超高效液相色谱指纹图谱结合化学模式识别评价白蒲黄胶囊质量

目的 建立评价白蒲黄胶囊质量的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱和化学模式识别方法。方法 色谱柱为Waters Acquity BEH C_(18)柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,柱温为35℃,切换检测波长210 nm及323 nm,进样量为2μL。建立2个厂家10批样品的指纹图谱,并进行相似度评价、聚类分析(CA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),筛选不同批次样品的差异性标志物。结果 方法学考察结果显示,精密度、重复性、稳定性试验结果的RSD均小于2.0%。10批样品共标定了19个共有峰;通过与对照品比对,指认7个成分,分别为盐酸黄柏碱(4号峰)、绿原酸(6号峰)、咖啡酸(10号峰)、菊苣酸(11号峰)、黄芩苷(13号峰)、盐酸小檗碱(17号峰)、白头翁皂苷B_(4)(19号峰)。10批样品的指纹图谱相似度均不低于0.978。10批样品按厂家聚为2类;在OPLS-DA模型下,以变量重要性投影值大于1筛选出4个差异性标志物,分别为白头翁皂苷B_(4)(19号峰)、5号峰、菊苣酸(11号峰)、绿原酸(6号峰)。结论 该方法操作简单、结果准确,可客观评价白蒲黄胶囊的质量。

UPLC-MS/MS法同时测定白蒲黄胶囊中12种有效成分

目的建立超高效液相色谱-串联质谱(ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLC-ESI-MS/MS)方法同时测定白蒲黄胶囊中β-蜕皮甾酮、筋骨草甾酮C、常春藤皂苷C、刺人参皂苷S、白头翁皂苷C、C47H76O17、白头翁皂苷B4、常春藤皂苷B、白头翁皂苷A3、α-常春藤皂苷、23-羟基白桦脂酸和常春藤皂苷元12种成分的含量。方法采用Phenomenex Kinetex-C18色谱柱(100×3mm,2.6mm),流动相为甲醇(0.1%甲酸)-水(0.1%甲酸),梯度洗脱,流速0.4mL/min,柱温40℃。采用电喷雾离子源进行正、负离子模式进行检测,多反应监测模式进行定量测定。离子源温度(Source Temp)为150℃,毛细管(Capillary)电压为2.0kV,离子源补偿电压(Source Offset)为50V,脱溶剂气温度(Desolvation Temp)为500℃,雾化气(Nebuliser)压力7.0Bar,接口处加热。结果在6.5min内白蒲黄胶囊中12种有效成分β-蜕皮甾酮、筋骨草甾酮C、常春藤皂苷C、刺人参皂苷S、白头翁皂苷C、C_(47)H_(76)O_(17)、白头翁皂苷B4、常春藤皂苷B、白头翁皂苷A3、α-常春藤皂苷、23-羟基白桦脂酸和常春藤皂苷元被完全分离;峰面积与其浓度呈良好的线性;平均回收率范围为97.13%～101.2%,相对标准差为1.2%～4.1%。结论该测定方法经验证分析时间短、专属性高,可为白蒲黄胶囊质量控制提供依据。