白芷多糖对2型糖尿病大鼠的降糖保肝作用

目的:研究白芷多糖(Angelica dahurica polysaccharide,ADP)的降糖保肝作用。方法:提取ADP,采用苯酚-硫酸法、硫酸-咔唑法、考马斯亮蓝法、高效凝胶渗透色谱法、高效液相色谱法分别测定中性糖质量分数、糖醛酸质量分数、蛋白质量分数、分子质量以及单糖组成。用高脂高糖联合链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠模型,分为空白对照组(Control组、灌喂蒸馏水)、模型组(Model组、灌喂蒸馏水)、ADP低剂量组(ADP-L组、灌喂200 mg/kg m_(b) ADP)、ADP高剂量组(ADP-H组、灌喂400 mg/kg m_(b) ADP)、阳性组(Positive组、灌喂200 mg/kg m_(b)二甲双胍),连续灌胃4周,对T2DM大鼠体质量、空腹血糖(fasting blood sugar,FBG)值、葡萄糖耐量、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)水平、胰岛素抵抗指数(homeostatic model assessment for insulin resistance,HOMA-IR)、糖原含量进行测定,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察肝脏组织病理学变化,并用试剂盒测定脂代谢、氧化应激、肝功能相关指标。结果:ADP的中性糖质量分数为(83.26±0.67)%、糖醛酸质量分数为(8.32±1.25)%、蛋白质量分数为(0.64±0.07)%,分子质量为10.28×10^(3) Da,单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸,物质的量之比为0.09∶0.45∶0.43∶1.00∶0.05∶0.53∶0.08,ADP能够极显著提高T2DM大鼠的体质量、血糖浓度、FINS水平以及糖原含量(P<0.01),极显著降低FBG浓度、HOMA-IR(P<0.01),改善肝脏组织病变,极显著改善脂代谢、氧化应激以及肝功能相关指标(P<0.01)。结论:ADP具有降糖保肝作用,可能是通过调节异常脂代谢及氧化应激从而起到降糖保肝作用。

白芷多糖的分析

研究了白芷多糖的结构和单糖组成。采用紫外光谱和红外光谱法对白芷多糖进行定性分析。结果表明,白芷多糖具有多糖特征性的紫外和红外吸收峰,其分子中存在酰胺结构;凝胶渗透色谱法测定结果表明,白芷多糖的峰值分子量为88538;采用气相色谱法测定白芷多糖中单糖的种类和构成比例,结果表明,白芷多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖等7种单糖组成,并计算出其中6种单糖的摩尔组成比例。

白芷多糖中单糖组成的气相色谱分析

目的:研究白芷多糖中单糖的种类和组成比例。方法:以三氟乙酸水解白芷多糖,水解产物中加入盐酸羟胺、吡啶和醋酸酐,衍生化反应生成糖腈乙酸酯衍生物,采用气相色谱法测定白芷多糖的单糖组成。用 OV-101毛细管色谱柱(0.22 mm×30 m);进样温度为210℃;检测器温度为240℃;柱温为程序升温:初始柱温110℃,维持5 min,以5℃·min^(-1)的升温速率升高到190℃,维持4 min,以3℃·min^(-1)的升温速率升高到210℃,维持20 min。结果:白芷多糖中含有木糖、甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖和半乳糖等7种单糖成分(有1种未鉴定出的单糖),并测定计算出已知6种单糖鼠李糖-阿拉伯糖-木糖-甘露糖-葡萄糖-半乳糖的摩尔构成比例为1.19:1.19:0.765:1:8.08:3.34。结论:该方法简便、灵敏,可以准确测定出白芷多糖中所含有的各种单糖。

白芷多糖的提取纯化及其对仓鼠肺细胞生长作用的研究

目的:研究白芷多糖(ADP)的提取纯化及其对中国仓鼠肺细胞(CHL)生长作用的影响.方法:提取ADP,经Sephadex G-50、G-200层析纯化,用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)比色法检测ADP对体外培养的CHL细胞生长增殖的作用.结果:经Sephadex G-50、G-200层析纯化后,分子量范围为1000～200000的ADP在50、100、500μg/m1对CHL细胞的生长增殖均有促进作用.结论:ADP对体外培养的CHL细胞增殖具有促进作用.

响应面法优化白芷水溶性多糖提取工艺的研究

目的采用响应面法优化白芷水溶性多糖的提取工艺.方法用苯酚-硫酸比色法测定白芷水溶性多糖在波长490 nm处的吸光度,计算多糖提取率并以此为实验指标,在单因素实验的基础之上,选取提取温度、提取时间、液料比为考察因素,利用Box-Bebnken方法进行三因素三水平实验设计.结果单因素最佳试验条件为液料比100∶1(mL∶g),提取时间90 min,提取温度70℃;响应面法优选出白芷水溶性多糖最佳提取工艺参数为液料比102∶1(mL∶g),提取时间90 min,提取温度68℃,在该优化条件下多糖实际提取率7.35%±0.005%.结论本研究优化的白芷水溶性多糖的提取工艺方便、稳定.

正交试验优化白芷多糖的活性炭脱色工艺研究

目的采用正交试验优化活性炭对白芷多糖提取液脱色的工艺条件。方法考察脱色温度、活性炭添加量和脱色时间对白芷多糖脱色效果的影响。在单因素试验的基础上,以多糖脱色率和多糖剩余率为指标,采用L9(34)正交试验确定了最优工艺的参数。结果活性炭添加量对脱色效果的影响最大,其次为温度,再次为时间。最佳脱色条件为脱色温度60℃,活性碳添加量2%,吸附时间30min,在此条件下,脱色率为96.20%,多糖剩余率为82.36%。结论活性炭对白芷多糖脱色工艺简便可行。

白芷粗多糖的提取工艺优化及辐照对其含量和活性的影响

目的优化白芷粗多糖的提取工艺,并研究高能电子束辐照对其含量、抗氧化活性和抑菌活性的影响。方法在单因素的实验基础上进行三因素三水平的Box-Benhnken中心组合实验,得到白芷粗多糖最优水提醇沉工艺;紫外-可见分光光度法测定经不同剂量高能电子束辐照后白芷粗多糖含量和清除羟自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的能力;菌饼法测定各辐照剂量处理下白芷粗多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和希瓦氏菌的抑制能力。结果白芷粗多糖的最优水浴提取工艺为:温度100℃、时间3 h、液料比60(mL/g),此条件下,粗多糖提取率可达到8.02%。高能电子束辐照剂量为0、1、3 kGy时,白芷粗多糖含量差异不显著(P>0.05);5~15 kGy辐照组含量差异显著(P<0.05),随着辐照剂量的增加含量上升,最高可达到17.62%。辐照会明显降低白芷粗多糖对·OH、DPPH自由基的清除能力,且不同辐照剂量下的白芷粗多糖的清除能力差异显著(P<0.05)。5、7 kGy辐照会升高白芷粗多糖对菌落的抑制能力,其余剂量辐照会降低其抑菌活性。结论高能电子束可以用于白芷辐照加工,为不影响粗多糖含量与活性,辐照剂量应为5 kGy。