白背毛木耳多糖APP3a羧甲基化修饰工艺研究

以白背毛木耳多糖APP3a为原料,用碱性氯乙酸法制备羧甲基化白背毛木耳多糖(CM-APP3a),研究其羧甲基化的工艺。以羧甲基取代度为指标,通过单因素实验对氯乙酸用量、氢氧化钠用量、反应时间、反应温度等工艺参数进行研究,并用响应面Box-Behnken实验设计对羧甲基化工艺进行优化。实验结果表明,APP3a羧甲基修饰的最佳工艺条件为:反应介质为异丙醇,多糖APP3a 60 mg,氯乙酸用量1.45 g,氢氧化钠用量2.48 g,反应温度55℃,反应时间3.5 h。在该优化条件下,羧甲基白背毛木耳多糖(CM-APP3a)的取代度达为0.892,与理论预测值0.895相比,其相对误差为0.33%。说明通过响应面优化后得出的回归方程具有一定的实践指导意义。

白背毛木耳多糖APP3a磷酸化修饰工艺及其抗氧化活性

以白背毛木耳为原料,采用热水浸提法提取白背毛木耳多糖(polysaccharides from Auricularia polytricha,APP),通过离子交换柱层析和凝胶柱层析对APP进行纯化,得到1个单一组分APP3a,以磷酸根含量为指标,探讨磷酸化试剂比例、反应温度、时间、p H对APP3a磷酸化修饰的影响,在单因素试验基础上,采用响应面Box-Behnken试验设计优化APP3a磷酸化修饰工艺,并通过对羟基自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基的清除作用研究APP3a磷酸化前后抗氧化活性。结果表明, APP3a磷酸化修饰工艺为磷酸化试剂比例3︰4、反应温度50℃、反应时间5 h、pH 9,在最佳工艺条件下,磷酸根含量为7.41%。抗氧化试验研究表明,与APP3a相比,磷酸化APP3a对羟基自由基、超氧阴离子自由基清除能力增强,对DPPH自由基的清除能力有所减弱。

白背毛木耳43-28胞外多糖的提取与纯化

[目的]对白背毛木耳43-28胞外多糖进行提取和纯化。[方法]利用液体深层发酵进行培养,水提-醇析法分级提取胞外多糖,通过DEAE-cellulose 52和Sephadex G-200柱层析纯化胞外多糖。[结果]提取得到白背毛木耳43-28胞外多糖,粗多糖得率为2.4%,总糖含量为54.67%;胞外多糖粗提物经DEAE-cellulose 52柱层析后分成酸性和中性多糖,这2种多糖分别经Sephadex G-200柱层析后,酸性多糖分离成大分子酸性多糖AP5和小分子酸性多糖AP6 2个组分,中性多糖只有AP7 1个组分。[结论]成功提取得到白背毛木耳43-28胞外多糖并进行了纯化,为对白背毛木耳多糖的综合利用提供参考。

白背毛木耳胞内多糖的提取与纯化

通过正交试验确定了白背毛木耳(Auricularia polytricha)43-26液体发酵培养基的最优配方(g/L):土豆20、玉米粉20、蛋白胨10和磷酸二氢钾5;利用超声波辅助水提醇沉法提取胞内粗多糖,多糖含量为75.5%;多糖粗提物经DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-200层析分离纯化,分别得到4个相对均一的纯多糖组分AP1、AP2、AP3和AP4。

微波辅助提取白背毛木耳多糖的工艺优化及抗氧化性研究

采用微波辅助提取白背毛木耳(Auricularia polytricha)多糖,通过单因素试验和正交试验对多糖提取工艺参数进行优化,并研究所提取的多糖对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除作用。结果表明:多糖的最佳提取工艺参数为微波时间3.0 min、料液比1∶45(g/m L)、微波功率640 W;在此条件下多糖平均提取率为14.87%,平均加样回收率为98.25%;多糖对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除率最大分别为44.57%和60.68%。本试验首次测定了白背毛木耳多糖的抗氧化活性,为白背毛木耳多糖的开发利用提供了依据。

白背毛木耳胞内多糖抗肿瘤作用的研究

为了探讨白背毛木耳胞内多糖的抗肿瘤作用,将昆明种小白鼠接种S-180实体瘤后随机分组,饲喂低、中和高剂量(100、200和400 mg/kg)白背毛木耳胞内多糖AP1,分别以生理盐水为空白对照和环磷酰胺为阳性对照。白背毛木耳胞内多糖AP1低、中和高剂量对S-180实体瘤的抑瘤率分别是36.84%、46.78%和56.73%,均能显著地提高荷瘤小白鼠脾脏指数和胸腺指数,和显著地延长S-180腹水型荷瘤小白鼠的存活时间。白背毛木耳胞内多糖AP1可以有效地抑制S-180肉瘤的生长,可通过提高动物的免疫功能达到抗肿瘤的作用。

响应面法优化白背毛木耳子实体多糖的酶法提取工艺

应用响应面法优化酶法提取白背毛木耳子实体多糖的工艺条件。使用纤维素酶辅助进行白背毛木耳子实体多糖的提取,在单因素试验的基础上通过响应面试验设计构建了模型并确定酶用量、pH值、提取温度、提取时间等4个主要影响因素的最佳工艺参数。结果表明,最佳的工艺条件为:纤维素酶用量3 774 U/g、pH为4.9、提取温度50.2℃、提取时间135 min,在此条件下白背毛木耳子实体多糖的提取率为15.47%,与模型预测值15.52%的相对误差仅为0.323%。

干燥方法对白背毛木耳多糖抗氧化活性的影响

以白背毛木耳为原料,利用传统水提法提取白背毛木耳多糖(polysaccharides from Auricularia polytricha,APPs),分别对传统热风干燥多糖(APPs-H)、真空干燥多糖(APPs-V)和冷冻干燥多糖(APPs-F)的化学组成和抗氧化活性进行研究。结果表明,白背毛木耳多糖为含有少量的蛋白质的酸性多糖,不同干燥方法将会影响其单糖组成和糖醛酸含量。APPs-H,APPs-V和APPs-F具有较强的清除DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基和亚硝基自由基的能力和还原力,在一定浓度范围内,多糖与抗氧化活性及还原能力之间呈正相关关系,干燥方法对白背毛木耳多糖抗氧化活性造成不同影响,其中APPs-F抗氧化活性最强,其次是APPs-V和APPs-H,冷冻干燥是制备APPs适宜的干燥方法。

不同提取方法对白背毛木耳多糖体外抗氧化活性的影响

以白背毛木耳为原料,水为溶剂,采用3种不同的提取方法(热水浸提、超声辅助、微波辅助)提取白背毛木耳多糖,经Sevage法脱蛋白、聚酰胺树脂柱层析法进一步纯化,经过冷冻干燥后得到3种方法提取的白背毛木耳多糖APS-W、 APS-U和APS-M.探讨了3种提取方法得到APS的化学性质、红外光谱及体外抗氧化活性.结果表明:白背毛木耳多糖APS-W、 APS-U和APS-M均为非淀粉多糖,具有多糖特征吸收峰及较强的抗氧化活性,且抗氧化活性呈现剂量依赖关系.基于白背毛木耳多糖的抗氧化活性,微波辅助提取方法是白背毛木耳多糖适宜的提取方法.

白背毛木耳多糖的流变特性研究

以白背毛木耳为原料,采用流变仪测定了浓度、剪切速率、温度、加热时间、冻融变化、金属离子和蔗糖等因素对白背毛木耳多糖溶液黏度的影响。结果表明,多糖溶液（浓度〉0.5%）的黏度与其浓度呈正相关,而与剪切速率成负相关（黏度减小）。多糖溶液表现为＂非牛顿流体＂,且为＂假塑性＂流体。多糖溶液的黏度随着其温度（20℃~80℃）的升高而递减。p H 6.8时多糖溶液的黏度最大。加热时间、冻融变化、金属离子和蔗糖等对白背毛木耳多糖溶液的黏度均有轻微的影响。