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转染抗VEGF发夹状核酶基因白血病细胞模型的建立
1
作者
许文林
沈慧玲
+1 位作者
吴朝阳
费霞
《白血病.淋巴瘤》
CAS
2006年第5期338-340,343,共4页
目的建立转染抗血管内皮生长因子(VEGF)发夹状核酶基因的白血病细胞模型,探讨发夹状核酶对白血病细胞系K562VEGF基因表达的效应。方法采用脂质体介导的方法将抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体(pcDNA3-RZ)转染入人白血病细胞系K562,G41...
目的建立转染抗血管内皮生长因子(VEGF)发夹状核酶基因的白血病细胞模型,探讨发夹状核酶对白血病细胞系K562VEGF基因表达的效应。方法采用脂质体介导的方法将抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体(pcDNA3-RZ)转染入人白血病细胞系K562,G418抗性筛选获得阳性克隆,转染VEGFpcDNA3-RZ和空载体(pcDNA3)的细胞组均有抗性细胞生长,分别命名为K562-RZ和K562-PC;抽提基因组DNA,用PCR方法验证核酶基因已转染入K562细胞,荧光定量PCR和westernblot方法分别检测白血病细胞VEGFmRNA和蛋白的表达量;同时测定K562-RZ,K562-PC和K562三组培养上清刺激内皮细胞生长的情况。结果抗VEGFpcDNA3-RZ成功转入白血病细胞系K562,G418筛选2周获得阳性克隆,PCR检测证实核酶基因整合入白血病细胞基因组DNA;与K562及K562-PC细胞相比,转染VEGF核酶基因的K562-RZ细胞VEGFmRNA和蛋白的表达量明显降低;K562-RZ组培养上清对内皮细胞的刺激作用明显弱于K562-PC组。结论建立了转染VEGF发夹状核酶基因的白血病细胞模型,抗VEGF发夹状核酶基因可明显下调白血病细胞VEGF的表达,为抗肿瘤治疗提供了新的线索。
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关键词
抗VEGF发夹状核酶基因
白血病细胞模型
原文传递
建立人急性粒细胞白血病M_2裸鼠模型
被引量:
1
2
作者
刘媛
董瑞红
+7 位作者
李玉华
汪涯雅
毋静
黄睿
邓兰
宋朝阳
陆志刚
胡海燕
《中国组织工程研究与临床康复》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期95-98,共4页
背景:人实体瘤细胞容易在小鼠体内成瘤,但人荷瘤白血病模型很难构建。通过放射线或环磷酰胺抑制裸鼠免疫系统预处理,可构建低成本、高稳定性的裸鼠模型。目的:探讨融合基因AML/ETO阳性的人急性粒细胞白血病M2白血病细胞Kasumi-1在BALB/...
背景:人实体瘤细胞容易在小鼠体内成瘤,但人荷瘤白血病模型很难构建。通过放射线或环磷酰胺抑制裸鼠免疫系统预处理,可构建低成本、高稳定性的裸鼠模型。目的:探讨融合基因AML/ETO阳性的人急性粒细胞白血病M2白血病细胞Kasumi-1在BALB/c裸鼠体内建立白血病模型的方法。方法:将BALB/c裸鼠以抽签法随机分3组:环磷酰胺组腹腔注射环磷酰胺连续2d后,尾静脉注射Kasumi-1细胞8×105只;照射组给予X射线全身照射,照射当天尾静脉注射Kasumi-1细胞;无预处理组未作任何处理,尾静脉注射Kasumi-1白血病细胞。另取3只正常BALB/c裸鼠作为正常对照。检测外周血涂片、骨髓涂片,流式细胞仪检测骨髓细胞免疫分型,RT-PCR检测白血病细胞瘤负荷,FISH检测骨髓细胞AML/ETO融合基因阳性细胞百分比。结果与结论:未经任何预处理裸鼠建模14d血涂片中白血病细胞达3.5%,骨髓中肿瘤细胞百分比可达40%以上,与FISH和流式细胞仪检测白血病细胞比例一致,且随着接种时间延长,瘤负荷不断增加。全身照射和环磷酰胺注射后的裸鼠瘤负荷高于无预处理组,但仍可带瘤生存60d。正常裸鼠外周血单个核细胞RT-PCR未发现有融和基因AML/ETO,其他3组均可见融和基因AML/ETO的mRNA表达。提示给予环磷酰胺组和X线照射预处理或单纯尾静脉接种Kasimi-1细胞均可建立急性粒细胞白血病M2裸鼠模型。
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关键词
急性粒
细胞
白血病
模型
AML/ETO融合基因
裸鼠
环磷酰胺
放射线
下载PDF
职称材料
ADAR1同工型基因在小鼠急性T淋巴细胞白血病模型中的表达
被引量:
3
3
作者
马翠花
田晨
+5 位作者
种靖慧
师迎旭
王金宏
林永敏
许静
郑国光
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2011年第3期566-569,共4页
本研究探讨RNA编辑酶ADAR1的2种同工型P110和P150在小鼠白血病发展中的表达变化规律。采用Notch1过表达小鼠急性T淋巴细胞白血病移植模型,在发病不同阶段分离骨髓单个核细胞,并在发病晚期用流式细胞术分选CD45.2+GFP+白血病细胞,用实时...
本研究探讨RNA编辑酶ADAR1的2种同工型P110和P150在小鼠白血病发展中的表达变化规律。采用Notch1过表达小鼠急性T淋巴细胞白血病移植模型,在发病不同阶段分离骨髓单个核细胞,并在发病晚期用流式细胞术分选CD45.2+GFP+白血病细胞,用实时定量PCR方法检测ADAR1的表达变化。结果表明:对照组和白血病组小鼠骨髓细胞均表达ADAR1的2种同工型P110和P150mRNA;Notch1过表达导致的小鼠白血病发展过程中2种同工型的表达水平变化不同;随着白血病的发展,P110的表达水平逐渐升高,而P150表达水平逐渐降低,在移植后的第14天降至对照组的1/4。分选后的CD45.2+GFP+白血病细胞高表达P110而低表达P150。结论 :ADAR1的亚型P110和P150mRNA在小鼠白血病中的表达变化规律存在差异,提示二者介导的RNA编辑可能在白血病发展中发挥不同作用。
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关键词
RNA编辑
ADAR1
P110P150
急性T淋巴
细胞
白血病
:
白血病
模型
下载PDF
职称材料
卡介苗抑制裸鼠白血病移植瘤生长及抗肿瘤的实验研究
被引量:
4
4
作者
王媛媛
王玲珍
孙立荣
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2011年第3期725-729,共5页
本研究通过建立人白血病突变株细胞异种移植模型探讨卡介苗(bacillus calmette-guerin vaccine,BCG)的抗白血病作用。对8-10周龄的BALB/c裸鼠皮下接种1×107/ml人急性髓系白0细胞,于4-6天可形成皮下浸润的白血病裸鼠模型,随后将其分...
本研究通过建立人白血病突变株细胞异种移植模型探讨卡介苗(bacillus calmette-guerin vaccine,BCG)的抗白血病作用。对8-10周龄的BALB/c裸鼠皮下接种1×107/ml人急性髓系白0细胞,于4-6天可形成皮下浸润的白血病裸鼠模型,随后将其分为2组:对照组和实验组。对照组于肿瘤内接种生理盐水,实验组又分为T1组(BCG组)、T2组(灭活的BCG组)。观察各组裸鼠带瘤生存情况,以及通过对肿瘤组织及多个脏器组织行石蜡切片HE染色,在光学显微镜下观察肿瘤内的形态变化。结果表明,HL-60细胞植入裸鼠皮下后各组裸鼠体表接种部位形成淡绿色的肿块,同时有局部转移及肝脏脾脏转移。在BCG组、灭活的BCG组均出现不同程度的肿瘤组织坏死现象。结论 :用白血病HL-60细胞建立了白血病移植裸鼠模型,有全身肿瘤转移的现象,在接种BCG后均未出现明显的结核感染情况。BCG自身对肿瘤组织有明显的破坏作用。
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关键词
白血病
HL-60
细胞
白血病细胞模型
卡介苗
下载PDF
职称材料
题名
转染抗VEGF发夹状核酶基因白血病细胞模型的建立
1
作者
许文林
沈慧玲
吴朝阳
费霞
机构
江苏大学附属人民医院血液科
出处
《白血病.淋巴瘤》
CAS
2006年第5期338-340,343,共4页
文摘
目的建立转染抗血管内皮生长因子(VEGF)发夹状核酶基因的白血病细胞模型,探讨发夹状核酶对白血病细胞系K562VEGF基因表达的效应。方法采用脂质体介导的方法将抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体(pcDNA3-RZ)转染入人白血病细胞系K562,G418抗性筛选获得阳性克隆,转染VEGFpcDNA3-RZ和空载体(pcDNA3)的细胞组均有抗性细胞生长,分别命名为K562-RZ和K562-PC;抽提基因组DNA,用PCR方法验证核酶基因已转染入K562细胞,荧光定量PCR和westernblot方法分别检测白血病细胞VEGFmRNA和蛋白的表达量;同时测定K562-RZ,K562-PC和K562三组培养上清刺激内皮细胞生长的情况。结果抗VEGFpcDNA3-RZ成功转入白血病细胞系K562,G418筛选2周获得阳性克隆,PCR检测证实核酶基因整合入白血病细胞基因组DNA;与K562及K562-PC细胞相比,转染VEGF核酶基因的K562-RZ细胞VEGFmRNA和蛋白的表达量明显降低;K562-RZ组培养上清对内皮细胞的刺激作用明显弱于K562-PC组。结论建立了转染VEGF发夹状核酶基因的白血病细胞模型,抗VEGF发夹状核酶基因可明显下调白血病细胞VEGF的表达,为抗肿瘤治疗提供了新的线索。
关键词
抗VEGF发夹状核酶基因
白血病细胞模型
Keywords
Leukemia cell mode
Anti-VEGF hairpin ribozyme gene
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
建立人急性粒细胞白血病M_2裸鼠模型
被引量:
1
2
作者
刘媛
董瑞红
李玉华
汪涯雅
毋静
黄睿
邓兰
宋朝阳
陆志刚
胡海燕
机构
南方医科大学珠江医院血液科
出处
《中国组织工程研究与临床康复》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期95-98,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30800486)
广东省科技计划(2007B030703003)
广东省卫生厅科研基金资助项目(WSTJJ20061116510106197611042927)~~
文摘
背景:人实体瘤细胞容易在小鼠体内成瘤,但人荷瘤白血病模型很难构建。通过放射线或环磷酰胺抑制裸鼠免疫系统预处理,可构建低成本、高稳定性的裸鼠模型。目的:探讨融合基因AML/ETO阳性的人急性粒细胞白血病M2白血病细胞Kasumi-1在BALB/c裸鼠体内建立白血病模型的方法。方法:将BALB/c裸鼠以抽签法随机分3组:环磷酰胺组腹腔注射环磷酰胺连续2d后,尾静脉注射Kasumi-1细胞8×105只;照射组给予X射线全身照射,照射当天尾静脉注射Kasumi-1细胞;无预处理组未作任何处理,尾静脉注射Kasumi-1白血病细胞。另取3只正常BALB/c裸鼠作为正常对照。检测外周血涂片、骨髓涂片,流式细胞仪检测骨髓细胞免疫分型,RT-PCR检测白血病细胞瘤负荷,FISH检测骨髓细胞AML/ETO融合基因阳性细胞百分比。结果与结论:未经任何预处理裸鼠建模14d血涂片中白血病细胞达3.5%,骨髓中肿瘤细胞百分比可达40%以上,与FISH和流式细胞仪检测白血病细胞比例一致,且随着接种时间延长,瘤负荷不断增加。全身照射和环磷酰胺注射后的裸鼠瘤负荷高于无预处理组,但仍可带瘤生存60d。正常裸鼠外周血单个核细胞RT-PCR未发现有融和基因AML/ETO,其他3组均可见融和基因AML/ETO的mRNA表达。提示给予环磷酰胺组和X线照射预处理或单纯尾静脉接种Kasimi-1细胞均可建立急性粒细胞白血病M2裸鼠模型。
关键词
急性粒
细胞
白血病
模型
AML/ETO融合基因
裸鼠
环磷酰胺
放射线
分类号
R394.2 [医药卫生—医学遗传学]
下载PDF
职称材料
题名
ADAR1同工型基因在小鼠急性T淋巴细胞白血病模型中的表达
被引量:
3
3
作者
马翠花
田晨
种靖慧
师迎旭
王金宏
林永敏
许静
郑国光
机构
中国医学科学院、北京协和医学院
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2011年第3期566-569,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号30971111)
天津市自然科学基金资助项目(编号11JCZDJC18200)
+1 种基金
国家973项目(编号2009CB521803,2009CB918901)
教育部新世纪优秀人才计划(编号NCET-08-0329)
文摘
本研究探讨RNA编辑酶ADAR1的2种同工型P110和P150在小鼠白血病发展中的表达变化规律。采用Notch1过表达小鼠急性T淋巴细胞白血病移植模型,在发病不同阶段分离骨髓单个核细胞,并在发病晚期用流式细胞术分选CD45.2+GFP+白血病细胞,用实时定量PCR方法检测ADAR1的表达变化。结果表明:对照组和白血病组小鼠骨髓细胞均表达ADAR1的2种同工型P110和P150mRNA;Notch1过表达导致的小鼠白血病发展过程中2种同工型的表达水平变化不同;随着白血病的发展,P110的表达水平逐渐升高,而P150表达水平逐渐降低,在移植后的第14天降至对照组的1/4。分选后的CD45.2+GFP+白血病细胞高表达P110而低表达P150。结论 :ADAR1的亚型P110和P150mRNA在小鼠白血病中的表达变化规律存在差异,提示二者介导的RNA编辑可能在白血病发展中发挥不同作用。
关键词
RNA编辑
ADAR1
P110P150
急性T淋巴
细胞
白血病
:
白血病
模型
Keywords
RNA editing
ADAR1
P110
P150
acute T-ALL leukemia
leukemia model
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
卡介苗抑制裸鼠白血病移植瘤生长及抗肿瘤的实验研究
被引量:
4
4
作者
王媛媛
王玲珍
孙立荣
机构
青岛大学医学院附属医院小儿血液科
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2011年第3期725-729,共5页
基金
山东省自然基金
编号Z2007C16
文摘
本研究通过建立人白血病突变株细胞异种移植模型探讨卡介苗(bacillus calmette-guerin vaccine,BCG)的抗白血病作用。对8-10周龄的BALB/c裸鼠皮下接种1×107/ml人急性髓系白0细胞,于4-6天可形成皮下浸润的白血病裸鼠模型,随后将其分为2组:对照组和实验组。对照组于肿瘤内接种生理盐水,实验组又分为T1组(BCG组)、T2组(灭活的BCG组)。观察各组裸鼠带瘤生存情况,以及通过对肿瘤组织及多个脏器组织行石蜡切片HE染色,在光学显微镜下观察肿瘤内的形态变化。结果表明,HL-60细胞植入裸鼠皮下后各组裸鼠体表接种部位形成淡绿色的肿块,同时有局部转移及肝脏脾脏转移。在BCG组、灭活的BCG组均出现不同程度的肿瘤组织坏死现象。结论 :用白血病HL-60细胞建立了白血病移植裸鼠模型,有全身肿瘤转移的现象,在接种BCG后均未出现明显的结核感染情况。BCG自身对肿瘤组织有明显的破坏作用。
关键词
白血病
HL-60
细胞
白血病细胞模型
卡介苗
Keywords
leukemia
HL-60 cell
leukemia cell xenograft model
bacillus calmette-guerin vaccine
分类号
R733.71 [医药卫生—肿瘤]
R979.1 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
转染抗VEGF发夹状核酶基因白血病细胞模型的建立
许文林
沈慧玲
吴朝阳
费霞
《白血病.淋巴瘤》
CAS
2006
0
原文传递
2
建立人急性粒细胞白血病M_2裸鼠模型
刘媛
董瑞红
李玉华
汪涯雅
毋静
黄睿
邓兰
宋朝阳
陆志刚
胡海燕
《中国组织工程研究与临床康复》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
下载PDF
职称材料
3
ADAR1同工型基因在小鼠急性T淋巴细胞白血病模型中的表达
马翠花
田晨
种靖慧
师迎旭
王金宏
林永敏
许静
郑国光
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2011
3
下载PDF
职称材料
4
卡介苗抑制裸鼠白血病移植瘤生长及抗肿瘤的实验研究
王媛媛
王玲珍
孙立荣
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2011
4
下载PDF
职称材料
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