X射线照射K562细胞后mdrl基因表达和白血病干细胞含量的变化

目的研究白血病K562细胞经X射线照射后耐药基因mdr1表达、白血病干细胞(LSC)含量和药物敏感性的变化,探讨白血病辐射耐受性与药物耐受性的相关性。方法以白血病K562细胞为模型,直线加速器X射线照射,采用实时荧光定量PCR技术检测mdr1 mRNA表达,流式细胞术检测LSC表面标志和P-糖蛋白(P-gp)表达,MTT法测定细胞的药物敏感性。结果白血病K562细胞系mdr1基因表达和LSC含量极低,经不同剂量的X射线照射后,K562细胞中LSC的含量显著增加,mdr1/P-gp表达增高,随时间延长而逐渐降低;对阿霉素的敏感性明显降低。结论X射线照射可提高白血病K562细胞群中LSC的比例和刺激mdr1/P-gp表达,继发性地降低其对常规化疗药物的敏感性。

矢车菊色素对高龄糖尿病大鼠B细胞淋巴瘤基因2及Bcl-2相关X蛋白基因表达的影响

目的了解矢车菊色素对高龄2型糖尿病大鼠(Goto-Kakizaki rats,GK大鼠)肾损害时B细胞淋巴瘤伯血病基因-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 assaciated X protem,Bax)基因表达的影响。方法 25周龄雄性GK大鼠24只随机分为矢车菊组和对照组,每组12只。矢车菊组饲喂含10%葡萄糖的矢车菊色素-3-葡萄糖苷溶液600 mg/L8周,对照组饲喂10%葡萄糖溶液8周。每周测量体重及空腹血糖,8周后处死。RT-qPCR检测大鼠左肾Bcl-2、Bax mRNA表达,同时检测左肾脏器指数、血清糖化血红蛋白(glycated hemoglobin A1c,GHbA1c)并观察右肾病理损害。结果矢车菊组肾Bcl-2 mRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。矢车菊组Bax基因与对照组比,mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。矢车菊组GK大鼠的体重、空腹血糖、血清GHbA1c和左肾脏器指数较对照组均降低(P<0.05)。与对照组比较,矢车菊组肾脏病理损害明显减轻。结论矢车菊色素可降低GK大鼠的体重、空腹血糖和血清GHbA1c水平,减轻糖尿病的肾损伤,可能与促进Bcl-2基因表达有关。

急性脑梗死伴肺部感染患者病原菌分布特点及肺部感染对Bax、FEIR、GSH-Px水平影响

目的 研究急性脑梗死(ACI)伴肺部感染患者病原菌分布特点及肺部感染对B细胞淋巴瘤/白血病-2基因关联X蛋白(Bax)、免疫黏附抑制因子(FEIR)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平的影响。方法 选取2020年5月—2022年5月治疗的ACI合并肺部感染53例作为研究组,同期治疗的ACI未合并肺部感染51例作为对照组。分析研究组感染病原菌的分布情况,比较2组血清Bax、FEIR、GSH-Px水平。结果 研究组53例中真菌感染5例,占比9.43%,以白色假丝酵母菌为主;革兰阳性菌感染24例,占比45.28%,以金黄色葡萄球菌为主,其次为肺炎链球菌;革兰阴性菌感染24例,占比45.28%,以鲍曼不动杆菌为主,其次为阴沟肠杆菌、产酸克雷伯菌。研究组血清Bax、FEIR水平高于对照组,而GSH-Px水平低于对照组(P<0.01)。结论 ACI伴肺部感染患者病原菌以革兰阳性菌和革兰阴性菌为主,ACI伴肺部感染患者的氧化应激水平较单独ACI明显增加。

川楝子醇提物抑制急性淋巴细胞白血病细胞增殖的作用机制研究

目的:探究川楝子醇提物抑制急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞增殖的作用机制。方法:选取人急性淋巴白血病细胞T淋巴细胞(CCRF-CEM)细胞株及无特定病原体(SPF)级6周SD品种的雌性大鼠12只,以不同浓度梯度川楝子醇提物作用24 h、48 h、72 h,观察其对CCRF-CEM细胞的抑制及凋亡的影响。结果:16 mg/L、80 mg/L、400 mg/L川楝子醇提物作用ALL细胞的不同时间具有明显的抗增殖作用。相较于对照组,于同一时间点,不同质量川楝子醇提物的吸光度值明显不同,且随着质量的增加吸光度值逐渐降低(P<0.05)。与对照组比较,16 mg/L、80 mg/L、400 mg/L川楝子醇提物作用外周血淋巴细胞同一时间段的给药吸光度值比较差异无统计学意义(P>0.05)。提示不同质量浓度对外周血淋巴细胞无明显的不良反应。于同一时间点,与对照组比较,不同质量浓度川楝子提取物的B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)基因、Bcl-2相关X蛋白(Bax)基因、P53基因表达明显不同(P<0.05);Bax基因随质量浓度的增加而增加,Bcl-2基因表达随质量浓度的增加而降低,24 h 400 mg/L川楝子醇提物的P53基因表达达到最高,而作用于ALL细胞48 h后,基因表达呈上升趋势(P<0.05)。结论:川楝子醇提物可通过线粒体介导抑制白血病CCRF-CEM细胞增殖,并且呈浓度及时间的依赖性。

高压氧预处理对减压病大鼠脑组织B细胞淋巴瘤/白血病基因-2蛋白及相关X蛋白表达的影响

目的 探讨高压氧（hyperbaric oxygen,HBO）预处理对减压病大鼠脑组织B细胞淋巴瘤/白血病基因-2蛋白（B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2）及相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3蛋白（cysteine aspartic acid specific protease-3,Caspase-3）表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠72只,采用数字表法随机分为正常对照组（对照组）、高压氧预处理组（HBO组）、减压病组（DCS组）,每组分别设置4个观察时间点（1、5、7、10 d）,每个时间点（亚组）6只.建立大鼠减压病模型,HE染色观察减压病后脑组织病理变化,免疫组织化学染色观察各组脑组织Bcl-2、Bax、Caspase-3 的表达.结果 （1） HBO组与DCS组脑组织皮层病情分级为轻度～中度（1～3级）.（2）HE染色发现,DCS组大鼠大脑皮层区出现大片疏松区,皮层与海马神经元细胞呈三角形变性坏死,细胞萎缩、体积缩小变性,染色质浓缩甚至碎裂,HBO组神经元变性坏死明显减轻.（3）1、5、7d时,DCS组脑组织皮层Bcl-2阳性细胞数分别为（89.5±15.60）、（176.4±10.22）、（265.52±15.74）个,与对照组（408.67 ±29.57）个相比明显减少,差异均有统计学意义（P＜0.01）;HBO组[脑组织皮层阳性细胞数分别为（179.64±12.21）、（253.91±14.00）、（341.15±13.52）个],较DCS组明显增加,差异均有统计学意义（P＜0.05）.1、5、7d时,DCS组脑组织皮层Bax阳性细胞数分别为（389.56±18.62）、（337.04±14.85）、（176.41±20.75）个,Caspase-3阳性细胞数分别为（495.64 ±21.03）、（283.04±13.12）、（352.41 ±21.34）个,较对照组1d时[脑组织皮层Bax和Caspase-3分别为（98.64±14.25）、（106.20±14.64）个]明显增加.HBO组Bax阳性细胞数分别为（313.54±21.02）、（253.05±13.60）、（129.03±12.85）个,Caspase-3分别为（429.43±14.08）、（228.05 ±13.60）、（301.02±15.79）个,较DCS组明显减少,差异均有统计学意义（P＜0.05）.DCS组Bcl-2/Bax值较对照组明显降低,HBO组Bcl-2/Bax值较DCS组明显升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 DCS组大鼠大脑皮层区神经元凋亡1d时最严重,海马区10 d时最明显;HBO预处理可以减轻减压对大鼠脑组织的病理损伤,减轻神经细胞的变性坏死,抑制线粒体途径的细胞凋亡.

丹参酮Ⅱ_A对鼠脑缺血再灌注损伤凋亡基因表达的影响

目的探讨丹参酮ⅡA(TanⅡA)对脑缺血再灌注损伤大鼠B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(Bcl-2)及B细胞淋巴瘤/白血病基因伴随蛋白x(Bax)蛋白表达的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、TanⅡA低剂量治疗组和TanⅡA高剂量治疗组。线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型。TanⅡA高、低剂量治疗组分别于术前连续灌胃给予相应剂量TanⅡA3 d,1次/d。除假手术组外的各组于脑缺血90 min再灌注24 h,进行HE染色观察病理形态学变化和神经症状评分,免疫组化法观察大鼠额顶部皮质Bcl-2和Bax蛋白表达。结果TanⅡA高、低剂量治疗组脑组织缺血损伤病理学改变明显轻于缺血再灌注组,TanⅡA高剂量治疗组缺血改变亦轻于低剂量治疗组。TanⅡA高、低剂量治疗组神经功能缺失评分较缺血再灌注组降低(P<0.05)。与假手术组比较,缺血再灌注组Bcl-2和Bax表达增加,Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05)。与缺血再灌注组比较,TanⅡA高、低剂量治疗组均显著增加Bcl-2表达、减少Bax表达,上调Bcl-2/Bax比值,高、低剂量组之间差异亦具有显著性(P<0.05)。结论TanⅡA对缺血再灌注脑损伤具有保护作用,其机制可能与通过增加Bcl-2表达,减少Bax表达,上调Bcl-2/Bax比值抗凋亡有关。

神经营养素-3对大鼠急性脊髓损伤后Bcl-2和Bax表达的影响

目的:观察神经营养素-3(NT-3)对大鼠急性脊髓损伤后B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(Bcl-2)和B细胞淋巴瘤/白血病基因伴随蛋白x(Bax)表达的影响,探讨NT-3对脊髓损伤的作用及其可能的分子机制。方法:105只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、损伤对照组(B组)和NT-3治疗组(C组),每组35只。B、C组用改良Allen′s法以30g·cm致伤大鼠T8脊髓制作损伤模型,C组经蛛网膜下腔导管于术后即刻、4h、8h、12h、24h、3d、7d注入NT-320μl(含NT-3200ng),B组在相同时间点给予等量生理盐水;A组打开椎板后蛛网膜下腔置管,不损伤脊髓,不给药。术后24h、3d、7d、14d对大鼠进行脊髓运动功能(BBB)评分。于术后4h、8h、12h、24h、3d、7d、14d处死动物(n=5),取T8节段脊髓,甲苯胺蓝(Nissl)染色观察脊髓前角运动神经元变化情况,用免疫组织化学方法检测Bcl-2和Bax在脊髓前角运动神经元中的表达变化情况。结果:各时间点C组和B组大鼠BBB评分均显著低于A组(P<0.01),但C组显著高于B组(P<0.05或0.01)。Nissl染色C组大鼠脊髓损伤区较B组出血少、残存神经元多,A组正常。各时间点C组和B组大鼠损伤脊髓前角运动神经元中Bax阳性细胞平均光密度(AOD)值均显著高于A组(P<0.01),但C组显著低于B组(P<0.05或0.01);各时间点C组和B组大鼠损伤脊髓前角运动神经元中Bcl-2阳性细胞AOD值均显著低于A组(P<0.01),但C组显著高于B组(P<0.05或0.01)。结论:NT-3可能通过抑制Bax表达,提高Bcl-2表达,抑制脊髓损伤后神经元凋亡,从而保护损伤的脊髓组织,这可能是NT-3对脊髓损伤具有保护作用的机制之一。

甘草甜素对HepG2细胞急性损伤后超微结构和相关蛋白表达的影响

目的 利用肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)和放线菌素D(actinomycinD ,ActD)造成HepG2细胞急性损伤 ,观察甘草甜素 (glycyrrhizin ,GL)对此过程中细胞超微结构和相关蛋白表达的影响。方法 给予不同终浓度的甘草甜素预保护 30min后 ,TNF和ActD共同作用HepG2细胞 12h ,电镜观察细胞超微结构的变化 ,Westernblot检测细胞内凋亡相关蛋白Caspase - 3及Bcl- 2、Bax的表达情况。结果 TNF -α和ActD共同作用 12h可造成HepG2细胞急性损伤 ,电镜下可见细胞缩小、核浓缩、微绒毛消失等凋亡细胞特征 ,而 10 0 μg/mLGL保护组未见 ;另外 ,Westernblot检测显示 ,给予不同浓度甘草甜素预保护后 ,损伤细胞内Caspase - 3的 32kD酶原表达逐渐增加 ,17kD活性成分表达逐渐减少 ,同时Bcl- 2表达逐渐增加 ,Bax表达逐渐减少。结论 TNF -α作用 12h后诱导的HepG2细胞急性损伤呈现凋亡细胞特有的超微结构改变 ,甘草甜素可通过调控凋亡相关蛋白的表达而抑制损伤的发生。

Bax、Bag-l、Bcl-2在乳腺肿瘤组织中的表达及意义

目的:探讨Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2结合抗凋亡基因(Bag-1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)在乳腺肿瘤组织中的表达及临床意义。方法:选取本院乳腺浸润性导管癌及其癌旁组织各85例、乳腺导管内癌及其癌旁组织各70例,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)免疫组化法检测Bax、Bag-l、Bcl-2蛋白在各组织中的表达。结果:Bax蛋白在浸润性导管癌组织中的表达与癌旁正常组织及导管内癌组织比较,差异无统计学意义(P>0.05);Bag-1、Bcl-2蛋白在浸润性导管癌组织中的表达高于在癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05);浸润性导管癌组织中Bag-1、Bcl-2蛋白阳性表达率明显高于导管内癌癌组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌组织中Bag-1、Bcl-2蛋白表达高于癌旁正常组织,在浸润性导管癌中的表达高于导管内癌组织,Bag-1、Bcl-2高表达可作为判断乳腺疾病良、恶性及预后的指标之一。

银杏叶提取物对大鼠急性脊髓损伤后神经功能恢复的作用及其机制

目的:观察银杏叶提取物(EGb)对大鼠实验性脊髓损伤后组织结构及运动功能恢复的作用,探讨其对急性脊髓损伤的作用机制。方法:120只SD雄性大鼠,随机分为假手术组(A组)、损伤对照组(B组)、甲基强的松龙(MP)治疗组(C组)和EGb治疗组(D组),每组30只。B、C、D组用Allen′s法以50g·cm致伤大鼠T9脊髓制作损伤模型,B组为单纯脊髓损伤,不给药;C组为脊髓损伤后30min内,由腹腔注入MP30mg/kg;D组为术后至处死前每天腹腔给予EGb17.5mg/kg;A组只打开T9椎板,不打击脊髓,不给药。术后24h、3d、5d、7d、14d对大鼠进行脊髓运动功能(BBB)评分。于术后24h、3d、5d、7d、14d处死动物(n=6),取T9节段脊髓,切片苏木素-伊红(HE)染色观察脊髓大体组织结构变化,用免疫组织化学方法检测B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(Bcl-2)和B细胞淋巴瘤/白血病基因伴随蛋白x(Bax)在脊髓前角运动神经元中的表达变化情况。结果:各时间点B、C、D组大鼠脊髓运动功能(BBB)评分均显著低于A组(P<0.01),伤后7d、14d时C、D组评分显著高于B组(P<0.05),各时间点C组与D组评分比较无统计学意义(P>0.05)。HE染色C组和D组大鼠脊髓损伤区较B组坏死程度轻、形成囊腔少,A组正常;1周后D组较C组片状出血灶少,神经细胞肿胀不明显。各时间点B、C、D组大鼠损伤脊髓前角运动神经元中Bcl-2阳性细胞数均显著高于A组(P<0.01),C、D组显著高于B组(P<0.01),7d、14d时D组显著高于C组(P<0.05);各时间点B、C、D组大鼠损伤脊髓前角运动神经元中Bax阳性细胞数均显著高于A组(P<0.01),C、D组显著低于B组(P<0.01),7d、14d时D组显著低于C组(P<0.01)。结论:EGb可能通过抑制Bax表达、提高Bcl-2表达,抑制脊髓损伤后神经元凋亡,在运动功能恢复、损伤脊髓组织保护上发挥其有益作用,1周后EGb仍能抑制脊髓损害后的继发性损伤。

缺血后预处理对缺血再灌注大鼠肝内胆管细胞损伤的影响及机制

目的观察缺血后预处理对缺血再灌注大鼠肝内胆管细胞损伤的影响并探讨其机制。方法取健康雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组,每组8只。假手术组:大鼠麻醉后于上腹部正中取一长3.5 cm纵切口,将腹壁各层依次切开,肝脏显露后进一步游离出肝十二指肠韧带,关腹,无其他干预。缺血再灌注组:在假手术组基础上,游离肝十二指肠韧带,用无损伤动脉夹将肝门区域夹闭,缺血30 min后取下血管夹,使血管开放,对肝脏持续再灌注,最后关腹。缺血后处理组:在缺血再灌注组基础上,血供完全恢复之前再灌注10 s,夹闭10 s,如此反复6个循环(共2 min)后完全恢复血供。比色法测定血清γ-GT、SOD活力,免疫组化法测定胆管组织中Bcl-2和Bax蛋白表达,采用原位缺口末端标记法测算胆管细胞凋亡指数(AI),HE染色后光镜下观察胆管上皮细胞基本形态学变化。结果 IR组、IPO组、SO组血清γ-GT值分别为(34.64±3.28)、(26.30±3.32)、(17.33±2.08)U/L,三组间两两比较,P均<0.05。SO组、IR组、IPO组大鼠血清SOD活力值分别为(58.26±3.00)、(60.28±3.73)、(61.53±7.99)U/m L,各组间比较,P均>0.05。IR组、IPO组、SO组胆管组织中Bcl-2蛋白阳性表达率分别为(42.67±3.73)%、(77.94±5.25)%、(18.21±4.16)%,三组间两两比较,P均<0.05。IR组、IPO组、SO组胆管组织中Bax蛋白阳性表达率分别为(90.17±2.12)%、(70.10±4.27)%、(30.63±3.00)%,三组间两两比较,P均<0.05。IR组、SO组、IPO组AI分别为79.31±1.12、26.06±2.27、58.90±2.75,三组间两两比较,P均<0.05。IPO组病理改变较IR组明显减轻,肝小叶结构较完整,肝细胞变性程度减轻,汇管区胆管上皮连续完整,炎细胞浸润少。结论缺血后预处理通过促进肝内胆管组织中Bcl-2蛋白表达、抑制Bax蛋白表达,抑制SD大鼠肝脏缺血再灌注过程中肝内胆管细胞凋亡,从而减轻肝脏缺血再灌注过程中肝内胆管细胞的损伤。

Piscidinol A对人肝癌HepG-2细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨匹西狄醇A(Piscidinol A)对人肝癌Hep G-2细胞增殖及凋亡的影响。方法取对数生长期经胰酶消化后的Hep G-2细胞,培养24 h后分为药物组及对照组,药物组加入不同浓度Piscidinol A(6.25、12.5、25、50、100 mg/L),对照组加入等体积的含10%胎牛血清RPMI1640培养液,12、24、48 h后采用MTT法检测细胞增殖抑制率,计算Piscidinol A的半数抑制浓度(IC_(50))值;于荧光显微镜下通过Hoechst 33258染色观察凋亡细胞形态,采用AnnexinⅤ-FITC/PI双标记法及流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blotting法检测B细胞淋巴瘤/白血病基因伴随蛋白x(Bax)蛋白表达。结果药物组Piscidinol A作用后Hep G-2细胞增殖受到抑制且呈量效和时效关系,24 h时IC_(50)值为24.90 mg/L;细胞凋亡染色显示,药物组有典型的细胞凋亡形态出现。药物组6.25、12.5、25、50、100 mg/L的Piscidinol A作用Hep G-2细胞24 h后,细胞凋亡率分别为11.83%、17.49%、21.72%、34.17%、48.51%,对照组为7.23%,随着药物浓度增大,药物组细胞凋亡率相应升高,与对照组相比,P均<0.05。药物组6.25、12.5、25、50、100 mg/L的Piscidinol A作用Hep G-2细胞24 h后,细胞凋亡相关蛋白Bax表达量分别为0.29、0.33、0.35、0.39、0.43μg/μL,对照组为0.24μg/μL,药物组随着Piscidinol A浓度升高,Bax蛋白表达增加,与对照组相比,P均<0.05。结论 Piscidinol A能抑制人肝癌Hep G-2细胞增殖并诱导细胞凋亡。

5-Aza-CdR联合5-FU对人结肠癌SW480和LS-174T细胞生长、凋亡的影响

目的观察5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)联合氟尿嘧啶(5-FU)对人结肠癌SW480和LS-174T细胞生长、凋亡的影响。方法将SW480和LS-174T细胞各分为四组:对照组、DAC组、5-FU组、联合组,对照组以等量PBS液加入SW480或LS-174T细胞培养液中;5-FU组用100μg/m L的5-FU干预SW480或70μg/m L的5-FU干预LS-174T细胞24 h;DAC组用5μmol/L的DAC干预SW480或LS-174T细胞48 h;联合组予5μmol/L的DAC干预SW480或LS-174T细胞48 h,再用100μg/m L的5-FU干预SW480或70μg/m L的5-FU干预LS-174T细胞24 h。MTT法测算细胞增殖抑制率;实时荧光定量PCR法检测各组凋亡相关基因(Bax、Bcl-2)mRNA表达;免疫细胞化学法检测Bax、Bcl-2蛋白表达。结果 DAC组和5-FU组细胞增殖抑制率高于对照组(P均<0.05),而联合组与其他三组相比细胞增殖抑制率亦升高(P均<0.01)。DAC组、5-FU组与对照组相比,Bax mRNA及蛋白表达增多(P均<0.05);与其他三组相比,联合组中Bax mRNA及蛋白表达增多(P均<0.01)。5-FU组、联合组与对照组相比,Bcl-2 mRNA及蛋白表达减少(P均<0.05),而联合组与5-FU组相比,Bcl-2 mRNA及蛋白表达差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 5-Aza-CdR和5-FU均能抑制人结肠癌SW480、LS-174T细胞生长,促进细胞凋亡,联合时作用更显著。

普罗布考联合山莨菪碱对糖尿病大鼠对比剂肾损伤的影响

目的探讨普罗布考联合山莨菪碱对糖尿病大鼠对比剂肾病(CIN)的影响。方法选取130只大鼠制备糖尿病大鼠模型,将造模成功大鼠随机分为模型组、普罗布考组、山莨菪碱组、联合组各21只。另选10只正常大鼠为正常对照组。糖尿病造模9周后,普罗布考组及联合组给予普罗布考500 mg/kg灌胃,连续6 d;第8天时,于制备CIN模型前,山莨菪碱组及联合组经腹腔注射山莨菪碱100μg/100 g,15 min后,模型组、普罗布考组、山莨菪碱组、联合组经尾静脉注射复方泛影葡胺注射液0.8 m L/100 g制备CIN模型;1 h后,山莨菪碱组、联合组经腹腔注射山莨菪碱100μg/100 g共7次。注射对比剂前及24 h后,采用CBB法测定尿蛋白。内眦静脉取血,测定血清BUN、Scr水平。称重,开腹后采集左右肾脏并称重,计算肾指数。HE染色法观察肾脏组织病理变化。取肾脏组织制成肾组织匀浆,测定氧化应激指标包括一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及总抗氧化能力(T-AOC)。荧光定量PCR法检测肾组织Bcl-2相关X蛋白质(Bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)mRNA表达。结果 (1)模型组BUN、Scr、UAE均高于正常对照组(P均<0.05)。普罗布考组及联合组BUN、Scr、UAE均低于模型组,联合组BUN、Scr、UAE均低于山莨菪碱组(P均<0.05)。(2)模型组肾指数高于正常对照组,普罗布考组及联合组肾指数低于模型组(P均<0.05)。(3)与模型组比较,普罗布考组、山莨菪碱组肾脏NOS水平升高,MDA水平降低(P均<0.05)。联合组肾脏SOD、T-AOC均高于普罗布考组和山莨菪碱组(P均<0.05)。(4)与模型组比较,普罗布考组、联合组肾脏Bax表达水平降低,Bcl-2及Bcl-2/Bax升高(P均<0.05);山莨菪碱组肾脏Bcl-2/Bax升高(P<0.05),联合组肾脏Bcl-2/Bax高于山莨菪碱组(P<0.05)。结论普罗布考、山莨菪碱联用可减轻糖尿病CIN大鼠的肾脏损伤,其机制可能与抑制氧化应激反应、上调Bcl-2/Bax比值有关,且效果优于单药应用。

坤泰胶囊对卵巢储备功能下降大鼠卵巢凋亡调控蛋白Bcl-2,Bax表达的影响

目的:探讨坤泰胶囊对去氧乙烯基环己烯(4-vinylcyclohexene diepoxide,VCD)所致卵巢储备功能下降(decreasing ovarian reserve,DOR)大鼠凋亡调控蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响,研究该药的作用机制。方法:SD雌性大鼠连续腹腔注射VCD(80 mg·kg^(-1))15 d,建立与人类相似的生理性卵巢储备功能下降模型。将动物分为正常组,模型组,坤泰胶囊高、中、低剂量组(1.89,0.63,0.21 g·kg-1),补佳乐(戊酸雌二醇,0.13 mg·kg^(-1))组,于造模第1天开始灌胃给药,每天1次,连续45 d。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清激素卵泡刺激素(FSH),黄体生成素(LH)及雌二醇(E2)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢、子宫的病理组织变化,蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测卵巢组织Bcl-2,Bax蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组FSH与LH明显升高,E_2明显降低(P<0.05);模型组卵巢、子宫体积明显缩小,原始卵泡与初级卵泡数目明显减少,子宫内膜变薄,腺体数目减少;模型组大鼠卵巢Bcl-2蛋白表达明显减少,Bax蛋白表达明显增加(P<0.05),Bcl-2/Bax显著下降(P<0.01)。与模型组比较,坤泰胶囊高、中、低剂量组FSH明显降低,E_2明显升高(P<0.05);补佳乐组FSH,LH明显降低,E2明显升高(P<0.05)。各给药组卵巢、子宫体积增大,原始卵泡与初级卵泡数目增多,子宫内膜变厚,腺体数目增加,改善程度顺序依次为坤泰胶囊低、中、高剂量组、补佳乐组。坤泰胶囊高、中、低剂剂量组及补佳乐组大鼠卵巢Bcl-2蛋白表达明显增加(P<0.05,P<0.01);坤泰胶囊高、中、低剂量组及补佳乐药组大鼠卵巢Bax蛋白表达减少(P<0.05);坤泰胶囊高、中、低剂量组及补佳乐组大鼠卵巢Bcl-2/Bax升高(P<0.05,P<0.01)。结论:坤泰胶囊可能通过上调卵巢Bcl-2蛋白表达及下调Bax蛋白表达,抑制卵泡的凋亡,从而改善卵巢功能。

强心饮对心肌病大鼠模型细胞凋亡因子的影响

目的研究强心饮对阿霉素诱导的心肌病心力衰竭大鼠模型的细胞凋亡相关因子表达的影响,以探讨强心饮对心肌细胞凋亡的作用机制。方法雄性Wistar大鼠分为6组,除空白组外,均采用尾静脉每周注射阿霉素2mg/kg,共6周,治疗组同时分别给于强心饮高、中、低剂量(含生药17.3g/kg、8.65g/kg、4.325g/kg),西药对照组给予培哚普利。治疗结束后,观测心力衰竭大鼠心肌细胞的凋亡情况(TUNEL法),检测B细胞淋巴瘤/白血病基因2(Bcl-2)和Bcl-2相关蛋白X(BAX)。结果强心饮能够减少模型大鼠心肌细胞凋亡,提高Bcl-2/BAX的比值。结论强心饮通过调控Bcl-2/BAX的表达,有效的阻止了心肌细胞凋亡发生。

二硫化二砷诱导T淋巴细胞白血病细胞株凋亡的机制研究

目的探讨二硫化二砷诱导T淋巴细胞白血病细胞株凋亡的分子机制。方法将不同浓度的二硫化二砷与T淋巴细胞白血病细胞株共培养。采用CCK-8方法测定细胞活性;AnnexinⅤ-PI方法测定细胞凋亡率,采用实时定量PCR在基因水平测定凋亡相关因子Bcl-2和Bax的表达。结果随着二硫化二砷药物浓度的增高,细胞活性减低,随着药物作用时间的延长,细胞活性逐渐减弱。其差异均有统计学意义。细胞凋亡结果显示:二硫化二砷药物浓度越高,细胞凋亡率越高,随着药物作用时间的延长,细胞凋亡率也越高。其差异均有统计学意义。实时荧光定量结果显示:与对照组比较,10μmol/L二硫化二砷与CEM细胞共孵育48 h,Bax/Bcl-2的比例升高(P<0.05)。结论二硫化二砷以时间和剂量依赖的方式抑制CEM细胞生长和诱导凋亡,诱导凋亡的机制与Bax/Bcl-2的比率增加有关。

半胱天冬氨酸酶-3、相关X蛋白与溃疡性结肠炎辨证分型的相关性

目的探讨溃疡性结肠炎（ulcerativecolitis，UC）中半胱天冬氨酸酶．3（Caspase．3）、B细胞淋巴瘤／白血病基因2相关X蛋白（Bax）的表达水平与辨证分型的相关性。方法将UC患者辨证分为湿热内蕴型组（25例）、脾胃虚弱型组（25例），用免疫组织化学技术（SP法），检测两组患者结肠黏膜腺上皮细胞Caspase．3、Bax的表达水平情况；并与正常对照组（25例）进行比较。结果Bax在湿热内蕴型[（4．56土1．58）分、脾胃虚弱型（3．28±1．14）分]的表达均升高，与正常对照组比较，差异均有统计学意义（p〈0．0．5）：两型的Caspase．3表达均升高，两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。此外，湿热内蕴型、脾胃虚弱型的Caspase．3、Bax的表达均呈正相关（r=0．23、r=0．21）。结论Bax、Caspase．3在UC中呈高表达，两者在细胞凋亡中具有调节作用，并与辨证分型有关。

重组人促红细胞生成素对眼挫伤后大鼠视网膜的保护机制

目的:探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erthropoietin,rhEPO)对挫伤视网膜Bcl-2和Bax的调节作用,明确重组rhEPO对挫伤视网膜的保护机制。方法:两月龄雄性大鼠45只,5只用于正常对照组,余下40只仿Allen重击法制作视网膜挫伤模型致左眼挫伤。将模型制备成功大鼠随机分为两组:模型组和rhEPO治疗组,每组各20只大鼠,每组又分12和24h;3和7d共四个时间点,每个时间点大鼠5只。rhEPO组大鼠iprhEPO,1次/d;模型组用同体积的生理盐水ip。各组各时段于给药给水停止后第2d取材,石蜡切片。应用免疫组织化学方法检测视网膜组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达变化。结果:正常对照组视网膜内均有适量Bcl-2和Bax蛋白表达;模型组Bcl-2蛋白表达随时间推移逐渐下降,至3d时表达最低。除12h外,其余各组Bcl-2蛋白表达均比正常对照组低。而Bax蛋白表达逐渐上升,至3d达峰值。除12h外,其余各组Bax蛋白表达均比正常对照组高;rhEPO组Bcl-2蛋白表达均比模型组高,而Bax蛋白表达均比模型组低。结论:Bcl-2和Bax参与了眼挫伤视网膜病变过程;rhEPO能够上调挫伤后大鼠视网膜细胞Bcl-2蛋白表达和下调Bax蛋白的表达,以抑制损伤视网膜细胞的凋亡。

表没食子儿茶素没食子酸酯对脊髓损伤大鼠氧自由基与炎症因子及凋亡因子的影响

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对脊髓损伤(SCI)大鼠急性期抗氧化、抗炎与抗凋亡作用。方法除假手术外,建立大鼠脊髓半切损伤模型。SCI大鼠给予药物治疗(阳性药组予甲泼尼龙100 mg/kg,EGCG低、中、高剂量组分别予EGCG 25、50、100 mg/kg,模型组予生理盐水10 mL/kg腹腔内注射),24 h后取受损脊髓局部组织,电子显微镜下观察脊髓组织超微结构,测定脊髓组织中活性氧簇水平、抗氧化酶系统活性、凋亡相关因子的蛋白水平以及血清中炎症因子的含量。结果电镜显示,EGCG各组脊髓形态好于模型组。且与模型组比较,EGCG组SCI大鼠脊髓组织中活性氧簇与一氧化氮(NO)水平降低(P<0.05),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白含量减少(P<0.01);抗氧化酶系统的活性得到提高(P<0.05);血清炎症因子与脊髓组织凋亡相关因子蛋白的表达减少(P<0.05)。结论 EGCG能减少SCI大鼠急性期氧自由基、炎症因子与凋亡相关因子的表达。