血小板-白细胞聚集体及其在川崎病发病中的研究进展

活化的血小板会与单核细胞、中性粒细胞、树突状细胞和淋巴细胞等各类白细胞相互作用,触发细胞间信号转导,从而导致血栓形成和炎症介质的大量合成。已在多种血栓性疾病和炎症性疾病中发现血液中血小板-白细胞聚集体水平升高,该文综述了最新文献,探讨血小板-白细胞聚集体形成机制、作用、检测方法及其在川崎病发病中的相关作用,为川崎病发病机制的研究提供了新思路。

自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶与腘绳肌腱修复创伤性髌骨脱位

背景:临床上创伤性髌骨脱位合并内侧髌股韧带股骨止点或体部撕裂多采用内侧髌股韧带重建手术,为促进内侧髌股韧带重建术后的腱骨愈合,研究者采用了包括生长因子、干细胞、富血小板血浆在内的多种生物治疗技术。目的:探讨自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶联合腘绳肌腱重建内侧髌股韧带修复创伤性髌骨脱位的临床疗效。方法:选择2019年2月至2021年2月秦皇岛市第一医院诊治的创伤性髌骨脱位患者37例,采用随机数字表法分为试验组(n=18)与对照组(n=19),试验组接受自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶联合自体腘绳肌腱重建内侧髌股韧带手术,对照组接受单纯自体绳肌腱重建内侧髌股韧带手术。两组患者术后随访12个月,通过目测类比评分、Lysholm评分、Kujala髌股关节评分及膝关节活动度评估患者膝关节疼痛及功能状态,通过MRI及CT片测量髌股关节髌骨倾斜角、髌骨适合角及髌骨外移率,评估髌股关节的稳定性及改善情况。结果与结论:①两组术后6,12个月的目测类比评分均低于术前(P<0.05),术后6,12个月的Lysholm评分、Kujala髌股关节评分均高于术前(P<0.05);试验组术后6个月的Lysholm评分、Kujala髌股关节评分高于对照组(P<0.05),两组间术后12个月的目测类比评分、Lysholm评分、Kujala髌股关节评分比较差异无显著性意义(P>0.05);②两组术后12个月的髌股关节髌骨倾斜角、髌骨适合角、髌骨外移率及关节活动度测量值均较术前明显改善(P<0.05);试验组术后12个月的髌骨倾斜角小于对照组(P<0.05),两组间术后12个月的髌骨适合角、髌骨外移率及关节活动度及MRI评分比较差异无显著性意义(P>0.05);③结果表明,自体富白细胞-血小板纤维蛋白凝胶联合腘绳肌腱重建内侧髌股韧带能有效治疗创伤性髌骨脱位,改善膝关节功能,恢复髌骨的运动轨迹。

缺血后适应对心肌缺血再灌注损伤大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶和血小板-白细胞聚集体表达的影响

目的:从炎症-血栓机制角度初步探讨缺血后适应减轻心肌缺血再灌注损伤的可能机制。方法:60只SD大鼠随机分为六组:假手术组(n=10)、缺血再灌注(I/R)组(n=10)、缺血后适应组(n=10)、SB203580组(n=10)、Anisomycin+缺血后适应(Ani+缺血后适应)组(n=10)和Ani组(n=10)。建立大鼠心肌缺血再灌注模型,检测心肌损伤标志物血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌钙蛋白I(Tn I)水平,采用流式细胞仪在不同时间点检测血小板-白细胞聚集体(PLA)表达水平,使用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测心肌梗死面积以及利用免疫蛋白印迹法测定磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)表达水平。结果:与I/R组相比,缺血后适应组和SB203580组的CK-MB和Tn I水平、梗死面积和再灌注60 min和3 h时PLA表达水平明显降低(P<0.05)。与缺血后适应组相比,SB203580组、Ani+缺血后适应组和Ani组的上述指标明显升高(P<0.05),Ani组和I/R组之间没有差异(P>0.05)。与I/R组相比,缺血后适应组、SB203580组和Ani+缺血后适应组明显抑制了磷酸化p38MAPK的表达(P<0.05),Ani组的磷酸化p38MAPK表达水平明显升高(P<0.05)。与缺血后适应组相比,Ani+缺血后适应组和Ani组磷酸化p38MAPK表达水平明显升高(P<0.05)。SB203580组具有与缺血后适应组类似的心脏保护作用。在Tn I、CK-MB、梗死面积和PLA水平方面,Ani+缺血后适应的保护作用减弱。结论:缺血后适应通过抑制p38MAPK的磷酸化而减少再灌注过程中PLA的表达,从而减轻缺血再灌注损伤。

外周血白细胞-血小板聚集体在肌钙蛋白阴性的急性冠脉综合症患者和健康人群的分布差异

【目的】观察外周血白细胞与血小板形成的聚集体在肌钙蛋白阴性的急性冠脉综合症患者和健康人群的分布情况。【方法】采集2011年11月-2012年5月期间,我中心收治的66例肌钙蛋白阴性的不稳定心绞痛患者外周血,以枸橼酸钠抗凝后采用流式细胞术分别分析粒细胞-血小板、单核细胞-血小板以及淋巴细胞-血小板聚集体的数量和比例。并采用相同方法对51例性别和年龄匹配的健康体检者进行白细胞-血小板聚集体的检测。【结果】与健康体检者相比,冠心病组患者外周血白细胞血小板聚集体的计数显著高于健康对照组[8 162 cells/μl（6 748-12 925）vs.5 911 cells/μl（4 722-7 252）,P〈0.001;以中位数和四分位间距表示,下同]。单核细胞-血小板聚集体百分比较健康对照组明显升高[23.25%（14.01%-40.40%）vs.17.88%（14.23%-24.25%）,P〈0.05],而粒细胞[9.06%（7.15%-11.48%）vs.9.50%（8.14%-11.30%）,P=0.470]和淋巴细胞[7.32%（6.14%-8.94%）vs.7.23%（5.57%-8.03%）,P=0.321]与血小板聚集体百分比在两组间没有显著性差异。【结论】肌钙蛋白阴性的急性冠脉综合症患者外周血白细胞血小板聚集体较健康人群明显升高,其中单核细胞-血小板聚集体增高更为明显,提示单核细胞-血小板聚集体对于冠心病患者危险分层具有潜在应用价值。

脓毒症患者外周血血小板-白细胞聚集体水平变化的意义

目的探讨脓毒症患者外周血血小板-白细胞聚集体（ PLA）水平变化的意义。方法将100例脓毒症患者分为感染性休克组30例，严重脓毒症组40例，脓毒症组30例，应用流式细胞术检测外周血血小板-中性粒细胞聚集体（ PNA）和血小板-单核细胞聚集体（ PMA）水平，并与30例健康者（对照组）进行比较。以28 d为终点比较预后良好组与预后不良组患者的外周血PLA水平、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ（ APACHEⅡ）和序贯器官衰竭估计评分（SOFA）。结果脓毒症患者外周血PMA和PNA水平明显高于对照组（P＜0．01）；感染性休克组外周血PMA和PNA水平明显高于严重脓毒症组、脓毒症组和对照组（P＜0．01）；严重脓毒症组外周血PMA和PNA水平明显高于脓毒症组和对照组（P＜0．01）；脓毒症组外周血PMA和PNA水平明显高于对照组（ P＜0．05）；预后不良组外周血PMA和PNA水平、APACHEⅡ和SOFA评分明显高于预后良好组（P＜0．01）。结论脓毒症患者外周血PLA水平升高，并与脓毒症严重程度有关，脓毒症患者预后不良组外周血PLA水平高于预后良好组，提示PLA可能在脓毒症损伤机制中起着重要作用。

急性脑梗死患者各类血小板-白细胞聚集体的检测及在临床诊断中的应用

目的检测急性脑梗死患者各类血小板-白细胞聚集体(PLA)水平,探讨其临床应用价值。方法选取58例急性脑梗死患者,其中大动脉粥样硬化性脑梗死(LAA)19例、小动脉闭塞性脑梗死(SAO)39例,以体检健康者20名作为正常对照组。采用流式细胞术检测总PLA、血小板-单核细胞聚集体(PMA)、血小板-粒细胞聚集体(PNA)、血小板-淋巴细胞聚集体(PLy A)和血小板(PLT)CD62P阳性率。采用免疫荧光干式定量法检测高敏C反应蛋白(hs-CRP),以hs-CRP<1.0 mg/L、1.0~3.0 mg/L、>3.0 mg/L将急性脑梗死患者分为低风险组、中度风险组和高风险组。由临床医师依据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)对患者进行评分,以NIHSS<5分为轻度梗死,NIHSS≥5分为中重度梗死。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各类PLA及CD62P诊断急性脑梗死的价值。结果 LAA组、SAO组PMA及LAA组PNA明显高于正常对照组(P<0.05),LAA组PMA与SAO组比较差异无统计学意义(P>0.05)。3组间PLA和PLy A差异均无统计学意义(P>0.05)。SAO组PLT活化后CD62P高于正常对照者(P<0.05)。SAO患者PMA与CD62P阳性率呈正相关(r=0.692,P<0.01)。ROC曲线分析显示,PMA、PNA、CD62P、PLA和PLy A诊断急性脑梗死的ROC曲线下面积分别为0.769(P<0.01)、0.652(P<0.05)、0.686(P<0.05)、0.641(P>0.05)和0.517(P>0.05)。各类PLA与hs-CRP、NIHSS评分之间均无相关性(P>0.05)。结论不同类型PLA在急性脑梗死中的变化不同。PMA与PNA水平在急性脑梗死中升高更显著,对急性脑梗死有一定的诊断意义,但可能不能用于鉴别LAA与SAO以及提示病情严重程度和预后。

急性脑梗死患者血小板-白细胞聚集体的变化

目的探讨急性脑梗死患者血小板-白细胞聚集体(PLA)的变化,及其与血浆C反应蛋白(CRP)、血小板聚集率(PAgT)的关系。方法对46例脑梗死患者(脑梗死组)和24例年龄、性别相配的非脑血管病患者(对照组)进行PLA、CRP和PAgT的检测。结果脑梗死组血小板-单核细胞聚集体(PMA)、PAgT和CRP分别为(13.00±0.76)%、(59.46±3.07)%和(9.39±1.28)mg/L,对照组分别为(6.55±0.29)%、(39.38±5.42)%和(2.37±0.46)mg/L,两组间差异有极显著性(均P<0.01);脑梗死组PLA、血小板-中性粒细胞聚集体(PNA)和血小板-淋巴细胞聚集体(PLyA)高于对照组,但两组间差异无显著性。脑梗死组PMA与CRP和PAgT呈极显著正相关(r=0.390、0.500,均P<0.01)。结论脑梗死急性期患者的炎症反应和血小板活化水平显著增高。

参芎注射液对急性脑梗死患者血小板-白细胞聚集体的影响

目的观察参芎注射液对急性脑梗死(ACI)患者血小板-白细胞聚集体(PLA)的影响。方法将51例AC I患者随机分为阿司匹林组和阿司匹林+参芎注射液组,检测两组治疗前后PLA、血小板中性粒细胞聚集体(PNA)、血小板淋巴细胞聚集体(PLyA)和血小板单核细胞聚集体(PMA)的水平,以及血小板聚集率(PAR)、C反应蛋白(CRP)、血白细胞、血小板、血脂、血糖和纤维蛋白原(Fg)水平、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的变化。结果阿司匹林组:PLA、PNA、PLyA以及CRP均有下降趋势,但与治疗前比较差异无统计学意义,而PMA、PAR以及NIHSS评分较治疗前明显降低(均P<0.05)。阿司匹林+参芎注射液组:PLA、PMA、PAR、CRP以及NIHSS评分较治疗前明显下降(均P<0.05),其中PMA和PAR下降较阿司匹林组更为明显(均P<0.05),而PNA、PLyA有下降趋势但与治疗前差异比较无统计学意义。两组治疗前后白细胞、血小板、血脂、血糖和Fg水平的差异均无统计学意义。结论参芎注射液具有协同抗血小板活化与聚集,抑制PLA,特别是PMA形成的作用,此外还具有一定的抗炎功效。

基线血小板-白细胞聚集体水平对NSTE-ACS患者近期预后的预测价值

目的探讨基线血小板-白细胞聚集体（PLA）水平对非ST段抬高型急性冠状动脉综合征（NSTE-ACS）患者近期主要不良心脏事件（MACE）的预测价值。方法共纳入114例患者,其中NSTE-ACS组72例,对照（CTL）组42例,分析比较两组患者相关临床资料;采用全球急性冠状动脉事件注册（GRACE）评分将NST-ACS患者分为低危组和高危组,比较两组PLA、血小板-单核细胞聚集体（PMA）、血小板-中性粒细胞聚集体（PNA）及血小板-淋巴细胞聚集体（PlyA）水平,并对PLA、PMA、PNA及PlyA水平与GRACE评分分数进行Spearman相关性检验;对NST-ACS组患者近期（出院后8个月内）MACE进行随访,使用受试者工作特征（ROC）曲线评价基线PLA水平对NST-ACS患者近期MACE的预测价值。结果与CTL组相比,NST-ACS组PLA、PMA、PNA及PLyA均升高（P〈0.01）;高危组NSTE-ACS患者PLA、PMA、PNA及PLyA均较低危组明显升高（均P〈0.01）;NST-ACS患者GRACE评分分数与基线PLA、PMA、PNA及PlyA水平均成正相关（r值分别为0.597、0.634、0.487、0.435,P〈0.01）;经随访,共有13.89%的NSTE-ACS患者发生了近期MACE;入院时PLA水平预测NSTE-ACS组出院后8个月内MACE的ROC曲线下面积为0.753（95%CI：0.737~0.779,P〈0.01）。结论基线PLA水平升高可能预示NSTE-ACS患者的不稳定状态;基线PLA水平不但可用于NSTE-ACS患者的早期快速危险分层,还可对NSTE-ACS患者近期MACE进行预测。

阿司匹林抵抗联合血小板-白细胞聚集体检测对急性脑梗死患者早期神经功能恶化的预测价值

目的 探讨阿司匹林抵抗（AR）联合血小板-白细胞聚集体（PLA）检测对急性脑梗死（ACI）患者早期神经功能恶化（END）的预测价值，旨在为早期识别END及临床干预提供参考。方法 选取ACI患者197例，均于患者入院当天行AR检测、PLA检测，于入院时以及入院后24、48、72 h采用美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评估患者的神经功能情况，记录END发生情况，据此分为END组、非END组。依次对两组的可能相关影响因素进行单因素分析和多因素Logistic回归分析。结果 197例ACI患者中，发生END者49例，END发生率为24.87%。根据AR的判定标准，END组AR 23例、阿司匹林半抵抗（ASR） 15例、阿司匹林敏感（AS） 11例，非END组AR 17例、ASR 29例、AS 102例。经单因素分析，END组AR、ASR及PLA、血小板粒细胞聚集体（PNA）、血小板单核细胞聚集体（PMA）、血小板淋巴细胞聚集体（PLyA）均高于非END组（P＜0.05或P＜0.01）。多因素Logistic回归分析显示，AR及PLA、PMA、PNA、PLyA均为发生END的独立危险因素，存在AR及PLA、PMA、PNA、PLyA水平越高的患者，发生END的风险越高（P＜0.05）。结论AR和血小板活化可能都是ACI患者发生END的重要危险因素，AR联合PLA检测对于预测END的发生可能具有积极的临床意义，据此及时调整抗血小板策略，有望减少END的发生。

血小板-白细胞聚集体在急性脑梗死患者及其短期预后的水平变化

目的探讨急性脑梗死患者血小板白细胞聚集体(PLA)与短期预后的关系。方法连续纳入发病24h内入院的急性脑梗死患者105例,并分别在入院24h内,发病14d时用流式细胞仪检测PLA,包括血小板中性粒细胞聚集体(PNA)、血小板单核细胞聚集体(PMA)、血小板淋巴细胞聚集体(PlyA);发病14d时进行改良Rankin量表(mRS)评分,作为评价短期预后的指标,mRS评分<3分为预后良好。mRS评分>3分为预后不良。选择50例健康体检者检测血小板-白细胞聚集体水平。结果急性脑梗死组与健康体检组比较血小板-白细胞聚集体明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。mRS评分<3分预后良好与>3分比较,白细胞-聚集体差异有统计学意义(P<0.05)。结论白细胞聚集体可以作为急性脑梗死短期预后的评价指标。

急性脑梗死患者血小板-白细胞聚集体的检测及其临床意义

目的探讨血小板-白细胞聚集体(platelet-leukocyte aggregates,PLA)的检测对急性脑梗死(acute cerebral infarction,ACI)患者的意义。方法用双标记流式细胞术检测65例ACI患者和24例对照组的PLA、血小板-中性细胞聚集体(PNA)、血小板-淋巴细胞聚集体(PLyA)、血小板-单核细胞聚集体(PMA),用血液凝集仪检测血小板聚集率(PAR),用ELISA法检测可溶性P选择素(sP-sel),用免疫散射比浊法检测C-反应蛋白(CRP)。结果ACI患者PLA(4.12±1.17)%、PNA(4.09±1.27)%和PLyA(4.28±1.09)%与对照组[分别为(4.10±0.99)%、(3.98±1.12)%、(4.01±1.98)%]无显著差异,PMA治疗前(11.54±1.88)%高于治疗后(8.40±2.74)%,P<0.01;治疗后又显著高于对照组(6.69±1.74)%,P<0.01,治疗前PMA水平与PAR、sP-sel、CRP正相关(r=0.554、0.447和0.514,均P<0.05)。结论PMA是反映ACI患者血小板活化的良好指标,并能反映机体炎症水平,在ACI的发生和发展过程中起着重要作用。

2型糖尿病患者血管病变与血小板-白细胞聚集体的相关性

目的探讨2型糖尿病患者血小板-白细胞聚集体(PLA)的变化及其与血管病变的关系。方法应用流式细胞术检测71例糖尿病患者组及正常对照组34例外周血中血小板-中性粒细胞聚集体(PNA)、血小板-单核细胞聚集体(PMA)的表达水平。结果糖尿病组的PNA和PMA的阳性表达率分别为(25.17±8.89)%和(40.22±18.64)%,均明显高于对照组的(15.43±4.70)%和(18.44±6.61)%(P<0.01)。糖尿病合并血管病变组患者的PNA、PMA比单纯糖尿病组患者升高更明显(P<0.05和P<0.01);血管病变损伤区域≥3和≥2时,PNA及PMA的百分率明显高于无血管病变组(P<0.01)。结论2型糖尿病患者的PLA明显升高,与糖尿病血管病变具有相关性。PMA的升高可作为反映糖尿病血管病变的标记。

血小板-白细胞聚集体对急性心肌梗死患者直接经皮冠状动脉介入治疗预后价值

目的研究血小板-白细胞聚集体(PLA)对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者直接经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后的预后价值。方法入选连续就诊并行直接PCI的STEMI患者156例,采集主动脉窦动脉血,利用流式细胞仪测定PLA,将患者分为PLA高值组与低值组。根据心电图ST段回落率及冠状动脉造影评价心肌灌注,随访患者术后主要心脑血管不良事件(MACCE)。结果 (1)PLA高值组与PLA低值组相比,发病至介入时间长,中性粒细胞比例、高敏C反应蛋白、丙二醛升高,射血分数及ST段回落率降低(P<0.05)。平均随访17.50个月,发生MACCE 36例(23.07%),PLA低值组MACCE 19例(17.8%),PLA高值组MACCE 17例(34.7%),PLA高值组MACCE发生率明显高于PLA低值组(χ~2=5.43,P<0.05)。(2)Kaplan-Meier生存分析显示,PLA高值组MACCE的发病风险明显高于PLA低值组(Log-rank检验P<0.01)。(3)Cox回归模型显示,中性粒细胞比例(RR:1.132,95%CI:1.002~1.280)与PLA升高(RR:1.101,95%CI:1.013~1.196)与MACCE事件发生相关。结论 PLA可用于评价心肌灌注不良,并与急性心肌梗死直接PCI后MACCE发生有关。

急性脑梗死患者血小板-白细胞聚集体的动态变化及意义

目的探讨急性脑梗死患者血小板-白细胞聚集体(platelet-leukocyte aggregation,PLA)的动态变化及其临床意义。方法收集作者医院就诊的158例急性脑梗死患者以及30名健康体检者(对照组)为研究对象,根据瘫痪肢体肌力或神经功能评分量表(NIHSS)评分变化将脑梗死患者分为进展性脑梗死组和无进展脑梗死组,采用流式细胞技术检测健康对照组以及脑梗死患者不同时期的PLA水平。结果进展性脑梗死组血小板-单核细胞聚集体(platelet-monocyte aggregations,PMA)水平在进展期明显升高,而后逐渐下降(P<0.05),无进展脑梗死组PMA水平逐渐下降,差异有统计学意义(P<0.05);进展性和无进展脑梗死组PLA、血小板-淋巴细胞聚集体(platelet-lymphocyte aggregations,PLyA)、血小板-中性粒细胞聚集体(platelet-neutrophilic aggrega-tions,PNA)水平无明显动态变化(P>0.05);PMA水平与NIHSS评分呈正相关(r=0.12,P<0.05)。结论 PLA不仅在脑梗死的发病中发挥作用,而且可反映急性脑梗死患者病情的严重程度。

血栓弹力图参数联合血小板-白细胞聚集体检测对急性脑梗死患者早期神经功能恶化及预后的预测价值

目的分析血栓弹力图(TEG)参数联合血小板-白细胞聚集体(PLA)检测对急性脑梗死(ACI)患者早期神经功能恶化(END)及预后的预测价值。方法收集2019年10月至2021年7月我院收治的94例ACI患者。根据发病72 h内NIHSS评分较基线增加≥2分为END组32例,<2分为非END组62例,比较END组与非END组、不同预后患者TEG参数如凝血因子激活时间(RT)、血块形成速率(KT)、凝固角(α-Angle)及弹力图最大振幅(MA)、PLA变化情况。分析TEG参数、PLA与ACI患者病情、预后的相关性。分析TEG参数、PLA单一与联合检测对ACI患者END的预测价值。结果END组RT、KT值均较非END组短,PLA较非END组高(P<0.05);两组α-Angle及MA值比较差异无统计学意义(P>0.05)。预后良好组KT值较预后不良组高,α-Angle、MA值及PLA较预后不良组低(P<0.05);但两组RT值比较差异无统计学意义(P>0.05)。KT与ACI患者NIHSS、mRS评分均呈负相关,PLA与上述评分呈正相关(P<0.05);α-Angle、MA与ACI患者NIHSS评分无相关性(P>0.05),与mRS评分呈正相关(P<0.05);RT值与NIHSS评分呈负相关(P<0.05),与mRS评分无相关性(P>0.05)。TEG参数、PLA联合检测预测ACI患者END的曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度均高于单一检测。结论TEG参数、PLA检测可有效预测ACI患者END、评估患者预后,联合检测TEG参数、PLA的预测价值更高。

血小板-白细胞聚集体在进展性脑梗死中的作用

目的探讨血小板-白细胞聚集体(platelet-leukocyte aggregation,PLA)在进展性脑梗死发病中的作用。方法检测158例急性脑梗死患者血压、血糖、血脂、C反应蛋白(CRP)、纤维蛋白原、PLA,并分析进展性脑梗死发生的危险因素。结果 158例脑梗死中,37例发展为进展性脑梗死。进展性脑梗死组入院次日血小板-单核细胞聚集体(platelet-monocyte aggregations,PMA)高于无进展性脑梗死组(P<0.05),而PLA、血小板-淋巴细胞聚集体(platelet-lymphocyte aggregations,PLyA)、血小板-中性粒细胞聚集体(platelet-neutrophilic aggregations,PNA)在两组间的比较无统计学意义(P>0.05);PMA水平与血糖、血胆固醇、CRP、纤维蛋白原、收缩压呈正相关;收缩压(OR0.11,95%CI 0.05～0.28,P=0.00)、PMA(OR 5.65,95%CI 2.47～12.96,P=0.00)为进展性脑梗死发生的独立危险因素。结论血小板-白细胞聚集体在进展性脑梗死的发病过程中发挥重要作用。

血小板-白细胞聚集体促进大鼠心肌缺血再灌注损伤及缺血后适应的保护作用

目的观察缺血后适应(Post C)对大鼠心肌缺血再灌注过程中血小板-白细胞聚集体(PLA)表达的影响,探讨缺血后适应Post C减轻心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的机制。方法将60只SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、缺血再灌注(I/R)组、缺血后适应(Post C)组、c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂(I-JNK)组、JNK激活剂+缺血后适应(Ani+Post C)组和JNK激活剂(Ani)组6组。构建大鼠心肌缺血再灌注模型,利用肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌钙蛋白I(Tn I)试剂盒检测心肌损伤标志物水平;采用流式细胞仪在基础状态、缺血30 min、再灌注30 min、再灌注60 min及再灌注3 h检测PLA表达水平;使用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测心肌梗死面积;利用Western blot方法测定磷酸化JNK(P-JNK)表达水平。结果 (1)I/R组CK-MB、Tn I水平及心肌梗死面积高于Sham组(P<0.05);Post C组和I-JNK组CK-MB、Tn I水平和梗死面积低于I/R组(P<0.05);与Post C组相比,Ani+Post C组和Ani组CK-MB、Tn I水平和梗死面积明显升高(P<0.05)。(2)与Sham组相比,I/R组缺血后各时间点PLA表达水平升高(P<0.05)。在MIRI不同时间点,I/R组、Ani+Post C组及Ani组PLA表达水平逐渐上升(P<0.05);在再灌注60 min和3 h,与I/R组相比,Post C组和I-JNK组PLA表达水平明显降低(P<0.05)。与Post C组相比,Ani+Post C组和Ani组PLA表达水平明显升高(P<0.05)。(3)I/R组P-JNK水平高于Sham组(P<0.05)。Post C和I-JNK抑制了P-JNK的生成(P<0.05),而Ani促进P-JNK水平升高(P<0.05);与Post C组相比,Ani+Post C组和Ani组P-JNK水平明显升高(P<0.05)。结论 Post C通过抑制JNK MAPK的磷酸化而减少再灌注过程中PLA的表达,从而减轻MIRI。

富白细胞-血小板纤维蛋白在大鼠牙髓修复中的应用

目的探讨富白细胞-血小板纤维蛋白(leukocyte-and platelet-rich fibrin,L-PRF)作为盖髓剂对大鼠牙髓炎症调节的作用。方法脂多糖(LPS)构建牙髓炎大鼠模型,30只大鼠随机分成5组,即正常对照组、LPS造模组、iRoot BP PLUS组、L-PRF组、L-PRF+iRoot BP PLUS组。直接盖髓14 d后取标本行显微CT(Micro-CT)扫描、苏木精-伊红(HE)及Masson染色、定量实时聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测,观察牙髓炎症及硬组织形成程度。结果Micro-CT示:LPS组未见硬组织形成,L-PRF组冠髓内可见斑块状钙化物,BP组及联合组在穿髓孔处见较完整的钙化桥。组织学染色示:LPS组炎症最重、无硬组织形成;联合组炎症最轻,硬组织形成最完整、连续,两组差异有统计学意义(P<0.01);BP组与联合组的炎症及硬组织形成程度均差异无统计学意义(P>0.05)。qRT-PCR结果示:各实验组牙髓组织中TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA相对表达水平相较于LPS组均有所降低,但L-PRF组与LPS组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论L-PRF联合iRoot BP PLUS作为复合盖髓材料,可用于大鼠牙髓炎牙髓组织修复以及牙髓炎症调节。

脓毒症患者外周血血小板-白细胞聚集体及其分类水平对合并ARDS的预测价值

目的探究脓毒症患者外周血血小板-白细胞聚集体(PLA)及其分类水平对合并急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的预测价值。方法对2015年1月至2018年5月间新疆医科大学第一附属医院收治的150例脓毒症患者进行分析,根据是否出现ARDS分为脓毒症组(非ARDS患者,90例)和ARDS组(发生ARDS患者,60例)。所有患者均行流式细胞术进行PLA检测和急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分及序贯器官衰竭评估(SOFA)评分,比较两组PLA水平及血小板单核细胞聚集体(PMA)、血小板中性粒细胞聚集体(PNA)、血小板淋巴细胞聚集体(PLyA)水平和APACHEⅡ、SOFA评分的差异,以"ARDS柏林定义"作为"金标准",应用受试者工作曲线(ROC)评价上述指标在预测脓毒症合并ARDS中的效能。结果 ARDS组的PLA和PMA水平以及APACHEⅡ和SOFA评分明显高于脓毒症组(t=4.025、8.328、6.599、7.029,P=0.005、0.000、0.000、0.000),ARDS组和脓毒症组的PNA和PLyA水平间无明显差异(t=1.023、1.267,P=0.308、0.207);ROC曲线显示,PMA预测脓毒症合并ARDS的曲线下面积最高(AUC=0.860,P=0.029),其次为SOFA评分、APACHEⅡ评分和PLA(AUC=0.741、0.723、0.669,P=0.040、0.044、0.046),其中PMA的AUC分别高于PLA(Z=3.469,P=0.001)、APACHEⅡ评分(Z=2.536,P=0.011)和SOFA评分(Z=2.430,P=0.015),PMA的最佳截点为≥13.99%。PMA预测脓毒症患者发生ARDS的灵敏度为86.67%,明显高于PLA、APACHEⅡ评分和SOFA评分,差异均有统计学意义(F=9.257,P=0.004)。结论脓毒症合并ARDS患者具有较高的外周血PLA水平,其中PMA升高更为明显;PMA在早期预测ARDS中有较高的灵敏度,其最佳截点为≥13.99%。