白花丹提取物对肝纤维化大鼠的实验性研究

目的:观察白花丹提取物对大鼠肝纤维化的血清学以及病理形态学的影响。方法:四氯化碳油剂皮下注射诱发大鼠肝纤维化病变,第3周起以白花丹提取物进行干预。第8周处死,取血清测定肝功能及肝纤四项指标的含量变化;取肝脏标本进行病理形态学观察,并免疫组化检测Ⅰ型胶原蛋白及α-SMA蛋白的表达。结果:光镜下组织学检查纤维化程度显示,血清检测结果显示,白花丹治疗组大鼠的肝功能状况好转,肝纤四项指标明显降低;病理学观察结果显示纤维化程度降低;免疫组化检测结果Ⅰ型胶原蛋白及α-SMA蛋白表达降低。以上结果均有统计学差异(P<0.05)。且白花丹治疗组的以上结果与秋水仙碱组相比,均有统计学差异(P<0.05)。结论:白花丹提取物有逆转实验性大鼠肝纤维化病变并保护其肝功能的作用,且白花丹提取物的以上作用优于秋水仙碱。

白花丹提取物对高糖诱导的肾小球系膜细胞纤维化及miR-155/SOSC1轴的影响

目的:探讨白花丹提取物对高糖诱导的肾小球系膜细胞纤维化及mir-155/SOSC1轴的影响。方法:设大鼠肾小球系膜细胞HBZY-1对照组(不含D-葡萄糖)、高糖组(25 mmol·L-1D-葡萄糖)、白花丹提取物低、中、高剂量组(25 mmol·L-1D-葡萄糖并分别加入白花丹提取物,使白花丹提取物终浓度为10.0,100.0,1000.0μg·ml-1),以上各组置于CO2培养箱(37℃、5%CO2、2%O2、93%N2),各组每孔设6个平行样,培养72 h。各组细胞培养结束后,MTT法测定各组细胞活力,膜联蛋白VFITC/PI染色测定各组细胞凋亡水平,流式细胞仪分析各组细胞周期水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及免疫印迹(Western-Blot)法测定mir-155、SOSC1基因及SOSC1蛋白水平。结果:高糖组吸光度(A)值、存活率水平、G1期、mir-155、SOSC1 mRNA、SOSC1蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05),细胞凋亡率显著低于对照组(P<0.05);白花丹提取物各剂量组A值、存活率水平、G1期、mir-155、SOSC1 mRNA、SOSC1蛋白表达水平显著低于高糖组(P<0.05),细胞凋亡率显著高于高糖组(P<0.05);随着白花丹提取物剂量逐渐增加,白花丹提取物各剂量组A值、存活率、G1期、mir-155、SOSC1 mRNA、SOSC1蛋白表达水平逐渐降低,细胞凋亡率逐渐升高(P<0.05)。结论:白花丹提取物能抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞纤维化,其机制与白花丹提取物通过抑制mir-155/SOSC1/NLRP3炎症途径的激活有关。

白花丹提取物对高糖诱导的肾小球系膜细胞分泌炎症因子及细胞外基质的影响

目的探讨白花丹提取物对高糖诱导的肾小球系膜细胞分泌炎症因子及细胞外基质的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,随机分为对照组,模型组,白花丹提取物低剂量(1 mg/L)、中剂量(2 mg/L)、高剂量(4 mg/L)组,甘露醇(24.5 mmol/L)组,收集各组细胞及细胞培养基,以酶联免疫吸附法检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平;检测各组细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;以实时荧光定量法检测各组细胞miR-155、SOCS1 mRNA水平;采用蛋白免疫印迹法检测各组细胞纤维连结蛋白(fibronectin,FN)、Ⅳ型胶原蛋白(collagen IV,Col IV)、细胞因子信号传导抑制蛋白1(cytokine signal transduction inhibitor 1,SOCS1)蛋白表达。结果与对照组相比,模型组、甘露醇组细胞上清液中TNF-α、IL-6及TGF-β1水平升高,细胞MDA、miR-155、FN及Col IV表达升高(P<0.05),细胞SOD水平、SOCS1 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05)。与模型组相比,白花丹提取物低、中、高剂量组细胞上清液中TNF-α、IL-6及TGF-β1水平降低,细胞MDA、miR-155、FN及Col IV表达降低(P<0.05),细胞SOD水平、SOCS1 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05),且各项变化均对白花丹提取物呈剂量依赖性(P<0.05)。结论白花丹提取物可抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞分泌炎症因子及细胞外基质,下调miR-155表达、上调SOCS1表达可能是其作用机制。