白血病抑制因子受体在宫颈癌侵袭转移中的作用及机制研究

探讨白血病抑制因子受体(LIFR)与宫颈癌侵袭转移的关系,进一步分析宫颈癌侵袭转移的机制。方法 纳入2021年1月至2021年12月期间我院收治的45例宫颈癌肺转移的患者作为研究对象,取宫颈癌组织、癌旁组织及肺转移病灶组织作为标本,分别检测三组标本的LIFR mRNA的表达水平。使用慢病毒质粒(包含LIFR),并运用空载体质粒vector转染人宫颈癌SiHa细胞,将得到LIFR过表达的宫颈癌视作研究组,对照细胞则视作对照组。运用蛋白免疫印迹(WB)法,以开展检测,分析Hippo-YAP信号通路相关蛋白的表达情况。再选取40只健康SD裸鼠进行研究,按随机数字表法实施分组,使裸鼠成为两组,每个小组有20只。通过经尾静脉注射法注射细胞,使其分别进入到不同组的裸鼠体内。4周后处死裸鼠,获取肺组织,并实施苏木精-伊红(HE)染色,观察肺组织的情况,调查肺细胞的转移病灶数。结果 LIFR mRNA表达水平对比,肺转移病灶组织<宫颈癌<癌旁组织,P<0.05。研究组LIFR、P-YAP以及P-TAZ蛋白表达水平明显高于对照组,YAP和TAZ表达水平低于对照组,P<0.05。研究组裸鼠肺转移灶平均个数为(9.4±1.2)个,对照组裸鼠肺转移灶平均个数为(23.3±5.4)个。研究组明显少于对照组,P<0.05。结论 LIFR表达水平降低,Hippo-YAP信号通路相关蛋白磷酸化水平降低,可能是促进宫颈癌肺转移的机制。

白血病抑制因子受体中gp130细胞内区诱导白血病细胞Meg-01内c-myc的表达

目的 :观察人白血病细胞系 Meg- 0 1白血病抑制因子 (L IF)受体α亚基 (gp190 )和另一亚基 gp130细胞内区与 c- m yc的关系 ,以探明白血病细胞过度增殖和晚期分化异常的机制。 方法 :用基因重组技术将两基因细胞内区互换以构成两嵌合体受体 (190 /130 ,130 /190 ) ,并分别在 Meg- 0 1表达 ,其与野生型受体竞争性结合 L IF,用免疫组化和蛋白质印迹法分析受体细胞内区形成同源性二聚体 (190 cyt- 190 cyt,130 cyt- 130 cyt)后的细胞状况和细胞内 c- m yc的表达。结果 :转染 p ED 190 /130后用 L IF作用 6 h,Meg- 0 1细胞 c- myc表达量增加 ,细胞增殖明显 ;而另一嵌合体受体对 Meg- 0 1细胞 c- myc的表达无影响。 结论 :L IF受体中 gp130亚基的细胞内区参与白血病 Meg- 0 1细胞内增殖信号的传递。

白血病抑制因子及其受体在早孕蜕膜和绒毛组织中表达的研究

目的 探讨正常早孕蜕膜和绒毛组织白血病抑制因子 (LIF)及其受体 (LIFR)的表达。 方法 采用原位杂交和免疫组织化学染色技术对 18例正常早孕妇女蜕膜和绒毛组织LIF -mRNA、LIF和LIFR蛋白的表达进行研究。 结果 全部早孕蜕膜组织和绒毛滋养细胞中有LIF -mRNA、LIF和LIFR蛋白表达 ,同一组织和细胞LIF和LIFR基因表达强弱基本一致 ,LIFR在绒毛滋养细胞的表达强于蜕膜。 结论 人类蜕膜和绒毛滋养细胞LIF和LIFR基因表达可能与胚泡着床、维持胎盘功能和促进胚胎发育有关。

白血病抑制因子及其受体与妊娠

白血病抑制因子 ( LIF)是一种多生物学活性的细胞因子。近年来的研究表明 ,LIF存在于子宫内膜、妊娠期蜕膜及胎盘上。它通过与其受体 ( LIFR)结合 ,从而调节胚胎的着床及妊娠的维持。LIF不仅与其他细胞因子之间相互调节 ,且它还受到激素内分泌的严格调控。进一步研究还发现 ,原因不明不孕症妇女子宫内膜 LIF的表达较正常妇女减弱甚至缺失 ,这提示 LIF的异常表达可能是原因不明不孕症患者着床失败的原因之一 。

白血病抑制因子及其受体在月经周期猕猴输卵管内的表达

应用免疫细胞化学方法对白血病抑制因子(LIF)、白血病抑制因子受体(LIFR)和gp130在月经周期猕猴输卵管内的表达进行了研究。结果表明,LIF、LIFR和gp130主要在输卵管上皮细胞内表达,而在固有层、肌层及浆膜内的表达量较少。LIF、LIFR和gp130在猕猴输卵管内的表达量随月经周期的不同而变化,在增殖中期到分泌中期的输卵管内表达量较高,而在增殖早期及分泌晚期输卵管内表达量较低。LIF及其受体在猕猴输卵管内的表达可能由卵巢分泌的类固醇激素所调控,LIF可能在猕猴排卵及早期胚胎发育过程中起重要的调节作用。

游离的白血病抑制因子受体α亚基胞内功能片段对HL-60细胞的生长调节

目的探讨白血病抑制因子(LIF)受体α亚基胞内区在细胞内游离存在时,对HL-60细胞增殖分化的调节及相关信号转导机制。方法鉴定已构建的重组质粒pCDNA3.0-190CT2+3和PCDNA3.0-190CT3;用脂质体将质粒转染HL-60细胞,细胞培养基中加入G-418来筛选阳性克隆。用免疫细胞化学和免疫印迹法检测转染组细胞中目的蛋白的表达。绘制细胞生长曲线。免疫印迹法检测各组细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达和信号分子STAT3的磷酸化水平。结果免疫印迹法检测及目的蛋白条带,获得稳定表达目的蛋白的细胞株。与野生组细胞相比,190CT2+3和190CT3组的细胞体积增大,分叶核细胞占总细胞数的比例增加,细胞增殖减慢,PCNA的表达减少,STAT3的磷酸化水平升高。结论LIF受体α亚基胞内区游离片段促进了HL-60细胞的分化,抑制了增殖,激活了信号分子STAT3。

TAT介导的白血病抑制因子受体α亚基胞内区远膜端融合蛋白的制备及其对HL-60细胞生长的抑制作用

目的：克隆表达HIV-1反式激活蛋白TAT与白血病抑制因子（LIF）受体α亚基胞内区C末端序列（LIFRα-CT3）的融合蛋白（TAT-CT3）,并检测其对HL-60细胞增殖的抑制作用.方法：重组构建TAT-CT3和SUMO融合表达质粒,转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导SUMO-TAT-CT3融合蛋白表达.表达产物经亲和层析柱纯化、去除SUMO蛋白标签后获得TAT-CT3融合蛋白,免疫印迹鉴定.采用CCK-8法检测HL-60细胞的抑制率.结果：构建了高表达重组子pET28a-SUMO-TAT-CT3,获得了相对分子质量约为26 kD的TAT-CT3融合蛋白.经活性检测,TAT-CT3融合蛋白能有效抑制HL-60细胞的生长.结论：成功地克隆、表达、纯化TAT-CT3融合蛋白,该融合蛋白具有生物活性,可抑制HL-60细胞的增殖.

血清雌孕激素及输卵管组织白血病抑制因子及其受体表达与输卵管妊娠的关系

目的探讨白血病抑制因子(LIF)及其受体(LIFR)和血清雌孕激素[雌二醇(E2)、孕酮(P)]与输卵管异位妊娠的关系。方法采用免疫组化技术检测11例非孕组、12例宫内妊娠组和36例输卵管异位妊娠组输卵管组织中LIF和LIFR的表达水平,半定量分析其在各组间的表达差异。电化学发光法检测32例正常宫内孕组、40例异位妊娠组血清E2和P。结果 LIF在非孕组、宫内妊娠组和异位妊娠组间的表达无明显差别;在输卵管腺上皮中,异位妊娠组LIFR的表达高于其他两组(P<0.05),而非孕组和宫内妊娠组上皮间表达无明显差异(P>0.05);但是在间质中,LIFR的表达在输卵管妊娠组明显低于其他两组(P<0.01),而非孕组和宫内妊娠组上皮间其表达无明显差异(P>0.05)。异位妊娠组血清E2、P水平明显均低于正常宫内妊娠组(P<0.05,P<0.01)。相关性分析显示输卵管妊娠时输卵管腺上皮LIFR和患者血清E2正相关,间质LIFR和E2负相关。结论 LIFR的异常表达可能与输卵管异位妊娠的发生密切相关。输卵管异位妊娠组血清E2、P均明显低于正常宫内妊娠组。E2能上调输卵管腺上皮的LIFR表达,下调输卵管间质LIFR的表达。

重组人白血病抑制因子受体α亚基细胞外区的分子克隆

目的：纯化可溶性白血病抑制因子（ＬＩＦ）受体，获得特异性免疫原并利用衰变加速因子（ＤＡＦ）的附膜特性探讨ＬＩＦ受体的生物特性和功能。方法：采用基因重组技术，将ＬＩＦ受体α亚基（ｇｐ１９０）细胞外区（ｇｐ１９０ｓｏｌ）的Ｃ端与ＤＡＦＣ端３７个氨基酸连接，再将该重组基因载入ｐＧＥＸ５Ｔ表达系统。结果：在Ｅ．ｃｏｌｉＸＬ１中可高度表达一种Ｎ端为谷胱甘肽Ｓ转移酶和Ｃ端为１９０ｓｏｌＤＡＦ的融合重组蛋白。此蛋白在ＸＬ１中表达产物为不溶性包涵体，以变性剂８ｍｏｌ／Ｌ尿素溶解并复性后，可与交联在亲和层析柱上的谷胱甘肽（Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ）结合，从而一次性分离ＬＩＦ受体α亚基细胞外区。结论：大分子糖蛋白也能采用ｐＧＥＸ５Ｔ系统在大肠杆菌中表达，并通过谷胱甘肽亲和法纯化而作为免疫原。

白血病抑制因子受体在宫颈癌肺转移过程中的作用及其机制

目的探讨白血病抑制因子受体(LIFR)在宫颈癌肺转移中的作用以及Hippo-YAP信号通路在其中的作用。方法 (1)采用实时荧光定量PCR法检测50例宫颈癌肺转移患者原发灶癌组织、癌旁组织及转移灶癌组织LIFR mRNA表达。(2)用包含LIFR的重组慢病毒质粒及其阴性对照空载体质粒vector转染人宫颈癌Si Ha细胞,2.0μg/mL嘌呤霉素筛选,得到稳定过表达LIFR的宫颈癌细胞(观察组)和对照细胞(对照组)。采用Western blotting法检测两组LIFR及Hippo-YAP信号通路相关蛋白YAP、P-YAP、TAZ、p-TAZ。将两组细胞经尾静脉注射到BALB/c裸鼠体内,4周后处死裸鼠,取出肺组织,HE染色,镜下计数肺组织中所有转移灶个数。结果 (1)LIFR mRNA相对表达量:原发灶癌组织高于癌旁组织,转移灶癌组织低于原发灶癌组织和癌旁组织(P均<0.05)。(2)观察组过表达LIFR的Si Ha细胞LIFR、p-YAP、p-TAZ蛋白相对表达量高于对照组(P均<0.05),YAP、TAZ蛋白表达量与对照组比较P均>0.05。注射过表达LIFR的Si Ha细胞及对照细胞的裸鼠肺转移灶个数分别为(9±2)、(60±5)个,P<0.05。结论过表达LIFR可促进Hippo-YAP信号通路蛋白YAP、TAZ磷酸化,进而抑制宫颈癌肺转移灶的形成。

白血病抑制因子受体gp190细胞内区与HL-60细胞内Cdc25B激活的关系

目的 :观察白血病抑制因子 (L IF)受体 gp190亚基完整的细胞内区和 gp190胞内区 C末端片段在人白血病细胞系HL - 6 0中与细胞周期调控因子 Cdc2 5 B表达和激活的关系 ,进一步了解 L IF引发白血病细胞增殖抑制和分化的机制。 方法 :用基因重组技术将 gp130的细胞内区换成 gp190的细胞内区 ,用 PCR技术扩增合成 gp190细胞内区 C末端的一个多肽 ,构成嵌合体受体基因 130 /190及 190 CT片段 ,并分别在 HL - 6 0细胞表达。用免疫组化和 Western印迹方法 ,分析在 L IF的诱导下 ,细胞生长和形态与 Cdc2 5 B表达的关系。 结果 :转染 pc DNA 3.0 130 /190的 HL - 6 0细胞 Cdc2 5 B的表达量降低 ,细胞数量减少 ,细胞体积增大 ;转染 pc DNA3.0 190末端的 HL - 6 0细胞 Cdc2 5 B的表达量增高 ,细胞表现为增殖 ,细胞体积普遍减小。 结论 :Cdc2 5 B表达量降低与 L IF诱导引发的白血病细胞 HL - 6 0增殖抑制有关 ,上述效应是由 gp190亚基细胞内区介导的 ,而gp190 C末端片段可干扰 L

白血病抑制因子受体与白血病细胞HL-60内有丝分裂原活化蛋白激酶的关系

目的 :探讨人白血病细胞系 HL - 6 0白血病抑制因子 (L IF)受体α亚基 (gp190 )和另一亚基 (gp130 )的细胞内区与有丝分裂原活化蛋白激酶 (MAPK)的关系 ,了解 L IF受体在调节白血病细胞增殖和分化中的意义。方法 :用基因重组技术将两基因细胞内区互换以构成两嵌合体受体 (190 / 130 ,130 / 190 )并分别在 HL - 6 0表达 ,其与野生型受体竞争性结合 L IF,用免疫组化和蛋白质印迹法分析受体细胞内区形成同源性二聚体 (190 cyt- 190 cyt,130 cyt- 130 cyt)后的 HL - 6 0细胞内 MAPK p42 /p44的 Thr2 0 2 / Tyr2 0 4磷酸化状况。 结果 :转染 p ED190 / 130后用 L IF作用 10 m in后 ,HL - 6 0细胞 MAPK p42 / p44的Thr2 0 2 / Tyr2 0 4磷酸化增加 ,细胞增殖明显 ;而另一嵌合体受体与α亚基形成 190 cyt- 190 cyt时 HL - 6 0细胞 MAPK的磷酸化降低。结论 :L IFR中 gp130亚基的细胞内区参与了 MAPK的激活及白血病细胞 HL - 6 0增殖信号的传递。

白血病抑制因子受体细胞内区对HL-60细胞表达CD14和CD15的影响

观察白血病抑制因子 (LIF)受体gp190亚基完整的细胞内区和gp190胞内区C末端片段(190CT)对人白血病系HL 6 0表达CD14、CD15的影响 ,进一步了解LIF引发白血病细胞增殖抑制和分化的关系 .用基因重组技术将LIF另一亚基gp130的细胞内区换成gp190的细胞内区 ,用PCR技术扩增gp190细胞内区C末端的一个多肽的编码序列 ,构成嵌合体受体基因 130 /190及 190CT片段 ,并分别在HL 6 0细胞表达 .用免疫组化和流式细胞术检测分析在LIF的诱导下 ,HL 6 0细胞表达CD14、CD15的水平 .转染pcDNA130 /190的HL 6 0细胞 ,CD15表达量明显增高 ;转染pcDNA190CT的细胞 ,CD15的表达量降低 ;但 2组细胞的CD14表达量均较低且水平接近 .LIF可能诱导HL 6 0细胞向粒细胞而不向单核细胞分化 ,该效应是由gp190亚基细胞内区介导的 ,而gp190C末端片段可干扰LIFα受体介导的信号传导效应 .

白血病抑制因子及其受体与子宫内膜的关系

白血病抑制因子(LIF)是一种多生物活性的细胞因子,研究表明,LIF在人及动物的子宫内膜的腺上皮细胞、妊娠期蜕膜及胎盘上均有表达;胚泡是动物生殖过程中的关键,一些细胞因子起重要作用,它们能够充当子宫内膜微环境的"局部调节者",LIF对哺乳动物胚胎发育到胚泡阶段具有一定的作用,LIF在子宫内膜中特异性表达,促进胚胎生长发育和启动胚泡植入;LIF在生殖周期中影响子宫的功能及调节子宫内膜生长,这可能与LIF作用于子宫使其能发生蜕膜反应有关;LIF通过与LIF受体及gp130蛋白作用而发挥重要的生物学功能。LIF在哺乳动物早期妊娠中的作用机制具有重要意义。文章对LIF及其受体与子宫内膜的关系做了综述。

HIV-1反式激活蛋白介导的白血病抑制因子受体α亚基胞内区远膜端融合蛋白在HL-60细胞分化中对microRNA-155的影响

目的：探讨HIV-1反式激活蛋白（TAT）与白血病抑制因子（LIF）受体α亚基胞内区C末端序列（LIFRα-CT3）的融合蛋白（TAT-CT3）,对HL-60细胞分化的影响.方法：将HL-60细胞分为对照组和TAT-CT3组.流式细胞仪对HL-60细胞进行粒细胞表面分化标记物CD14、CD11b的检测;Real-time PCR检测HL-60细胞中BIC、miR-155及其下游靶基因C/EBP β和SOCS-1 mRNA的表达;免疫印迹检测HL-60细胞中C/EBP β、SOCS-1及pSTAT3蛋白的表达.结果：与对照组相比,TAT-CT3组的HL-60细胞,其粒细胞表面分化标记物CD14、CD11b阳性表达率增加;BIC、microRNA-155（miR-155）表达量降低,C/EBP β和SOCS-1 mRNA及蛋白表达量均增加,pSTAT3蛋白表达量降低.结论：TAT-CT3融合蛋白通过抑制miR-155的表达,促进HL-60细胞向成熟粒细胞方向分化.

白血病抑制因子受体与白血病细胞U937内促分裂原活化蛋白激酶的关系

探讨人白血病细胞系U937白血病抑制因子 (LIF)受体α亚基和另一亚基gp130细胞内区与促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK)的关系 ,旨在研究白血病细胞增殖和分化的机制。用基因重组技术将两基因细胞内区互换以构成两嵌合体受体 (190 130 ,130 190 )并分别在U937表达 ,其与野生受体竞争性结合白血病抑制因子 ,用免疫组化和免疫印迹法分析受体细胞内区形成同源性二聚体(190cyt 190cyt,130cyt 130cyt)后的细胞状况和细胞内MAPK的水平。结果表明 ,转染pE190 130后用LIF作用 6h ,U937细胞MAPK表达量增加 ,MAPK形成的二聚体较明显 ,细胞增殖较快 ;而另一嵌合体受体与α亚基形成 190cyt 190cyt时U937细胞MAPK的表达无变化 ,二聚体不明显。说明LIF受体中gp130亚基的细胞内区参与了MAPK的激活及白血病U937细胞增殖信号的传递。

白血病抑制因子及其受体与哺乳动物的胚胎发育和着床

在哺乳动物胚胎发育过程中，细胞与细胞间的相互作用是调节细胞分化、形态发生和生长发育的主要机制，这些相互作用通常是由神经内分泌激素和一些多肽类生长因子及其受体等所介导的。白血病抑制因子（Leukemiainhibitoryfactor，LIF）是一种多功能的细胞因子，因它能抑制?..

核受体辅助抑制因子在急性非淋巴细胞白血病细胞株中的表达

目的:明确核受体辅助抑制因子(N-CoR)在急性非淋巴细胞白血病细胞株及细胞分化过程中表达的变化,探讨其在急性白血病中的意义。方法:RT-PCR半定量检测16种急性非淋巴细胞白血病细胞株中N-CoR的基因表达及急性早幼粒细胞白血病细胞株在维A酸作用过程中的变化。结果:N-CoR在所有细胞株中都有表达,在急性早幼粒细胞白血病细胞株中随着细胞的分化表达增加。结论:N-CoR对维持白血病细胞的增殖起重要作用,其表达量的变化和细胞的分化状态相关。

白血病抑制因子及其受体在早孕蜕膜和绒毛组织中表达的研究

目的：探讨正常早孕蜕膜和绒毛组织白血病抑制因子(LIF)及其受体(LIFR)的表达。方法：采用原位杂交和免疫组织化学染色技术对18例正常早孕妇女蜕膜和绒毛组织LIF-mRNA、LIF和LIFR蛋白的表达进行研究。结果：全部早孕蜕膜组织和绒毛滋养细胞中有LIF-mRNA、LIF和LIFR蛋白表达，同一组织和细胞LIF和LIFR基因表达强弱基本一致，LIFR在绒毛滋养细胞的表达强于蜕膜。结论：人类蜕膜和绒毛滋养细胞LIF和LIFR基因表达可能与胚泡着床、维持胎盘功能和促进胚胎发育有关。