白芦藜醇对牙周炎大鼠OPG/RANKL/RANK信号通路的影响

目的考察白芦藜醇(Resveratrol,RSV)对牙周炎大鼠骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)/核因子-κB受体活化因子(receptor activator of NF-κB,RANK)(OPG/RANKL/RANK)信号通路相关蛋白的影响。方法采用不同浓度的RSV对牙周炎大鼠进行干预,采用RT-PCR和Western blot分别检测牙周组织细胞OPG、RANKL、IL-1、IL-6、TNF-α和基质金属蛋白酶8(matrix metalloproteinase 8,MMP-8)的mRNA水平和蛋白表达水平。结果牙周炎模型组大鼠牙周组织中OPG、RANKL、IL-1、IL-6、TNF-α和MMP-8的mRNA表达强度和蛋白水平高于空白对照组(P<0.05),RSV低剂量组、RSV中剂量组、RSV高剂量组则依次低于牙周炎模型组(P<0.05)。结论RSV可以降低牙周炎大鼠牙周组织中OPG、RANKL、IL-1、IL-6、TNF-α和MMP-8的mRNA和蛋白表达水平,改善大鼠牙周组织状况。

白芦藜醇对大鼠类固醇糖尿病的影响及其作用机制研究

目的:探讨不同剂量的白芦藜醇(Resveratrol)对大鼠类固醇糖尿病(SDM)的影响及机制。方法:采用SD大鼠随机分为正常对照组(NC组),类固醇糖尿病组(SDM组)和白芦藜醇低剂量组(LR组),中剂量组(MR组)和高剂量组(HR组);检测各组大鼠血糖,胰岛素抵抗,血清中脂联素和炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的改变,胰岛细胞凋亡率和胰腺组织细胞凋亡蛋白BCL2的变化。结果:与SDM组相比,MR组和HR组大鼠血糖、胰岛素抵抗、TNF-α的表达、胰岛细胞凋亡率明显降低(P<0.05),MR组和HR组大鼠血清脂联素和胰岛BCL2的表达明显升高(P<0.05)。结论:中剂量和大剂量白芦藜醇对大鼠SDM具有保护作用,这种保护作用与降低SDM大鼠血糖、抑制胰岛素抵抗、抑制胰岛炎性因子表达、上调增殖蛋白BCL2的表达,从而降低胰岛细胞的凋亡有关。

白芦藜醇对糖尿病小鼠肾脏内质网应激的影响

目的探讨白芦藜醇对糖尿病小鼠肾脏组织内质网应激的影响。方法 8周龄C57bl/6小鼠腹腔注射STZ诱导糖尿病小鼠模型。将实验动物分为正常对照组、糖尿病未治疗组和糖尿病白芦藜醇治疗组。建模5个月后取肾脏组织行Western blot和RT-PCR检测内质网应激通路关键分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)与葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulated protein78,GRP78)表达水平。免疫组织化学染色观察肾脏组织CHOP的表达。结果糖尿病白芦藜醇治疗组CHOP和GRP78表达水平相比糖尿病未治疗组明显减少(P<0.05),但两者均高于正常对照组(P<0.05)。结论白藜芦醇能明显降低糖尿病小鼠肾脏内质网应激水平。

白芦藜醇影响前脂肪细胞增殖与分化及调控相关信号通路的研究

目的：探讨白芦藜醇（Resveratrol）对于小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响及其调控相关信号通路的研究。方法：培养小鼠3T3-L1前脂肪细胞,添加不同剂量的白芦藜醇处理24、48 h,用MTT法检测细胞增殖;在诱导3T3-L1前脂肪细胞分化的过程中添加100μmol·L^（-1）白芦藜醇处理48 h,继续培养6 d后油红O染色观察脂肪细胞的分化程度;采用荧光定量PCR技术检测与分化相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、CCAAT/增强子结合蛋白-α（C/EBPα）和Notch1,炎症相关基因单核细胞趋化因子-1（MCP-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和瘦素（Leptin）的mRNA表达水平;酶联免疫吸附法（ELISA）分析3T3-L1分化过程中白芦藜醇对MCP-1蛋白分泌的影响。结果：白芦藜醇显著抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖,并呈现一定的时间、剂量依赖效应。与对照组相比,白芦藜醇通过抑制脂肪细胞中分化相关基因（PPARγ、C/EBPα和Notch1）mRNAs表达水平,抑制3T3-L1细胞分化过程中脂滴的合成;白芦藜醇可以促进3T3-L1前脂肪细胞向脂肪细胞分化过程中炎症相关因子MCP-1的mRNA表达和蛋白分泌,白芦藜醇致成熟脂肪细胞中Leptin mRNA表达水平在第2天降低,但第4天升高。结论：白芦藜醇可以抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖,及前脂肪细胞分化,其机制可能是通过抑制PPARγ、C/EBPα和Notch1的表达。在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中,白芦藜醇可以促进脂肪细胞分化过程中MCP-1的表达及分泌,及增加Leptin基因表达,调控炎症状态影响肥胖。

白芦藜醇对大鼠牙移植后牙周组织愈合及Sirt1/Nrf2信号通路的影响

目的:观察白芦藜醇(RSV)对大鼠牙移植后牙周组织愈合及Sirt1/Nrf2信号通路的影响。方法:48只雄性Lewis大鼠随机分为对照(Control)组、模型(Model)组、低剂量RSV(L-RSV)组和高剂量RSV(H-RSV)组。苏木精-伊红(HE)染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察牙周组织病理学变化;免疫组织化学染色检测核因子κB受体激活剂配体(RANKL)、骨保护素(OPG)、Runt相关转录因子2(RUNX2)和骨钙素(OCN)等成骨分化相关因子的表达;扫描电子显微镜分析牙根吸收情况,Western blot检测牙周组织中Sirt1、Nrf2蛋白表达水平。结果:与Control组比较,Model组牙周组织TRAP阳性细胞数量增多,RANKL表达和牙根吸收率升高,OPG、RUNX2和OCN表达以及Sirt1、Nrf2蛋白水平降低(P<0.05)。与Model组比较,L-RSV组和H-RSV组牙周组织TRAP阳性细胞数量减少;RANKL表达和牙根吸收率降低,OPG、RUNX2和OCN表达以及Sirt1、Nrf2蛋白水平升高(P<0.05)。结论:RSV可促进大鼠牙移植后牙周组织愈合,促进作用可能与激活Sirt1/Nrf2信号通路有关。

白芦藜醇对凋亡诱导因子介导乙醇致幼鼠脑损伤的保护作用

目的 探讨白芦藜醇对乙醇致幼鼠脑损伤保护作用的分子机制。方法 建立乙醇致脑损伤模型,将24只新生雄性小鼠于生后随机分为3组,7 d龄时,按2 g/kg乙醇（20%无菌盐水溶液）皮下注射,间隔2 h后再次注射。对照组乳鼠仅注射等量生理盐水。乙醇加白芦藜醇组（简称白芦藜醇组）自第1次乙醇注射起,每天应用白芦藜醇80 mg/kg灌胃1次,共3次。乙醇皮下注射72 h后取材。通过苏木素-伊红（HE）染色观察脑皮质形态学变化,采用常规及实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）、免疫组织化学（IHC）法检测凋亡诱导因子（AIF）mRNA及蛋白水平的变化。结果 常规及RT-qPCR显示,乙醇组AIF mRNA相对表达量（2.374 0±0.160 5,n=3）较生理盐水组AIF mRNA相对表达量（1.634 0±0.065 9,n=3）和白芦藜醇组mRNA相对表达量（1.5060±0.164 6,n=3）显著增加,差异有统计学意义（F=34.51,P〈0.05）。IHC检测提示生理盐水组AIF未见明显表达,阳性细胞数为（12.0±3.5）个,乙醇组中AIF表达增强,阳性细胞数为（42.0±6.5）个,而白芦藜醇组中可见少量棕色物质沉积,表达阳性细胞数为[（16.0±4.2）个,乙醇组与其他两组比较,差异有统计学意义（F=33.10,P〈0.05）。结论 乙醇致小鼠脑损伤模型中,AIF表达增强,白芦藜醇可减弱乙醇致AIF的表达,提示白芦藜醇通过调节AIF表达,参与保护乙醇致脑损伤的分子过程。

白芦藜醇通过抑制血管内皮生长因子受体-1-磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号转导通路影响HepG2细胞增殖

目的观察白芦藜醇通过抑制血管内皮生长因子受体(VEGFR)-1-磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号转导通路对肝癌细胞增殖的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测白芦藜醇对HepG2细胞(2017年6月购自上海普诺赛生物)细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期变化,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测VEGFR-1、Akt基因表达水平,蛋白质印迹法(Western blot)检测磷酸化(p)-VEGFR-1、VEGFR-1、p-Akt和Akt表达水平。采用转化后的Cochran Armitage趋势检验。结果白藜芦醇对HepG2细胞增殖具有明显的抑制作用,且呈剂量和时间依赖性,表明白藜芦醇浓度增加,作用时间越长,对HepG2细胞增殖的抑制作用越强。白藜芦醇浓度为0、20、80、160μmol/L时G0/G1分别为35.60、40.91、49.35和55.15,结果显示白藜芦醇作用HepG2细胞48 h后,可使肝癌HepG2细胞周期阻滞于G0/G1期。白藜芦醇浓度由5μmol/L逐渐增加至160μmol/L时,HepG2细胞中VEGFR-1表达水平由1.00±0.08逐渐降至0.28±0.02。HepG2细胞中Akt mRNA表达水平由2.32±0.22逐渐降至1.08±0.10。随着白藜芦醇浓度的增加,HepG2细胞中p-VEGFR-1、VEGFR-1、Akt和p-Akt蛋白表达水平均显著降低(χ2=15.183、17.842、32.628、26.163,P<0.05),其随白藜芦醇浓度变化而变化的趋势,经Cochran Armitage趋势检验,差异均有统计学意义(χ2=22.798,P<0.05)。结论白芦藜醇通过抑制VEGFR-1-PI3K/Akt信号转导通路的表达可抑制肝癌HepG2细胞增殖。

白芦藜醇对骨肉瘤细胞U-2OS增殖和凋亡的影响及其分子机制

目的观察白芦藜醇(resveratrol,Res)对骨肉瘤细胞U-2OS增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞U-2OS,用不同浓度的Res(5、10、20、40、80μmol/L)作用不同时间(24、48、72 h)后,MTT法检测Res对U-2OS细胞增殖活力的影响;流式细胞术检测Res对细胞周期和凋亡的影响;应用Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3酶活性;Western blot检测细胞内Bax、Bcl-2和Caspase 3蛋白的表达水平。结果 Res作用24 h时,与空白对照组及DMSO组比较,20和40μmol/L Res组的细胞增殖抑制率、G0/G1和G2/M期的细胞比例、细胞凋亡率、Caspase-3酶活性显著升高(P<0.05),S期细胞比例显著降低(P<0.05);20μmol/L Res组U-2OS细胞中Bax和Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论 Res通过诱导提高Caspase-3酶活性,上调促凋亡基因Bax、Caspase-3及下调抗凋亡基因Bcl-2蛋白的表达水平,从而抑制U-2OS细胞的增殖,促进其凋亡,为Res治疗骨肉瘤提供了实验依据。

白芦藜醇对小鼠脓毒症相关性脑病炎性损伤的保护作用

目的 探讨沉默信息调控因子1 （sirtuin 1,Sirt1）的天然激动剂白芦藜醇（resveratrol,Res）对脓毒症相关性脑病（sepsis-associated encephalopathy,SAE）炎性损伤的保护作用.方法 采用盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture,CLP）方法制作脓毒症小鼠模型,18只C57B/L小鼠按随机数字表法分为3组,每组6只：假手术组（Sham组）、CLP脓毒症模型组（CLP组）以及CLP＋Res注射组（Res组）.术后24 h脑组织取材,末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法（terminaldeoxynucleotidyl transferase mediated nick end labelling,TUNEL）观察细胞凋亡情况;分离皮质和海马,采用实时定量聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction,RT-PCR）分别检测Sirt1、含热蛋白结构域NOD样受体家族蛋白-3（NLR family pyrin domain containing-3 protein,NALP3）和白细胞介素（interleukin,IL）-1β的mRNA含量.结果 TUNEL染色后电镜下观察,海马Res组阳性细胞数量少于CLP组,凋亡细胞多集中于海马CA1区.Res组小鼠海马和皮质的Sirt1 mRNA的相对表达水平分别为4.62±0.64和4.60±0.61,显著高于Sham组和CLP组（P＜0.01）.Res组海马和皮质的NALP3相对表达水平分别为0.86±0.26和0.94±0.35,显著低于CLP组（P＜0.05）;与Sham组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.Res组海马的IL-1β mRNA相对表达水平为0.57±0.17,显著低于Sham组和CLP组,差异有统计学意义（P＜0.01）;Res组皮质的IL-1β mRNA相对表达水平为1.61±0.44,与Sham组和CLP组相似,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 SAE时IL-1β在海马区引起的炎性损伤较皮质区明显,Sirt1激动剂白芦藜醇对SAE炎性损伤具有保护作用.

白芦藜醇对自发性高血压大鼠血管重构的保护作用

目的观察白芦藜醇对自发性高血压大鼠血管重构的作用。方法选择20只雄性自发性高血压大鼠（SHR）和10只wistar-Kyoto（wKY）大鼠，数字抽签随机分为对照组、模型组及白芦藜醇组。观察血压、脉搏波速度变化情况，采用苏木-伊红（HE）染色、维多利亚蓝天狼星红染色观察主动脉形态学改变，检测一氧化氮（NO）、内皮素1（ET1）观察血管内皮功能，检测超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）、过氧化氢（H202）观察氧化应激水平。结果22周末，与对照组比较，模型组大鼠出现血压升高，脉搏波速度增加，主动脉管壁增厚，壁厚内径百分比增大，血管横截面积及血管腔横截面积增大，胶原纤维面积／弹性纤维面积比值增加。主动脉组织中NO、SOD、CAT表达下降而ET-1、MDA、H2O2表达增加。经白芦藜醇处理后，与模型组比较，白芦藜醇组血压无明显变化，而脉搏波速度下降（6681．1±2154．9）cm／s与（4283．1±946．1）cm／s（P〈0．05），主动脉管壁厚度降低（P〈0．01），壁厚内径百分比减小（P〉0．05），血管横截面积减小（P〈0．05），血管腔横截面积减小（P〈0．05）；胶原纤维面积／弹性纤维面积比值减小（P〈0．01）；主动脉组织中NO表达增多（P〈0．01），SOD表达增多（P〈0．01），CAT表达增多（P〈0．05），ET-1表达减少（P〈0．01），MDA表达减少（P〈0．01），H202表达减少（P〈0．05）。结论白芦藜醇具有抗氧化作用，可通过改善氧化应激，延缓血管重构的过程。

白藜芦醇对高脂所致心肌细胞氧化应激损伤的保护作用及其与AMPK/mTORC1/p70S6K信号通路的相关性

目的探讨白藜芦醇对脂毒性心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法棕榈酸(palmitic acid,PA)刺激H9c2细胞,白藜芦醇预处理后,MTT检测细胞增殖情况;免疫荧光及流式细胞法检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;用试剂盒检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平;免疫印迹法检测AMPK/m TORC1/p70S6K通路蛋白以及凋亡蛋白表达水平。结果 MTT结果示,PA(0. 4 mmol·L-1)刺激24、48 h时,心肌细胞存活率出现明显下降;免疫荧光法及流式细胞法显示,与对照组相比,PA(0. 4 mmol·L-1)刺激24 h时,ROS及MDA水平明显升高,SOD活性明显降低;免疫印迹法显示,与对照组相比,PA(0. 4 mmol·L-1)刺激24 h时,p-AMPK蛋白及Bcl-2蛋白表达降低,p-mTORC1、p-p70S6K、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达增高。白藜芦醇预处理,可以明显逆转上述变化。结论白藜芦醇可以明显抵抗高脂所致的心肌细胞氧化应激损伤,可能与AMPK/m TORC1/p70S6K信号通路调控相关。

白藜芦醇对肝癌Bel-7404细胞增殖、凋亡、侵袭影响机制研究

目的观察白藜芦醇对肝癌细胞Bel-7404增殖、凋亡、侵袭影响,并研究其内在分子机制。方法采用MTT法检测白藜芦醇对Bel-7404细胞增殖的影响;流式细胞术检测白藜芦醇对Bel-7404细胞凋亡的影响;Transwell法检测白藜芦醇对Bel-7404细胞侵袭的影响。蛋白免疫印迹实验检测Pro-caspase 3,PARP,MMP-9及VEGF的表达。结果白藜芦醇可以抑制Bel-7404细胞增殖,呈时间和浓度依赖性。白藜芦醇可以诱导Bel-7404细胞凋亡,呈浓度依赖性,与下调Procaspase3和PARP蛋白表达有关。白藜芦醇可以抑制Bel-7404细胞侵袭性,呈浓度依赖性,与下调MMP-9、VEGF蛋白表达有关。结论白藜芦醇可以抑制肝癌Bel-7404细胞增殖、通过剪切Procaspase3,PARP蛋白而诱导凋亡,通过下调MMP-9和VEGF蛋白表达水平而抑制Bel-7404细胞侵袭性。

白藜芦醇对妊娠期糖尿病大鼠脑组织氧化应激和细胞凋亡的影响

目的:研究白藜芦醇(Resveratrol,Res)对妊娠期糖尿病大鼠脑组织氧化应激和细胞凋亡的影响。方法:取妊娠5天大鼠,通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35 mg/kg的方法诱导制备妊娠期糖尿病大鼠模型,选取100只模型大鼠,根据血糖水平随机分为:妊娠期糖尿病模型对照组,白藜芦醇(60、120和240 mg/kg)治疗组和盐酸二甲双胍(200mg/kg)阳性对照组,每组20只;另取20只妊娠5天大鼠作为正常妊娠对照组,20只同龄非妊娠雌性大鼠作为正常非妊娠对照组。分别于给药前和给药后第7、14天分别测定各组大鼠空腹血糖水平;给药治疗2周后,测定各组大鼠血清中总抗氧化能力(T-AOC)水平和磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)含量;检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;通过HE染色观察脑组织病变,通过TUNEL染色观察神经细胞凋亡状况并计算凋亡指数。结果:与正常非妊娠对照组大鼠相比,正常妊娠组大鼠各监测指标无显著性变化。与正常妊娠对照组相比,妊娠期糖尿病模型对照组大鼠血糖水平显著升高,血清中T-AOC水平显著降低、CPK和LDH含量显著升高,脑组织中SOD、GSH-Px、CAT活性显著降低,且MDA含量显著升高;脑组织病理性形态学改变明显,神经细胞凋亡现象突出、凋亡率显著升高,上述差异均具有统计学意义。与妊娠期糖尿病模型组相比,白藜芦醇(120和240mg/kg)治疗组大鼠血糖水平显著降低,血清中CPK、LDH含量显著降低,脑组织中SOD、CAT活性显著降低且MDA含量显著降低;白藜芦醇(240mg/kg)治疗组血清中T-AOC水平和脑组织中GSH-Px活性均显著升高;白藜芦醇治疗组大鼠脑组织病变和神经细胞凋亡状况均明显改善,其中以240mg/kg治疗组效果最为显著,白藜芦醇(120和240mg/kg)治疗组神经细胞凋亡指数显著降低;上述差异均具有统计学意义。结论:白藜芦醇能够有效降低血糖,改善脑组织中抗氧化酶活性、降低氧化应激损伤,改善脑组织病变并抑制神经细胞凋亡,提示白藜芦醇对妊娠期糖尿病大鼠脑组织氧化应激和细胞凋亡具有抑制作用。

白藜芦醇对妊娠期糖尿病大鼠降低血糖和抗氧化能力的影响

目的:研究白藜芦醇(Resveratrol)对妊娠期糖尿病大鼠降低血糖和抗氧化能力的影响。方法:取120只妊娠5天SD大鼠,通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35 mg/kg制备大鼠糖尿病模型,随机分为6组:妊娠糖尿病模型对照组,白藜芦醇(30、60、120和240 mg/kg)治疗组和盐酸二甲双胍(200mg/kg)阳性对照组,每组20只;另取20只妊娠5天SD大鼠作为正常妊娠对照组,以及20只非妊娠雌性大鼠作为正常非妊娠对照组。分别检测第0、7、14天的空腹血浆血糖和胰岛素水平;治疗满2周后,检测各组大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性,丙二醛(MDA)含量以及总抗氧化能力(T-AOC);检测肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性;通过苏木精-尹红(HE)染色观察肝脏组织病理形态学改变,通过原位末端标记法(TUNEL)观察肝细胞凋亡状况。结果:与正常非妊娠对照组相比,正常妊娠对照组大鼠空腹血浆血糖和胰岛素水平,血清中ALT、AST、ALP活性及MDA含量和T-AOC水平,肝脏组织中SOD、GSH-Px、CAT活性均无显著性差异;且肝脏组织病理形态学改变和肝细胞凋亡状况均无明显变化。与妊娠期糖尿病模型组相比,白藜芦醇(60、120和240mg/kg)治疗组大鼠血清中ALT、AST活性和MDA含量显著降低;白藜芦醇(120和240 mg/kg)治疗组大鼠血糖水平显著降低、胰岛素水平显著升高,血清中ALP活性显著降低,肝脏组织中SOD、GSH-Px、CAT活性显著升高,白藜芦醇治疗组大鼠肝组织病理形态学改变和肝细胞凋亡状况均明显减轻。白藜芦醇240 mg/kg治疗组大鼠血清中T-AOC水平和肝脏组织中SOD、GSH-Px、CAT活性较盐酸二甲双胍阳性对照组显著升高,但二者对糖尿病大鼠胰岛素分泌、血糖水平以及血清中ALT、AST、ALP、MDA含量的影响无显著性差异。结论:白藜芦醇对妊娠期糖尿病大鼠具有剂量依赖性的降低血糖和提高抗氧化能力作用,该作用可能与其能够有效提高胰岛素水平和改善抗氧化酶系统的活性有关。

白藜芦醇对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用及对HMGBl及TLR4mRNA表达的影响

目的:研究白藜芦醇(Resveratrol,Res)对脓毒症大鼠急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)的保护作用及对ALI大鼠肺组织中高迁移率族蛋白(high mobility group box 1 protein,HMGBl)及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)mRNA表达的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症组(Sep组)和白藜芦醇组(Res组),采用盲肠结扎穿刺术(Cecal ligation and puncture,CLP)制备脓毒症相关性ALI大鼠模型,造模1 h后,Res组给予40mg/kg,Sham和Sep组给予等量生理盐水,均经股静脉注射。各组分别于2、6、12和24h,取大鼠肺组织,HE染色观察病理形态学变化,RT-PCR检测脓毒症大鼠各器官组织HMGB1及TLR4的mRNA的动态表达变化。结果:Res组在造模后12 h,肺组织病理变化与Sep组相比有所减轻,24 h Res作用达到最强,各种病理改变明显减轻,部分肺组织开始接近正常形态;Res组与Sepsis组比较,肺组织HGMB1及TLR4 mRNA表达明显下调。结论:Res可以通过下调肺组织HGMB1及TLR4 mRNA表达减轻脓毒症诱导的肺损伤。

白藜芦醇干预大鼠酒精性脂肪肝的研究

目的:观察白藜芦醇对大鼠酒精性脂肪肝的作用并探讨相关的作用机制。方法:用白酒灌胃诱导建立大鼠酒精性脂肪肝(AFL)模型,分设空白对照组、模型组、硫普罗宁(阳性对照)组、白藜芦醇(62.5、125、250mg/kg)治疗组。白藜芦醇干预9周后,称取大鼠体质量、体脂和肝脏重量计算肝指数与体脂比,分离血清测定血脂、转氨酶、NO和肝组织匀浆测定SOD、MDA指标,病理切片观察肝脏的病理变化。结果:与模型组相比,白藜芦醇(125、250mg/kg)治疗组大鼠的体脂量比、肝指数、丙氨酸转氨酶(ALT)、甘油三脂(TG)、丙二醛(MDA)的含量显著降低,超氧化物歧化酶(SOD)活性显著增加;白藜芦醇(62.5、125、250mg/kg)治疗组天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-D)、一氧化氮(NO)的含量显著降低,低密度脂蛋白胆固醇(HDL-D)含量显著增加,大鼠肝组织脂肪变明显减轻。结论:白藜芦醇具有降低转氨酶、血脂和抗氧化作用,减少肝细胞中的脂质沉积与肝损伤,改善白酒诱导的酒精性脂肪肝。

白藜芦醇改善阿霉素性心衰的机制研究

目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,RSV)对阿霉素(doxorubicine,Dox)诱导大鼠慢性心衰的影响及其作用机制。方法:取SD雄性大鼠60只,通过使用剂量递增的方法(1,2,3 mg/kg)腹腔注射阿霉素,成功建立慢性心衰模型。将心衰大鼠随机分为地高辛(阳性药)和白藜芦醇组(浓度分别为25.0,12.5,6.25mg/kg),另设空白对照组及模型组。各组均经过灌胃给药(20 ml/kg),给药3周后测定各组大鼠血流动力学参数左室收缩压(LVSP)、左室内压上升及下降最大速率(+dp/dtmax),WST微板法和TBA法检测心脏组织超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及总巯基的含量。Masson染色明确心肌间质胶原纤维增生情况,免疫组织化学方法观察心肌8-羟基脱氧鸟苷的表达。Western免疫印迹检测SIRT1蛋白表达情况。结果:与模型组比较,白藜芦醇25mg/kg浓度时明显改善大鼠心肌间质胶原纤维增生,降低8-羟基脱氧鸟苷大量表达,并且增加大鼠血流动力学LVSP、(+)dp/dtmax参数,增加心肌超氧化物岐化酶、总巯基的含量。蛋白免疫印迹显示白藜芦醇组剂量依赖性明显上调SIRT1蛋白表达。结论:白藜芦醇可减轻阿霉素诱导心衰大鼠的氧化损伤,这种保护可能是通过上调SIRT1来实现的。

白藜芦醇对妊娠期糖尿病大鼠血脂和脂肪因子水平的影响

目的:研究白藜芦醇(Resveratrol,Res)对妊娠期糖尿病大鼠血脂和脂肪因子水平的影响。方法:取60只妊娠5天SD大鼠,通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35 mg/kg制备妊娠期糖尿病大鼠模型,随机分为5组:妊娠糖尿病模型对照组,白藜芦醇(60、120和240 mg/kg)治疗组和盐酸二甲双胍(200mg/kg)阳性对照组,每组12只;另取12只妊娠5天SD大鼠作为正常妊娠对照组,以及12只非妊娠雌性大鼠作为正常非妊娠对照组。分别于给药前和给药治疗第7、14天通过血糖仪检测空腹血糖、并采用酶联免疫(ELISA)法胰岛素水平;治疗满2周后,测量各组大鼠体重;通过全自动生化检测仪测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)含量;采用ELISA法测定血浆中脂肪因子指标:瘦素(Leptin)、脂联素(Adiponectin)、抵抗素(Resistin)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果:与正常非妊娠对照组相比,正常妊娠对照组大鼠空腹血糖水平和胰岛素水平,体重,血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C含量,血浆中Leptin、Adiponectin、Resistin、TNF-α和IL-6水平均无显著性差异(P>0.05)。与正常妊娠对照组相比,妊娠糖尿病模型对照组大鼠胰岛素水平显著降低、空腹血糖水平显著升高;体重显著较高;血清中TC、TG、LDL-C含量显著升高,HDL-C含量显著降低;Leptin、Resistin、TNF-α、IL-6水平显著升高,Adiponectin水平显著降低。与妊娠期糖尿病模型组相比,白藜芦醇(60、120和240 mg/kg)治疗组大鼠血清中TC、TG含量显著降低;白藜芦醇(120和240 mg/kg)治疗组大鼠胰岛素水平显著升高、血糖水平显著降低,体重显著降低,血清中LDL-C含量显著降低,血浆中Leptin、TNF-α、IL-6水平显著降低;白藜芦醇240 mg/kg治疗组大鼠血清中HDL-C含量显著升高,血浆中Adiponectin显著升高且Resistin显著降低。与盐酸二甲双胍治疗组相比,白藜芦醇240 mg/kg治疗组大鼠胰岛素水平显著升高,血清中TC、TG、LDL-C含量显著降低,血浆中Leptin、TNF-α、IL-6水平显著降低且Adiponectin水平显著升高,差异均具有统计学意义。结论:白藜芦醇对妊娠期糖尿病大鼠具有剂量依赖性的提高胰岛素分泌、降低血糖、降低体重、调节血脂和血浆脂肪因子含量的作用。

白藜芦醇对肾性高血压大鼠脑动脉瘤形成的抑制作用

目的:观察白藜芦醇对肾性高血压大鼠脑动脉瘤形成的抑制作用及其对NF-κB活性的影响。方法:制作大鼠脑动脉瘤模型,随机分为对照组、模型组和治疗组,光镜及电镜观察组织学变化,应用免疫组化及EMSA检测NF-κB的动态变化。结果:组织学观察中对照组没有动脉瘤产生,模型组动脉瘤发生率约12%,治疗组大鼠给予白藜芦醇30mg/kg,仅发现部分动脉呈瘤前病变,无明显的动脉瘤产生。NF-κB在各组脑动脉壁中均有表达,对照组NF-κB活性微弱;模型组随着大鼠血压的增加其NF-κB活性迅速增加,术后1月时其活性增至高峰,并持续至术后2月,以后逐渐下降,术后4月降至正常水平;治疗组NF-κB活性被明显抑制,随着大鼠血压的增加,NF-κB活性仅有轻度增加,无明显的活性高峰出现。结论:NF-κB的高表达在脑动脉瘤形成的发病机制中起重要作用,白藜芦醇抑制NF-κB的高表达可能是防止动脉瘤的发生的机制之一。

白藜芦醇对LPS诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

目的:研究白藜芦醇对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞β淀粉样蛋白(beta amyloid,Aβ)分泌的影响。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,LPS刺激2h后给予不同浓度白藜芦醇,观察细胞形态学变化并采用化学比色法测定白藜芦醇对细胞培养上清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)分泌的影响,ELISA法检测白藜芦醇对细胞培养上清Aβ1-40和Aβ1-42分泌的影响,实时荧光定量PCR方法检测白藜芦醇对SH-SY5Y细胞β-分泌酶(beta-site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1,BACE1)mRNA表达的影响。结果:与正常组比较,LPS刺激可导致SH-SY5Y细胞损伤,细胞培养上清中LDH、Aβ1-40和Aβ1-42分泌均显著增多;白藜芦醇(10-9M、10-8M、10-7M、10-6M、10-5M)可显著降低LPS诱导的LDH分泌增多;白藜芦醇(10-6M、10-5M)可降低SH-SY5Y细胞培养上清中的Aβ1-40和Aβ1-42水平,并减少SH-SY5Y细胞BACE1的mRNA表达。结论:白藜芦醇体外用药可减少LPS诱导的SH-SY5Y细胞损伤及Aβ1-40和Aβ1-42分泌,其机制与抑制BACE1表达有关。