小白菊内酯对杏仁核电点燃大鼠的神经保护作用及机制

目的探讨小白菊内酯对杏仁核电点燃癫痫大鼠行为学影响及其机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只。对照组不进行电刺激,每天给予Tween80腹腔注射;模型组、小白菊内酯低剂量组、小白菊内酯高剂量组每天给予1次电刺激制备杏仁核电点燃癫痫模型,其中小白菊内酯低、高剂量组于电刺激1 h前分别给予小白菊内酯250μg/kg、500μg/kg腹腔注射,模型组给予Tween80腹腔注射,共干预15 d。观察各组大鼠癫痫发作情况;电刺激结束后24 h行Morris水迷宫实验,记录大鼠逃避潜伏期及穿越平台象限百分比;然后检测脑组织中丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量,透射电镜观察海马CA1区超微结构。结果随着造模时间的延长,癫痫造模各组大鼠癫痫发作等级逐渐升高,但小白菊内酯低、高剂量组大鼠癫痫发作级别均明显低于模型组(P均<0.05),且小白菊内酯高剂量组明显低于同期小白菊内酯低剂量组(P均<0.05)。水迷宫实验中,模型组大鼠第1~4天的逃避潜伏期均明显长于对照组(P均<0.05),穿越平台象限百分比明显低于对照组(P<0.05);小白菊内酯低、高剂量组大鼠第1~4天的逃避潜伏期均明显短于模型组(P均<0.05),穿越平台象限百分比均明显高于模型组(P均<0.05);可视平台实验中,各组大鼠逃避潜伏期、游泳速度比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与对照组比较,模型组大鼠脑组织中MDA含量明显升高(P<0.05),GSH含量明显降低(P<0.05);海马突触间隙明显增宽(P<0.05),活性带长度明显缩短(P<0.05),突触后致密物厚度明显降低(P<0.05)。与模型组比较,小白菊内酯低、高剂量组大鼠MDA含量均明显降低(P均<0.05),GSH含量均明显升高(P均<0.05);海马突触间隙均明显缩短(P均<0.05),活性带长度均明显变长(P均<0.05),突触后致密物厚度均明显增加(P均<0.05)。与小白菊内酯低剂量组比较,小白菊内酯高剂量组大鼠脑组织中MDA、GSH含量变化更明显(P均<0.05)。结论小白菊内酯对杏仁核癫痫大鼠有很好的神经保护作用,机制可能与其抗氧化和保护海马超微结构有关。

小白菊内酯通过LINC00299/miR-590-3p对阿尔茨海默病模型细胞损伤的影响

目的探讨小白菊内酯调控LINC00299/微小RNA(miR)-590-3p途径对阿尔茨海默病(AD)模型细胞损伤的影响。方法用Aβ_(1~42)处理SK-N-SH细胞复制AD细胞模型。CCK-8和流式细胞术检测细胞活力和凋亡率。试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量。实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LINC00299和miR-590-3p表达。采用上述方法观察抑制LINC00299对AD模型细胞损伤的影响。双荧光素酶报告实验验证LINC00299和miR-590-3p靶向关系。结果Aβ_(1~42)处理后,SK-N-SH细胞活力、miR-590-3p表达量、SOD活性明显降低,凋亡率、LINC00299表达量、MDA含量、LDH释放量明显升高(P<0.05)。小白菊内酯处理后,Aβ_(1~42)诱导的SK-N-SH细胞活力、miR-590-3p表达量、SOD活性明显升高,凋亡率、LINC00299表达量、MDA含量、LDH释放量明显降低(P<0.05)。LINC00299过表达逆转了小白菊内酯对Aβ_(1~42)诱导的SK-N-SH细胞凋亡和氧化损伤的影响。miR-590-3p与LINC00299序列直接结合。结论小白菊内酯可能通过调控LINC00299/miR-590-3p通路进而保护AD模型细胞损伤。

杭白菊及其F1代单株头状花序的营养成分比较分析

通过液相质谱联用技术对杭白菊及其F1代优选单株的花朵(头状花序)进行营养成分比较分析。结果表明,杭白菊、杭F1-17和杭F1-22中分别检测到502、505和496个代谢物,三者共有代谢物309个。结合差异倍数值FC≥1.5和≤0.8筛选杭白菊vs杭F1-17和vs杭F1-22的差异代谢物中分别有135和206种上调、144和154种下调,其中,杭F1-17和杭F1-22的黄酮类代谢物山奈酚(FC为16.77和18.69)、木犀草素(FC为7.35和3.74)、异鼠李素(FC为3.21和6.38)、人体必须氨基酸之一的甲硫氨酸(FC为103.22和67.71)、主要有机酸苹果酸(FC为306.73和2.76)和柠檬酸(FC为4.82和12.16)、菊花主要保健成分绿原酸(FC为1.53和3.11)等物质的相对含量均明显上调。此外,与母本杭白菊相比,杭F1-17特有熊果酸、维生素A和K3等成分,杭F1-22特有鼠尾草酚、杨梅素、维生素B1等成分。以上研究表明杭白菊F1代优选单株中的主要营养成分相对含量明显较母本高,同时在F1代单株中还检测到特有营养成分,且杭F1-17头状花序的托桂特性也为开发观食两用的优良茶用菊新品种提供了参考。

Siglec-E影响小白菊内酯靶向MAPK/NF-κB通路抑制小胶质细胞M1极化

目的探讨唾液酸结合样凝集素E(sialic acid binding lectin E,Siglec-E)对小白菊内酯(parthenolide,PTL)抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠小胶质细胞(BV2)M1极化作用的影响。方法①从基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)获取Siglece相关小鼠脑组织单细胞测序数据,分为野生型组(WT,n=3)和敲除型组(Siglece^(-/-),n=4)。从中筛选出小胶质细胞并分析相关差异基因及通路富集。通过shRNA干扰技术构建BV2细胞株模型,得到NC-shRNA BV2和Siglece-shRNA BV2细胞并检测Siglec-E(Siglece)表达水平。②将NC-shRNA和Siglece-shRNA细胞分别分为Control组、LPS组、PTL组和PTL+LPS组(n=3),采用RT-qPCR检测小胶质细胞M1极化标志物iNOS、IL-1β和IL-6的mRNA水平。将Siglece^(fl/fl)和Cx3cr1^(cre)小鼠交配,获得小胶质细胞特异性Siglec-E缺失(Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre))小鼠,并建立LPS诱导的神经炎症模型。③将出生4 d的各9只WT和Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre)雄鼠分成Control组、LPS组和PTL+LPS组(n=3)。采用RT-qPCR、免疫荧光技术和Western blot验证敲除效果以及极化相关通路,研究Siglec-E影响PTL抑制小胶质细胞M1极化的机制。结果与NC-shRNA组比较,Siglece-shRNA组中Siglec-E表达显著降低(P<0.01),说明SiglecE敲除细胞模型建立成功。在LPS刺激的条件下,与Control组比较,NC-shRNA细胞和Siglece-shRNA细胞的iNOS、IL-1β和IL-6的mRNA水平均显著上调(P<0.01)。PTL与LPS共同作用下,NC-shRNA细胞中上述M1极化的标志物均明显下降(P<0.05)。而对于Siglece-shRNA细胞,上述M1极化的标志物无显著下调。PTL对BV2细胞JNK、IκB蛋白的磷酸化具有抑制作用(P<0.01),也可抑制NF-κB核转位,而下调Siglec-E则会减弱该作用。与WT组小鼠比较,Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre)小鼠小胶质细胞Siglec-E表达显著降低(P<0.01),PTL对Siglece^(fl/fl)×Cx3cr1^(cre)小鼠小胶质细胞NF-κB磷酸化水平的抑制作用也降低。结论小胶质细胞Siglec-E缺失会减弱PTL靶向MAPK/NF-κB通路对其M1极化的抑制作用。

花期杭白菊植株引诱菊小长管蚜的嗅觉和视觉线索及应用

杭白菊是一类顶级的茶用菊,原产地是浙江省桐乡市。菊小长管蚜Macrosiphoniella sanborni是菊属植物重要害虫,常常在花期觅食于花上和匿于花内,随着菊花采摘、加工而残留在菊花产品中。冲饮菊花茶过程中,蚜尸或肢体就浮现在菊花茶汤中,致饮者“倒胃口”。为揭示该蚜嗜好花朵原因和研制有效的防控手段以便在花期控制该蚜,分离鉴定了花期杭白菊植株的36种挥发性化合物,挑选其中含量大的、主要的17种用作味源,对该蚜做行为测定。发现a-蒎烯、反-2-己烯醛、(+)-4-蒈烯、顺-3-己烯乙酯、顺式-β-罗勒烯、γ-萜品烯、或者1-辛烯-3-乙酯7种成分的10-4g/mL的正己烷溶液显著地吸引该蚜雌、雄成蚜。依次将该7种成分的每种10-2g/mL正己烷溶液与蚜虫性信息素荆芥内酯的10-4g/mL正己烷溶液按照60∶10∶10∶2∶2∶20∶2∶1体积比配制成复合型蚜虫引诱剂,在菊园中与专利产品蚜虫引诱剂比较诱效,结果表明前者对于该蚜更具有引诱力。此外,在杭白菊园进行的该蚜趋色行为测定中,测得菊花黄对该蚜诱效稍强于芽绿色。随后,将每块菊花黄粘板附1个复合型蚜虫引诱剂诱芯,组成1个诱捕器,在杭白菊花期的菊园放置相互间距7 m×8 m的诱捕器诱杀成蚜。结果证实:不仅每个诱捕器诱杀了大量菊小长管蚜成虫,而且诱捕器的防效优于吡虫啉药液。认为:花期杭白菊植株的主要挥发性化合物和花朵上雌蚜释放的性信息素(嗅觉线索)与菊花的黄色(视觉线索)叠加引诱了菊小长管蚜;研制的载有复合型蚜虫引诱剂的菊花黄粘板可用作花期有效诱杀菊小长管蚜的手段。

采穗批次和冷藏对福白菊种苗质量与产量的影响

自越冬后,连续采穗扦插福白菊的母株,探究了其扦插的最大繁育系数,并比较了不同批次插穗、生根苗的质量,定植后于盛花期观测其株高、冠幅和产量等指标,以评估不同批次插穗、生根苗、产量的差异,旨在为福白菊的种苗繁育和高产栽培提供依据。结果表明:春季在福白菊越冬母株上可采10茬扦插穗条,结合冷藏,在适宜的定植期内可产生5批插穗和5批生根苗。春季,1株福白菊采穗株最多可繁育40余株扦插苗,后期所采穗条有变细、变弱的趋势,扦插后的生根数下降,但总根长与平均根长呈增加的趋势;冷藏30 d以内未发现对生根苗和插穗的保存质量存在不利的影响,当冷藏超过30 d时损耗率则会增加。此外,冷藏20~30 d对生根苗的生长、鲜花产量具有一定的提升作用,扦插生根后冷藏比插穗冷藏后扦插的种苗产花量更高;就种苗的来源而言,自越冬后,从母株上所采集的第1至第4茬穗条扦插生根苗的产花量高于其他插穗;就定植时间而言,5月中下旬定植仍不低于前期定植的种苗产量;自5月下旬开始,随着定植期的延后,第5至第7批的株高、冠幅和单株产量呈现下降趋势,与定植期晚于5月之后的种苗相比,二代插穗生根苗的产花量均优于在相近定植期的一代插穗生根苗的产花量。

杭白菊木脂素类成分研究

目的 研究杭白菊木脂素类成分。方法 采用大孔吸附树脂、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和制备型HPLC对杭白菊80%乙醇提取物进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果 从中分离得到11个化合物,分别鉴定为ssioriside (1)、nudiposide (2)、lyoniside (3)、tortoside A (4), viburfordoside E (5)、tiliamuroside A (6)、开环异落叶松脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、异落叶松脂醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、异落叶松脂醇-9-O-β-D-吡喃木糖苷(9)、5′-甲氧基-异落叶松脂醇-9′-O-β-D-吡喃木糖苷(10)、(7R,8R)-4,7,9,9′-四羟基-3,3′-二甲氧基-8-O-4′-新木脂素(11)。结论 化合物1~11均为首次从该植物中得到。

小白菊内酯治疗白血病研究进展

目的 为小白菊内酯(PTL)治疗白血病提供参考。方法 检索中国知网、万方、维普、Pub Med数据库2000年至2023年相关文献,分析PTL治疗白血病的药理活性和作用机制,并总结其临床应用及剂型改进方法。结果 对于急性白血病,PTL能通过抑制核因子激活的B细胞的κ-轻链增强复合蛋白(NF-κB)、影响PI3K/AKT/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路、上调活性氧水平及激活应激反应蛋白等机制,促使急性白血病细胞凋亡,影响细胞周期;对于慢性白血病,PTL通过半胱氨酸残基的烷基化抑制NF-κB和影响谷胱甘肽系统诱导活性氧抑制白血病细胞。PTL还可提高白血病细胞对化学药物治疗相关药物的敏感性。可通过制备聚(苯乙烯-马来酸酐)-b-聚(苯乙烯)胶束及聚乳酸-羟基乙酸共聚物、抗CD44包裹技术来提高PTL的溶解度和生物利用度。结论 PTL对白血病疗效较好,但需通过修饰、改造、合成后才能成为较理想的抗白血病药物。本研究可为研发安全、高效的新型白血病药物提供思路,也为白血病治疗提供实验基础和理论支持。

生物提取物小白菊内酯抗肿瘤作用及机制的研究进展

小白菊内酯(parthenolide, PTL)是一种从小白菊中提取的倍半萜内酯,因其独特的化学性质和对多种肿瘤细胞的复合分子作用,被认为是一种极具潜力的抗癌候选药物。研究显示,PTL不仅能有效抑制核因子κB(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells, NF-κB)和STAT-3等关键转录因子,还可以触发特定的细胞死亡路径,促使细胞内活性氧增加和Bcl-2家族蛋白改变。此外,PTL对癌症干细胞也显示出了特异性的靶向能力。鉴于PTL的显著功效,该化合物有希望成为一种新的靶向癌症治疗的药物。本篇综述聚焦于探讨PTL在肿瘤模型中的作用机制,特别是其对肿瘤细胞基因表达、信号转导以及不同细胞死亡类型的影响。

小白菊内酯对多柔比星诱导的H9c2心肌细胞损伤保护作用的相关机制研究

目的探索小白菊内酯(PTL)对多柔比星(DOX)诱导的心肌细胞损伤的保护作用机制。方法培养H9c2大鼠心肌细胞,应用CCK-8法确定DOX和PTL的最佳作用浓度。将H9c2大鼠心肌细胞分为对照组、PTL组、DOX组及DOX+PTL组进行相应处理,DCFH-DA染色流式细胞仪检测细胞内活性氧水平,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞内凋亡比例,蛋白质印迹法检测核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、B细胞淋巴瘤-2相关x蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白的表达。结果检测0.5~5.0μmol/L浓度梯度的DOX处理大鼠H9c2心肌细胞24 h后,细胞活力下降,并且呈现剂量依赖性(P<0.05),其中1.0μmol/L DOX可引起H9c2心肌细胞活力降至53.0%±0.4%。5.0μmol/L PTL预处理H9c2心肌细胞3 h后可显著增加DOX引起的细胞活力(P<0.05)。与对照组相比,在DOX组的H9c2心肌细胞中Nrf2、HO-1及Bcl-2蛋白表达显著降低,Bax表达显著增加(P<0.05),氧化应激水平、细胞凋亡比例增多(P<0.05);与DOX组相比,PTL预处理显著增加了DOX处理的H9c2心肌细胞中Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达,降低Bax表达(P<0.05),并降低氧化应激水平、细胞凋亡率(P<0.05)。结论PTL缓解DOX引起的H9c2心肌细胞损伤,可能与激活Nrf2/HO-1通路、抑制Bcl-2/Bax通路有关。

小白菊内酯调控NF-κB表达改善体外循环犬肺缺血再灌注损伤

目的研究小白菊内酯(PTL)对体外循环(CPB)犬肺缺血再灌注(IR)损伤的影响,并探讨其作用机制。方法18只健康成年中华田园犬,体重10~12 kg,采用随机数字表法分为假手术组(Sham)、肺缺血再灌注组(IR)和小白菊内酯组(PTL)。假手术(Sham)组不进行CPB,其余两组均建立CPB左肺缺血再灌注损伤模型。取CPB前(T_(1))、停机时(T_(2))和实验结束时(T 3)股动脉血行血气分析,计算呼吸指数(RI)和氧合指数(OI);ELSIA检测T_(1)、T_(2)和T_(3)时点血浆和T 3时点左肺肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6和TNF-α含量;HE染色观察肺组织病理情况;qRT-PCR检测肺组织TNF-αmRNA表达水平;Western blot检测肺组织NF-κB p65、NF-κB p65和TNF-α蛋白表达水平。结果CPB后犬出现肺损伤,与IR组比较,T_(3)时点PTL组肺组织病理损伤减轻,RI明显降低(P<0.05),血浆、肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6和TNF-α含量,肺组织TNF-αmRNA相对表达水平,TNF-α、NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05),OI明显升高(P<0.05)。结论PTL可改善CPB犬肺损伤,其机制可能与抑制NF-κB p65激活,减轻炎症反应有关。

杭白菊不同溶剂提取物中总酚和总黄酮的含量及抗氧化活性比较

分别采用水、70%乙醇、70%甲醇三种提取溶剂对杭白菊进行超声波提取,测定各种溶剂提取物中总酚和总黄酮的含量,比较提取物的体外抗氧化活性。结果发现,不同溶剂提取物中总酚和总黄酮含量存在显著性差异(P<0.05)。其中,70%乙醇作为提取溶剂提取的总酚和总黄酮含量最高,分别为6.66 mg GAE/g和15.64 mg RE/g,70%甲醇次之,而水作为溶剂提取效率是最低的。抗氧化活性结果表明,70%乙醇提取物的DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和FRAP铁离子还原能力均为最高,分别为30.93μmol TE/g、113.30μmol TE/g和120.23μmol TE/g,水提物的最低,三种提取物总酚和总黄酮的含量与ABTS自由基清除能力和FRAP铁离子还原能力之间存在显著正相关性(P<0.05)。杭白菊具有很高的营养价值和药用价值,本研究将为进一步开发利用杭白菊提供一定的理论基础和科学依据。

超声辅助酱香型白酒浸提杭白菊工艺优化

以杭白菊为原料,采用超声波辅助酱香型白酒浸渍法提取杭白菊中黄酮含量。通过单因素实验和正交实验得到优化工艺参数,温度为25℃,超声时间30 min,粉碎度60目,液固比53:1(g/mL),在此条件下,总黄酮提取量最高达到168.68μg/mL。通过对最佳工艺浸提的菊花酱酒进行抗氧化性实验,得出其DPPH和ABTS清除率分别为18.35%和89.12%,均远高于纯酱酒的清除率,说明浸提出的黄酮显著增强了酱酒的抗氧化能力。本文研究结果为菊花酱酒的开发和应用提供了基础数据。

种植密度与摘心次数对无毛小白菊生长的影响

【目的】为探索野生无毛小白菊的种植密度与摘心次数,提高菊花蕾产量,解决山地栽培产量不高的技术难题。【方法】以种植密度130 cm(含施工通道45)×25 cm、130 cm×35 cm、130 cm×45 cm和摘心次数6、7、8次各3种处理,比较分析无毛小白菊地径、高度、侧枝数的生长指标和鲜花蕾产量的变化。【结果】密度为130 cm×25 cm、130 cm×35 cm、130 cm×45 cm时,地径分别为1.03、1.59、1.81 cm,与密度呈明显的负相关关系;高度分别为94.75、93.43、95.50 cm,密度对纵向生长影响很小;侧枝数分别为275、465.25、487.5条,呈明显的负相关关系;单株鲜花蕾产量分别为128.78、197.15、230.7 g,呈明显负相关关系。摘心6、7、8次时,地径分别为1.8、1.5、1.3 cm,呈明显的负相关关系;高度分别为98.3、96.5、95.5 cm,摘心次数对纵向生长影响很小;侧枝数分别为333.75、404.75、490条,呈明显的正相关关系;单株鲜花蕾产量分别为172.3、184.8、200.5 g,呈明显的正相关关系。【结论】合理密度+良好的管理模式能够达到增产,所以,山地种植无毛小白菊株行距130 cm×35 cm,摘心8次的管理技术,值得在生产中推广应用。

渭北旱塬杭白菊引种试验

为了解杭白菊在渭北旱塬的适应性,进行了渭北旱塬引种试验。试验结果表明,引种成活率达95%以上,未受霜冻影响,有效含量明显高于药典标准.由此可知渭北旱塬为杭白菊的安全生产地,且有利于有效成分的提高。

小白菊内酯对食管癌细胞增殖 凋亡和能量代谢的影响

目的 探讨小白菊内酯对食管癌细胞增殖、凋亡和能量代谢的影响。方法 对人食管癌细胞Eca109转染肝激酶B1(LKB1)的短发夹RNA(shRNA)重组pLK0.1质粒(LKB1-shRNA)及阴性对照质粒(NC-shRNA),然后应用不同浓度的小白菊内酯处理Eca109细胞。使用细胞计数试剂(CCK-8)检测试剂盒测量细胞活力。使用Annexin V-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)双重染色分析细胞凋亡。使用定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法检测LKB1、cleaved PARP、磷酸化腺苷酸(AMP)激活蛋白激酶-α(p-AMPK-α)和AMPK-α的蛋白表达。使用Screen Quest荧光法葡萄糖摄取检测试剂盒检测葡萄糖摄取。使用三磷酸腺苷(ATP)分析试剂盒测量细胞ATP水平。结果 与未处理的Eca109细胞相比,10μmol/L小白菊内酯孵育24 h后细胞中LKB1的表达水平升高(P<0.05)。小白菊内酯处理抑制了Eca109细胞的增殖、葡萄糖摄取和ATP合成,并诱导了细胞凋亡(P<0.05)。小白菊内酯处理升高了LKB1、p-AMPK-α和cleaved PARP的蛋白相对表达量(P<0.05)。然而,沉默LKB1则逆转了小白菊内酯对细胞增殖、凋亡、葡萄糖摄取和ATP合成的影响(P<0.05)。结论 小白菊内酯通过激活LKB1-AMPK轴来抑制食管癌细胞增殖、葡萄糖摄取和ATP合成,并诱导细胞凋亡。

不同钝化剂处理下镉和铅在土壤-杭白菊体系中富集迁移特性及菊花品质的变化

为综合评价生物质炭、调理剂和腐殖酸3种不同钝化剂对杭白菊镉(Cd)和铅(Pb)含量降解的影响,通过土壤盆栽实验研究了钝化剂处理下Cd和Pb在2种土壤-杭白菊体系中的富集迁移特性及菊花品质的变化。结果表明:在2种不同程度Cd和Pb污染土壤中添加3种钝化剂杭白菊整体对Cd富集系数均降低,其中添加生物质炭降幅最显著(54.70%、72.27%);添加生物质炭相较于其它2种钝化剂对抑制Cd和Pb在茎-花间的迁移以及菊花茶茶渣中的残留量效果均最显著,茶渣中两者的残留在土壤1中分别下降48.91%、56.10%,土壤2中分别下降62.77%、86.00%。土壤1中添加生物质炭花中绿原酸、木犀草苷和异绿原酸A含量与对照相比增幅最显著,分别为154.93%、77.11%和99.09%;而土壤2中添加3种钝化剂,3种有效成分含量均极显著提高。综合分析,生物质炭对Cd和Pb在杭白菊植株中的降解,降低菊花茶中的残留以及提升菊花品质方面效果最佳,可作为杭白菊种植区土壤钝化修复首选材料。

梳齿带自走式杭白菊收获机设计与试验

求,设计了一款梳齿带自走式杭白菊收获机。该收获机主要由梳齿带采摘部件、毛刷组件、升降装置、行走装置、收集装置和液压系统组成,采用链传动带动梳齿排循环转动的方式,利用多排梳齿的梳刷作用实现对杭白菊的连续采收,可通过液压系统调节采摘部件的运转速度和工作高度。通过运动力学分析,确定了传送带、旋转梳齿排等关键部件的结构参数。基于此,搭建了试验样机,并以收获机行驶速度、采摘部件工作转速、梳齿与毛刷间的最小距离为试验因素,以杭白菊采摘率、损伤率和含杂率为试验指标,在田间进行了三因素三水平正交试验,获得了收获机最佳工作参数。当行驶速度为0.1 m/s、采摘部件工作转速为60 r/min、梳齿与毛刷间的最小距离为60 mm时,采摘效果最好,采摘率为83.1%,破损率为15.8%,含杂率为17.9%。所设计的梳齿带自走式杭白菊收获机运行稳定,满足杭白菊采摘的农艺要求。

靶向结直肠癌的小白菊内酯脂质体纳米颗粒诱导程序性坏死并改善T细胞耗竭

目的研究小白菊内酯(PTL)诱导结直肠癌细胞程序性坏死,并通过调节T细胞耗竭抑制结直肠癌的发展的机制,并通过构建其靶向脂质体改进其临床应用。方法通过CCK8实验检测不同结直肠肿瘤细胞经PTL处理后的增殖能力。利用ROS与LDH检测分析PTL诱导MC38细胞死亡的方式并进行蛋白免疫印迹分析。将24只小鼠随机分成对照组(等量生理盐水)、低剂量PTL组(5 mg/kg)与高剂量PTL组(15 mg/kg),通过在小鼠腹股沟皮下注射MC38细胞构建皮下瘤模型,给药后检测各组小鼠皮下瘤的重量与CD8^(+)T细胞的浸润情况,分析CD8^(+)T细胞耗竭表型的变化。构建PTL脂质体并对其进行表征。通过在小鼠回盲部移植肿瘤构建结直肠癌原位移植瘤模型,将32只小鼠随机分成对照组(等量生理盐水)、PTL处理组(100μg/mL)、低剂量靶向脂质体TCP-1-PTL-LNPs组(100μg/mL)和高剂量TCP-1-PTL-LNPs组(200μg/mL),尾静脉注射给药,通过免疫组化分析CD8在肿瘤中的表达情况。结果多种结直肠癌细胞(SW480、DLD1、HCT116和MC38)在PTL作用下随着药物浓度梯度增加细胞活力逐渐下降。在MC38细胞中,这一效应可被抑制剂Nec-1拮抗,同时免疫蛋白印迹分析显示经PTL处理细胞出现RIP3和MLKL的磷酸化。在小鼠皮下瘤模型中,经流式细胞术分析,与对照组或低剂量组相比,高剂量PTL组出现了肿瘤CD3^(+)CD8^(+)T细胞的浸润增加(P<0.01),同时PD1hiTIM3^(+)T细胞比例显著增加(P<0.01),而PD1loTIM3-T细胞比例显著降低(P<0.01)。在小鼠结直肠癌原位移植瘤模型中,经过PTL治疗,免疫组化结果显示CD8表达较对照组明显增加,而使用了高浓度靶向脂质体治疗的肿瘤中CD8表达更进一步增加(P<0.01)。结论小白菊内酯通过诱导细胞程序性坏死、增加肿瘤CD8^(+)T细胞浸润,改善CD8^(+)T细胞耗竭,其靶向脂质体能提高其抗肿瘤效应。

小白菊内酯对地塞米松诱导的成骨细胞增殖和分化的影响

目的探讨小白菊内酯(parthenolide,PTL)对地塞米松(dexamethasone,Dex)诱导的成骨细胞(MC3T3-E1)成骨分化及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法用浓度为2.5~80μmol/L的小白菊内酯与地塞米松共同处理MC3T3-E1细胞,CCK-8法检测细胞增殖活性;将MC3T3-E1细胞分为对照组(Control组)、地塞米松组(Dex组)、小白菊内酯低、中、高浓度组(PTL-L组、PTL-M组、PTL-H组)、小白菊内酯高浓度+Wnt抑制剂组(PTL-H+DKK1组),碱性磷酸酶(ALP)染色检测细胞ALP活性,茜素红S染色观察细胞矿化结节形成;Western blot检测细胞Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨钙素(OCN)、骨形成蛋白2(BMP2)、细胞周期蛋白Cyclin D1及Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达水平。结果浓度为2.5~80μmol/L的小白菊内酯可促进地塞米松诱导的MC3T3-E1细胞增殖,选择小白菊内酯浓度为5.0、10.0、20.0μmol/L进行后续实验;与Control组相比,Dex组ALP活性显著降低,矿化结节减少,RUNX2、OCN、BMP2、Cyclin D1、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与Dex组比较,PTL-L组、PTL-M组、PTL-H组ALP活性、矿化结节数依次升高,RUNX2、OCN、BMP2、Cyclin D1、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平依次升高(P<0.05);与PTL-H组比较,PTL-H+DKK1组ALP活性与矿化结节显著降低,UNX2、OCN、BMP2、Cyclin D1、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论小白菊内酯通过激活Wnt/β-catenin信号通路,减轻地塞米松对成骨细胞增殖与分化的抑制作用。