B细胞淋巴瘤/白血病因子-2家族相关信号通路与重度抑郁症关系的研究进展

重度抑郁症（MDD）是一种严重行为异常、认知障碍、心境低落的心身疾病之一，对机体消化、免疫、循环和神经系统等均会产生影响并造成机体损伤，且MDD发病率高、复发率高、死亡率高。世界卫生组织（WTO）预测MDD在10年后将是仅次于心血管疾病的重要疾病之一。虽然国外和国内对MDD研究并未间断，但是MDD病因和发病机制还未完全清楚。

胰岛素样生长因子-1对大鼠胰岛功能及细胞凋亡的影响

目的研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在高糖条件下对大鼠胰岛功能及胰岛细胞凋亡的影响。方法体外培养SD大鼠胰岛48 h,按培养液不同分为3组:对照组(葡萄糖5.6 mmol/L)、高糖组(葡萄糖15.6mmol/L)、IGF-1组(葡萄糖15.6 mmol/L+IGF-1 10 ng/mL),检测项目(1)胰岛细胞分泌功能:放射免疫法、免疫组织化学法;(2)胰岛细胞凋亡:Hoechst33342染色免疫荧光法、DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL法)、免疫组织化学法、透射电镜。结果与对照组比较,高糖组胰岛素分泌量、细胞内胰岛素表达率明显减少(P<0.05);凋亡细胞明显增多,人B细胞淋巴瘤/白血病因子-2(Bcl-2)表达率明显减少(P<0.05);细胞核碎裂固缩多,核仁消失核膜变形分泌颗粒减少可见淀粉样物质沉积。与对照组及高糖组比较,IGF-1组胰岛素分泌量、胰岛素表达率均明显升高(P<0.05);胰岛细胞凋亡率低于高糖组但高于对照组(P<0.05)、Bcl-2表达率高于高糖组但低于对照组(P<0.05);核碎裂、核固缩少,细胞核形态结构正常及分泌颗粒数量相对增加。结论 IGF-1可以直接作用于胰岛,有促进胰岛素分泌及抗细胞凋亡作用,这种功能可能与诱导抗凋亡因子Bcl-2高表达有关。

黄芪汤对延缓^(12)C^(6+)离子辐射致大鼠肾组织细胞凋亡的影响及相关机制

目的:探讨黄芪汤抑制^(12)C^(6+)离子辐射脑模型鼠肾组织细胞凋亡的分子保护机制。方法:50只SPF级Wistar大鼠随机分为正常对照组,单纯辐射模型组,黄芪汤(高、中、低剂量)组。正常对照组和单纯辐射模型组给予等体积生理盐水灌胃10 ml/(kg·d),黄芪汤治疗组分别灌胃给予黄芪汤18、9、4.5 g/(kg·d),连续给药2周。7 d后除正常对照组外,其余各组大鼠脑组织给予4Gy ^(12)C^(6+)离子束单次照射,辐射后第7日处死各组大鼠。HE染色法观察大鼠肾脏的病理形态变化,ELISA法检测大鼠血清IL-6的含量,实时荧光定量PCR法测定大鼠肾脏Bcl-2、Bax和Caspase-3的基因表达,免疫组化法检测大鼠肾脏Bcl-2、Bax、Caspase-3和NF-κB的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,单纯辐射模型组体重和肾脏指数均显著降低,血清IL-6的含量显著升高,肾脏Bcl-2的基因表达和蛋白表达均显著降低,Bax和Caspase-3的基因表达和蛋白表达均显著升高,NF-κB的蛋白表达也显著升高(P<0.01),单纯辐射组肾小球系膜细胞明显增生,肾小管间质血管明显扩张充血,肾小管管腔狭窄、不规则。与单纯辐射模型组相比,黄芪汤高剂量组体重和肾脏指数均明显升高,黄芪汤各干预组肾脏Bcl-2的基因表达和蛋白表达均显著升高(P<0.05或P<0.01);而黄芪汤中、高剂量组Bax和Caspase-3的蛋白表达均显著降低,各干预组血清IL-6的含量显著降低,肾脏Bax和Caspase-3的基因表达均显著降低,肾脏NF-κB的蛋白表达显著下降(P<0.05或P<0.01),黄芪汤高剂量组可见肾小球系膜细胞增生情况明显改善,肾小管轮廓清晰。结论:黄芪汤对^(12)C^(6+)离子辐射脑模型鼠的肾损伤具有一定的防护作用,其作用机制可能与调控Bcl-2/NF-κB信号通路有关。

β-细辛醚对抑郁模型大鼠行为及海马MKP-1,MSK-1,CREB和Bcl-2的影响

目的:探讨β-细辛醚对抑郁模型大鼠行为学及丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1),增强有丝分裂原和应激活化蛋白酶-1(MSK-1),cAMP反应元件结合蛋白(CREB)和B细胞淋巴瘤/白血病因子-2(Bcl-2)表达的影响。方法:60只2～3月龄SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组和β-细辛醚组,每组15只。采用慢性轻度不可预见性应激加孤养复制抑郁模型,造模第2天开始,氟西汀组和β-细辛醚组灌胃给药,1次/d(氟西汀1.2 mg.kg-1.d-1,β-细辛醚25 mg.kg-1.d-1)。于实验第1,7,14,21天,分别进行体重、糖水消耗量检测和敞箱实验,对大鼠行为学改变进行评定。采用免疫组织化学染色检测MKP-1和Bcl-2蛋白表达,实时定量PCR对MKP-1,MSK-1,CREB和Bcl-2进行定量分析。结果:与模型组比较,氟西汀组和β-细辛醚组大鼠行为学指标显著改善,海马区MKP-1表达减弱、MSK-1,CREB和Bcl-2表达增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:β-细辛醚可有效改善抑郁模型大鼠的抑郁症状,其机制可能与减少海马区MKP-1,增强MSK-1,CREB和Bcl-2蛋白表达有关。

黄芪汤对12C^6+离子辐射脑损伤模型鼠Bcl-2/NF-κB信号通路的调控机制研究

目的观察黄芪汤对12C^6+离子辐射脑损伤模型鼠脑组织B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白表达的影响,进一步揭示黄芪汤防辐射机制。方法50只SPF级Wistar大鼠随机分为正常对照组,单纯辐射模型组,黄芪汤高、中、低剂量组(18,9,4.5 g·kg^−1·d^−1)。黄芪汤高、中、低剂量组预先给予黄芪汤灌胃2周,单纯辐射模型组和黄芪汤高、中、低剂量组大鼠脑组织于灌胃第8天给予4 Gy 12C^6+离子束单次照射,正常对照组不予照射。辐射后第7天处死各组大鼠。HE染色法观察脑组织的病理形态变化,实时荧光定量PCR法和免疫组化法分别测定各组大鼠脑组织Bcl-2、Bax和caspase-3的基因表达和蛋白表达,Western blotting法检测各组大鼠脑组织NF-κB的蛋白表达。结果与正常对照组比较,单纯辐射模型组体质量和脑系数均显著降低,脑组织Bcl-2的基因表达和蛋白表达均显著降低,Bax和caspase-3的基因表达和蛋白表达均显著升高,NF-κB的蛋白表达也显著升高(P<0.05),单纯辐射模型组大鼠脑组织出现不同程度的神经细胞数量减少,排列疏松,核固缩、深染及神经细胞周围间隙增宽。与单纯辐射模型组相比,黄芪汤中、高剂量组脑系数和脑组织Bcl-2的蛋白表达显著升高,黄芪汤高剂量组体质量和脑组织Bcl-2的基因表达均显著升高(P<0.05);而黄芪汤各干预组的NF-κB蛋白表达均显著降低,中、高剂量组caspase-3的基因表达和蛋白表达均显著降低,高剂量组Bax的基因表达和蛋白表达也均显著降低(P<0.05),高剂量组神经细胞数量减少及脑组织排列疏松等情况较单纯辐射组明显好转,但未完全恢复正常。结论黄芪汤对12C6+离子辐射所致大鼠脑损伤具有一定防护作用,其作用机制可能与促进脑组织Bcl-2/NF-κB信号通路的Bcl-2蛋白表达,抑制其Bax、caspase-3和NF-κB蛋白表达来减轻脑组织神经细胞凋亡有关。