阴道或直肠注入白芸豆凝集素的长期毒性研究

目的观察长期阴道或直肠注入白芸豆植物凝集素(WKBA)对小鼠的影响,为人用安全剂量提供参考。方法将昆明种小鼠分成白芸豆凝集素高、中、低剂量组、壬苯醇醚(乐乐迷,Nonoxynol-9)组、辅料组、生理盐水组,每组雌雄各15只。分别采用阴道/肛门给药。1周给药5次。3个月后进行检查。结果连续3个月阴道或直肠注入白芸豆凝集素(≤4 mg/d),小鼠的日常生活没有异常,对小鼠的尿液没有影响,而小鼠的血液学和血液生化指标没有变化规律。结论连续3个月阴道或直肠注入白芸豆凝集素(≤4 mg/d),小鼠的日常生活没有异常,对小鼠的尿液指标和脏器系数没有影响,而对小鼠血液的生化指标影响不明确。

白芸豆凝集素的分子稳定性和光谱性质研究

经缓冲液抽提、CM-Sepharose、DEAE-Sepharose离子交换及Sephacryl S-200分子筛层析,从白芸豆种子纯化得到白芸豆凝集素(Phaseolus coccineus lectin,PCL).SDS-PAGE和Sephacryl S-200凝胶过滤分析表明白芸豆凝集素是由两个30 kD的单体组成的分子量约为56 kD的同源二聚体蛋白.凝血活性结果表明白芸豆凝集素能凝集的兔血细胞和人ABO血型细胞,无血型专一性.其凝血活性在80℃以下和pH 3.0～10.0时保持稳定.脲、盐酸胍对PCL凝血活性的影响表明,随着变性剂浓度的升高,凝血活性逐渐丧失.不同温度、pH和不同浓度变性剂条件下PCL的荧光光谱分析表明PCL变性过程的阶段性.

人及兔醛化红细胞的制备和应用

[目的]用4种血型的人醛化红细胞测定植物凝集素(PHA)的活性,并用标准抗血清对血型进行复查。同时初步探讨兔醛化红细胞对植物凝集素(PHA)凝集活性的测定效果。[方法]将新鲜的人A、B、O、AB型血以及兔血进行红细胞的提取并醛化,然后用抗A和抗B血清测定醛化后的人红细胞的血型,并用醛化的人的4种血型的红细胞悬液以及兔的醛化红细胞悬液对植物凝集素进行效价的测定。[结果]醛化后的人的4种血型的红细胞仍保持原血型不变,并且可以与植物凝集素发生凝集反应,结果与用新鲜血浆测定的效价一致。用兔醛化红细胞悬液也测定出同样的植物凝集素效价,且灵敏度与用人的醛化红细胞悬液测定相同。[结论]醛化的人的4种血型的红细胞以及兔醛化红细胞不仅未改变其表面的抗原,而且均可用于对植物凝集素的效价测定,同时具有保存时间长的优点。从降低成本的角度考虑,也可采用兔的醛化红细胞血液对植物凝集素进行效价测定。