白芍甘草药对治疗原发性痛经实验研究

目的:研究不同配伍比例白芍-甘草(炙)药对对己烯雌酚+缩宫素所致大鼠痛经模型的保护作用,筛选最佳比例并进行治疗机制探讨。方法:通过己烯雌酚+缩宫素制备痛经模型大鼠,研究白芍单味水煎煮提取物、芍甘药对不同配伍比例(白芍∶甘草=5∶1,4∶1,3∶1,2∶1,1∶1,2∶3,1∶3)水煎煮提取物和甘草单味水煎煮提取物对其的止痛作用,并对效果较佳组进行进一步研究,测定其组大鼠血清中SOD、GSH-PX的活性和NO、MDA含量。结果:随白芍甘草(炙)比例变化,治疗效果出现双峰现象,白芍-甘草(炙)药对能明显提高血清中SOD、GSH-PX的活性,降低MDA含量,并能提高血清中NO的含量。结论:白芍-甘草(炙)药对可以通过增加大鼠血清中SOD、GSH-PX的活性,提高NO含量,降低MDA含量,调节体内生物信息失衡,进而缓解痛经,对大鼠原发性痛经有保护作用。

白芍甘草药对中芹糖异甘草苷和异甘草苷在大鼠体内药代动力学研究

目的:比较炙甘草与白芍配伍前后,炙甘草中芹糖异甘草苷和异甘草苷的药动学行为差异。方法:采用文献报道的HPLC法,同时测定大鼠灌服炙甘草药材、白芍甘草药对后血浆中芹糖异甘草苷和异甘草苷的含量,计算药代动力学参数并进行t检验。结果:与白芍配伍后,异甘草苷的AUC显著降低,通过药时曲线趋势可见对芹糖异甘草苷亦有影响,但药代动力学参数表现不明显,尚需进一步研究。结论:白芍可能通过抑制炙甘草中的芹糖异甘草苷的代谢,增加其生物利用度。

白芍-甘草药对中异甘草素和甘草次酸在大鼠体内的药代动力学研究

目的比较炙甘草与白芍配伍前后,炙甘草中异甘草素和甘草次酸的药代动力学行为差异。方法采用HPLC法同时测定大鼠灌服炙甘草药材、白芍-甘草药对后血浆中异甘草素和甘草次酸的含量,计算药代动力学参数并进行t检验。结果与灌胃给予异甘草素、甘草次酸单体相比,灌胃给予甘草药材和药对后达峰时间显著延迟,AUC增加,在体内的平均滞留时间延长。芍-甘药对3∶1和1∶1药动学无明显差异。与灌胃给予甘草药材相比,甘草次酸的Cnax,AUC两个比例中均有显著减小,而异甘草素的Cnax,AUC仅在1∶1比例中明显降低。结论白芍中物质可改变甘草中其他物质向异甘草素转化的速率,或促进异甘草素的代谢;同时抑制甘草酸、甘草次酸的吸收。

基于数据挖掘分析含白芍-甘草药对成方制剂的组方规律

目的:分析《中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂》(以下简称《中药成方制剂》)中含白芍和甘草药对(以下简称“白芍-甘草”)成方制剂的组方规律,以期更好地指导临床,并为新药研发提供参考。方法:收集《中药成方制剂》中含白芍-甘草的所有成方制剂,录入中医传承辅助系统(V2.5)(以下简称TCMISS)建立数据库,采用该软件的频次统计、关联规则等数据挖掘方法,对主治证候和疾病进行频次分析,并对高频证候和疾病的组方规律进行分析。结果:含白芍-甘草成方制剂共327首,主治证候共88种,主治疾病共131种。高频证候气血两虚证、气滞血瘀证和高频主治疾病月经失调、眩晕的核心药物组合均以八珍汤为基本方,但加减变化因病证不同差异较大。气血两虚证最常配伍黄芪以增强补气作用、陈皮以理气健脾,补而不滞。气滞血瘀证最常配伍香附疏肝理气、延胡索活血止痛、陈皮理气健脾。月经失调最常配伍香附疏肝理气、陈皮理气健脾、砂仁化湿行气、阿胶补血止血。眩晕最常配伍黄芪补气升阳。结论:该研究通过大数据客观地探讨了含白芍-甘草成方制剂的组方规律,为白芍-甘草的临床运用提供了客观依据。

基于网络药理学探究芍药甘草汤保肝作用

目的基于网络药理学探究芍药甘草汤保肝作用。方法在中药系统药理学数据库和分析平台检索筛选白芍、甘草的化学成分,以口服生物利用度和类药性为条件筛选,通过SwissTargetPrediction数据库和TargetNET数据库预测并构建成分靶点集。DisGeNET数据库建疾病靶点集。通过DAVID数据库的Functional Annotation功能对共同靶点进行GO富集分析和KEGG通路富集分析。最后导入数据用Cytoscape3.2.1软件构建“中药⁃成分⁃靶点⁃通路⁃疾病”网络图。使用GEO数据库及ROC曲线,评价芍药甘草汤中芍药与甘草的相同靶点对非酒精性脂肪肝的治疗效应及诊断价值。结果得到芍药甘草汤治疗肝损伤网络图,其中含有活性成分75个,与肝损伤疾病相关靶点共48个,通路41条。其抗肝损伤作用可能与甘草黄酮类化合物如甘草查耳酮A、毛异黄酮,以及山柰酚、槲皮素、异鼠李素、芍药苷、β⁃谷甾醇、刺芒柄花素和甘草酸及其衍生物等化学成分有关,推测CYP1A2、PTGS2、SYK和基质金属蛋白酶家族MMP9、MMP1、MMP2等为靶蛋白,通过作用Ras信号通路、HIF⁃1信号通路、TNF信号通路、VEGF信号通路、Rap1信号通路、Pl3k⁃akt信号通路、胰岛素抵抗、细胞凋亡和NAFLD等发挥保肝作用。ROC曲线评价结果显示,CYP1A2、PIM1、PTGS2、MMP9的曲线下面积均处于0.70以上,其中CYP1A2和PTGS2的表达具有差异(P<0.05)。结论芍药和甘草的相同靶点CYP1A2和PTGS2在NAFLD进程中可能具有良好的治疗效应和诊断价值,但结果仍需进一步实验验证。

白芍-炙甘草配伍下调铁死亡的抗溃疡性结肠炎机制研究

目的 探讨白芍、炙甘草及白芍-炙甘草药对的抗葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate-sodium, DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis)的药效,以及对铁死亡的调控作用。方法 将60只C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、白芍给药组、炙甘草给药组以及白芍-炙甘草配伍给药组。除空白对照组外,其余各组均给予3.5%DSS造模建立结肠炎模型,并按照分组给予不同药物灌胃干预,连续给药7天,实验期间记录小鼠体重。第8天处死小鼠提取结肠组织,测量结肠长度、疾病活动指数(disease activity index, DAI),通过苏木素-伊红(haematoxylin-eosin, HE)染色观察结肠组织病理学改变;通过透射电镜观察组织中线粒体的形态变化,生化试剂盒检测结肠组织中Fe^(2+)、还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)、丙二醛(malonaldehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)的含量,蛋白免疫印迹法检测结肠组织谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathion peroxidase, GPX4)、溶质载体家族7成员11(solute vector family 7 members 11,SLC7A11)蛋白表达水平。结果 与空白对照组比较,模型组小鼠体重降低,DAI评分升高,结肠长度明显缩短;模型组结肠组织中,线粒体膜皱缩,线粒体嵴模糊;同时,Fe^(2+)、MDA含量增加以及GPX4、SLC7A11蛋白表达均明显降低(P<0.05);与模型组比较,各给药组小鼠体重下降、结肠长度缩短以及DAI评分上升得到明显改善。白芍、炙甘草和白芍-炙甘草药对组Fe^(2+)、MDA含量显著减少(P<0.05),GPX4、SLC7A11蛋白表达升高(P<0.05和P<0.01),GSH和SOD含量显著增加(P<0.05),且白芍-炙甘草药对的调控作用明显强于白芍和炙甘草。结论 白芍-炙甘草药对抗溃疡性结肠炎的作用较单味药相比显著增强,且机制与其抑制溃疡性结肠炎小鼠结肠组织铁死亡水平有关。

白芍甘草(炙)药对对原发性痛经模型大鼠GSH-Px、ROS、4-HNE、8-OHdG、PGE2、6-K-PGF1α的影响

目的:研究白芍甘草(炙)药对对原发性痛经模型大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、活性氧(ROS)、4-羟基壬烯酸(4-HNE)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)、前列腺素E2(PGE2)、6-酮-前列腺素(6-K-PGF1α)的影响,确定白芍甘草(炙)药对最佳配伍比例。方法:采用腹腔注射己烯雌酚与缩宫素制备原发性痛经模型,观察空白对照组、模型组、白芍组、甘草组、白芍甘草1:1、2:1、3:1组扭体次数;采用酶联免疫吸附法测定血清GSH-Px、ROS、4-HNE、8-OHd G、PGE2、6-K-PGF1α水平;剖取子宫,制备10%匀浆,测定PGE2、6-K-PGF1α活性。结果:针对大鼠血清,模型组各指标含量ROS为289.1±3.6 IU/ml、GSH-Px为33.3±0.5 pmol/ml、4-HNE为342.0±1.9 pg/ml、8-OHd G为71.8±1.0 ng/L、PGE2为419.7±5.7 ng/L、6-K-PGF1α为60.7±1.1 ng/ml,白芍甘草1:1组显著降低4-HNE、8-OHd G、PGE2含量(309.8±4.6 pg/ml、64.6±0.5 ng/L、377.0±6.0 ng/L),白芍甘草2:1组显著降低ROS、4-HNE、8-OHd G、PGE2、6-K-PGF1α含量(233.5±0.6 IU/ml、287.8±2.4 pg/ml、58.6±1.5 ng/L、372.8±1.5 ng/L、49.5±0.4 ng/m L),升高GSH-Px含量(45.7±0.5 pmol/ml),白芍甘草3:1组显著升高GSH-Px含量(42.8±1.0 pmol/ml);针对子宫匀浆,模型组PGE2、6-k-PGF1α含量为(390.0±5.6 ng/L、49.0±0.9 ng/m L)白芍甘草2:1组显著降低PGE2、6-K-PGF1α含量(363.1±4.1ng/L、37.6±0.2ng/m L),白芍甘草3:1组显著降低6-K-PGF1α含量(42.9±0.8 ng/m L),以上结果均具有统计学意义。结论:白芍甘草(炙)药对升高痛经大鼠体内GSH-Px,降低ROS,4-HNE,8-OHd G、PGE2、6-K-PGF1α含量,通过抗氧化应激及镇痛作用达到治疗效果,确定白芍甘草(炙)药对最佳配伍比例为2:1。

白芍-甘草药对治疗骨关节炎的疗效机制预测

目的:探讨白芍-甘草药对治疗骨关节炎的作用机制。方法:首先在《中药大辞典(第二版)》中检索白芍和甘草的所有化学成分;其次采用中药系统药理学数据库(TCMSP)中的ADME参数,遴选活性成分;然后在Pub Chem和TCMSP数据库中查找活性成分对应的人类靶蛋白,在Gene数据库中查找骨关节炎相关基因;把靶蛋白和基因导入分子网络分析平台,采用核心计算分析法则,分别构建药物和疾病的分子网络和生物学通路,并进行比较映射分析。结果:药物和疾病涉及的共同生物学通路主要包括细胞免疫、细胞因子信号,涉及的共同高连接分子主要包括白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),核转录因子-κB1(NF-κB1)和细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)。结论:白芍-甘草药对可能通过影响IL-1,TNF-α,NF-κB1和ERK1/2,以及调控细胞因子信号通路,抑制炎症,调节软骨细胞免疫,从而对骨关节炎产生协同疗效。