大叶蔷薇乙醇提取物的生物活性及其物质基础

对大叶蔷薇(Rosa macrophylla Lindl.)不同部位(花、枝、叶、果)乙醇提取物的总酚和类黄酮含量进行测定,并对其体外的抗氧化能力、抗肿瘤活性和抗炎活性进行评价;利用UPLC-MS/MS技术分析大叶蔷薇叶和果的次生代谢产物组成差异,并对次生代谢产物与生物活性之间的相关性进行分析。结果显示:大叶蔷薇各部位乙醇提取物的总酚和类黄酮含量均较高,分别为123.96~277.93和80.20~714.73 mg·g^(-1)。叶乙醇提取物的总酚含量最高,DPPH·清除能力、ABTS+·清除能力和总抗氧化能力最强,对人宫颈癌HeLa细胞、人胃癌MGC-803细胞和人肺癌A549细胞的半数抑制率均最小;在0~60μg·mL^(-1)范围内,果乙醇提取物对小鼠RAW 264.7巨噬细胞表现出较小的细胞毒性,且随着乙醇提取物质量浓度增加,小鼠RAW 264.7巨噬细胞的NO释放量逐渐下降,并具有一定的剂量依赖性。比较代谢组学分析结果显示:叶和果的次生代谢产物组成存在明显差异,共得到175种差异代谢产物。Pearson相关性分析结果显示:叶和果乙醇提取物的生物活性与差异代谢产物存在一定的相关性。综上所述,大叶蔷薇叶乙醇提取物的抗氧化能力最强,抗肿瘤活性最好;而果乙醇提取物具有最佳的抗炎活性;松萝酸和金合欢素等可能是叶抗肿瘤活性的物质基础,表儿茶素没食子酸酯、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、吲哚-3-甲醛、葫芦巴碱和根皮苷等可能是果抗炎活性的物质基础。

连翘叶乙醇提取物对APAP诱导肝损伤小鼠氧化应激及炎症因子的影响

【目的】研究连翘叶乙醇提取物(ethanolic extract of Forsythia suspense leaves,FSLE)对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的肝损伤作用及其机制。【方法】随机将48只昆明小鼠分为空白对照组(NC组)、APAP肝损伤模型组(LD组)、连翘叶乙醇提取物高剂量对照组、高、中、低剂量组(FSLE组、HFSLE+LD组、MFSLE+LD组、LFSLE+LD组),每组8只。建立肝损伤模型并给药,检测各组小鼠谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)活性与谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量,苏木精伊红(HE)染色观察肝组织病理情况,检测TRAF2、NF-κB p65 mRNA、蛋白的表达水平和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)的水平。【结果】FSLE可降低肝损伤小鼠ALT、AST活性和MDA、H2O2含量(P<0.05),提高SOD活性和GSH含量(P<0.05),改善肝组织病理情况,降低TRAF2和NF-κB p65 mRNA、蛋白表达量和TNF-α、IL-1β、IL-6的水平(P<0.05)。【结论】FSLE通过改善氧化应激、调节TNF/NF-κB p65信号通路和抑制炎症反应发挥抗APAP肝损伤的作用。

白苏叶乙醇提取物体外抗氧化活性评价及相关性分析

利用六种不同的评价抗氧化活性方法,包括细胞内活性氧清除能力(CAA)、总抗氧化活性(TAA)、清除超氧阴离子自由基(SSAR)、清除羟自由基(SHR)、清除二苯基苦基苯肼自由基(SDR)活性以及抑制卵黄脂蛋白脂质过氧化(ILLP)对白苏叶乙醇提取物(WPEE)体外抗氧化活性及清除自由基能力进行了评价,并与抗坏血酸(VC)的抗氧化活性进行了比较。结果表明,六种评价方法均证实WPEE有明显的抗氧化活性,其中TAA、SSAR和SDR活性顺序均为:VC>F2>WPEE>F1(F1和F2为WPEE的组分1和2),但SHR及ILLP活性顺序为F2>WPEE>VC>F1。此外,WPEE在浓度1~500μg/mL范围内,对RAW264.7细胞是无毒性的,且具有良好的活性氧(ROS)清除能力。皮尔森相关性分析显示,六种评价抗氧化活性的方法均具有局限性,其评价的是抗氧化活性的不同方面;但除了ILLP与SSAR几乎没有相关性外,其他4种评价抗氧化活性的方法具有很好的相关性;抗氧化活性大小与WPEE的浓度正相关,说明WPEE是有重要应用前景的广谱型天然抗氧化剂。

芳樟树叶乙醇提取物的抗癌作用

探讨了芳樟树叶乙醇提取物各部分的抗癌作用。采用系统溶剂法从芳樟树叶得到一系列提取物,运用MTT和集落形成实验法考察各提取物对体外培养的人肺癌95-D细胞、人口腔表皮样癌KB细胞和肝癌HepG2细胞增殖的影响。结果发现石油醚部分A1、氯仿部分A2和乙酸乙酯部分A3对3种肿瘤细胞的增殖和集落形成均有不同程度的抑制作用,且给药量与细胞抑制和集落形成明显的正相关关系。因此,芳樟树叶乙醇提取物在体外有明显的抗肿瘤作用,且抗癌有效组分很可能在它的石油醚部分、氯仿部分以及乙酸乙酯部分。

夹竹桃叶乙醇提取物对斑马鱼的毒性评价

研究表明,夹竹桃(Nerium indicum Mill.)及其提取物对多种害虫具有较强的毒杀作用,已在害虫生物防治中显示出较大作用。为了合理开发夹竹桃植物,需要进一步评价夹竹桃植物对水生生物的安全性和对动物的毒理学。文章利用索氏提取法提取夹竹桃叶乙醇粗提物,并进一步用氯仿萃取浓缩、硅胶柱层析方法提取分离乙醇精提物,经鉴定为强心甙组分。在此基础上,委托浙江省医学科学院评价了乙醇粗提物对实验动物的毒理学,并采用静态法评价了这二种提取物对斑马鱼(Brachydanio rerio)的急性毒性和慢性效应。结果表明:夹竹桃叶乙醇粗提物的提取率为45%,乙醇精提物(主要成分为强心甙组分)的提取率为0.25%。乙醇粗取物对大鼠经口和经皮毒性为低毒级,对家兔皮肤和眼无刺激,对豚鼠的致敏反应属弱致敏性。这说明夹竹桃叶乙醇粗提物对哺乳动物十分安全。在急性毒性试验中,发现斑马鱼的死亡率与提取物处理浓度和处理时间均呈明显的正相关。处理浓度越大,斑马鱼的死亡率越高;同一浓度处理时间越长,死亡率越高。用24 mg/L乙醇粗提物处理6、12、24和48h的死亡率分别为26.67%、60%、91.11%和95.56%;用0.5 mg/L乙醇精提物处理12、24、48、72和96h的死亡率分别为6.25%、33.33%、52.08%、54.17%和60.42%;用24 mg/L乙醇粗提物处理96h或32 mg/L处理48h,或者用1 mg/L乙醇精提物处理24h,斑马鱼全部死亡。在慢性毒性试验中,用3.33—10.0 mg/L乙醇粗提物处理斑马鱼28d,其死亡率为12%—20%。乙醇粗提物处理斑马鱼后,急性毒性LC50=12.52 mg/L(药后96h)>10 mg/L,慢性毒性LC50=199.51 mg/L(药后28d);乙醇精提物处理斑马鱼后,急性毒性LC50=0.46 mg/L(药后96h)<1 mg/L,根据《化学农药环境安全评价试验准则》(1990)中农药对鱼类的毒性分级标准,说明夹竹桃叶乙醇粗提物对斑马鱼的毒性属于低毒,比较安全;乙醇精提物对斑马鱼的毒性则为高毒,十分不安全。

轮叶党参乙醇提取物益气活血化瘀及抗衰老作用的初步研究

目的探讨轮叶党参乙醇提取物对大鼠益气活血化瘀作用及对小鼠的抗衰老作用。方法观察轮叶党参乙醇提取物对气虚型血瘀证模型大鼠血液流变学各项指标的影响,同时测定小鼠爬杆时间,常压耐缺氧时间,免疫器官的重量等试验指标从而初步判断该药是否具有抗衰老作用。结果轮叶党参乙醇提取物可明显降低气虚型血瘀证模型大鼠的全血黏度(高切、中切、低切)、血浆黏度,明显降低红细胞聚集指数,加快红细胞电泳时间,降低红细胞压积。轮叶党参乙醇提取物高剂量组在对小鼠灌胃给药后第7天、第14天能非常显著延长小鼠的常压耐缺氧时间,低剂量组在给药后第14天显著地延长小鼠的常压耐缺氧时间。该药高、低剂量组在给药后第7天、第14天均能显著增加小鼠的胸腺重量,在给药后第14天显著地增加小鼠的脾脏重量。结论轮叶党参乙醇提取物具有益气活血化瘀作用及对小鼠有抗衰老作用。

26种非嗜食植物乙醇提取物对柑桔潜叶蛾的产卵驱避作用

研究了26种非嗜食植物乙醇提取物和机油乳剂在田间对柑桔潜叶蛾(Phyllocnistiscitrella)的产卵驱避效果,并用干扰作用控制指数(IIPC)对这些效果进行评价.结果表明,处理后36h,23种提取物和机油乳剂有显著的产卵驱避作用.其中金光菊(Rudbeckialaciniata)提取物的驱避效果最好,IIPC为0,即产卵驱避效果为100%.其次为φ=0 25%机油乳剂,IIPC为0 051.薇苷菊(Mikaniamicrantha)、胜红蓟(Ageratumconyzoides)、芒箕(Dicranopterispedata)3种提取物的驱避效果也达90%以上.马兜铃(Aristolochiachampionii)提取物则有显著的产卵吸引作用.

柿叶乙醇提取物在猪油中的抗氧化性研究

研究了柿叶乙醇提取物在猪油中的抗氧化作用。结果表明 ,柿叶乙醇提取物的抗氧化性随着在猪油中添加量的增大而增强。使用浓度为 60 0 mg kg时 ,其抗氧化性比 1 0 0 mg kg橙皮甙和 1 0 0 mg kg茶多酚略强。柠檬酸的增效作用比硬脂酰 L 抗坏血酸酯明显。

银杏叶和银杏外种皮乙醇提取物对酪氨酸酶的抑制作用比较

报道银杏叶和银杏外种皮乙醇提取物对酪氨酸酶活力的影响.结果表明:银杏叶和银杏外种皮乙醇提取物对酪氨酸酶活力均有显著的抑制作用.测定导致酶活力下降50%的银杏叶和银杏外种皮提取物含量(IC50)分别为:6.59mg/mL和2.73mg/mL.对酪氨酸酶的抑制作用均表现为可逆抑制,抑制类型均为混合型.分别测定银杏叶和外种皮提取物对游离酶抑制常数(KI)和酶底物络合物抑制常数(KIS),并加以比较.

海边月见草叶提取物乙醇洗脱级分的抗氧化作用

海边月见草(Oenothera drummondii Hook.)叶提取物经X-5大孔树脂吸附及体积分数10%、30%、50%和70%乙醇溶液梯度洗脱获得4个级分,研究了这4个级分对DPPH、·OH和O2-的清除作用及其在卵黄脂蛋白过氧化体系中的抗氧化作用。4个洗脱级分均表现出较强的清除DPPH和·OH的能力,清除率随各级分浓度的升高而提高,其中,30%乙醇洗脱级分的清除作用最强,对DPPH和·OH的50%抑制浓度(IC50)分别为0.069和0.741g·L-1。浓度达1.0g·L-1,4个洗脱级分对O2.均有一定的清除能力,且对卵黄脂蛋白过氧化作用的抑制率均在50%以上。结果表明,海边月见草叶提取物的不同浓度乙醇洗脱级分具有较强的清除自由基的能力,并有一定的抗卵黄脂蛋白过氧化的作用,但总体效果较槲皮素略差。

31种热带植物乙醇提取物对朱砂叶螨的生物活性研究

室内测定31种植物乙醇提取物对朱砂叶螨的触杀和驱避作用。结果表明,大山芝麻、蜂巢草、仔榄树和许树乙醇提取物对朱砂叶螨具有明显的触杀作用,24 h后平均校正死亡率达80%以上,其中大山芝麻的触杀效果最好,高达96.35%;23种植物提取物对朱砂叶螨产卵驱避作用显著,平均驱避率达90%以上;牛筋果、云南野桐、多花瓜腹木、黄椿木姜、酒饼簕和毛瓣鸡血藤提取物对成螨驱避作用明显且较为稳定,48 h的平均驱避率达91%以上。

蹄叶橐吾乙醇提取物抗溃疡作用研究

目的初步探讨蹄叶橐吾地上部分乙醇提取物的抗溃疡作用。方法采用小鼠无水乙醇型、利血平型和消炎痛型3种胃溃疡模型,观察了蹄叶橐吾乙醇提取物对3种实验性胃溃疡的抗溃疡作用。结果蹄叶橐吾地上部分乙醇提取物的2 600 mg/kg,5 200 mg/kg二组对无水乙醇型胃溃疡有明显的抑制作用,2 600 mg/kg,5 200 mg/kg二组的溃疡指数与常水组比有显著性差异(P<0.000 1),而对利血平型和消炎痛型胃溃疡无明显的抑制作用。结论蹄叶橐吾地上部分乙醇提取物2 600 mg/kg,5 200 mg/kg二组对无水乙醇型胃溃疡有预防保护作用,而对利血平型和消炎痛型胃溃疡无保护作用。

木薯叶乙醇提取物对图丽鱼和罗非鱼生长影响的研究

为提高木薯的综合利用率,提高水产养殖的生产水平,将木薯叶经简单乙醇提取、浓缩后,添加到饲料。通过测定分析存活率、生长性能、饲料转化性能、机体营养组成及免疫能力指标,研究木薯叶乙醇提取物对图丽鱼和罗非鱼生长的影响。试验结果表明:饲料添加木薯叶乙醇提取物能显著提高图丽鱼存活率,明显增加血清中超氧化物歧化酶SOD含量,降低罗非鱼甘油三脂和碱性磷酸酶活力,增强溶菌酶活力,提高图丽鱼和罗非鱼的免疫能力。研究结果可为木薯叶醇提取物作为促进图丽鱼和罗非鱼生长、天然低毒的饲料添加剂提供理论依据。

顶空气相色谱法测定银杏叶提取物中乙醇的残留量

目的:建立顶空气相色谱法测定银杏叶提取物中乙醇的残留量。方法:采用CP-624(30m×0.32mm,1.8μm)色谱柱,载气为氮气,柱温采取程序升温的方法;FID检测器温度250℃;进样口温度180℃。结果:乙醇在20.6～412.0μg/ml范围内呈良好的线性关系,r=0.9996;平均回收率为99.85%,RSD为1.62%,最低检测限为13ng。结论:该方法简单、灵敏、准确,可用于银杏叶提取物中乙醇残留量的测定。

白苏乙醇提取物及挥发油抑菌活性研究

分别采用溶剂浸提和水蒸汽蒸馏法对白苏叶进行提取,并用生长速率法分别测定2种白苏叶提取物对7种植物病原真菌的抑制作用。测定结果表明,在0.1 g干样/mL下,白苏叶乙醇提取物在3~5 d的培养时间内能够完全抑制辣椒疫霉病菌的生长,对番茄灰霉病菌的生长抑制率高于60%。白苏叶挥发油在测定中对植物病原真菌也表现出较强的抑菌活性。白苏叶挥发油在0.5 mg/mL时能够完全抑制供试7种供试病菌的生长。白苏挥发油对7种供试植物病原真菌的测定表明,挥发油对水稻纹枯病菌和番茄灰霉病菌具有较强的抑制作用,EC50分别为0.0677mg/mL和0.1050 mg/mL。

非嗜食植物乙醇提取物对柑桔潜叶蛾的产卵驱避作用

本文研究 4种非嗜食植物乙醇提取物和机油乳剂在田间对柑桔潜叶蛾 Phyllocnistis citrella的产卵驱避效果 ,并用干扰作用控制指数 IIPC对这些效果进行评价。结果表明 ,处理后 2 4小时 ,0 .2 5 %机油乳剂和鸡矢藤、五爪金龙、樟树叶的提取物都有显著的产卵驱避作用 ,其中机油乳剂的驱避效果最好 ,IIPC为 0 .0 6 7,即产卵驱避效果为 93.3%,鸡矢藤、五爪金龙、樟树叶提取物也有较好的驱避效果 ,IIPC分别为 0 .0 96、0 .117、0 .15 6 ,即产卵驱避效果分别为 90 .4 %、88.3%、84 .4 %。

水菠菜叶乙醇提取物对MG-63骨质疏松相关基因表达的影响

为探讨水菠菜叶乙醇提取物与抗骨质疏松作用的关系及其作用机制,用水菠菜叶乙醇提取物处理人成骨样细胞MG-63 48 h后,提取水菠菜叶乙醇提取处理组和对照组细胞的总RNA,将两组RNA纯化为mRNA,逆转录成cDNA,用Cy3和Cy5两种不同的荧光染料进行线性扩增标记,然后与骨质疏松相关基因表达谱芯片杂交,扫描后对获得的数据用LuxScan 3.0软件分析.研究发现经水菠菜叶乙醇提取物诱导后MG-63细胞的244个骨质疏松相关基因中,有c-Fos、JNK、ODF、c-src、OSCAR、RANKL、Samd4、Samd6、Samd7 9个基因表达明显上调,LRP5、Dkk1、TGFB、OPG 4个基因明显下调.结果表明水菠菜叶乙醇提取物能改变骨质疏松相关基因的表达,抗骨质疏松作用机制可能与Wnt/β-catenin蛋白信号传导途径和骨保护素/核因子受体激活信号传导途径有关,与雌激素内分泌途径无关.

甘蔗叶乙醇提取物的不同溶剂萃取部位对CCl_4致小鼠急性肝损伤的保护作用研究

目的:筛选甘蔗叶具有抗肝损伤作用的活性部位。方法:以80%乙醇提取甘蔗叶得到乙醇提取物浸膏,用水分散后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,得到相应极性部位萃取物,剩余为水部位萃取物。将108只小鼠随机分为空白A组[0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)与3.5%聚山梨酯80溶液]、空白B组(纯净水)、模型组(纯净水)、联苯双酯组(阳性对照,0.2 g/kg)、甘蔗叶乙醇提取物组和甘蔗叶不同极性部位(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水)组(以生药量计给药量均为22.92 g/kg,以0.5%CMC-Na与3.5%聚山梨酯80溶液为溶剂),每组12只。每天灌胃给药1次,连续给药12 d。末次给药1 h后,除空白A、B组外,其余各组小鼠均腹腔注射0.15%四氯化碳(CCl4)-花生油(0.1 mL/10 g)溶液复制急性肝损伤模型。16 h后,观察小鼠一般情况,并检测其血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)含量,观察其肝组织病理形态学变化并进行Ishak评分。结果:与空白B组比较,空白A组小鼠各指标均无明显差异(P>0.05)。与空白A组比较,模型组小鼠毛发稀疏,体型消瘦,活动稍显迟缓;血清中ALT、AST含量显著升高(P<0.01);肝小叶结构破坏严重,肝索和肝窦结构不清晰,肝索排列紊乱,Ishak评分显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠一般情况均有所好转;联苯双酯组、甘蔗叶乙醇提取物组和甘蔗叶乙酸乙酯部位组小鼠血清中ALT、AST含量显著降低(P<0.05或P<0.01),且肝组织的病理损伤也明显减轻,Ishak评分显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:甘蔗叶乙醇提取物的乙酸乙酯部位为其具有抗CCl4致小鼠急性肝损伤作用的活性部位。

连翘叶乙醇提取物抗小鼠蓖麻油性腹泻活性及其对家兔离体空肠平滑肌自发性收缩的影响研究

背景中医药治疗腹泻具有疗效迅速、不良反应少、费用低廉等优势。连翘具有清热解毒、消肿散结的功效,目前就其治疗腹泻方面的研究鲜有报道。目的观察连翘叶乙醇提取物(FS ext)对小鼠蓖麻油性腹泻的影响,并研究其对家兔离体空肠平滑肌自发性收缩的影响及其作用机制。方法2018年6—12月,于四川省南充市采集连翘叶并经提取得到FS ext,采用高效液相色谱法分析FS ext的化学成分;取60只禁食4 h(可自由饮水)的小鼠随机分为0.5 g/kg FS ext试验组、1.0 g/kg FS ext试验组、2.0 g/kg FS ext试验组、4.0 g/kg FS ext试验组、8.0 g/kg FS ext试验组、16.0 g/kg FS ext试验组,每组10只,分别给予0.5 g/kg、1.0 g/kg、2.0 g/kg、4.0 g/kg、8.0 g/kg、16.0 g/kg的FS ext进行灌胃,记录14 d内小鼠的死亡情况和毒性迹象,建立相应的剂量-效应曲线,从而确定FS ext的半数致死剂量(LD50),以确定其安全性。另取50只小鼠随机分成阴性组、阳性组、0.25 g/kg FS ext试验组、0.50 g/kg FS ext试验组、1.00 g/kg FS ext试验组,每组10只,阴性组给予0.9%氯化钠溶液(20 ml/kg)灌胃,阳性组给予洛哌丁胺(4 mg/kg)灌胃,0.25 g/kg FS ext试验组、0.50 g/kg FS ext试验组、1.00 g/kg FS ext试验组分别给予0.25、0.50、1.00 g/kg FS ext。给药30 min后,小鼠均给予蓖麻油0.4 ml灌胃,观察4 h内以下指标:初始半固体粪便时间,固体、半固体、液体粪便数量。采用腹泻指数(EI)评估腹泻的严重程度。取42只健康家兔,制备离体空肠平滑肌,观察FS ext对离体空肠平滑肌自发性收缩的影响:分别用乙酰胆碱(ACh,10μmol/L)和氯化钾(KCl,60 mmol/L)预处理离体空肠平滑肌,来探究FS ext对其诱导的离体空肠平滑肌自发性收缩的影响;用含FS ext或维拉帕米(1μmol/L)的无Ca2+高K+台式液预处理离体空肠平滑肌,然后累计CaCl2进一步研究其机制。结果FS ext中主要含连翘苷和连翘酯苷A等化学成分;小鼠按不同剂量的FS ext进行灌胃后,在观察期内未出现任何死亡或毒性迹象。阳性组初始半固体粪便时间长于阴性组、0.25 g/kg FS ext试验组、0.50 g/kg FS ext试验组(P<0.05);1.00 g/kg FS ext试验组初始半固体粪便时间长于阴性组、0.25 g/kg FS ext试验组(P<0.05)。阴性组EI高于阳性组、1.00 g/kg FS ext试验组(P<0.05);0.25 g/kg FS ext试验组、0.50 g/kg FS ext试验组EI高于阳性组(P<0.05)。FS ext(0.01~10.00 mg/ml)以剂量依赖性的方式抑制家兔离体空肠平滑肌的自发性收缩,并抑制由ACh和KCl诱导的空肠收缩,同时,FS ext也能抑制CaCl2诱导的空肠平滑肌自发性收缩,并使CaCl2量-效关系曲线右下移,与维拉帕米引起的CaCl2量-效关系曲线变化类似。结论FS ext有明显的抗小鼠蓖麻油性腹泻作用,并能抑制家兔离体空肠平滑肌的自发性收缩及ACh和KCl诱导的空肠收缩,其机制可能与阻断M受体和抑制L-型钙离子通道有关。