多西他赛白蛋白纳米粒的制备及处方工艺优化

目的优化多西他赛白蛋白纳米粒(DTX-HSANps)的处方和制备工艺,并对其进行初步的质量评价。方法采用NabTM技术制备DTX-HSANps,通过Plackett-Burman实验设计,对DTX在油相中的浓度、人血白蛋白(Humanserumalbumin,HSA)在水相中的浓度、水相溶液的pH、油水相体积比、乳化器的转速和均质压力共6个因素进行考察,以粒径、稳定性及过药量作为指标,筛选影响产品质量的关键因素。采用Box-Behnken效应面法筛选最优的处方工艺,对样品的粒径、包封率、载药量、微观形态进行表征。结果确定HSA在水相中的浓度、水相溶液的pH和均质压力为影响产品质量的关键因素。根据最佳处方工艺制备三批样品,冻干复溶后,DTX-HSA Nps的粒径为(107.3±1.3)nm,PDI为(0.123±0.012),载药量为(3.9±0.2)%,包封率为(92.0±0.6)%。结论所制备的DTX-HSANps粒径分布均匀,理化性质稳定,具有较高的产品开发价值以及较好的临床应用潜力。

薯蓣皂苷元白蛋白纳米粒制备及其体内药动学研究

目的制备薯蓣皂苷元白蛋白纳米粒,并考察其体内药动学。方法高压均质法制备白蛋白纳米粒,单因素试验优化处方,测定其包封率、载药量、粒径、Zeta电位、溶解度、体外释药,分析其晶型、稳定性。18只大鼠随机分为3组,分别灌胃给予薯蓣皂苷元、物理混合物、薯蓣皂苷元白蛋白纳米粒的0.5%CMC-Na混悬液(30 mg/kg),于0.5、1、2、3、4、6、9、12、18 h采血,HPLC法测定薯蓣皂苷元血药浓度,计算主要药动学参数。结果最佳处方为薯蓣皂苷元用量60 mg,水相pH值8.5,白蛋白用量0.9 g,均质压力135 MPa,均质次数10次,包封率为93.59%,载药量为5.70%,粒径为163.72 nm,Zeta电位为-21.67 mV。白蛋白纳米粒溶解度高于原料药、物理混合物,模拟胃液、模拟肠液中其24 h内累积溶出率高于原料药。薯蓣皂苷元在白蛋白纳米粒中以无定形态存在,6个月内稳定性良好。与原料药、物理混合物比较,白蛋白纳米粒t max缩短(P<0.05),t 1/2延长(P<0.05),C max、AUC 0~t、AUC 0~∞升高(P<0.01);与原料药比较,其相对生物利用度增加至3.77倍。结论白蛋白纳米粒可增加薯蓣皂苷元溶解度,促进其体外释药、体内口服吸收。

Plackett-Burman实验设计联用Box-Behnken响应面法优化柚皮素白蛋白纳米粒的处方工艺

目的 优化NabTM技术制备柚皮素的牛血清白蛋白纳米粒的处方工艺。方法 以包封率为指标,采用Plackett-Burman实验设计结合Box-Behnken响应面法优化柚皮素白蛋白纳米粒的处方工艺,并考察纳米粒的体外释放规律。结果 最终确定柚皮素白蛋白纳米粒处方工艺为:白蛋白浓度为30 mg·mL-1,水相pH值为6,有机相与水相比例为1∶5,制备的纳米粒包封率为88.80%,粒径为171.9 nm, PDI为0.340,体外释放具有明显缓释作用。结论 Plackett-Burman实验设计联用Box-Behnken响应面法可用于优化柚皮素白蛋白纳米粒工艺处方。

叶酸偶联白蛋白纳米粒肿瘤细胞靶向性研究

目的 研究能通过叶酸受体介导靶向肿瘤细胞的叶酸偶联白蛋白纳米粒。方法 利用叶酸活性酯在碱性条件下与白蛋白纳米粒表面上的氨基反应 ,制得叶酸偶联的白蛋白纳米粒。以荧光定量法确定浓度、时间、游离叶酸对肿瘤细胞摄取叶酸偶联白蛋白纳米粒的影响程度。结果 成功制备了叶酸偶联白蛋白纳米粒。叶酸偶联白蛋白纳米粒的肿瘤细胞摄取量随纳米粒浓度增大、培养时间延长而增加 ,肿瘤细胞对叶酸偶联白蛋白纳米粒的摄取可被过量的外源性游离叶酸所抑制。结论 叶酸偶联白蛋白纳米粒能通过细胞膜上的叶酸受体介导内吞入胞 。

受体介导米托蒽醌白蛋白纳米粒肿瘤细胞靶向性研究

目的研究叶酸偶联米托蒽醌白蛋白纳米粒(MTO-BSANP-FOLATE)的肿瘤细胞靶向性。方法采用去溶剂化法制备白蛋白纳米粒,采用叶酸活性酯在微碱性条件下与白蛋白纳米粒表面的活性氨基偶联制备叶酸偶联白蛋白纳米粒,再将其与米托蒽醌混合,戊二醛固化,制备MTO-BSANP-FOLATE。采用3HTDR掺入法和流式细胞术对其肿瘤细胞靶向性进行评价。结果所制备的MTO-BSANP-FOLATE包封率为(96.55±0.96)%,载药量为(9.66±0.10)%。3HTDR掺入法和流式细胞术结果表明MTO-BSANP-FOLATE组的肿瘤细胞抑制率及凋亡率均高于MTO-BSANP。结论MTO-BSANP-FOLATE可通过肿瘤细胞高表达的叶酸受体靶向于肿瘤细胞。

高效液相色谱法测定葫芦素B人血清白蛋白纳米粒中药物含量

目的：建立葫芦素B人血清白蛋白纳米粒中药物含量的测定方法。方法：采用Diamonsil C18柱（200mm×4.6 mm,5μm）;以乙腈-水-磷酸（45∶55∶0.1）作为流动相;流速为1 mL.min-1;检测波长为228 nm;柱温30℃。结果：在本实验条件下蛋白纳米粒中辅料对葫芦素B的测定无干扰,在1.0~20 mg.L-1浓度范围内线性关系良好（r=0.999 9,n=5）,葫芦素B平均回收率为100.2%,RSD为0.8%（n=3）。结论：本法准确可靠,简便易行,可用于葫芦素B人血清白蛋白纳米粒中药物含量的测定。

叶酸受体介导米托蒽醌白蛋白纳米粒的体内分布及药效学研究

目的考察叶酸偶联米托蒽醌白蛋白纳米粒(MTO-BSANP-folate)在荷瘤裸鼠体内分布特征及抑瘤情况。方法以荷SKOV3人卵巢肿瘤细胞裸鼠为模型,考察了MTO-BSANP-folate对荷瘤裸鼠肿瘤生长情况的影响,并与米托蒽醌白蛋白纳米粒(MTO-BSANP)及米托蒽醌溶液(MTO-sol)进行比较。采用HPLC研究静脉给药后各实验组米托蒽醌的体内分布情况。结果尾静脉给予MTO-BSANP-folate的荷瘤裸鼠肿瘤生长最为缓慢,抑瘤率最高。体内分布实验结果表明,MTO-BSANP-folate在肿瘤的分布高于MTO-BSANP及MTO-sol。结论叶酸偶联米托蒽醌白蛋白纳米粒是一种有潜力的抗肿瘤药物的载体,可靶向于高表达叶酸受体的肿瘤。

RP-HPLC法研究米托蒽醌白蛋白纳米粒在大鼠的体内分布和淋巴结靶向性

目的:建立大鼠血浆及组织(心、肝、脾、肺、肾及淋巴结)中米托蒽醌(MTO)的快速萃取法和 RP-HPLC 检测法,研究米托蒽醌白蛋白纳米粒(MTO-BSA-NP)在大鼠体内的组织分布和淋巴结靶向性。方法:采用甲酸为酸化剂、甲醇为润湿剂、20%三氯乙酸为蛋白沉淀剂、氯仿为油脂溶解剂一步沉淀萃取 MTO。RP-HPLC 法检测 MTO,色谱柱为 C_(18)(300mm×6mm,5μm),流动相为甲醇-0.16mol·L^(-1)甲酸铵缓冲液(pH2.7)(48:52),进样量10μL,流速1.0mL·min,检测波长658nm,外标法峰面积定量。结果:MTO 与内源性物质分离良好。血浆及心、肺、肾和淋巴结匀浆中,MTO 浓度在50～2997ng·mL^(-1)范围内;肝和脾匀浆中,MTO 浓度在100～2997ng·mL^(-1)范围内,峰面积与 MTO 浓度线性关系良好(r>0.999)。MTO 从血浆中萃取同收率为98.5%,组织中的萃取回收率均在52.0%以上。方法回收率高,日内和日间精密度均小于10%,样品稳定性良好。测定结果表明 MTO-BSA-NP 在淋巴结的摄取率是米托蒽醌注射液(MTO-Soln)的3.36倍,但在其他组织的分布无显著性差异。结论:本文建立的一步沉淀萃取法和 RP-HPLC 法,简便、快速、可靠,可用于 MTO-BSA-NP 在大鼠的体内分布和淋巴结靶向性研究。MTO-BSA-NP 较 MTO-Soln 淋巴结靶向性显著。

白蛋白纳米粒的制备工艺及其靶向性研究进展

目的综述近年内白蛋白纳米粒给药系统制备工艺、靶向性及结构修饰定性技术的进展。方法描述白蛋白纳米粒给药系统的制备工艺、体内靶向性研究和结构修饰评估技术进展,分析白蛋白纳米粒系统靶向性给药的优势与技术难关,进行问题总结与展望。结果白蛋白纳米粒是较有前途的靶向性胶质药物载体。结论白蛋白纳米粒靶向给药系统的研究有重要的临床意义。

白蛋白纳米粒药物传递系统的研究进展

目的综述白蛋白纳米粒作为药物传递系统的最新研究进展。方法依据国内外研究文章及专利文献共63篇,将白蛋白的性质及功能、白蛋白纳米粒的制备工艺、靶向肿瘤作用机理、上市药物及其临床前和临床实验结果进行了概括。结果白蛋白是一种良好的药物载体,显示独特的靶向肿瘤机理;白蛋白纳米粒的制备方法中二硫键形成法相对于其他制备方法具有显著优点,避免了很多基于溶剂传递的传统剂型中存在的潜在问题,由其制备的上市药物紫杉醇白蛋白纳米粒(Abraxane)具有较好的临床疗效。结论白蛋白纳米粒给药系统的研究有着重要的临床意义及发展前景。

HPLC法测定羟基喜树碱人血清白蛋白纳米粒中的药物含量

目的建立羟基喜树碱（10-hydroxycamptothecin，HCPT）人血清白蛋白纳米粒（humanserumalbuminnanoparticle，HSA—NP）中药物含量的测定方法。方法采用KromasilC18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-水（体积比45：55），流速1．0mL·min^-1，紫外检测波长266nnq，柱温35℃。结果在本实验条件下制剂中辅料对HCPT含量的测定无干扰，HCPT质量浓度在2．0～10．0mg·L^-1内线性关系良好（r=0．9999，n=5），HCPT平均加样回收率为100．2％，RSD为1．0％（n=9）。结论本法准确可靠、简便易行，可用于羟基喜树碱人血清白蛋白纳米粒（HCPT—HSA—NP）中药物含量的测定。

叶酸偶联米托蒽醌白蛋白纳米粒的制备及体外性质研究

目的研究叶酸偶联米托蒽醌白蛋白纳米粒的制备工艺及体外性质。方法考察了pH值对包封率的影响及包封率与载药量之间的关系。并考察了不同量交联剂对纳米粒释药速度的影响。结果叶酸偶联米托蒽醌白蛋白纳米粒包封率为(96.55±0.96)%,载药量为(9.66±0.10)%。在加入了不同量的固化剂后,可得到释放速度不同的叶酸偶联米托蒽醌白蛋白纳米粒。结论优化了叶酸偶联米托蒽醌白蛋白纳米粒的制备工艺。

马钱子碱白蛋白纳米粒的制备与初步评价

目的制备马钱子碱白蛋白纳米粒,并考察其体外理化性质。方法采用去溶剂化-化学交联法制备白蛋白纳米粒。利用透射电镜、马尔文激光粒度仪、HPLC法及考马斯亮兰-酶标仪对制备的纳米粒进行表征。结果制得的纳米粒呈类球形,平均粒径为(209.8±3.6)nm,Zeta电位(-34.49±1.32)mV,纳米粒收率90.0%±3.2%,包封率为60%±2.3%,载药量为2%±1.2%,体外模拟释药结果表明载药纳米粒药物释放速率在24h内持续稳定。结论去溶剂化-化学交联法制备马钱子碱白蛋白纳米粒简便可靠,体外释药具有明显的缓释作用。

采用星点设计-效应面法优化及制备阿霉素白蛋白纳米粒

目的采用星点设计-效应面法优化阿霉素白蛋白纳米粒的制备工艺。方法采用去溶剂化-固化交联法制备阿霉素白蛋白纳米粒。以白蛋白质量浓度(X1:1ρ,g.L-1)、阿霉素的质量浓度(X2:2ρ,g.L-1)、pH值(X3)及白蛋白理论交联度(X4,%)为考察对象,以纳米粒平均粒径(Y1:d,nm)、zeta电位(Y2:V,mV)、载药量(Y3:w1,%)和包封率(Y4:w2,%)为评价指标,以四因素五水平的星点设计-效应面法筛选出最佳制备工艺;并采用透射电镜观察制得纳米粒的形态。结果优化后的处方工艺为:白蛋白质量浓度为17 g.L-1、阿霉素质量浓度为2 g.L-1、pH值为9、白蛋白理论交联度为125%。以此条件制得的纳米粒平均粒径为(151±0.43)nm,zeta电位为-(18.8±0.21)mV,载药量为(21.4±0.70)%,包封率为(76.9±0.21)%,均与预测值偏差较小。结论阿霉素白蛋白纳米粒的制备采用星点设计-效应面法设计并优化是可行的。

磁性阿霉素白蛋白纳米粒的研制

目的 :制作具有稳定磁性、能够携带化疗药物的白蛋白纳米粒 ,并对白蛋白纳米粒的磁性、药物含量进行检测。方法 :将市售用Fe3 O4 粉末 ,经化学方法处理 ,制成纳米大小的Fe3 O4 泥糊 ,将Fe3 O4 泥糊、纯盐酸阿霉素、人体血清白蛋白按一定比例混合 ,通过在棉仔油中超声乳化、加热变性、乙醚洗涤等工艺制作出磁性阿霉素白蛋白纳米粒 ,用乙醇提取法提取磁性纳米粒中的阿霉素 ,并用荧光光度计测定含量。将纳米粒溶于生理盐水中 ,在光学显微镜下观察在磁场作用下磁性纳米粒的运动情况。通过检测溶液中的游离药物 ,观察在不同的加热温度下 ,磁性纳米粒的稳定性 ,并用电子显微镜观察纳米粒的内部结构。结果 :磁性白蛋白纳米粒阿霉素含量为 5 7.5 μg/ g ,阿霉素包含率为 98.3% ,磁性白蛋白纳米粒溶液在光学显微镜下观察 ,在磁场的作用下 ,纳米粒迅速向磁铁的方向移动并发生聚集 ,当磁铁与纳米粒的距离加大时 ,纳米粒运动速度减慢 ,并沿磁力线的方向形成串珠状聚集。电子显微镜下观察 ,Fe3 O4 颗粒均匀分布在白蛋白纳米粒中。结论 :磁性白蛋白纳米粒具有磁性稳定、靶向性强、药物包含率高、释药速率可控制的特点 ,为靶向药物治疗提供了可靠的载药工具。

星点设计-效应面法优化白蛋白纳米粒吸附灯盏花素的研究

制备空白牛血清白蛋白纳米粒,通过星点设计-效应面法优化空白白蛋白纳米粒吸附灯盏花素的制备参数。以灯盏花素浓度、空白白蛋白纳米粒浓度、灯盏花素加入量为因素,以包封率、载药量、载药后粒径的增大量为指标,分别用不同数学模型描述指标与因素间的关系。根据模型绘制效应面,预测最优处方并进行验证。对制得产物的粒径、多分散系数、Zeta电位及体外释药性质等进行了研究。结果表明,考察因素与考察指标之间的定量关系均具有较高的可信度,优化处方的预测值和测定值非常接近。最佳制备参数:灯盏花素溶液浓度1.45 mg/mL,空白白蛋白纳米粒混悬液浓度30 mg/mL,前者为后者的2.4倍体积;产物的载药量为6.73%,包封率为80.08%,粒径增加22.7 nm。载药后的纳米粒平均粒径为283.4 nm,多分散系数为0.117,Zeta电位为17.95 mV,24 h累积释放率79.19%。本实验成功地将灯盏花素吸附于空白白蛋白纳米粒,并优化了该载药白蛋白纳米粒的制备条件。

量子点在叶酸偶联白蛋白纳米粒靶向肿瘤细胞研究中的应用

目的制备荧光量子点标记的叶酸偶联白蛋白纳米粒,并研究该纳米粒对人结肠癌HT-29细胞的靶向性。方法先通过缩合剂将量子点与白蛋白纳米粒相结合,再利用叶酸活性酯在碱性条件下与白蛋白表面上的氨基反应,制得叶酸修饰的白蛋白/量子点纳米粒,通过量子点荧光标记的方法对结肠癌HT-29肿瘤细胞摄取Folate-HAS/QDs纳米粒进行相关研究。结果成功制备了具有良好粒径分布和荧光性能的Fo-late-HAS/QDs纳米粒,并证实该纳米粒对HT-29细胞有较强的靶向性。结论通过量子点作为荧光标记物,简单直观的证实了叶酸修饰的白蛋白/量子点纳米粒能通过细胞膜上的叶酸受体介导内吞入细胞,可显著靶向于叶酸受体丰富的肿瘤细胞。

HPLC法测定苦参碱白蛋白纳米粒的包封率

建立苦参碱白蛋白纳米粒药物包封率测定的 HPLC 法。方法:采用离心超滤法分离苦参碱白蛋白纳米粒中的游离苦参碱,以 HPLC 为分析手段对纳米粒包封率进行测定评价。色谱条件:采用 Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:乙腈-0.02mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(6:94);流速:1.0 mL·min^(-1);检测波长:210 nm;温度:25℃。结果:采用离心超滤法分离,HPLC 法测定,可达到游离苦参碱与纳米粒的有效分离,苦参碱峰与溶剂峰分离良好,苦参碱浓度在6～100μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率在95.06%～100.9%之间,日内 RSD 和日间 RSD 均小于2%(n=5)。结论:本方法准确可靠,简单快速,可用于苦参碱白蛋白纳米粒药物包封率的测定。

半胱氨酸对高效液相色谱法测定多西紫杉醇白蛋白纳米粒含量的影响

建立多西紫杉醇(docetaxel,DOC)人血清白蛋白纳米粒(human serum album in nanoparticles,HSA-NP)中药物含量测定的方法。利用半胱氨酸(cysteine,Cys)还原人血清白蛋白中交联的二硫键,释放HSA-NP中包裹的药物,再利用HPLC测定药物含量。结果表明,在本实验条件下Cys及制剂中辅料对DOC的含量测定无干扰。1μg/LCys、37℃孵化30min,最后用乙腈沉淀蛋白的方法可以完全测定出制剂中DOC含量。

蟾毒灵白蛋白纳米粒对结肠癌干细胞端粒酶活性的影响

目的观察蟾毒灵白蛋白纳米粒对SW480结肠癌干细胞增殖及端粒酶活性的影响。方法流式细胞仪分选SW480结肠癌细胞CD133+/CD44+亚群(SW480结肠癌干细胞),以不同浓度(1、10、50、100 nmol/L)的蟾毒灵及蟾毒灵白蛋白纳米粒进行干预,MTT法观察细胞增殖,采用端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附测定法(TRAP-ELISA)检测结肠癌干细胞端粒酶活性的变化。结果与对照组比较,低浓度(1、10 nmol/L)蟾毒灵及蟾毒灵白蛋白纳米粒干预对SW480结肠癌干细胞的增殖及端粒酶活性均无明显影响(P>0.05);与对照组和中、高浓度(50、100 nmol/L)蟾毒灵组比较,相应浓度的蟾毒灵白蛋白纳米粒组SW480结肠癌干细胞的增殖及端粒酶活性明显受到抑制(P<0.05)。结论 50 nmol/L和100 nmol/L的蟾毒灵白蛋白纳米粒能显著抑制结肠癌干细胞的增殖和端粒酶活性,且效果优于蟾毒灵。