CD123在急性早幼粒细胞白血病微小残留病检测中的应用

为了探讨CD123联合应用其它免疫标志检测急性早幼粒细胞白血病(APL)中微小残留病(MRD)的作用及意义,采用四色流式细胞术(FCM)分析了186例初诊APL患者的免疫表型特点及20例正常骨髓中与APL细胞表型相同的细胞所占比例,并应用以CD34/CD117/CD123/HLA-DR为主的4色抗体组合对172份标本进行MRD检测并与实时定量PCR结果相比较。172份标本包括19例连续随访APL患者的116份骨髓或外周血标本和47例距初诊3个月至2年不等的非连续随访患者的56份骨髓标本,其中形态学完全缓解(CR)后117份,CR前55份标本。对18份标本同时加做抗体组合CD9/CD117/CD34/CD33检测。结果表明:初诊APL患者除高表达CD9、CD33、CD117和低表达CD34、HLA-DR外,CD123的阳性表达率为100%(30/30);正常骨髓中CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞和CD117+CD34-CD9+CD33+细胞在有核细胞中的比例分别为(0.066±0.012)%和(0.089±0·066)%,与APL患者相比相差4个对数级;随访期内,19例患者全部获得形态学CR,中位时间为4周(3-6周),13例FCM结果转阴的中位时间为7.5周(5-11周),11例PCR结果转阴的中位时间为8周(5-12周);形态学CR后随访的117份标本中41份FCM检测MRD呈阳性,8份标本CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例>5%,中位值为9.02%(5.26%-18.14%),33份标本CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例<5%,中位值为0·48%(0.02%-4.70%);CD117+CD34-细胞中CD123+HLA-DR-细胞的中位相对比例分别为86.77%(63.29%-92.62%)和63.59%(15.11%-98.36%);FCM与PCR同时检测MRD结果显示,FCM(+)标本中95.9%(93/97)PCR为阳性,FCM的假阳性率为4.1%(4/97),PCR的假阴性率为8.75%(7/93)。FCMMRD(-)标本中,92%(69/75)PCR阴性,8%(6/75)为PCR阳性。连续随访的116份标本和形态学CR后的117份标本显示,CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例与实时定量PCR检测的mRNA水平基本一致,两者均有一定的相关性(r=0.824,P<0.001和r=0.754,P<0.001)。结论:应用CD34/CD117/CD123/HLA-DR为主的2组4色抗体组合检测APL患者中的MRD简单可行,可与PCR检测相互补充。

儿童急性B淋巴细胞白血病微小残留病检测及其预后意义

目的建立检测急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)微小残留病(MRD)的流式细胞术,评估监测MRD对于判断B-ALL预后的价值。方法用四色荧光抗体组合流式细胞术对33例确诊并接受SCMC-ALL-2005方案治疗的B-ALL患儿进行MRD检测,并随访5年,分析监测结果、复发率、5年无事件生存率。结果建立了正常骨髓细胞分布的分析模板;流式细胞术检测结果表明,18例MRD阳性患儿的白血病复发率为55.6%(10/18)、15例MRD阴性患儿复发率为13.3%(2/15),差异有统计学意义(P<0.05)。其5年无事件生存率分别为44%和93%,差异有统计学意义(χ2=6.37,P<0.05)。结论监测MRD对于B-ALL患儿预后评估有重要意义,并为治疗方案的选择提供依据。

儿童急性淋巴细胞白血病微小残留病检测及其进展

治疗的强度应与白血病复发的风险相适应是当代医学对于儿童急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukaemia，ALL）治疗的基本观念。

急性髓系白血病微小残留病检测的临床意义

目的探讨微小残留病(MRD)检测在急性髓系白血病预测复发及指导治疗的临床意义。方法选择32例初治急性髓系白血病(除外M3)患者128份标本,利用多参数流式细胞术(FCM)进行微小残留病检测,CD45/SSC设门,选择2-4组四色抗体组合,从诱导化疗后第21天开始,每1-3个月监测一次。结果按照首次诱导治疗后第21天MRD水平将32例AML分为高(MRD>1×10-2)、中(1×10-2>MRD>1×10-4)、低(MRD<1×10-4)三组。高、中、低三组的2年复发率依次为83.3%、11.1%、0。其中MRD>1×10-2组2年复发率最高,MRD<1×10-4组预后好,两组的复发概率差异有统计学意义(P<0.05)。形态学与MRD动态监测两年结果显示,其中26例缓解,6例复发。6例形态学复发者均在MRD持续阳性4-6个月出现。形态学完全缓解时MRD阳性组与阴性组的复发率有显著性差异(P<0.05)。结论 MRD>1×10-2高度提示复发,MRD阳性比形态学复发出现早,连续监测MRD对个体化治疗和预测复发有重要意义。

儿童急性T淋巴细胞白血病微小残留病检测的临床意义

目的探讨急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患儿微小残留病(MRD)监测的临床指导价值。方法采用多参数流式细胞术对2006年1月1日-2008年12月31日在北京儿童医院治疗的60例T-ALL患儿在治疗不同时间点进行追踪监测,分析不同MRD水平患儿的临床特征及预后。结果诱导治疗第33 d MRD≥1×10-4组患儿易复发,P=0.03;诱导治疗第33 d MRD<1×10-4组患儿预计5年无事件生存率(EFS)为100%,而MRD≥1×10-4组患儿5年EFS为(62.5±7.1)%,两组之间差异有显著性(P=0.018)。结论监测T-ALL患儿MRD水平在评估早期治疗反应、监测复发以及估计预后中具有重要临床价值。

白血病微小残留病检测方法及临床意义

尽管目前白血病的完全缓解率有很大提高,但完全缓解(CR)后复发是目前白血病治疗面临的难题之一。患者体内微小残留病(MRD)与白血病复发密切相关,研究证明MRD的有无及其高低不仅反映了个体对治疗的反应情况,而且在白血病早期复发的预示中有显著作用;检测MRD还可以帮助医生在明确白血病细胞生物学的基础上决定治疗方案,从而改善临床疗效。本文就对MRD检测方法及其临床应用进行综述。

急性白血病微小残留病检测方法临床应用的研究进展

急性白血病(AL)患者治疗后微小残留病(MRD)水平直接决定AL复发和患者的生存期。近年来,越来越多的方法用于MRD的检测,如荧光原位杂交(FISH)、聚合酶链式反应(PCR)技术、流式细胞术(FCM)、质谱技术,其预测疾病复发、评估预后等临床价值得到广泛认可,可为AL的临床干预治疗提供依据。

儿童急性白血病微小残留病检测的临床意义

目的探讨微小残留病（MRD）在儿童急性白血病的临床意义。方法对1996年2月～2005年3月在我科正规治疗的30例急性白血病患儿采用外周血，利用单克隆抗体直接免疫荧光标记法和流式细胞仪多参数分析技术进行MRD的检测，并动态随访。结果在已停药的14例患儿中，7例MRD持续阴性或由阳转阴，7例由阴性转阳性，其中2例复发；在维持治疗的16例中，缓解后MRD持续阴性者6例，缓解时MRD阳性者8例（其中2例分别于缓解后3月、8月复发，4例经治疗后转阴），缓解时MRD可疑阳性2例（其中1例转阳性）。结论诱导治疗能杀死大量的白血病细胞，但尚未彻底清除MRD；缓解期一定时间内的病人MRD阳性不一定复发；维持治疗的后期或停药后MRD持续阳性，则有可能复发，MRD持续阴性的患儿预后较好。因此，连续监测MRD对指导临床治疗、早期预测直发有重要意义．

以IgH/TCR重排为靶分子的PCR急淋白血病微小残留病检测的现状和进展

以IgH/TCR重排为靶分子的PCR微小残留病(MRD)检测,对儿童急性淋巴细胞白血病的预后判断、预防复发具有重要意义。本文主要对这种方法的进展及其应注意的问题进行综述。

流式细胞术在急性淋巴细胞性白血病微小残留病检测中的应用

目的 用流式细胞术检测急性淋巴细胞性白血病 (ALL)患者的微小残留病 (MRD) ,为临床MRD的检测提供科学依据 ,并在此基础上 ,探讨MRD的临床意义。方法 3 3例初发白血病患者均接受 4～ 6周诱导化疗 ,获得完全缓解后 ,进行巩固化疗。在诱导化疗结束时 ,巩固化疗第 12、2 4、3 6周 ,应用流式细胞仪 (FCM)以ALL患者白血病细胞的特异分化抗原为标志监测MRD。结果 初诊时FCM检测 3 3例患者骨髓均有淋巴系分化抗原表达 ,在诱导化疗结束时 ,巩固化疗第 12、2 4、3 6周 ,FCM检测MRD检出率分别为 42 4%、3 1 3 %、13 8%、12 5 %。在按年龄 (以 18岁为界 )、性别、初发病时白细胞计数 (5 0×10 9/L为界 )、Ph染色体、My表达、CNSL等因素分别分组中 ,各个时间段MRD的检出率均无差别。MRD阳性及白细胞计数大于 5 0× 10 9/L(P <0 10 )为复发的高危因素。结论 ①白细胞分化抗原可作为免疫学标志用FCM方法检测ALL患者的MRD。②MRD与临床复发高度相关。③MRD可能为ALL患者一个独立的预后不良的因素。

荧光原位杂交技术在白血病微小残留病检测中的研究进展

监测白血病患者的微小残留病 (MRD)对于评价其治疗效果、预测复发和调整治疗方案具有重要意义。本文简要介绍了近年来荧光原位杂交 (FISH)在

儿童急性白血病微小残留病检测

目的研究微小残留病(MRD)的检测在儿童急性白血病中的临床意义。方法对已诊断并坚持治疗的40例急性白血病患儿采集骨髓标本,应用单克隆抗体直接免疫荧光标记法和三色流式细胞术(FCM)多参数分析技术的方法,进行MRD的检测并进行随访,随访期为1～5年。结果 40例急性白血病患儿中,已停药25例,维持治疗15例。停药的25例患儿中,诱导缓解结束时有18例MRD阴性,7例由阴性转阳性。15例维持治疗患儿中,缓解时至今MRD阴性者为8例,缓解时阳性者为7例。结论连续监测MRD对儿童急性白血病预测预后及指导个体化治疗有重要的意义。

急性白血病微小残留病检测及其意义

急性白血病微小残留病检测及其意义王小钦综述林果为审校由于化疗、骨髓移植等治疗学的发展，急性白血病（ＡＬ）的完全缓解（ＣＲ）率已有明显提高，生存时间也明显延长，但急性白血病的５年长期生存率仍只有１５％～３０％［１］。大部分患者常困复发而死亡，所以如何预...

急性淋巴细胞白血病微小残留病检测的方法、标本选择、临床意义研究进展

急性淋巴细胞白血病(ALL)患者缓解后复发与体内微小残留病(MRD)有关。ALL患者MRD检测的常用方法有多参数流式细胞仪(FCM)、PCR、二代测序(NGS):FCM测量速度快,可多参数测量; ALL患者MRD可出现抗原漂移导致FCM结果呈假阴性; PCR包括实时荧光定量RCR(q PCR)、逆转录PCR(RT-PCR)两种,检测MRD的灵敏度均较高,但结果易出现假阴性; NGS又称高通量测序、深度测序,检测MRD时灵敏度高于FCM、PCR法,但具有需要DNA总量高、生物学信息复杂、费用昂贵等问题。临床上检测MRD的首选标本为骨髓,但T-ALL患者的外周血可作为MRD检测标本。ALL患者检测MRD可对患者并进行危险分层,指导后续规范化治疗。ALL患者检测MRD可帮助患者判断预后。ALL患者检测MRD可作为CD20单克隆抗体—利妥昔单抗治疗ALL效果的判定标准。

基于分子条形码标记的超深度二代测序技术在儿童急性白血病微小残留病检测中的应用

目的建立分子条形码(UMI)标记的超深度二代测序(NGS)技术检测儿童急性白血病微小残留病(MRD)的方法,并分析该方法的灵敏度和特异度。方法采集35例急性白血病患儿初诊及诱导治疗后骨髓标本,初诊时采用NGS技术行全外显子组检测并寻找肿瘤基因突变作为MRD检测标记,诱导治疗后采用UMI标记的超深度NGS技术检测肿瘤基因突变率作为NGS-MRD指标。流式细胞术(FCM)及RT-PCR技术分别寻找MRD检测标记,诱导治疗后采用FCM及PCR技术检测患儿MRD水平并进行对比验证。结果 NGS技术筛选检测标记的阳性率高于FCM及RT-PCR技术(P<0.05),NGS技术检测MRD的灵敏度也高于FCM及RT-PCR技术(P<0.05)。FCM及NGS技术检测MRD的平均值无显著差异(P>0.05)。结论UMI标记的超深度NGS技术可能成为儿童急性白血病MRD检测的新方法。

儿童急性白血病微小残留病检测的临床意义

目的探讨微小残留病(MRD)的检测在儿童急性白血病中的临床意义.方法对1996年2月～2005年3月在本科治疗的30例急性白血病患儿采集外周血,利用单克隆抗体直接免疫荧光标记法和流式细胞仪多参数分析技术进行微小残留病的检测,并动态随访.结果在已停药的14例患儿中,7例MRD持续阴性或由阳转阴,7例由阴转阳性(其中2例复发);在维持治疗的16例患儿中,缓解至今MRD阴性者6例,缓解时MRD阳性者8例(其中2例分别于缓解后3月、8月复发,4例经治疗后转阴),缓解时MRD可疑阳性2例(其中1例转阳性).结论诱导治疗能杀死大量的白血病细胞,但尚未彻底清除MRD缓解期的一定时间内患者MRD阳性不一定复发;MRD持续阴性的患儿预后较好,维持治疗的后期或停药后MRD持续阳性,则有可能复发.因此,连续监测MRD对指导临床治疗、早期预示复发有重要意义.

荧光原位杂交技术在白血病微小残留病检测中的应用

荧光原位杂交是利用非放射性物质标记核酸探针,通过免疫荧光在间期核和染色体上检测特异DNA序列的一种分子遗传学技术,具有快速、安全、准确和灵敏等优点,它为肿瘤微小残留病(MRD)的检测提供了一种新颖可靠的手段。