响应面法优化白英生物碱的超声提取工艺条件

[目的]优选白英生物碱的最佳超声提取工艺条件。[方法]在单因素试验的基础上,选择超声时间、温度、料液比为自变量,以生物碱提取率为响应值,采用中心组合设计的方法,研究各自变量及其交互作用对生物碱提取率的影响。利用响应面分析方法,模拟得到二次回归方程的预测函数,并确定白英生物碱提取工艺的最适条件。[结果]最佳提取工艺条件为:超声时间53 min、温度65℃、料液比1∶20(g/ml)、提取2次;在此条件下,生物碱提取率达0.308%。[结论]该方法优选了白英生物碱的最佳超声提取工艺条件,为白英的进一步开发利用提供了依据。

白英提取液对Hela细胞凋亡及Fas/FasL基因表达的影响

目的:探讨白英提取液对Hela细胞凋亡及Fas/FasL基因表达的影响。方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测凋亡,二步法免疫组化检测Fas蛋白表达,半定量RT-PCR检测Fas和FasL mRNA表达。结果:白英提取液对Hela细胞增殖有较强的抑制作用,且这种作用呈一定的剂量-时间依赖性;细胞凋亡率明显升高;Fas基因mRNA和蛋白表达显著上升,FasL mRNA表达明显下降。结论:白英提取液通过上调Fas基因和下调FasL基因表达,诱导细胞凋亡,从而抑制Hela细胞增殖。

白英水提物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的实验研究

目的:观察白英水提物(ESL)对胃癌SGC-7901细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法:常规法制备ESL;实验分正常对照组、白英处理组和顺铂处理组。白英处理组加入ESL终浓度分别为12.5、25、50 mg/mL。MTT法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜观察SGC-7901细胞凋亡及形态变化,半定量RT-PCR分析基因bcl-xl、bid、Caspase-9 mRNA表达,荧光分析法测定Caspase-3活性。结果:与正常对照组比较,三个剂量白英处理组SGC-7901细胞增殖抑制均有显著性增加,且呈明显的时效和量效关系,细胞凋亡显著增多(P<0.05),表现细胞核固缩、染色质凝集、边聚等;bcl-xl mRNA表达显著下降(P<0.05),bid、Caspase-9 mRNA表达显著性升高(P<0.05),并随ESL浓度增加而加强,Caspaes-3活性亦显著性增高(P<0.01)。结论:ESL能剂量依赖性诱导SGC-7901细胞凋亡和抑制增殖,其作用与调控bcl-xl、bid、Caspase-9 mRNA表达和增强Caspase-3活性相关。

白英抗肿瘤活性部位筛选

目的研究白英乙醇提取物及其不同溶剂萃取部分对肿瘤细胞的体外抑制作用,筛选白英抗肿瘤活性部位。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法。结果白英乙醇提物、乙酸乙酯部位、正丁醇部位对肿瘤细胞均有不同程度的抑制作用;乙酸乙酯部位对A375细胞和Hela细胞的抑制作用较强,IC50 值分别为9 6 9mg·L-1和2 0 90mg·L-1;正丁醇部位对A375细胞和Hela细胞的抑制作用次之,IC50 值分别为31 72mg·L-1和6 4 4 2mg·L-1;水溶性部位对A375细胞和Hela细胞无抑制作用。结论乙酸乙酯部位、正丁醇部位有一定的细胞毒作用,初步确定为白英抗肿瘤活性部位。

白英抗肿瘤成分提取工艺的研究

目的探讨白英抗肿瘤成分提取工艺的最佳工艺条件。方法采用L9(34)正交设计法,分别以浸膏率、半数有效抑制浓度(IC50)和薯蓣皂苷元的质量分数为考察指标,对白英提取工艺条件进行筛选。结果以浸膏率为考察指标时,其优选工艺为A2B3C3,其中提取次数对浸膏率有显著性影响;以IC50为考察指标时,其优选工艺为A3B3C1;以薯蓣皂苷元的质量分数为考察指标时,其优选工艺为A2B2C1。综合考察采用50%的乙醇,提取3次,每次1h为最佳工艺条件。结论本实验所采用的方法适合白英抗肿瘤成分的提取。

白英化学成分的研究

目的 :对白英中的化学成分进行研究。方法 :大孔吸附树脂 ,sephadexLH 2 0 ,正相及反相硅胶柱色谱分离 ,光谱数据鉴定结构。结果 :分离鉴定了 4个化合物 ,咖啡酸 ,香草酸 ,N(p hydroxyphenethyl) p coumaramide ,芦丁。结论

白英中总黄酮的含量测定

目的：建立白英中总黄酮的含量测定方法。方法：以芦丁为对照，三氯化铝显色，采用分光光度法，在419nm处测定吸光度值，计算白英中总黄酮含量。结果：芦丁的质量浓度在5．48～21．920．g／mL范围内与吸光度值呈良好线性关系（r=0．9996），方法的平均回收率为96．7％（n=9），RSD为1．1％；不同来源的白英药材中总黄酮含量差异较大。结论：本方法操作简便、准确、灵敏、重现性好，可用于白英药材的质量控制。

HPLC法测定中药白英中薯蓣皂苷元的含量

目的 用HPLC法测定不同来源自英中薯蓣皂苷元的含量。方法 选用Apollo C18色谱柱（4．6mm×250mm．5μm），流动相为乙腈-水（体积比为90：10），检测波长为210nm，柱温为室温。结果薯蓣皂苷元的质量浓度在0．04～0．20g·L^-1。内与峰面积呈良好线性关系，方法 的平均回收率为104．5％（n=9）；不同来源的白英药材中薯蓣皂苷元的含量有较大差异。结论 方法操作简便、准确、灵敏度高，为白英药材质量控制提供了定性和定量依据。

白英化学成分的分离与鉴定

目的 研究中药白英的化学成分。方法 用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法分离纯化，通过理化性质和。H-NMR、^13C-NMR等光谱数据确定化合物的结构。结果 从白英中分离得到5个化合物，分别鉴定为β-谷甾醇（1）、胡萝卜苷（2）、N-反式-对羟基苯乙基阿魏酰胺（3）、槲皮素（4）、咖啡酸（5）。结论 化合物1～4为首次从白英中分离得到。

遮荫处理的白英光合作用和叶绿素荧光特性研究

利用GFS-3000光合作用仪和MINI-PAM叶绿素荧光仪测定了遮荫处理(平均光强分别为1 000(对照)、500和250μmol.m-2.s-1)后白英植株光合作用和叶绿素荧光特性的变化,从而研究了适宜栽培白英的光照条件.结果表明,白英的光系统Ⅱ实际光化学效率和最大光化学效率的日变化比较平稳且维持在一个较高的水平;随着遮光处理的加强,白英叶片的净光合速率、补偿点、光饱和点、CO2补偿点和CO2饱和点均呈现出下降的趋势,而光合色素含量均呈现上升的趋势.研究结果证实,白英最适合在866.00μmol.m-2.s-1光照条件下栽培.

白英乙醇提取物抗肿瘤作用初步研究

目的:研究白英乙醇提取物体内外抗肿瘤作用。方法:采用MTT法观察白英乙醇提取物体外对人肝癌BEL-7402细胞及人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用;以小鼠S180肉瘤及H22肝癌为模型,观察白英乙醇提取物在体内对肿瘤生长的抑制作用。结果:白英乙醇提取物对人肝癌BEL-7402细胞及人胃腺癌SGC-7901细胞有增殖抑制作用,且均呈现良好的浓度-效应依赖关系,作用48 h的IC50值分别为(287.40±5.84),(176.14±5.18)μg.mL-1;白英乙醇提取物在体内对小鼠S180肉瘤和H22肝癌肿瘤的生长均有显著的抑制作用,且呈现良好的剂量-效应关系,高剂量组的抑瘤率分别达到(41.15±4.54)%和(45.00±7.37)%。结论:白英乙醇提取物具有抗肿瘤作用。

白英总苷抗肿瘤作用初步研究

目的研究白英总苷体内外抗肿瘤作用。方法采用MTT法考察白英总苷体外对人肝癌BEL-7402细胞及人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用;以小鼠S180肉瘤及H22肝癌为模型,考察白英总苷体内对肿瘤生长的抑制作用。结果白英总苷对人肝癌BEL-7402细胞及人胃腺癌SGC-7901细胞有显著地增殖抑制作用,且均呈现良好的浓度-效应依赖关系,作用48h的IC50值分别为(180.22±6.32)μg/ml和(114.89±4.89)μg/ml;白英总苷对小鼠S180肉瘤有显著的抑制作用,且呈现良好的剂量-效应关系,三次重复实验,高剂量组的抑瘤率达到33.76%±3.24%;白英总苷各剂量对小鼠H22肝癌抑制作用均不显著。结论白英总苷体内外有一定的抗肿瘤作用。

白英提取液对人肺癌A549细胞凋亡及Fas／FasL基因表达的影响

目的探讨白英提取液(STE)对人肺癌A549细胞凋亡及fas/fasL基因表达的影响。方法体外培养肺癌A549细胞,以0(正常对照组),10,20和40 mg/ml STE处理A549细胞48 h,并以25 mg/L顺铂(DDP)作为阳性对照。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,TUNEL法检测凋亡率,半定量RT-PCR检测fas和fasL mRNA表达。结果与正常对照组比较,STE各浓度组细胞增殖抑制率显著上升(P(0.01),细胞凋亡率明显升高(P(0.01),基因fas mRNA表达显著上升(P<0.05或P<0.01),而fasL mRNA表达明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论STE通过上调fas基因和下调fasL基因表达,诱导细胞凋亡,从而抑制A549细胞增殖。

白英生物碱通过抑制NF-κB信号通路诱导人肺腺癌A549细胞凋亡

目的:探讨白英生物碱(STA)诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对NF-κB信号通路相关基因表达的影响。方法:采用STA处理体外培养的A549细胞,用MTT法检测细胞增殖抑制效果,Annexin V-FITC/PI双染后用流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞核NF-κB/p65和胞浆Survivin、IκBα、p-IκBα蛋白表达。结果:STA对A549细胞增殖具有较强的抑制作用,并呈剂量-时间依赖性;STA作用24 h后,细胞凋亡率显著上升,IκBα表达显著上升,NF-κB/p65、Survivin和p-IκBα表达显著下降。结论:白英生物碱可明显诱导A549细胞凋亡,其机制可能与抑制NF-κB/p65信号通路有关。

RP-HPLC法同时测定白英中绿原酸及咖啡酸的含量

目的建立RP-HPLC法同时测定白英药材中绿原酸、咖啡酸含量的方法。方法色谱柱为Diamonsil C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-体积分数0．05％的磷酸水溶液（体积比25：75），检测波长327nm，柱温45℃，流速1．0mL·min^-1。结果绿原酸质量浓度在0．5～32．0mg·L^-1（r=0．9999）内与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为99．9％，RSD为1．52％。咖啡酸质量浓度在10．0～640．0μg·L^-1（r=0．9999）内与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为99．9％，RSD为1．35％。结论该方法简便、准确、重复性良好，可用于白英药材的质量控制。

中药白英的研究进展

目的对中药白英的化学成分、药理作用和临床应用作以综述。方法按照化合物的结构类型对白英的化学成分进行分类综述,并且对其药理作用及临床应用加以总结。结果白英含有多种化学成分,主要有甾体皂苷类、甾体生物碱类、有机酸等化合物,它具有抗肿瘤、抗炎、抗过敏、抗真菌等药理作用,在临床上作为常用抗癌中草药。结论为中药白英的研究与开发提供了参考。

中药材白英XRD指纹图谱及相似度分析

目的:建立白英药材XRD的鉴定分析新方法。方法:对白英药材不同药用部位进行X射线衍射分析,并按2θ进行相似度计算与分析。结果:获得了白英药材不同药用部位的X射线衍射Fourier指纹图谱。结论:粉末X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法可用于白英药材不同药用部位的鉴定和识别,相似度的计算结果进一步证明了方法的可行性。

白英提取物的免疫调节作用研究

目的探讨白英提取物的免疫调节作用。方法实验设3个浓度的药物组和空白对照组,对其进行正常小鼠脾淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应、NK细胞活性测定、抗体生成细胞的检测、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞、碳廓清实验等实验。结果各项免疫学活性测定表明白英提取物能有效地增加正常小鼠的脾淋巴细胞转化率,增强小鼠迟发型变态反应、NK细胞活性、抗体形成细胞活性、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率,且随提取物溶液浓度增高而增强。结论白英提取物具有一定的免疫调节作用。

白英化学成分和药理作用研究进展

对白英的化学成分、药理作用和临床应用等方面进行综述,为白英的研究开发提供参考。白英中主要含有苷类、有机酸类、倍半萜类、甾醇类、香豆素以及其它化合物;具有良好的抗癌防癌、消除炎症、抗过敏及护肝等作用,在临床上具有广泛的应用价值。

白英提取物诱导人肝癌BEL-7404细胞凋亡作用

目的 探讨中药白英提取物对肝癌BEL 74 0 4细胞系的凋亡作用。方法 用不同浓度的白英提取物处理肝癌BEL 74 0 4细胞 ,通过观察细胞形态、DNA凝胶电泳法研究白英提取物诱导肝癌BEL 74 0 4细胞产生凋亡现象。结果 光学显微镜下可见细胞呈凋亡特征性变化 ,凝胶电泳可见细胞DNA有规律断裂形成梯形图谱。结论 白英可诱导肝癌BEL 74 0