白花蛇舌草乙醇提取物对肺腺癌A549/DDP细胞的耐药逆转及其机制

目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物在体外对肺腺癌A549/DDP细胞株的耐药逆转作用及对多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响。方法MTT法测定白花蛇舌草乙醇提取物对A549/DDP细胞耐药的逆转作用;半定量RT-PCR和Western Blot分别检测肿瘤细胞MRP mRNA和蛋白的表达。结果白花蛇舌草乙醇提取物使A549/DDP细胞对DDP的耐药倍数由10.294下降至5.586;并显著降低A549/DDP MRP mRNA和蛋白的表达。结论白花蛇舌草乙醇提取物可以部分逆转肺腺癌A549/DDP细胞对DDP的耐药;其逆转作用可能通过降低细胞MRP的表达来实现。

白花蛇舌草乙醇提取物对肺腺癌A549细胞株增殖和凋亡的影响

目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物在体外对肺腺癌A549细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用MTT法测定不同浓度白花蛇舌草乙醇提取物对A549细胞增殖的影响；Hoechst 33258检测白花蛇舌草乙醇提取物作用后细胞凋亡情况；流式细胞仪检测药物作用后的细胞周期和凋亡率；Western Blot检测药物作用后的Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果白花蛇舌草乙醇提取物抑制A549细胞增殖呈时-效和量-效关系；Hoechst33258检测白花蛇舌草乙醇提取物作用A549细胞后可见凋亡细胞；40 mg/ml白花蛇舌草乙醇提取物作用A549细胞12，24，36，48h，药物组G1-G0期细胞百分比分别为（42.82±3.95）%，（51.84±6.37）%，（54.76±8.85）%和（64.94±7.56）%，药物组细胞凋亡率分别为（5.72±0.98）%，（7.10±2.08）%，（19.89±4.25）%，（32.55±6.51）%，均高于对照组（P均（0.05），且G1-G0期细胞百分比和凋亡率随药物作用时间增加而增加；Western Blot显示，白花蛇舌草乙醇提取物作用A549细胞，Bax的表达随作用时间增加而增加，Bcl-2的表达随作用时间增加而减低。结论白花蛇舌草乙醇提取物随着药物浓度和作用时间的增加对肺腺癌A549细胞的体外抑制效应增加；其抑制作用可能通过将细胞周期阻滞于G1-G0期和通过上调Bax和下调Bcl-2的表达而诱导细胞凋亡来实现的。

白花蛇舌草乙醇提取物调控DDR1对大鼠肝癌细胞增殖的影响

目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物对大鼠肝癌细胞增殖的影响及作用机制。方法选取Wistar大鼠82只,采用小剂量二乙基亚硝铵(DEN)构建大鼠肝癌模型,在动物造模成功后随机分为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,各20只。造模成功后1 d,模型组给予乙醇提取物溶剂1 mL/(100 g·d)灌胃处理8周,后三组分别给予90、180、360 mg/(kg·d)白花蛇舌草乙醇提取物灌胃处理8周。观察各组大鼠一般情况;常规检测各组大鼠血清ALT、AST水平;采用HE染色观察各组大鼠肝脏组织形态学变化;采用免疫组化染色法测算各组大鼠肝组织PCNA阳性细胞表达率;采用Western blotting法检测各组大鼠肝组织PI3K、Akt和DDR1蛋白。结果模型组大鼠精神表现萎靡、毛发散乱,饮食量降低,低、中、高剂量组大鼠上述状态得到一定的改善。与模型组相比,低、中、高剂量组大鼠ALT和AST水平降低(P<0.05或<0.01)。HE染色显示模型组大鼠肝组织多处坏死,伴有明显的形态异常;低、中、高剂量组大鼠肝组织坏死减轻,细胞变性程度减轻。与模型组相比,低、中、高剂量组PCNA阳性细胞率降低,PI3K、Akt、DDR1蛋白表达降低(P<0.05或<0.01)。结论白花蛇舌草乙醇提取物能够抑制大鼠肝癌细胞增殖,其机制可能与下调DDR1表达,抑制PI3K/Akt信号通路有关。

基于自噬途径探究白花蛇舌草乙醇提取物对结肠癌SW480细胞凋亡情况的影响

目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物对结肠癌SW480细胞自噬和凋亡的调节作用,为临床治疗结肠癌提供新的途径。方法将结肠癌SW480细胞完全培养后接种于6孔板,设置对照组与低、中、高剂量组,分别加入含有0μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的白花蛇舌草乙醇提取物进行干预。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,计算细胞增殖抑制率(IR);DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率;AO染色观察细胞自噬的情况;Western blot法检测相关蛋白表达。结果低、中、高剂量组24 h、48 h、72 h后IR水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);随着作用时间的延长和浓度的提高,白花蛇舌草乙醇提取物对结肠癌SW480细胞增殖的抑制作用越明显,在24 h、48 h、72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为(35.78±2.52)μg/ml、(24.59±2.74)μg/ml和(18.54±2.12)μg/ml。低、中、高剂量组细胞凋亡率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),随着浓度的提高,白花蛇舌草乙醇提取物促进结肠癌SW480细胞凋亡的作用越明显。低、中、高剂量组细胞内发出红色荧光的酸性自噬囊泡的比重明显高于对照组。与对照组比较,低、中、高剂量组细胞干预72 h后自噬相关蛋白Beclin-1、BNIP3、Atg 5表达均明显增加,p62表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论白花蛇舌草乙醇提取物对结肠癌SW480细胞增殖抑制作用显著,其机制可能与诱导细胞自噬和凋亡,共同促进细胞死亡有关。

白花蛇舌草乙醇提取物对人肾癌786-0细胞体外生长及体内成瘤的影响

目的:探讨白花蛇舌草乙醇提取物(Ethanol extract of Hedyotis Diffusae Herba,EEHDH)对人肾癌786-0细胞体外生长及体内成瘤的影响。方法:体外实验采用MTT法检测EEHDH对人肾癌786-0细胞的生长抑制作用;体内实验采用人肾癌786-0细胞实体瘤小鼠动物模型,取30只昆明小鼠,6只为正常对照组,余24只昆明种小鼠每只左后肢腋窝皮下接种0.2 m L肿瘤细胞悬液,24 h后称质量,随机分为模型对照组、EEHDH低剂量组、EEHDH中剂量组和EEHDH高剂量组,每组各6只。正常组和模型对照组灌胃等体积饮用水,EEHDH低剂量组、EEHDH中剂量组和EEHDH高剂量组分别灌胃含生药量5.0 g·kg-1、10.0 g·kg-1、20.0 g·kg-1的EEHDH溶液,每日1次,连续给药14 d,末次给药24 h后颈椎脱臼处死动物,切开肿瘤部位,剥离瘤块,用滤纸吸净其上液体,称瘤块质量,计算抑瘤率。同时分离胸腺、脾脏,精密称质量,计算胸腺指数、脾脏指数。结果:EEHDH在体外可显著抑制人肾癌786-0细胞的增值,其效果与剂量和作用时间相关。体内试验表明,与模型组比较,EEHDH低剂量组、EEHDH中剂量组、EEHDH高剂量组均能明显减轻瘤块的质量,差异具有统计学意义(P<0.05),抑瘤率分别为16.02%、31.22%和34.26%,差异有统计学意义(P<0.05)。小鼠荷瘤后,其脾脏指数、胸腺指数比较正常组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,EEHDH低剂量组、EEHDH中剂量组、EEHDH高剂量组能显著提高脾脏指数,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:EEHDH在体外能明显抑制人肾癌786-0细胞的增值,体内能显著抑制荷瘤小鼠肾癌786-0细胞生长,与调节免疫器官功能有关。

白花蛇舌草乙醇提取物抗炎作用研究

目的观察白花蛇舌草乙醇提取物(EEHD)的抗炎作用。方法采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型[选昆明种小鼠50只,随机分成五组,每组10只,分别按125、250、500 mg/(kg·d)剂量给试验组灌胃白花蛇舌草乙醇提取物,连续8 d;对照组灌胃阿司匹林100 mg/(kg·d),连续8 d;空白组灌胃生理盐水0.5 ml/(kg·d),连续8 d]和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)致小鼠腹腔白细胞增多模型[选小鼠50只,随机分成五组,每组10只,分别按125、250、500 mg/(kg·d)剂量给试验组灌胃白花蛇舌草乙醇提取物,连续8 d;对照组灌胃阿司匹林100 mg/(kg·d),连续8 d;空白组灌胃生理盐水0.5 ml/(kg·d),连续8 d]研究白花蛇舌草抗炎作用。结果连续灌胃给药8 d,与空白组比较,对照组及250、500 mg/(kg·d)试验组对二甲苯所致小鼠耳肿胀有抑制作用(P<0.05)。与空白组比较,对照组及500 mg/(kg·d)试验组能显著抑制CMC-Na引起的小鼠腹腔白细胞游走(P<0.05)。结论白花蛇舌草具有显著的抗炎作用。

白花蛇舌草乙醇提取物对不同上皮-间质表型的肺腺癌细胞体外作用的研究

目的研究白花蛇舌草乙醇提取物(EEHD)对不同上皮-间质表型的肺腺癌细胞(H358、A549、HCC827)增殖和凋亡的影响。方法以人肺腺癌细胞H358、A549、HCC827为研究对象,分别加入不同浓度EEHD孵育48 h后,通过CCK8检测各组细胞生长情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果 EEHD对HCC827、H358、A549细胞生长抑制IC50分别为277.11、404.51、887.85 g/ml。与浓度为250 g/ml的EEHD共孵育48 h后,HCC827、H358、A549细胞的凋亡率分别为18.03%、14.97%、14.60%。结论 EEHD对H358、A549、HCC827上皮-间质表型人肺腺癌细胞生长有不同程度的抑制作用,其作用机理尚待进一步研究。

白花蛇舌草乙醇提取物对MHCC97-H、MHCC97-L肝癌细胞体内外增殖的影响

目的:探讨白花蛇舌草乙醇提取物对肝癌细胞MHCC97-H、MHCC97-L增殖的影响。方法:通过CCK-8增殖实验、平板克隆实验、细胞周期及凋亡检测观察白花蛇舌草乙醇提取物对细胞增殖的影响;通过球形成实验、肝癌干细胞标志物EpCAM、CD133检测观察白花蛇舌草乙醇提取物对肝癌干细胞亚群的影响。通过构建MHCC97-H肝癌细胞裸鼠移植瘤模型,观察白花蛇舌草乙醇提取物在体内对肝癌细胞生长的影响,通过构建移植瘤指数生长模型,评估其抗肝癌疗效。结果:白花蛇舌草乙醇提取物呈时间、浓度依赖性抑制肝癌细胞MHCC97-H、MHCC97-L体外增殖。与正常对照组比较,4 mg/mL白花蛇舌草乙醇提取物可降低肝癌细胞克隆形成率(P<0.01),明显增加G_(0)/G_(1)期细胞比例(P<0.01),明显增加凋亡细胞比例(P<0.01),明显降低细胞成球率及EpCAM^(+)、CD133^(+)干细胞亚群比例(P<0.01)。体内实验表明,白花蛇舌草乙醇提取物0.52 g/kg组MHCC97-H移植瘤体积在治疗期内小于生理盐水组,通过构建移植瘤指数增长模型可得生理盐水组与白花蛇舌草乙醇提取物组移植瘤生长速率分别为7.9%,6.8%,白花蛇舌草乙醇提取物0.52 g/kg组肿瘤生长延迟2 d。结论:白花蛇舌草乙醇提取物可能通过阻滞MHCC97-H、MHCC97-L细胞周期于G_(0)/G_(1)期、诱导其凋亡、抑制细胞自我更新能力、抑制EpCAM^(+)、CD133^(+)干细胞亚群生长以抑制肝癌细胞体内外增殖。

白花蛇舌草提取物通过AMPK/ATG5信号通路对急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用机制研究

目的:通过5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/自噬相关蛋白5(ATG5)信号通路,探讨白花蛇舌草提取物减轻急性胰腺炎(AP)大鼠肺损伤的机制。方法:建立AP肺损伤大鼠模型,随机分为模型组、提取物(白花蛇舌草提取物)组、3-MA(自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤)组、AICAR(AMPK激活剂)组、提取物+AICAR组,每组15只,另取15只大鼠作为假手术组;ELISA检测血清淀粉酶(AMY)、IL-1β、IL-6、IL-18水平;检测大鼠腹水量及肺湿/干重比(W/D);HE观察胰腺及肺组织病理损伤;Western blot检测溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)、自噬底物p62、IL-1β前体蛋白(pro-IL-1β)、胰蛋白酶原活化肽(TAP)、AMPK、p-AMPK、ATG5、自噬标志物LC3-Ⅱ/Ⅰ、泛素特异性蛋白酶10(UPS10)表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠腹水量、肺W/D、胰腺和肺组织病理损伤评分、血清AMY、IL-1β、IL-6、IL-18水平、胰腺组织p62、TAP、pro-IL-1β表达、肺组织pAMPK/AMPK、ATG5、LC3-Ⅱ/Ⅰ、UPS10、pro-IL-1β表达均升高(P<0.05),胰腺和肺组织LAMP2蛋白表达降低(P<0.05);模型大鼠经白花蛇舌草提取物或自噬抑制剂3-MA干预后,上述指标均得到显著改善(P<0.05),且白花蛇舌草提取物的改善效果优于3-MA(P<0.05);而AMPK激活剂AICAR可削弱白花蛇舌草提取物对AP大鼠肺损伤的改善作用(P<0.05)。结论:白花蛇舌草提取物可通过抑制AMPK/ATG5信号通路减轻炎症反应、降低自噬水平改善AP大鼠肺损伤。

白花蛇舌草提取物通过抑制有氧糖酵解和促进氧化磷酸化抑制肝癌细胞增殖

目的 探讨白花蛇舌草提取物(HDE)对肝癌细胞增殖的影响及其与有氧糖酵解和氧化磷酸化的关系,并分析其可能机制。方法 采用CCK-8实验和细胞增殖实验(5-ethynyl-2-deoxyuridine, EDU)检测不同质量浓度(20、40、80 mg/mL)HDE对肝癌细胞SNU-368增殖的影响;采用酶标仪检测乳酸脱氢酶活性、葡萄糖摄取、乳酸生成、线粒体呼吸链复合体活性,采用pH计检测细胞外液pH值,采用细胞氧耗仪检测细胞氧耗,分析HDE对SNU-368细胞有氧糖酵解和氧化磷酸化的影响;采用qRT-PCR实验检测各组SNU-368细胞中GLUT1、GLUT4、HK2、GPI、PFKL、ALDOA和HIF-1α的mRNA表达,采用Western blotting检测HIF-1α的蛋白表达。用过表达HIF-1α的慢病毒转染肝癌细胞SNU-368构建过表达HIF-1α稳转细胞株,并进行HDE相应干预后,采用qRT-PCR和Western blotting检测HIF-1α的mRNA及蛋白表达。结果 CCK-8实验显示,HDE呈一定的浓度依赖效应抑制肝癌细胞增殖(均P<0.05);糖代谢相关检测结果显示,HDE可以抑制葡萄糖摄取和乳酸生成,降低乳酸脱氢酶活性,升高细胞外培养液pH值,增加细胞氧耗和线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性(均P<0.05);qRT-PCR结果显示,HDE抑制了GLUT1、HK2、GPI、ALDOA mRNA的表达(均P<0.05)。qRT-PCR和Western blotting实验显示,与对照组相比,HDE组HIF-1α mRNA及蛋白的表达明显减少;而与HDE组相比,HDE干预过表达HIF-1α的HIF-1α-LV组中,HIF-1α mRNA及蛋白表达再次增加(P<0.05)。结论 HDE通过抑制肝癌细胞有氧糖酵解、促进氧化磷酸化而抑制肝癌细胞增殖,作用机制可能与抑制HIF-1α的表达有关。

白花蛇舌草乙醇提取物体外诱导人AML-M2白血病细胞凋亡机制研究

目的观察白花蛇舌草乙醇提取物(ethanol extract of Hedyotis diffusa Willd.,EEHDW)对AML-M2白血病Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响机制。方法采用MTT比色法、Hoechest荧光染色检测测定EEHDW作用后Kasumi-1细胞增殖和凋亡的情况,Western blotting法检测Kasumi-1细胞中Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-9、Cyto-C、P65、p-P65、IkBα、p-IkBα、IKKα/β、C-myc以及AML1-ETO的蛋白水平。结果 EEHDW抑制急性髓系白血病Kasumi-1细胞增殖,并具有时间和浓度依赖性。0.04,0.06,0.08mg·mL?1的EEHDW能诱导细胞凋亡(P<0.05或P<0.01)。EEHDW可以显著上调Cyto-C、cleaved PARP、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9以及Bax的表达水平,而降低Bcl-2、C-myc和AML1-ETO蛋白的表达,同时EEHDW能够浓度依赖性地增加p-P65、p-IkBα的蛋白表达。结论 EEHDW诱导Kasumi-1细胞凋亡一方面是通过调节Bax/Bcl-2的表达影响线粒体途径,另外一方面还与激活NF-кB信号通路有关,在这个过程中同时抑制原癌基因C-myc和AML1-ETO融合基因的表达。

白花蛇舌草乙醇提取物对TGF-β1诱导的人肺腺癌细胞H358上皮间质化的干预作用

目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物(EEHD)对转化生长因子-β1(TGF-β1)体外诱导的人肺腺癌细胞H358间质化过程的干预作用。方法以5 ng·m L-1的转化生长因子-β1作用于H358细胞24 h,成功构建上皮间质转化模型,此后分别加入低、中、高浓度的白花蛇舌草乙醇提取物作用48 h后,通过蛋白质印迹法与定量聚合酶链反应检测各组细胞上皮标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)及间质细胞标志物波蛋白(vimentin)的蛋白和mRNA的表达。结果 5 ng·m L-1的转化生长因子-β1可成功构建H358细胞上皮间质转化模型,在不同浓度白花蛇舌草乙醇提取物干预后,随浓度升高E-钙黏蛋白表达呈上升趋势,波蛋白表达下降。结论白花蛇舌草乙醇提取物能部分干预甚至逆转转化生长因子-β1诱导的H358细胞上皮间质转化过程。

白花蛇舌草多糖的提取工艺、生物学功能及在畜禽生产上应用的研究进展

白花蛇舌草是一种药食同源性植物,对畜禽绿色健康养殖、畜产品安全等都有积极作用。迄今为止从白花蛇舌草中鉴定出180多种化合物,包括环烯醚类、黄酮类、蒽醌类、酚类、挥发油和多糖等。多糖类化合物是白花蛇舌草主要的生物活性成分之一,具有抗氧化、免疫调节、抗肿瘤等多种药理活性。为此,本文对白花蛇舌草多糖的提取工艺、生物学活性的作用机制及其在畜禽生产上的应用进行阐述,并对白花蛇舌草多糖目前存在的问题和在畜禽生产上的前景进行展望,为白花蛇舌草多糖在新型饲料添加剂方面的开发利用提供参考。

白花蛇舌草提取物抗氧化作用的研究

研究了白花蛇舌草的水、乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、石油醚提取物的抗氧化活性及其有效成分。结果表明 :在花生油中 ,这 6种溶剂的提取物均有抗氧化作用 ,以丙酮提取物的抗氧化作用最强 ,其最适使用质量分数为 0 .12 %。质量分数 0 .12 %的丙酮提取物的抗氧化活性低于质量分数 0 .0 2 %的茶多酚 ,但高于质量分数 0 .0 2 %的BHT、BHA、VC、VE。白花蛇舌草提取物的抗氧化成分以黄酮、萜类、羟基蒽醌。

白花蛇舌草提取物诱导U937细胞凋亡的实验研究

目的探讨中草药白花蛇舌草(HDW)醇提取物在体外对人白血病细胞株的增殖抑制和凋亡作用。方法以白血病U937细胞为研究对象,以不同浓度和不同时间HDW醇提取物为干预因素,用MTT法检测HDW醇提取物对U937细胞的抑制作用;用细胞形态学、流式细胞术、DNA电泳观察细胞凋亡情况。结果U937细胞经HDW醇提取物作用后,呈时间和剂量依懒性。光镜观察可见细胞膜完整、核碎裂、凋亡小体等形态学特征,DNA电泳呈现典型的梯形条带,流式细胞仪分析表明0.5,1,2,4 mg/mL的HDW醇提取物使U937细胞发生凋亡率分别为4.18%,56.96%,82.43%,56.41%。结论HDW醇提取物抗肿瘤效应强,同时抑制U937细胞的增殖及诱导细胞凋亡。

壮药白花蛇舌草不同部位总DNA提取方法的比较研究

目的:比较改良试剂盒法和改良CTAB法对白花蛇舌草不同部位总DNA提取的效果。方法:以白花蛇舌草的新鲜叶片、茎、花、果及干燥全草为实验材料,采用改良试剂盒法和改良CTAB法两种DNA提取方法提取上述材料的总DNA,将提取到的DNA经凝胶电泳和超微量分光光度计检测,比较两种方法对白花蛇舌草不同部位总DNA的提取效果。结果:提取浓度方面,使用改良试剂盒法提取叶、茎、花的总DNA浓度能达到0.3μg/mL以上,使用改良CTAB法提取叶、茎的总DNA浓度能达到0.3μg/mL以上;提取纯度方面,改良试剂盒法对花DNA的提取纯度最高(A260/A280=1.80),其余部分次之,改良CTAB法对叶DNA的提取纯度最高(A260/A280=1.79),其余部分次之。结论:当提取白花蛇舌草新鲜叶片和茎的DNA时,改良试剂盒法和改良CTAB法均能较好的效果;当提取白花蛇舌草的新鲜花、果和干燥全草的DNA时,改良试剂盒法能满足实验要求。

白花蛇舌草-半枝莲药对提取物抑菌活性部位研究

目的通过测定白花蛇舌草-半枝莲药对醋酸乙酯/95%乙醇(1∶1)提取上清液F0、析出浸膏F1、析出浸膏经AB-8大孔树脂富集后组分F2及F2经聚酰胺分离得到的各组分的抑菌活性,寻找药对提取物抑菌活性的活性部位或活性成分。方法采用一剂量法和二倍稀释法测定各提取对5种微生物(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、毛霉、酵母菌)的抑菌活性。结果与结论 F0抑制金黄色葡萄球菌活性最强;F1没有抑菌活性;F1经过大孔树脂富集后组分F2抑菌活性得到显著增强,其抑制枯草芽孢杆菌活性强于F0,抑菌效价值达8.37μg.ml-1;F2经聚酰胺分离得到的F2-10组分是抑制枯草芽孢杆菌的活性部位;各提取物对霉菌和酵母菌均无抑制活性。

白花蛇舌草提取物通过Hippo-YAP信号通路抑制胰腺癌SW1990细胞上皮细胞间质转化

目的:探讨白花蛇舌草提取物对胰腺癌SW1990细胞上皮细胞间质转化(EMT)的影响,分析其与Hippo-Yap相关蛋白(YAP)信号通路活化的关系。方法:体外培养胰腺癌SW1990细胞,试验分为7组:对照组(不添加任何药物处理),低剂量组(白花蛇舌草提取物20 mg/ml),中剂量组(白花蛇舌草提取物50 mg/ml),高剂量组(白花蛇舌草提取物100 mg/ml),抑制剂组(XMU-MP-1抑制剂),高剂量+抑制剂组,阳性对照组(冬凌草甲素15μmol/L)。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测SW1990细胞凋亡情况;Western blot检测YAP及其磷酸化蛋白(p-YAP)、E钙黏附蛋白(E-cadherin)、N-钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、α平滑肌动蛋白(α-SMA)、转录因子(Snail)表达情况。结果:与对照组相比,白花蛇舌草提取物不同剂量组SW1990细胞增殖抑制率均显著升高(P<0.05),且高剂量组、阳性对照组均显著高于中剂量组、低剂量组(P<0.05);与对照组相比,抑制剂组SW1990细胞凋亡率、p-YAP及E-cadherin蛋白表达量均显著降低(P<0.05),而高剂量组、阳性对照组及高剂量+抑制剂组均显著升高(P<0.05),且高剂量组、阳性对照组显著高于高剂量+抑制剂组(P<0.05);与对照组相比,抑制剂组YAP、N-cadherin、Vimentin、α-SMA、Snail蛋白表达量显著升高(P<0.05),而高剂量组、阳性对照组及高剂量+抑制剂组均显著降低(P<0.05),且高剂量组、阳性对照组显著低于高剂量+抑制剂组(P<0.05)。结论:白花蛇舌草提取物可能通过活化Hippo-YAP信号通路抑制胰腺癌SW1990细胞EMT的发生。

白花蛇舌草提取物体外对人胃癌细胞SGC-7901增殖抑制作用的实验研究

目的探讨白花蛇舌草提取物体外对人胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用。方法通过体外无菌传代培养人胃癌细胞SGC-7901,将白花蛇舌草提取物以0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.15mg/mL、0.2mg/mL四个不同浓度作用于该细胞,24h后采用MTT法检测细胞活性及数量。结果药物组0.05mg/mL和0.1mg/mL浓度孔的吸光值与对照组相比无显著性差异(P>0.05),而0.15mg/mL和0.2mg/mL浓度孔的吸光值明显小于对照组(P<0.05)。结论白花蛇舌草提取物体外对人胃癌细胞SGC-7901增殖有一定的抑制作用,且抑制作用的强弱可能跟药物浓度有关,值得进一步研究。

白花蛇舌草提取物通过下调Hippo-YAP信号通路促进结肠癌细胞凋亡

目的探讨白花蛇舌草提取物熊果酸、齐墩果酸对结肠癌细胞增殖与凋亡的影响及其机制。方法不同浓度的熊果酸、齐墩果酸作用结肠癌(HCT-8)细胞24、48、72 h后,CCK-8法、平板克隆形成实验检测HCT-8细胞的存活情况。筛选最佳实验条件,将细胞分为对照组和实验组,各组细胞做成细胞爬片,细胞免疫荧光检测YAP1蛋白水平。各组细胞消化离心做成细胞蜡块,免疫组织化学方法检测YES相关蛋白(YAP1)、p53基因(p53)、尾型同源盒转录因子2(CDX-2)、白介素6(IL-6)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源等位基因(PTEN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白水平。结果白花蛇舌草提取物可不同程度抑制结肠癌HCT-8细胞的增殖。细胞免疫荧光结果显示,对照组YAP1蛋白表达较实验组强。免疫组化结果显示YAP1的表达与TNF-α的表达有一定相关性。结论白花蛇舌草提取物通过抑制Hippo-YAP信号通路的活性,抑制结肠癌HCT-8细胞的增殖,诱导其凋亡。白花蛇舌草提取物可能是一种潜在的肠癌治疗药物。