基于Box-Behnken响应面法优化白芍总苷脂质体凝胶的制备工艺

目的:优化白芍总苷脂质体凝胶的制备工艺。方法:以卡波姆用量、甘油用量、三乙醇胺用量为考察因素,均匀度、透明度、流动性为质量评价标准,采用Box-Behnken响应面法优化白芍总苷脂质体凝胶的制备工艺。结果:白芍总苷脂质体凝胶最佳制备工艺的卡波姆用量为2 g,甘油用量为90 g,三乙醇胺用量为30 g。结论:优化后的白芍总苷脂质体凝胶制备工艺制备出的白芍总苷脂质体凝胶外观均匀、透明度高、流动性好。优化后的白芍总苷脂质体凝胶制备工艺稳定可行,可以代替现有的传统制备工艺,应用于临床治疗。

白芍总苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用及其机制研究

目的:研究白芍总苷(TGP)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:通过夹闭冠状动脉30min后松夹的方法制备心肌缺血再灌注大鼠模型,取80只大鼠随机分为心肌缺血再灌注模型对照组、白芍总苷60、120和240mg/kg治疗组和复方丹参滴丸135mg/kg治疗组,并另取16只同龄大鼠设假手术组,术后立即灌胃给药,4周后,测定各组大鼠心脏/体质量比,由TTC染色测定各组大鼠心肌梗死面积,通过HE染色方法观察各组大鼠心肌组织病理学改变;测定各组大鼠血清中心肌酶(AST、CPK、LDH)含量以及总抗氧化能力(T-AOC)水平;测定心肌组织中抗氧化酶(SOD、GSH-Px、CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量;通过酶联免疫法(ELIAS)测定各组大鼠血清中白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果:较模型对照组,白芍总苷120和240mg/kg组大鼠心脏/体质量比和心肌梗死面积均显著降低;白芍总苷治疗组大鼠心肌组织病变好转,其中以240mg/kg治疗组效果最为显著;白芍总苷120和240mg/kg治疗组大鼠血清中AST、CPK、LDH含量及IL-6水平均显著降低,心肌组织中SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,其中240mg/kg治疗组血清中T-AOC、IL-1、TNF-α水平和心肌组织中GSH-Px活性显著升高。结论:白芍总苷能够有效减轻心脏水肿,减小心肌组织梗死,改善组织病理学改变,提示白芍总苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有剂量依赖性的保护作用,其作用机制可能与其能够增强抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤,改善心功能有关。

白芍总苷对Aβ42沉积诱导脑内炎症因子及CD45、磷酸化tau蛋白表达的影响

目的:观察Aβ42沉积对大脑海马CD45、炎症因子和磷酸化tau蛋白(p-tau)表达的影响及白芍总苷(TGP)的干预作用。方法:应用立体定位注射技术对12周龄雌性SD大鼠1次性大脑海马定位注射纤丝状A 42复制AD病理模型,并给予白芍总苷进行干预,用免疫组化方法显示CD45、炎症因子及p-tau表达情况,并用分析软件进行图像分析。结果:与正常对照组相比,AD模型组的CD45、IL-1β、IL-6及p-tau阳性细胞染色面积(染色面积与染色的阳性细胞数成正比)均增加而染色强度值均下降(蛋白表达量与染色强度值成反比);与AD模型组比较,各给药组的IL-1β、IL-6染色面积均下降;除西乐葆对照组的IL-6染色强度值仅表现为增加的趋势外,其余各给药组的IL-1β、IL-6染色强度值均增加。另外,与AD模型组相比,白芍总苷高剂量组和西乐葆组的p-tau、CD45染色面积均下降而染色强度值均升高,TGP低剂量组的p-tau、CD45染色面积则有下降的趋势而染色强度值则有升高的趋势。结论:Aβ42沉积可诱导大脑海马炎症反应、小胶质细胞激活和炎症细胞因子过表达以及tau蛋白的过度磷酸化,而抑制小胶质细胞的激活及炎症细胞因子的过表达,从而抑制脑内炎症及tau蛋白的过度磷酸化,可能是TGP拮抗AD的主要作用机制。

白芍总苷对动脉粥样硬化大鼠TNF-α/P38MAPK/NF-κB/RBP4信号通路及其血清IL-17,IL-27,IL-33影响的研究

目的:观察白芍总苷(Total glucosides of paeony,TGP)对动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)大鼠TNF-α/P38MAPK/NF-κB/RBP4信号通路的影响及对血清中白细胞介素-17 (Interleukin-17,IL-17),白细胞介素-27 (Interleukin-27,IL-27),白细胞介素-33 (Interleukin-33,IL-33)的调节作用。方法:30只雄性SD大鼠随机分成正常组、模型组和TGP组,每组10只。除正常组外,模型组和TGP组大鼠均通过喂养高脂饲料结合腹腔注射维生素D3的方法建立大鼠AS模型,共12周,同时TGP组大鼠按照200 mg/(kg·d)剂量在造模过程中同步连续灌胃给药12周,正常组和模型组则同步给予等体积生理盐水。以上各组大鼠于建立模型第12周末处死,称取各组大鼠体质量及心脏组织质量计算心脏指数(Cardiac index,CI);HE染色观察各组大鼠主动脉形态结构病理学变化;采用ELISA试剂盒测定各组大鼠血清中IL-27、IL-17、IL-33的水平;采用蛋白印记法检测大鼠主动脉中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 Mitogen activated protein kinase,p38MAPK)、核因子κB (Nuclear factor kappa-B,NF-κB)、视黄醇结合蛋白4 (Retinol-binding protein 4,RBP4)的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠的CI、主动脉HE染色病理评分、细胞因子水平(IL-27、IL-17、IL-33)以及TNF-α、p38MAPK、NF-κB、RBP4蛋白相对表达量均显著增加(P <0.05);与模型组比较,TGP组大鼠的CI、主动脉HE染色病理评分、细胞因子水平(IL-27、IL-17、IL-33)以及TNF-α、p38MAPK、NF-κB、RBP4蛋白相对表达量均显著降低(P <0.05)。结论:TGP对AS大鼠心脏具有显著的保护作用,可改善其主动脉粥样硬化程度,同时抑制TNF-α/P38MAPK/NF-κB/RBP4信号通路相关蛋白的表达,减少IL-17、IL-27及IL-33等炎症细胞因子的表达。