白芷提取物通过调控SBF2-AS1/miR-329-3p轴影响卵巢癌细胞增殖及凋亡

目的探讨白芷提取物对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法采用不同浓度的白芷提取物处理人卵巢癌细胞A2780,采用甲基噻唑基四唑(MTT)法观察白芷提取物对A2780细胞增殖活力的影响;流式细胞仪检测白芷提取物处理后A2780细胞凋亡情况;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测白芷提取物对长链非编码RNA SBF2-AS1(LncRNA SBF2-AS1)、微小RNA-329-3p(miR-329-3p)表达的影响;MTT法与流式细胞仪分别检测抑制SBF2-AS1的表达后A2780细胞增殖活力及凋亡情况;双荧光素酶报告基因实验检测SBF2-AS1与miR-329-3p的靶向调控关系;Western印迹检测细胞中细胞周期蛋白(Cyclin)D1、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、P21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况。结果白芷提取物抑制A2780细胞增殖且呈剂量依赖性,促进细胞凋亡,抑制CyclinD1、Bcl-2的表达,而促进P21、Bax的表达(均P<0.05);抑制SBF2-AS1的表达可显著抑制A2780细胞增殖,提高细胞凋亡率,上调P21、Bax的表达,而下调CyclinD1、Bcl-2的表达(均P<0.05);白芷提取物可显著促进miR-329-3p的表达,而抑制SBF2-AS1的表达(均P<0.05);双荧光素酶报告实验证实SBF2-AS1可靶向结合miR-329-3p并负向调控其表达;SBF2-AS1过表达可逆转白芷提取物对A2780细胞增殖、凋亡的作用。结论白芷提取物可通过调控SBF2-AS1/miR-329-3p轴抑制卵巢癌细胞增殖、促进细胞凋亡。

白芷提取物的质量标准研究

目的建立白芷提取物的质量标准。方法按照《中国药典》2010年版及文献方法进行提取物的性状、鉴别、检查的研究,含量测定采用HPLC法。结果建立了白芷提取物质量标准,内容主要包括性状、TLC鉴别、检查(粒度、干燥失重、炽灼残渣、微生物限度、重金属及有害元素、农药残留量、二氧化硫残留量)、含量测定。结论建立的质量标准可控性高,可操作性和专属性强,能有效控制白芷提取物的质量。

白芷提取物对绿原酸肠吸收的影响

目的考察白芷70%乙醇提取物对绿原酸肠吸收的影响。方法采用外翻肠囊法和在体单向肠灌流法,研究提取物、P-gp抑制剂(盐酸维拉帕米)、抗生素(诺氟沙星)对绿原酸肠吸收的影响。结果十二指肠中,绿原酸组和绿原酸-白芷提取物组的表观吸收系数(Papp)分别为(6.792±1.28)×10^(-6)cm/s和(11.605±2.03)×10^(-6)cm/s,而空肠中分别为(1.700±0.53)×10^(-6)cm/s和(7.194±1.93)×10^(-6)cm/s。绿原酸组的吸收速率常数(Ka)和Papp分别是(1.984±0.99)×10^(-4)/s和(15.62±4.42)×10^(-6)cm/s,绿原酸-白芷提取物组分别是(4.784±0.36)×10^(-4)/s和(37.33±2.18)×10^(-6)cm/s,绿原酸-盐酸维拉帕米组分别是(5.847±0.75)×10^(-4)/s和(44.64±5.64)×10^(-6)cm/s,绿原酸-诺氟沙星组分别是(9.673±0.81)×10^(-4)/s和(88.86±7.92)×10^(-6)cm/s。结论绿原酸最佳吸收部位为十二指肠和空肠,白芷对其肠道吸收显著促进作用,可能与抑制P-gp活性及调节肠道菌群有关。

白芷提取物及其活性成分欧前胡素改善痛风性关节炎

目的探讨白芷提取物及欧前胡素对尿酸钠(monosodium urate,MSU)晶体诱导的痛风性关节炎的作用。方法采用大鼠左踝关节注射MSU建立痛风性关节炎模型,测量大鼠0-24 h踝关节肿胀程度;观察滑膜组织病理学变化;检测滑膜组织中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、白细胞介素-1β(IL-1β)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)、白细胞介素-1R1(IL-1R1)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白或mRNA的表达情况。结果白芷提取物和欧前胡素明显减轻MSU诱导大鼠左踝关节肿胀,改善滑膜组织中炎性浸润,明显降低滑膜组织中NLRP3、IL-1β、caspase-1、IL-1R1、IL-6、TNF-α的蛋白及mRNA表达。结论白芷提取物及其活性成分欧前胡素均有较好的改善痛风性关节炎作用,为其临床应用提供基础数据支撑。

白芷提取物对大鼠脾淋巴细胞免疫抑制作用初探

目的探讨白芷提取物对地塞米松致大鼠脾淋巴细胞免疫抑制作用的影响。方法建立地塞米松致大鼠免疫抑制模型,考察白芷提取物对大鼠脾淋巴细胞的增殖活性、自然杀伤细胞(NK细胞)活性的影响。结果白芷提取物(5.0 g/kg)对刀豆蛋白A(ConA)诱导脾淋巴T细胞增殖能力有升高作用,但对脂多糖(LPS)诱导脾淋巴B细胞增殖能力未见明显影响,对脾淋巴细胞的NK细胞活性也有增强作用。结论白芷提取物(5.0 g/kg)能提高大鼠脾淋巴T细胞和NK细胞的增殖活性。

阿魏酸和白芷提取物对1例额叶变异型阿尔茨海默病患者的临床疗效

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)也被称为老年性痴呆,是一种伴有精神行为改变和日常生活能力减退的神经退行性疾病,β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)沉积形成的老年斑及过度磷酸化Tau蛋白形成的神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs)是其组织病理学特征。AD分为典型AD和非典型AD。后皮层变异性AD、Logopenic失语AD和额叶变异型AD(frontal variant of AD,Fv AD)均为非典型AD,其中FvAD临床明显特征是患者在痴呆的早期即出现额叶功能的严重受损。阿魏酸和白芷提取物(Feru-guard)是一种膳食补充剂,近年来在治疗痴呆伴发精神行为障碍(behavioral and psychological symptoms of dementia,BPSD)方面的疗效引起了相关学者的广泛关注。本文报道了Feru-guard治疗1例FvAD患者的临床疗效,并详细回顾了其诊治过程。

不同提取工艺下白芷提取物的评价性质量分析

目的研究制定白芷提取物中欧前胡素含量测定方法,并对其不同提取工艺,进行评价性质量分析。方法以欧前胡素为指标,采用高效液相色谱法测定其含量;比较水提醇沉法、pH 8～9氨水提取醇沉法、pH 8～9氨水提取法、60%乙醇超声提取法和60%乙醇加热回流法等不同工艺的差异。结果 60%乙醇加热回流法欧前胡素含量较高,欧前胡素含量在2.5110～160.701μg范围里呈较好的线性关系;欧前胡素的回收率为98.07%。结论 60%乙醇加热回流法工艺所得白芷提取物中欧前胡素含量较高,欧前胡素转移率最高,提取方法合理、可行、效率高。

白芷提取物对葛根中葛根素肠吸收的影响研究

目的:考察白芷提取物对葛根素肠吸收的影响,初步探讨白芷提取物促吸收原理,为中药配伍原理提供依据。方法:采用大鼠外翻与大鼠在体单向灌流实验方法,考察在含有白芷提取物时葛根溶液的肠吸收影响,同时考察P-gp抑制剂对葛根肠吸收影响,研究白芷提取物是否对葛根有促吸收作用,进一步考察葛根肠吸收机制。结果:葛根的肠吸收中,回肠>结肠>空肠>十二指肠,加入白芷提取物后,葛根在空肠吸收明显增加。以空肠单向灌流进行实验,葛根素的表观通透系数(Papp)与吸收速率常数(Ka)随药物浓度增大而逐渐减少,含有P-gp抑制剂维拉帕米的葛根素Ka与Papp分别比单纯葛根素吸收增加了2.49,2.60倍(P<0.001)。pH 5.0,6.8下葛根素吸收较pH 7.4的好。结论:葛根的吸收主要是主动吸收,受P-gp外排影响,加入白芷提取物后葛根吸收增加。

Caco-2细胞单层模型研究葛根提取物中葛根素转运机制及白芷提取物对其转运的影响

目的利用人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞单层模型,研究了葛根提取物中葛根素的吸收转运机制,以及白芷提取物对其吸收转运的影响。方法建立人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞模型,利用此模型研究葛根提取物中葛根素的双向转运特征,并考察时间、药物浓度、pH值对其转运的影响;研究葛根中葛根素在P-糖蛋白(P-gp)、人多药耐药蛋白(MRP)蛋白专属抑制剂存在或缺失条件下,葛根素在Caco-2细胞模型的转运情况;并考察白芷提取物对葛根中葛根素吸收转运的影响。结果在pH 5.5弱酸条件下,葛根素吸收较好;随着葛根提取物浓度的增大,Ka值逐渐增大,Papp值逐渐增加并趋于平衡,在加入P-糖蛋白和人多药耐药蛋白蛋白抑制剂后,葛根的Papp AP-BL增大,Papp BL-AP/Papp AP-BL降低;白芷提取物中香豆素能够促进葛根素的转运。结论葛根提取物中葛根素在Caco-2细胞模型的吸收机制以被动转运为主,同时存在着载体转运,P-糖蛋白和人多药耐药蛋白蛋白可能为其主要载体并参与载体转运的过程,白芷提取物对葛根素有一定促吸收作用。

乳糖微粉研磨改性降低白芷提取物吸湿性的工艺筛选及机制探究

目的:筛选乳糖微粉研磨改性降低白芷提取物吸湿性的工艺条件,分析乳糖微粉的抗吸湿机制。方法:以吸湿率为评价指标,采用单因素试验考察乳糖种类、药辅比、研磨时间对乳糖微粉研磨改性以降低白芷提取物吸湿性的工艺条件,通过粒径分布、微观结构等物理指标对改性物加以佐证。结果:乳糖微粉研磨改性最佳工艺条件为白芷提取物与乳糖超微粉(粉碎1 min)等比例研磨3 min。改性物的粒径d0.1,d0.5,d0.9分别为3.477,15.078,54.501μm,接触角(7.7±0.66)度,乳糖颗粒包覆在白芷提取物表面。结论:乳糖适度微粉化能明显降低白芷提取物的吸湿初速度与吸湿加速度的绝对值,能显著降低白芷提取物的吸湿性。抗吸湿作用可能与研磨改性使得乳糖粒子附于白芷提取物表面密切相关。

Caco-2细胞模型研究川芎提取物中阿魏酸转运机制及白芷提取物对其转运的影响

目的:利用人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞单层模型,研究了川芎提取物中阿魏酸的吸收转运机制,以及白芷提取物对其吸收转运的影响。方法:建立人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞模型,利用此模型研究时间、药物浓度对川芎提取物中阿魏酸的转运影响与阿魏酸的双向转运特征;研究川芎中阿魏酸在有或无P-gp、MRP蛋白专属抑制剂存在时阿魏酸在Caco-2细胞模型的双向转运情况;并考察白芷提取物对川芎中阿魏酸吸收转运的影响。结果:阿魏酸在3h范围内转运速率保持恒定,在浓度范围(28～336mg/ml)内浓度与转运速率呈线性相关;加入P-gp和MRP蛋白抑制剂后,阿魏酸的AP侧转运增加,BL侧转运降低,PDR值下降;加入白芷有效成分(香豆素:0.45mg/ml、挥发油:0.72μl/ml、香豆素+挥发油:0.45mg/ml香豆素+0.72μl/ml挥发油)后阿魏酸的转运显著提高。结论:阿魏酸的转运过程可能为被动转运兼存在载体转运,阿魏酸的转运同时受P-gp和MRP外排影响,MRP影响较为明显,白芷有效成分对阿魏酸的转运有促进作用。

Caco-2细胞单层模型研究黄芩提取物中黄芩苷转运机制及白芷提取物对其转运的影响

目的:研究黄芩提取物中黄芩苷的吸收转运机制以及白芷提取物对其吸收影响,分析探讨白芷提取物对黄芩苷转运的影响机制。方法:建立人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞模型,利用此模型研究pH、时间、药物浓度、温度对黄芩提取物中黄芩苷的转运影响;研究黄芩苷在P-gp,MRP蛋白专属抑制剂存在与否时黄芩苷在Caco-2细胞模型的双向转运情况;并考察白芷提取物对黄芩苷吸收转运的影响。结果:37℃环境下黄芩苷转运在pH 7.4条件下吸收较好,且存在浓度依赖性;4℃环境下蛋白失活,转运量降低;黄芩苷双向转运PDR为0.54,P-gp抑制剂维拉帕米、MRP抑制剂丙磺舒加入后,黄芩苷BL→AP转运减少,而PDR无差异。加入白芷活性成分香豆素、挥发油、香豆素与挥发油混合物后黄芩苷转运分别提高了2.34,3.31,3.13倍。结论:黄芩苷主要转运机制为被动转运,兼有外排蛋白参与。白芷活性成分对黄芩苷有促吸收作用,此作用可能与黄芩苷的被动转运机制有关,白芷提取物打开了细胞间的紧密连接,也可能与白芷抑制外排蛋白的表达或功能有关。

白芷提取物的HPLC指纹图谱研究

目的建立白芷提取物HPLC指纹图谱分析方法。方法采用Diamonil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-四氢呋喃,梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长320 nm。结果 10批未熏硫白芷制备的提取物HPLC指纹图谱相似度均在0.9以上,确定了9个峰作为特征峰组成其对照指纹图谱,并对其中的8个峰进行了指认,分别为异紫花前胡内酯、8-甲氧基补骨脂素、佛手内酯、白当归脑、氧化前胡素、欧前胡素、水合氧化前胡内酯、异欧前胡素。熏硫白芷制备的提取物与对照HPLC指纹图谱比较,有色谱峰的大幅度降低或缺失。结论建立的指纹图谱较全面地反映了白芷提取物中香豆素类成分的特征,分析方法简便、重复性好,为有效地控制白芷提取物的质量提供了新的评价方法和依据。

Caco-2细胞模型研究白芷提取物对P-糖蛋白功能的影响

目的:研究白芷提取物对黄酮类成分葛根素、黄芩苷肠道转运的影响,结合白芷提取物对Caco-2细胞上P-gp功能的影响,探讨白芷提取物对葛根素、黄芩苷肠吸收的影响机制。方法:采用Caco-2细胞模型,研究白芷提取物分别对黄酮类成分葛根素、黄芩苷吸收的影响,以P-gp底物罗丹明123(R-123)为荧光探针,评价不同浓度白芷提取物和P-gp抑制剂维拉帕米对R-123细胞蓄积的影响,细胞内的R-123浓度采用荧光分光光度法检测。结果:白芷提取物对葛根中葛根素、黄芩中黄芩苷的吸收均有明显的促进作用,葛根素的表观渗透系数Papp分别提高1.6～3.6倍,黄芩苷的表观渗透系数Papp分别提高2.3～3.3倍;白芷香豆素(0.15～1.5 mg.mL-1)、白芷挥发油(0.24～6.0μL.mL-1)、白芷香豆素+白芷挥发油均能显著增加细胞内Rh-123的摄取,对P-gp显示出明显剂量依赖性的抑制作用。结论:白芷提取物促进葛根素、黄芩苷等黄酮类成分吸收的原因可能与其抑制P-gp外排有关。

白芷超临界CO_2提取物的鉴别与含量测定

目的建立白芷超临界CO2提取物的质量控制方法.方法采用TLC法,以石油醚(60～90℃)-乙醚(体积比2:3)为展开剂,于254 nm紫外光下检视,对本品进行鉴别;采用HPLC法对本品有效成分欧前胡素进行含量测定.结果欧前胡素在0.12～1.23μg范围内呈线性关系(r=0.999 9),平均回收率为98.5%,RSD为1.14%.结论本方法结果准确,灵敏、专属性强,可作为白芷超临界CO2提取物的质量控制标准.

白芷提取物促糖尿病溃疡新生血管成熟作用及机制研究

目的研究白芷提取物对自发2型糖尿病db/db(C57BLKS/J)小鼠皮肤溃疡新生血管成熟的影响与机制。方法选取8周龄雄性db/db小鼠随机分为模型组及白芷提取物组,同窝雄性db/m小鼠作为对照组。背部打孔法制备糖尿病溃疡小鼠模型。白芷提取物组以白芷提取物1.8 g/kg ig给药,对照组和模型组ig等量生理盐水,连续给药21 d。记录创伤后2、4、7、11、14、21 d小鼠创面大致情况;对创伤后11 d各组小鼠创面进行HE、免疫组化、免疫荧光染色观察创面组织形态、新生血管数量与成熟情况以及创面叉头转录因子(FOXO1)、血管生成素-2(Ang-2)在创面组织中的定位表达;体外根据不同干预条件,将内皮细胞分为正常糖浓度缺氧组、高糖缺氧组、高渗缺氧组、高糖缺氧+白芷提取物组。并将不同干预条件下内皮细胞与周细胞共培养,观察白芷提取物干预高糖缺氧下内皮细胞对周细胞趋化作用及体外管状结构形成的影响。Western bloting法检测各组创面组织及内皮细胞中FOXO1、p-FOXO1、Ang-2蛋白水平及其上游蛋白激酶B(Akt)蛋白及磷酸化蛋白水平。结果创伤后4、7、11、14、21 d,白芷提取物组创面愈合速率、创面恢复大致情况、创面组织中血管形成数量及新生血管成熟情况明显优于模型组(P<0.05);白芷提取物组中FOXO1和Ang-2蛋白表达水平明显高于模型组(P<0.05),白芷提取物组中p-Akt、p-FOXO1蛋白表达均低于模型组(P<0.05);体外实验中白芷提取物干预高糖缺氧下内皮细胞后,细胞中FOXO1和Ang-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),p-Akt,p-FOXO1蛋白表达明显增加(P<0.05);此外,白芷提取物能提高高糖缺氧下内皮细胞对周细胞的趋化作用,促进高糖缺氧下内皮细胞与周细胞体外管状结构形成。结论白芷提取物能促进新生血管形成与成熟,从而提高db/db小鼠创面愈合速率和质量,其作用机制可能与下调FOXO1/Ang-2通路,实现内皮细胞对周细胞募集及管状结构形成有关。

白芷乙醇提取物镇痛作用研究

目的:观察白芷乙醇提取物(EEAD)的镇痛作用。方法:各组小鼠连续灌胃不同剂量的白芷乙醇提取物3d,末次给药后1 h。以热板致痛法、醋酸扭体法为疼痛模型,生理盐水为阴性对照药,阿司匹林为阳性对照药,考察白芷乙醇提取物的镇痛作用。结果:白芷提取物可显著延长小鼠热板反应的潜伏期,及扭体反应出现的时间。结论:白芷乙醇提取物镇痛作用明确。

白芷免洗面膜的制备及质量评价

以白芷提取物为主要原料制备质量合格,且具有美白护肤作用的白芷免洗面膜。优化白芷中香豆素类物质的提取条件;确定基质处方的基本组成,筛选出最佳的基质处方;制备白芷提取物、面膜基质及面膜,并对面膜进行质量检查和络氨酸酶抑制率的测定。结果确定:白芷中提取香豆素类物质的最优条件;面膜基质的处方组成;白芷面膜对络氨酸酶有明显的抑制作用。所以可以通过现代技术提取白芷的有效成分制备相对安全、有效的免洗面膜。

韩国发现白芷能治疗哮喘

8月3日，韩国韩医学研究院表示，通过白鼠实验，发现白芷提取物经口给药，可大大改善哮喘病症状。该研究成果（论文题目：Anti—asthmatic effects of Angelica dahurica against ovalbumin-induced airway inflammation via upregulation of heme oxygenase-1）刊载于SCI级杂志（Food and Chemical Toxicology》，并且在韩国已经申请了专利。