞粘附缺陷病方法的建立

从福建某奶牛场250头进口荷斯坦牛采血提取牛血液DNA,根据已知牛染色体上CD18编码基因序列383位碱基由A变为G而引起牛白细胞粘附缺陷病设计特异性野生型和突变型探针,建立实时荧光定量PCR检测方法用于牛白细胞粘附缺陷病的基因分型检测。结果检出2头母牛为牛白细胞粘附缺陷病携带者,检出率为0.8%,没有发现患病牛。结果证明本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法是一种敏感性和特异性很高的筛选奶牛牛白细胞粘附缺陷病有害基因的新方法。