白花丹素介导sirt1-FOXO1通路对糖尿病肾病大鼠氧化应激损伤的影响

目的探究白花丹素通过沉默信息调节因子2相关酶(sirt)1-叉头框蛋白(FOX)O1通路对糖尿病肾病(DN)大鼠氧化应激损伤的影响。方法120只SD大鼠随机分为对照组、DN组、白花丹素低剂量组、白花丹素高剂量组、EX-527组(sirt1抑制剂,5 mg/kg)、白花丹素高剂量+EX-527组,每组20只。检测大鼠24 h尿蛋白、空腹血糖(FBG)、血肌酐(SCr)、血β2微球蛋白(β2-MG)及肾组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;测定大鼠左肾指数;过碘酸雪夫(PAS)染色观测肾脏病理变化;TUNEL法检测肾组织细胞凋亡;Western印迹法检测sirt1-FOXO1通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,DN组24 h尿蛋白、FBG、Scr、β2-MG水平、左肾指数、MDA、IL-1β、IL-6水平均显著升高,肾组织匀浆SOD、CAT水平、肾组织sirt1、FOXO1蛋白均显著降低(P<0.05)。与DN组相比,白花丹素低、高剂量组24 h尿蛋白、FBG、Scr、β2-MG水平、左肾指数、MDA、IL-1β、IL-6水平均显著降低,肾组织匀浆SOD、CAT水平、肾组织sirt1、FOXO1蛋白显著升高(P<0.05);EX-527组24 h尿蛋白、FBG、Scr、β2-MG水平、左肾指数、MDA、IL-1β、IL-6水平均显著升高,肾组织匀浆SOD、CAT水平、肾组织sirt1、FOXO1蛋白均显著降低(P<0.05);EX-527可部分削弱白花丹素高剂量对DN大鼠氧化应激损伤的缓解作用。结论白花丹素可能通过激活sirt1-FOXO1通路,缓解DN大鼠氧化应激损伤。

基于JAK2/STAT3信号通路探讨白花丹醌对人肝癌细胞迁移和侵袭的影响

目的:探讨中药单体白花丹醌(plumbagin,PL)对人肝癌细胞迁移与侵袭的影响及其可能的机制。方法:以人肝癌Huh-7和LM3细胞为研究对象,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测不同浓度的PL对Huh-7和LM3细胞增殖的影响,通过划痕实验和Transwell迁移实验检测PL对Huh-7和LM3细胞迁移能力的影响,Transwell侵袭实验检测PL对Huh-7和LM3细胞侵袭能力的影响,Western Blot检测Huh-7和LM3细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及酪氨酸蛋白激酶2(Janus kinase 2,JAK2)/信号传导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription3,STAT3)信号通路中相关蛋白的表达情况。结果:PL可抑制Huh-7和LM3细胞增殖,且呈现出时间和浓度依赖性;PL以浓度依赖性方式抑制Huh-7和LM3细胞迁移和侵袭;PL可下调N-cadherin、MMP-2蛋白表达,上调E-cadherin蛋白表达,且能够抑制JAK2/STAT3信号通路的激活。结论:PL可抑制人肝癌Huh-7和LM3细胞迁移和侵袭,该过程的分子机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路的激活有关。

白花丹素抗肿瘤基础作用机制研究进展

恶性肿瘤严重威胁人类生命健康。通过检索白花丹素抗肿瘤相关研究,发现白花丹素具有良好的抗肿瘤活性,对各种类型的恶性肿瘤都表现出良好的抑制效果。其抗肿瘤的作用机制主要是通过激活线粒体凋亡途径,破坏肿瘤细胞内氧化还原平衡状态;降低周期蛋白表达水平,紊乱肿瘤细胞周期;降低细胞侵袭、迁移能力和诱导肿瘤细胞发生自噬等实现。其分子机制与抑制Akt激活,调节PI3K/Akt/mTOR、PI3K/Akt/GLUT等多条信号通路有关。此外,白花丹素还可联合其他治疗手段,逆转肿瘤细胞多药耐药反应,增强肿瘤细胞对放疗的敏感性。然而现阶段对白花丹素主要集中于体外的基础研究,关于白花丹素对同种肿瘤不同表型细胞的机制差异性尚不清晰,且白花丹素具有一定细胞毒性,开发更多安全高效的载体系统,明确临床给药剂量也是广大学者的研究重点。故该文对近5年有关白花丹素抗肿瘤作用的相关文献进行归纳总结,为白花丹素抗肿瘤的进一步开发利用提供一定参考。

白花丹醌通过CXCL8/PI3K/AKT糖酵解通路抑制结肠癌细胞增殖、促进凋亡

目的:观察白花丹醌对结肠癌细胞Caco-2增殖、凋亡的影响,探究其潜在的作用机制。方法:运用CCK8法、流式细胞术检测不同浓度白花丹醌(4、8、12μmol/L)处理的Caco-2细胞的增殖抑制率、凋亡率。不做任何处理的Caco-2细胞设为Control;脂质体法将si-NC组(转染si-NC)、si-CXCL8组(转染si-CXCL8)转染至Caco-2细胞;8μmol/L的白花丹醌与0.5%DMSO处理的Caco-2细胞设为8μmol/L+DMSO组;8μmol/L的白花丹醌分别与z-VAD-FMK、740Y-P处理的Caco-2细胞设为8μmol/L+z-VAD-FMK组、8μmol/L+740Y-P组。RT-qPCR、Western blot实验检测细胞中CXCL8的mRNA、蛋白表达,CXCL8、M2-型丙酮酸激酶(M2 pyruvate kinase,PKM2)、L-乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)、人α-烯醇化酶(apha-enolase,ENO1)、葡萄糖磷酸异构酶(glucose phosphate isomerase,GPI)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(phosphorylated phosphatidylinositol 3 kinase,p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)的蛋白表达。结果:与Control组相比,白花丹醌(4、8、12μmol/L)呈浓度依赖性促进Caco-2细胞增殖抑制率、凋亡率升高,抑制CXCL8的mRNA和蛋白表达。与8μmol/L+DMSO组相比,8μmol/L+z-VAD-FMK组细胞的增殖抑制率、凋亡率明显降低,CXCL8的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。白花丹醌(4、8、12μmol/L)呈浓度依赖性抑制PKM2、LDHA、p-PI3K、p-AKT的蛋白表达。si-CXCL8组PKM2、LDHA、p-PI3K、p-AKT的蛋白表达明显低于si-NC组。740Y-P明显减弱白花丹醌对Caco-2细胞增殖抑制率和凋亡率的促进作用。结论:白花丹醌抑制结肠癌细胞增殖,促进凋亡,其潜在的作用机制与CXCL8/PI3K/AKT糖酵解通路有关。

白花丹素缓解眼小梁网细胞氧化应激损伤的作用

目的探讨白花丹素缓解眼小梁网细胞氧化应激损伤的作用。方法取人眼小梁细胞系iHTM进行培养、传代,建立小梁网细胞氧化应激损伤模型,分为对照组、模型组、抑制剂组、白花丹素联合抑制剂组和白花丹素组。检测各组丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX 1)、细胞增殖活性、细胞凋亡率和活性氧水平;检测各组Kelch样ECH关联蛋白1(Kelch like ECH associated protein 1,Keap1)、核因子相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)蛋白的相对表达量。结果与对照组比较,其他4组的MDA均升高,SOD、GPX 1均降低,且比较MDA,白花丹素组<白花丹素联合抑制剂组<模型组<抑制剂组,比较SOD、GPX 1,抑制剂组<模型组<白花丹素联合抑制剂组<白花丹素组(P<0.05);与对照组比较,其他4组的细胞增殖活性、细胞凋亡率、活性氧和Keap1蛋白的相对表达量均升高,Nrf2、ARE蛋白的相对表达量均降低,且比较细胞增殖活性、细胞凋亡率、活性氧和Keap1蛋白的相对表达量,白花丹素组<白花丹素联合抑制剂组<模型组<抑制剂组,而比较Nrf2、ARE蛋白的相对表达量,抑制剂组<模型组<白花丹素联合抑制剂组<白花丹素组(P<0.05)。结论白花丹素可缓解小梁网细胞氧化应激损伤,作用机制可能与激活Keap1/Nrf2信号通路有关。

白花丹素对涎腺腺样囊性癌细胞增殖、迁移、凋亡的干预作用及其机制

目的观察白花丹素(PLB)对涎腺腺样囊性癌细胞增殖、迁移、凋亡的干预作用,并探讨其作用机制。方法取涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞进行体外培养,将细胞分为0、12.5、25、50μmol/L PLB组,分别加入含0、12.5、25、50μmol/L PLB的DMSO培养基培养24 h。采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞毒性;CCK-8实验观察细胞增殖能力;Transwell试验观察细胞迁移能力;TUNEL染色法观察细胞凋亡情况;荧光探针法检测活性氧(ROS)水平,微量法检测丙二醛(MDA)含量;荧光探针法检测线粒体膜电位;Western blotting法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、Caspase-3表达,计算Bcl-2/Bax、Cleaved Caspase-3/Caspase-3。结果12.5、25、50μmol/L PLB组细胞LDH释放量均高于对照组,其中25、50μmol/L PLB组高于12.5μmol/L PLB组,50μmol/L PLB组高于25μmol/L PLB组(P均<0.05)。不同浓度PLB组细胞增殖能力、细胞迁移率均较对照组下降,其中25、50μmol/L PLB组低于12.5μmol/L PLB组(P均<0.05),25μmol/L PLB组与50μmol/L PLB组比较无统计学差异(P>0.05)。不同浓度PLB组细胞凋亡率均高于对照组,其中25、50μmol/L PLB组高于12.5μmol/L PLB组,50μmol/L PLB组高于25μmol/L PLB组(P均<0.05)。25、50μmol/L PLB组细胞内ROS水平均高于对照组和12.5μmol/L PLB组,且50μmol/L PLB组高于25μmol/L PLB组(P均<0.05);25、50μmol/L PLB组细胞内MDA水平均高于对照组,且50μmol/L PLB组高于12.5、25μmol/L PLB组(P均<0.05)。25、50μmol/L PLB组线粒体膜电位低于对照组,50μmol/L PLB组低于12.5μmol/L PLB组(P均<0.05)。不同浓度PLB组细胞Bcl-2/Bax均低于对照组,Cleaved Caspase-3/Caspase-3均高于对照组(P均<0.05),不同浓度PLB组间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论PLB可抑制涎腺腺样囊性癌细胞增殖和迁移,促进其凋亡;PLB可能是通过诱导线粒体氧化应激以及ROS介导的细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。

RP-HPLC测定民族药材白花丹不同药用部位中白花丹醌的含量

目的：建立白花丹药材中白花丹醌的含量测定方法并考察白花丹不同药用部位中的含量。方法：色谱条件：KromasilCi8柱（4．6mm×200mm，5μm），柱温30℃。流动相甲醇．水（65：35），检测波长213nm，流速1mL·min^-1。结果：白花丹醌在0．0208—0．104μg，峰面积与进样量具有良好的线性关系，回归方程y=-14．29＋9138．9X，r=0．9999，平均回收率为98．7％。白花丹各部位中白花丹醌的含量分别为：根0．394％，茎0．050％，叶0．031％。结论：本法简便、准确、重复性好，可用于控制白花丹药材质量。

白花丹素对金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果

文章通过研究白花丹素对金黄色葡萄球菌(MSSA)与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的生长和对MSSA、MRSA生物被膜的抑制效果,为治疗金黄色葡萄球菌感染提供了新的研究方向。研究采用微量稀释法测定白花丹素对MRSA与MSSA的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);用微孔板建立金黄色葡萄球菌的生物被膜体外模型,采用结晶紫染色法测定生物被膜的形成量。研究结果表明:白花丹素对MRSA和MSSA的生长均有抑制效果,且对两种细菌生物被膜的清除效果显著,MRSA形成的生物被膜更难被清除。

白花丹化学成分的研究

目的:研究白花丹Plumbago zeylanicaLinn.地上部分的化学成分。方法:对白花丹95%乙醇提取物的乙酸乙酯部分进行色谱分离,通过理化性质和波谱分析鉴定化合物的结构。结果:从白花丹中分离得到9个化合物,分别鉴定为白花丹醌(Ⅰ),isoshinanolone(Ⅱ),白花丹酸(Ⅲ),β-谷甾醇(Ⅳ),对羟基苯甲醛(Ⅴ),反式桂皮酸(Ⅵ),香兰子酸(Ⅶ),2,5-二甲基-7-羟基-色原酮(Ⅷ),3-吲哚甲醛(Ⅸ)。结论:化合物Ⅴ,Ⅶ,Ⅷ和Ⅸ为首次从白花丹属植物中分离得到。

HPLC测定不同采收途径及不同部位白花丹中白花丹醌的含量

目的:分析不同采收途径及不同部位的白花丹中白花丹醌含量,寻找富集白花丹醌的药用部位和白花丹的最佳采收途径。方法:采用HPLC法测定不同采收途径白花丹和不同部位中白花丹醌的含量:色谱柱为Hypersil ODS(25cm×4.6mm,25μm),流动相为甲醇-水(65∶35),流速为1.0mL/min,检测波长为213nm,柱温30℃。结果:白花丹醌在0.01μg～0.32μg含量范围呈线性关系,Y=18211600X+10434.57758,r=0.99946,RSD=1.28%(n=6);新鲜的白花丹根部、茎部及叶中白花丹醌的含量分别为0.026%、0.006%和0.014%;干燥的白花丹根部、茎部及叶中白花丹醌的含量分别为0.324%、0.082%和0.174%;枯萎的白花丹茎部、叶及穗中白花丹醌的含量分别为0.002%、0.001%和0.003%。结论:干燥组白花丹中白花丹醌含量高于新鲜组和枯萎组,白花丹根部的白花丹醌含量最高,其次是穗,叶、茎。本法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可用于控制白花丹药材的质量。

RP-HPLC测定不同产地白花丹中白花丹醌的含量

目的分析不同产地白花丹药材中白花丹醌含量的差异。方法采用KromasilC18柱（4.6mm×200mm,5μm）,柱温：30℃,流动相：甲醇-水（65∶35）,检测波长：213nm,流速：1mL·min^-1。结果白花丹醌在0.0104-0.3328μg,峰面积与进样量具有良好的线性关系,回归方程为Y=-22.32＋9527.9X,r=0.9999,平均回收率为98.7%。结论本法简便、准确、重复性好,可用于控制白花丹药材质量。

HPLC法测定云南不同产地白花丹的不同部位中白花丹醌的含量

目的:建立白花丹药材中白花丹醌的反相高效液相色谱测定方法,以分别考察云南不同产地白花丹药材的不同部位中白花丹醌的含量。方法:色谱柱为 Kromasil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(70:30),流速为1.0mL·min^(-1),检测波长为254 nm,柱温为25℃。结果:白花丹醌在25.3～253μg·mL^(-1)范围内,具有良好的线性关系,r=0.9998;平均回收率为99.0%,RSD=1.4%(n=6)。不同产地白花丹药材地上部分的白花丹醌含量分别为0.046%(嘎洒),0.079%(勐养),0.134%(嘎东),0.032%(曼东),0.047%(曼阁),0.057%(曼老);根部的白花丹醌含量分别为0.842%(嘎洒),1.04%(勐养),1.44%(嘎东),0.763%(曼东),0.639%(曼阁),1.97%(曼老)。结论:本法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可用于控制白花丹药材质量。

白花丹素的提取及其抗氧化活性研究

[目的]从白花丹中提取活性成分白花丹素,研究抗氧化活性并探讨作用机理。[方法]利用柱层析法从白花丹的乙醇提取液中分离得到其活性成分白花丹素,通过核磁共振、红外光谱,质谱等谱学方法鉴定化合物结构;运用磷钼酸盐法测定不同浓度白花丹素的总抗氧化能力;运用碘量法测定不同浓度白花丹素抑制花生油脂过氧化的能力。[结果]白花丹素表现出较强的总抗氧化能力,能明显抑制油脂过氧化,且呈正相的剂量效应和时间效应,各处理浓度的抗氧化能力也基本表现出优于BHT(1.0 mg/ml)的抗氧化能力。[结论]白花丹素萘醌环的酚羟基是抗氧化作用的主要活性基团,白花丹素的抗氧化能力是抗肿瘤作用的重要机制之一。

不同溶剂索氏提取的白花丹叶中白花丹醌的含量测定

[目的]测定不同方法提取的白花丹鲜叶中白花丹醌的含量并加以比较,优选出最佳提取溶剂。[方法]采用索氏提取法,选用不同的溶剂提取白花丹鲜叶中的白花丹醌,并通过HPLC测定其含量,从而确定最佳提取溶剂。[结果]测得用氯仿、石油醚(II)、浓度95%乙醇、无水甲醇提取白花丹醌的含量依次为0.511%、0.341%、0.233%和0.191%;用氯仿提取的白花丹醌含量(提取率)最高。[结论]不同方法提取的白花丹鲜叶中白花丹醌的含量差异明显。

白花丹鲜叶与干叶中白花丹醌含量测定

[目的]比较白花丹新鲜叶及干燥叶中白花丹醌含量的高低。[方法]采用水蒸气蒸馏法提取白花丹叶中的白花丹醌,用高效液相色谱仪检测鲜叶及干燥叶中白花丹醌的含量。[结果]白花丹鲜叶与干燥叶中白花丹醌的含量分别为0.0275%和0.0088%。[结论]白花丹醌的含量新鲜叶比干燥叶高。

白花丹花和果实中白花丹醌含量的分析

[目的]检测白花丹花和果实中白花丹醌的含量,为白花丹花和果实的临床应用及开发提供依据。[方法]采用无水甲醇(50 ml)冷浸药材粉末24 h后,再利用超声提取(50 min),通过高效液相色谱法(HPLC)测定白花丹花和果实中白花丹醌的含量。[结果]白花丹花及果实中白花丹醌的含量分别为0.005 9%和0.009 5%。[结论]白花丹花和果实均含活性成分白花丹醌,具有开发利用价值。

白花丹素和白花丹素-铜配合物体外抗肿瘤活性研究

目的:观察白花丹素及白花丹素-铜配合物对肿瘤细胞株的生长抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法:采用MTT法检测不同浓度的白花丹素及白花丹素-铜配合物对体外培养的多种肿瘤细胞株的生长抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50)。结果:白花丹素-铜配合物对大多数肿瘤细胞株的抑制率大于白花丹素,但抗肿瘤谱小于白花丹素,推测白花丹素-铜配合物的抗癌活性强于白花丹素,但抗肿瘤谱缩小,可能与白花丹素-铜配合物的配位关系、构效关系有关。结论:白花丹素及白花丹素-铜配合物具有体外抗肿瘤活性。

白花丹鲜茎与干茎中白花丹醌含量测定

采用水蒸气蒸馏法提取白花丹茎中的醌类化合物,并测定化合物中白花丹醌的含量。结果表明,白花丹鲜茎与干燥茎中白花丹醌的含量分别为0.0423%、0.0420%。

HPLC测定不同方法提取白花丹叶中白花丹醌的含量

[目的]优选白花丹鲜叶中白花丹醌的最佳提取方法。[方法]分别采用超声提取法、索氏提取法和水蒸气蒸馏提取法提取白花丹鲜叶中的白花丹醌,然后采用HPLC测定其含量,比较分析测定结果,优选出最佳提取方法。[结果]测得超声提取法、索氏提取法和水蒸气蒸馏提取法提取白花丹醌的含量依次为0.036 3%、0.051 1%和0.017 5%;采用索氏提取法提取的白花丹醌含量最高。[结论]优选出白花丹鲜叶中白花丹醌的最佳提取方法为索氏提取法。

白花丹醌的提取分离鉴定

目的对多民族药材白花丹(Phum bago zeylanicaL.)中的白花丹醌进行提取分离和鉴定。方法用硅胶柱层析分离;用TLC,IR,MS,NMR等技术鉴定结构。结果从白花丹中分离得到桔黄色针状结晶,根据理化性质、薄层色谱及光谱数据分析,鉴定为白花丹醌(P lumbagin)。结论为建立白花丹药材的质量控制方法打下了物质基础,对白花丹临床用药安全及进一步开发具有极其重要的意义。