白背三七总黄酮对糖尿病大鼠的降血糖作用

目的分析白背三七总黄酮对糖尿病大鼠的降血糖作用。方法选择对大鼠进行尾静脉链脲佐菌素注射,对患有糖尿病的大鼠模型完成复制,并针对白背三七总黄酮治疗糖尿病大鼠的空腹血糖(FPG)等数据变化展开分析。结果给药后,白背三七总黄酮高剂量以及中剂量组大鼠的FPG、TG、CH、SOD与模型对照组对比,差异有统计学意义(P<0.05)。在为大鼠进行给药的第1个月后,白背三七总黄酮不同剂量组大鼠在血清TG、CH上也分别呈现出不同程度的降低,与模型对照组对比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论白背三七总黄酮应用于糖尿病大鼠不但能够控制病情,同时还能够改善自身的新陈代谢情况。

白背三七中吡咯里西啶生物碱的含量分析及风险评价

目的建立超高效液相色谱串联质谱法(ultra performance liquid chromatograph tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定白背三七中芝麻菜叶千里光碱-N-氧化物、春千里光碱、野百合碱、春千里光碱-N-氧化物、倒千里光碱、千里光菲灵碱和千里光宁碱的含量,依据检测结果对其进行初步风险评价。方法用Agilent Poroshell 120 SB-C_(18)色谱柱(150 mm×3.0 mm,2.7μm),流动相A为1 mL·L^(-1)甲酸和5.0 mmol·L^(-1)甲酸铵水溶液,B为1 mL·L^(-1)甲酸的甲醇,梯度洗脱。电喷雾离子源,正离子多反应模式监测。结果7种吡咯里西啶生物碱在各自质量浓度范围内线性关系良好(r>0.9970);平均加样回收率为89.31%~92.16%,RSD值为2.02%~3.48%。5批白背三七样品中倒千里光碱的含量范围为158.76~1714.89μg·kg^(-1)。结论建立的UPLC-MS/MS法稳定可行,可为白背三七中吡咯里西啶生物碱的质量控制和安全性评价提供科学依据。

白背三七地上部分的化学成分

AIM: To investigate the chemical constituents of aerial parts of Gynura divaricata(L.)DC.METHODS: Chemical constituents were isolated with multi-chromatographic methods.Their structures were determined by spectral analysis and chemical evidence.RESULTS: 10 compounds were obtained and identified as quercetin(Ⅰ),3-O-β-Dglucopyranosyl quercetin(Ⅱ),3-O-β-D-(6→1) glucopyranosyl-αL-rhamnosyl quercetin(Ⅲ),3-O-β-D-(6→1)glucopyranosyl-α-L-rhamnosyl kaemferol(Ⅳ),epi-friedelinol(Ⅴ),epi-friedelinol acetatd(Ⅵ),β-sitosterol(Ⅶ),stigmasterol(Ⅷ),adenosine(Ⅸ) and uridine(Ⅹ).CONCLUSION: All these compounds were isolated from this plant for the first time.

白背三七总黄酮对糖尿病大鼠的降血糖作用

目的:观察白背三七总黄酮对糖尿病大鼠的降血糖作用。方法:采用尾静脉注射链脲佐菌素的方法复制糖尿病大鼠模型,观察白背三七总黄酮对糖尿病大鼠体质量、摄食量、饮水量、空腹血糖(FBG)、血清糖化血红蛋白(GHB)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量及胰腺组织病理变化的影响。结果:白背三七总黄酮能够降低糖尿病大鼠摄食量、饮水量、FBG和血清GHB、TG、CH含量,升高血清SOD含量,降低血清MDA含量,减轻胰腺胰岛β细胞病变。结论:白背三七总黄酮能够改善糖尿病大鼠高血糖症状,其机制可能与其改善脂质代谢,抗脂质过氧化和抑制胰腺组织细胞病理变化有关。

白背三七地上部分化学成分研究

目的:对白背三七地上部分进行化学成分研究。方法:应用硅胶柱、薄层制备、葡聚糖凝胶等色谱技术分离纯化,应用波谱技术确定化合物的结构。结果:从白背三七中分离得到了10个化合物,分别为:2-(1,′2,′3,′4′-四羟基丁基)-6-(2,″3,″4″-三羟基丁基)-吡嗪(1)、掌叶半夏碱庚(2)、烟酸(3)、5-羟基吡啶羧酸(4)、5-羟基吡啶-2-甲酸甲酯(5)、腺苷(6)、尿苷(7)、豆甾醇葡萄糖苷(8)、对苯二甲酸二丁酯(9)、绿原酸甲酯(10)。结论:化合物1、2、5、9、10为首次从该属植物中分离得到,化合物3、4为首次从该植物中分离得到。

白背三七多糖的提取纯化及含量测定

目的确定白背三七多糖的最佳提取方案,对其多糖进行分离纯化和含量测定。方法建立正交实验,对其提取方案进行优化;通过Sevage法脱蛋白、乙醇沉淀以及DEAE-52柱层析进行分离纯化;蒽酮-硫酸法测定其总多糖含量。结果温度90℃,固料比1:9,提取时间2 h;提取次数2次,所得多糖的含量最高。蒽酮-硫酸法测得粗多糖含量为1.49%;DEAE-52柱层析分离纯化分别得到组分Ⅰ、组分Ⅱ、组分Ⅲ。结论水提白背三七多糖工艺简便,投资少,有利实现工业化大生产。

超声辅助提取白背三七总黄酮

目的:超声辅助提取白背三七干叶、鲜叶、干茎和鲜茎中的总黄酮,探讨超声促进提取的原因。方法:用单因素试验法考察液料比、提取时间和乙醇体积分数对黄酮提取率的影响,并与常规溶剂提取法进行对比。用扫描电镜研究超声处理后白背三七叶片的结构改变。结果:超声提取最优条件为每克植物材料用30mL 70%乙醇溶液提取15min,重复提取2次;对白背三七的相同部位超声提取时,新鲜材料提取率明显高于干的植物材料。结论:超声提取白背三七总黄酮时,提取效率较高、时间短,其高效率可能来源于超声波对材料表明细胞壁的强烈损伤。

白背三七化学成分研究

目的提取分离白背三七地上部分的化学成分。方法运用反复硅胶柱色谱技术提取分离化学成分，根据波谱数据和理化性质确认其平面和立体结构。结果从白背三七地上部分得到10个化合物，经鉴定分别为正二十烷（n-Eicosane 1），二十四烷醇（Tetracosanol 2），二十八烷酸（Octacosanoic acid3），二十八烷醇（Octacosyl alcohol 4），棕榈酸（Palmitic acid 5），豆甾醇-3-O-β—D-吡喃葡萄糖苷（Stigmasterol-3-O—β—D—glucopyranoside 6），豆甾醇（Stigmasterol 7），β-谷甾醇（β—Sitosterol 8），胡萝卜苷（Daucosterol 9），木栓酮（Friedelin 10）。结论化合物1—6，9，10为首次从该植物中获得。

不同光环境对紫背天葵和白背三七生长及光合荧光特性的影响

以紫背天葵(Begonia fimbristipula)和白背三七(Gynura divaricata)两种优良野生蔬菜为研究对象,研究了自然全光照(L0)、郁闭度约50%林下(L1)、郁闭度约70%林下(L2)3种光环境下植株的生长及光合和荧光参数变化,以明确其耐荫性以及林下套种的可行性。结果显示:(1)紫背天葵和白背三七地径和株高在L0和L1处理之间无显著差异,而在L2处理下显著低于L0。(2)两种野菜最大净光合速率(Pmax)、光饱和点(LSP)、光补偿点(LCP)均随光照强度减弱逐渐降低,表观量子效率(AQY)在3种光环境下无显著差异;PSⅡ潜在最大量子产量(Fv/Fm)、光化学荧光猝灭系数(qP)和电子传递速率(ETR)也随光照强度减弱而减小,非光化学荧光猝灭系数(NPQ)却随光照强度减弱而增加。(3)两种野菜光合和荧光参数在L0和L1处理之间无显著差异,而在L2处理下显著低于L0。研究表明,在较大郁闭度林分下,紫背天葵和白背三七叶片叶绿素分子捕获激发能的效率降低,其PSⅡ吸收光能用于光化学电子传递的份额减少,而用于热耗散的份额增加,电子传递活性和通过电子传递链传递的能量降低,净光合速率下降,植株生长受到抑制;两种野菜均具有一定的耐阴性,可以在林分郁闭度50%左右的林下正常生长。

白背三七多糖的结构表征及α-葡萄糖苷酶的抑制活性

采用气相色谱、高碘酸氧化、Smith降解、部分酸水解和13C-NMR对白背三七分离多糖GDPs-1和GDPs-2的一级结构进行表征;通过刚果红实验和X射线衍射对其高级结构进行初步探究;并研究各种多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果表明:DPs-1由D-Fru、L-Rha、L-Ara、D-Xyl、D-Man、D-Glu和D-Gal组成,物质的量比为0.2:0.4:1:1:1:2:7;GDPs-2由L-Ara、D-Man、D-Glu和D-Gal组成,物质的量比为0.4:2:2:0.1;高碘酸氧化、Smith降解、部分酸水解和13C-NMR显示GDPs-1主链重复单元为α-(1→2)-Gal残基,支链由α-(1→3)-Xyl、α-(1→3)-Man、α-(1→2)-Glu、Me-α-Araf构成;GDPs-2主链重复单元为α-(1→3)-Man残基,支链由α-(1→2)-Glu和α-(1→6)-Glu组成;刚果红实验表明GDPs-2分子存在较为稳定的三股螺旋构象;X射线衍射显示2种多糖分子规整性不强,以多晶体无定形态存在;体外降血糖研究表明,白背三七粗多糖GDPs-1和GDPs-2对α-葡萄糖苷酶的抑制活性均极低,提示其并非通过抑制α-葡萄糖苷酶活性来实现降血糖功效。

滁菊总黄酮和白背三七总黄酮配伍对糖尿病血瘀证大鼠血糖及血液流变学的影响

目的观察滁菊总黄酮和白背三七总黄酮配伍对糖尿病血瘀证大鼠空腹血糖(FBG)及血液流变学指标的影响。方法采用饲喂高脂饲料复合链脲佐菌素(STZ)的方法复制2型糖尿病大鼠模型,再注射强的松龙和肾上腺素制备糖尿病血瘀证大鼠模型。观察滁菊总黄酮和白背三七总黄酮配伍对糖尿病血瘀证大鼠体质量、空腹血糖(FBG)、全血黏度和血浆黏度、血沉和红细胞压积、凝血参数及二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)诱导的血小板聚集的影响。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠体质量显著减轻,全血黏度和血浆黏度、血沉和红细胞压积及血小板聚集率显著增加,活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)明显缩短,纤维蛋白原(FIB)水平明显升高。与模型对照组比较,滁菊总黄酮或白背三七总黄酮单独应用均能显著降低模型大鼠全血黏度和血浆黏度,降低血沉和红细胞压积,延长PT,降低FIB水平,白背三七总黄酮还具有降低FBG作用。与单独应用滁菊总黄酮或白背三七总黄酮比较,滁菊总黄酮和白背三七总黄酮配伍能显著抑制大鼠体质量减轻,降低血沉、红细胞压积及抑制ADP、AA诱导的血小板聚集作用明显增强,显著延长APTT、TT;另外,滁菊总黄酮和白背三七总黄酮配伍降低FBG作用明显强于白背三七总黄酮,降低FIB作用显著强于滁菊总黄酮。结论滁菊总黄酮和白背三七总黄酮配伍改善糖尿病血瘀证大鼠FBG和血液流变学异常作用显著增强。

白背三七总黄酮的提取工艺研究

目的:考察白背三七总黄酮的提取工艺。方法:以总黄酮得率为主要考察指标,出膏率为参考指标,采用单因素试验法考察浸泡时间、药材部位、药材粒径等10个影响因素,用正交试验法考察乙醇浓度、提取温度、料液比等3个影响因素。结果:单因素试验得出的优化工艺条件:提取方法为超声法,浸泡时间50 min,药材部位为茎与叶,乙醇浓度60%,药材粒径≤12目,提取温度60℃,料液比1:40,超声时间15 min,超声功率500 W,提取次数2次。正交试验得出的最佳提取工艺:用40倍量60%的乙醇,在60℃下超声提取2次。结论:该提取工艺可为中药白背三七的开发利用提供参考。

白背三七叶中吡咯里西啶生物碱的LC-MS^n检测

The pyrrolizidine alkaloids(PAs) in leaf of Gynura divaricata(L.) DC.was analyzed by LC-MSn technique.The result shows that two hepatotoxic pyrrolizidine alkaloids(HPAs) are detected from the methanol extract of G.divaricata leaf,with relative molecular weight of 335 and 365,respectively and lower content.The constituent with relative molecular weight 335 is a retronecine-type alkaloid,and identified as integerrimine;another constituent with relative molecular weight 365 is an otonecine-type alkaloid,speculated to be isomer of usaramine or 18-hydroxyinterrimine.

白背三七黄酮类化合物的提取及抗氧化性评价

采用乙醇提取法从白背三七叶中提取具有生物活性的黄酮类化合物,并对其抗氧化活性进行综合评价。通过正交试验,确定了白背三七黄酮类化合物提取的最优工艺条件:乙醇体积分数80%,料液比1∶25(质量体积比),提取温度65℃,提取时间120 min。在此条件下,黄酮类化合物平均得率3.81%;抗氧化试验结果表明白背三七黄酮类化合物具有较强的抗氧化能力,且呈明显的剂量效应。对Fe3+的还原能力与VC接近(P>0.05),而远高于BHT;对DPPH自由基和ABTS自由基均具有很好的清除效果,其IC50值分别为0.039 mg/ml和0.062 mg/ml。白背三七黄酮类化合物对DPPH自由基的清除能力极显著高于对照组BHT和VC(P<0.01),对ABTS自由基清除能力显著强于VC,但不如BHT。

白背三七总黄酮对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响

目的观察白背三七总黄酮对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响。方法采用高糖高脂饲料喂养加腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立2型糖尿病胰岛素抵抗模型。设空白组、模型组、阳性药二甲双胍组、白背三七总黄酮高剂量组、中剂量组及低剂量组,给药6周后测各组大鼠糖耐量(GTT),空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(GHb)和血清胰岛素(FINS)水平,计算胰岛素敏感指数(ISI)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),RT-PCR法检测肝细胞膜胰岛素受体(InsR)mRNA表达。结果高剂量及中剂量白背三七总黄酮组大鼠的糖耐量得到显著改善(P<0.01),FPG、GHb、FINS及HOMA-IR水平显著减少(P<0.01),ISI水平显著上升(P<0.01),肝细胞膜InsR mRNA的表达显著增强(P<0.05或P<0.01)。结论白背三七总黄酮能够改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗,其作用机制可能与上调InsR mRNA的表达有关。

白背三七组织培养技术

【目的】探讨不同激素配比对白背三七离体繁殖的影响,建立白背三七种苗再生繁殖体系。【方法】以当年生枝条为外植体,采用不同激素组合(0～0.1mg/L6-BA、0～0.2mg/LKT、0～0.2mg/L2,4-D以及0～0.4mg/LIBA、0～0.4mg/LNAA)对带芽茎段进行不定芽诱导和增殖、壮苗和生根培养。【结果】在添加相同KT、2,4-D条件下,添加过高的6-BA(1.0mg/L)会降低丛生芽增殖系数;而在相同6-BA、KT的条件下,添加2,4-D可提高芽的增殖,以在培养基MS+0.5mg/L6-BA+0.2mg/LKT+0.2mg/L2,4-D中茎段丛芽增殖系数最高,为15.4,丛生苗较壮、生长良好。不同IBA、NAA组合均可诱导丛生芽生根,但以培养基MS+0.2mg/LIBA+0.2mg/LNAA的生根效果最好,接种10d开始生根,15d时生根率为85.3%,每株平均生根数为4～9条,移栽成活率可达82.3%。【结论】建立了白背三七种苗再生繁殖体系,可为白背三七的产业化生产提供技术支撑。

响应面法优化白背三七多糖的提取工艺

以白背三七为原料,采用微波辅助法提取白背三七多糖。在单因素实验的基础上,采用响应面法优化白背三七多糖的提取工艺。实验结果表明,影响微波辅助提取白背三七多糖的主要因素依次为:液料比、微波时间、微波功率,其中料液比对提取率的影响达到了极其显著水平。白背三七多糖提取的最佳工艺参数为:液料比45∶1(m L/g)、微波功率390 W、微波时间22 min。在此条件下,白背三七多糖的提取率为15.36%,与模型预测值接近。因此,采用响应曲面法优化得到的工艺条件具有一定的实际应用价值。

白背三七愈伤组织诱导及培养条件优化

以白背三七带芽嫩叶和茎段为外植体诱导愈伤组织,建立愈伤组织培养体系,并对主要培养条件进行了优化。结果表明:白背三七带芽嫩叶在MS培养基与1.0 mg/L KT+0.5 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA激素组合下能快速诱导出愈伤组织,最佳诱导时期为3月份。白背三七在B5培养基与0.5 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA激素组合下可获得疏松易碎、有金属光泽、生长旺盛的愈伤组织,呈平缓的"S"型生长曲线,接种后第18天生物量达到最大值19.54 g/瓶。

白背三七多糖的分离纯化

采用D315弱碱性阴离子交换树脂和Sephadex G-25凝胶柱层析,从白背三七叶粗多糖中分离纯化得到中性多糖GDPs-1、GDPs-2及酸性多糖GDPs-3 3个多糖组分。经高效凝胶色谱测定,重均分子质量分别为:1.06×104、4.17×103D和3.74×103D;纯度分别为94.08%、92.3%和99.8%。红外光谱证明3种多糖均含有多糖类特征吸收峰,初步推测GDPs-1中α和β构型并存,GDPs-2和GDPs-3为α构型;核磁共振结果进一步证实3种多糖中均只含有α构型。

白背三七大孔树脂富集物化学成分及抗氧化活性研究

本文采用HPLC-ESI-MS分析白背三七醇提液经HPD-100树脂富集分离后的黄酮类化合物,并采用化学和生物模型对富集物的抗氧化活性进行研究。实验结果表明该富集物主要黄酮成分为槲皮素和山奈酚的糖苷类化合物,且以山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷的含量最高;白背三七醇提液经富集后总黄酮含量提高了6倍。在试验模型中,除螯合能力外,富集后产物抗氧化能力较富集前均有显著提高,说明黄酮类化合物是白背三七抗氧化活性的主要物质基础。