过表达miR-186对白血病HL-60细胞增殖和凋亡作用机制的研究

目的探究过表达miR-186对白血病细胞增殖、凋亡及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的调控作用。方法选取人白血病HL-60细胞,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、细胞计数试剂-8(CCK-8)、Hoechst33258染色、酶联免疫吸附试验(ELISA)及蛋白质印迹法(WB)法分析细胞形态、miR-186相对表达量、增殖能力、凋亡情况、相关因子表达水平。结果转染24 h后,与mimic NC组相比,miR-186组细胞生长受到抑制,miR-186相对表达量、凋亡细胞数、超氧化物歧化酶(SOD)、caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而细胞增殖活力、丙二醛(MDA)、p-PI3K和p-AKT、Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。PI3K/AKT信号通路抑制剂的加入使各项指标差异更加显著(P<0.05)。结论过表达miR-186能够通过抑制PI3K/AKT信号通路抑制人白血病HL-60细胞的增殖并改善氧化应激水平,促进细胞凋亡。

甘草查尔酮A对HL-60细胞恶性生物学行为的抑制作用及其机制

目的 探究甘草查尔酮A(LA)对急性髓系白血病(AML)细胞HL-60的作用及其机制。方法 将人AML细胞系HL-60细胞分为对照组、LA组(30μmol/L)、IL-6组(100 ng/mL,JAK2/STAT3信号通路激活剂)和LA+IL-6组。培养48 h后,采用MTT法和克隆形成实验检测HL-60细胞增殖活性;采用流式细胞术检测HL-60细胞周期分布和细胞凋亡;采用Transwell实验检测HL-60细胞侵袭和迁移;采用Western blot检测p21、p27、cyclin E2、CDK2、Bcl-2、Bax、cleaved-Caspase-3、p-JAK2,JAK2,p-STAT3和STAT3蛋白表达水平。结果 与对照组比较,LA组细胞活力、克隆形成数、侵袭和迁移细胞数均降低(P<0.05),Bcl-2、cyclin E2和CDK2蛋白表达量均降低(P<0.05),JAK2和STAT3蛋白的磷酸化水平均降低(P<0.05);G0/G1期细胞比例和细胞凋亡率均升高(P<0.05),p21、p27、Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达量均升高(P<0.05)。与对照组比较,IL-6组细胞活力、克隆形成数、侵袭和迁移细胞数均升高(P<0.05),Bcl-2、cyclin E2和CDK2蛋白表达量均升高(P<0.05),JAK2和STAT3蛋白的磷酸化水平均升高(P<0.05),G0/G1期细胞比例和细胞凋亡率均降低(P<0.05),p21、p27、Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达量均降低(P<0.05)。与IL-6组比较,LA+IL-6组细胞活力、克隆形成数、侵袭和迁移细胞数均降低(P<0.05),Bcl-2、cyclin E2和CDK2蛋白表达量均降低(P<0.05),JAK2和STAT3蛋白的磷酸化水平均降低(P<0.05),G0/G1期细胞比例和细胞凋亡率均升高(P<0.05),p21、p27、Bax和cleaved-Caspase-3蛋白表达量均升高(P<0.05)。LA+IL-6组和LA组间上述指标差异没有统计学意义。结论 甘草查尔酮A可抑制AML细胞系HL-60细胞增殖、侵袭和迁移,诱导细胞凋亡并将细胞阻滞在G0/G1期,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路激活有关。

白花蛇舌草对人白血病细胞株HL-60增殖、凋亡及PI3K/AKT和Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 探究白花蛇舌草对人白血病细胞株HL-60增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法 将HL-60细胞随机分为0μmol/L组、3μmol/L组、6μmol/L组和12μmol/L组,分别采用0、3、6、12μmol/L浓度白花蛇舌草处理。流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布;JC-1法检测线粒体膜电位;Western blot检测Ki-67、Caspase-3、c-Myc、Cyclin D1、CDK4、AKT、p-AKT、Wnt1、β-catenin蛋白表达水平。结果 与0μmol/L组比较,6、12μmol/L组细胞凋亡率和G1期比例明显升高,S期比例和线粒体膜电位明显降低,cleaved Caspase-3/Caspase-3比值升高,Ki-67、c-Myc、Cyclin D1、CDK4、Wnt1、β-catenin蛋白表达水平和p-AKT/AKT比值降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 白花蛇舌草通过PI3K/AKT、Wnt/β-catenin信号通路抑制HL-60细胞增殖,诱导细胞凋亡。

猪胆酸钠对人早幼粒白血病细胞系(HL-60)作用机理的初步探讨

观察了猪胆酸钠和维甲酸对人早幼粒白血病细胞系(HL-60)体外诱导分化过程中细胞膜脂肪酸的组成、细胞蛋白激酶C(PKC)活性及c-myc癌基因表达的变化,初步探讨猪胆酸钠对HL-60细胞作用的分子机理,结果表明,经100～400μg·ml^(-1)猪胆酸钠处理3d的HL-60细胞,其PKC活性和c-myc表达与对照组比较均明显下调;1μmol·L^(-1)维甲酸诱导3 d的细胞,PKC活性未见明显变化,而癌基因c-myc表达则降至对照组的17％;无论是猪胆酸钠(400 μg·L^(-1))还是维甲酸(1μmol·L^(-1))诱导3d的HL-60细胞,其细胞膜脂肪酸组成均无明显改变。

抑制SDF-1活性对人急性髓性白血病HL-60细胞系增殖的影响

本研究通过观察抑制SDF 1活性对HL 6 0细胞增殖活性的影响 ,探讨趋化因子SDF 1在维持HL 6 0细胞生存能力中的作用。培养骨髓基质细胞 ,并与HL 6 0细胞共培养 ,采用SDF 1受体CXCR4单克隆抗体阻断SDF 1生物活性后 ,用MTT法检测HL 6 0细胞活力、用流式细胞术观察HL 6 0细胞增殖周期变化、检测细胞膜表面CXCR4表达 ,同时检测CXCR4单克隆抗体应用前后HL 6 0细胞内钙离子浓度变化。结果显示 ,抗CXCR4单克隆抗体可下调HL 6 0细胞膜表面CXCR4的表达 ,同时处于G0 /G1期的细胞增多 ,处于S期的细胞减少 ,而白血病细胞存活率下调 ,细胞内钙离子浓度降低。结论 :抑制SDF

华蟾素通过调控MYH9/USP7/c-MYC通路抑制急性髓系白血病细胞免疫逃逸

【目的】探讨华蟾素调控肌球蛋白重链9(MYH9)/泛素特异性蛋白酶7(USP7)/骨髓细胞瘤病毒癌基因(c-MYC)通路对急性髓系白血病(AML)细胞免疫逃逸的影响。【方法】(1)体内实验:建立裸鼠异种移植瘤模型,评估华蟾素对AML细胞在体内生长和免疫逃逸的影响。(2)体外实验:使用不同浓度的华蟾素处理人AML细胞株HL-60,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞活力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。将HL-60细胞与活化的CD8^(+)T细胞共培养,流式细胞术检测CD8^(+)T细胞表面标志物CD25的表达,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测共培养上清液中细胞因子[白细胞介素2(IL-2)和干扰素(IFN-γ)]的水平,CytoTox96非放射性细胞毒性分析评估CD8^(+)T细胞对HL-60细胞的毒性。Western Blot法检测MYH9、USP7和c-MYC的蛋白表达,免疫共沉淀(Co-IP)法检测MYH9、USP7和泛素化之间的相互作用。转染MYH9过表质粒,验证华蟾素在AML中的作用机制。【结果】华蟾素抑制裸鼠移植瘤生长,增强CD8^(+)T细胞抗肿瘤的能力。华蟾素浓度依赖性地抑制HL-60细胞活力、侵袭。华蟾素处理后上调CD8^(+)T细胞表面标志物CD25的表达,同时还上调IL-2和IFN-γ水平。华蟾素增强CD8^(+)T细胞对HL-60细胞的毒性。华蟾素抑制HL-60细胞MYH9、USP7和c-MYC的蛋白表达,MYH9通过募集USP7促进c-MYC去泛素化,华蟾素抑制MYH9介导的c-MYC去泛素化。【结论】华蟾素可通过抑制MYH9的表达进而减少去泛素化酶USP7对c-MYC的募集,促进c-MYC泛素化降解,从而抑制AML细胞免疫逃逸。

梁金菇多糖促人急性早幼粒细胞白血病细胞系(HL-60)细胞凋亡研究

目的 :观察梁金菇多糖对人类早幼粒细胞白血病细胞系 (HL 6 0 )是否具有凋亡诱导作用 ,并进一步研究半胱天冬酶 3(Caspase 3)基因在此过程中的作用。方法 :四氮唑蓝比色法 (MTT法 )观察梁金菇多糖对HL 6 0细胞的抑制率 ,应用形态学、流式细胞术、DNA凝胶电泳等方法检测细胞凋亡的发生。应用半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测凋亡相关基因Caspase 3mRNA表达的变化。结果 :梁金菇多糖对HL 6 0细胞的生长有明显的抑制作用 ,并诱导肿瘤细胞发生凋亡 ;在HL 6 0细胞凋亡过程中 ,凋亡相关基因Caspase 3转录水平比用药前增强。结论 :梁金菇多糖促HL 6 0细胞凋亡 ,且与Caspase

吉西他滨对白血病细胞系HL-60细胞的抑制作用

目的观察吉西他滨对HL-60细胞增殖、凋亡及C-myc蛋白表达的影响,探讨吉西他滨对白血病细胞的作用及其与c-myc间的关系,为其作为新的抗白血病药物提供实验依据。方法体外培养HL-60细胞,吉西他滨及阿糖胞苷处理细胞0、24、48、72 h后倒置显微镜下观察细胞生长状态及形态学改变;锥虫蓝拒染法计数活细胞,计算细胞存活率,观察吉西他滨对细胞生长的影响;应用流式细胞仪进行细胞周期分析、检测凋亡率;免疫组织化学染色法检测C-myc蛋白表达改变。结果24 h时不同质量浓度吉西他滨组均显著抑制细胞存活,随药物质量浓度增加存活率减小,各组间比较有显著性差异(P<0.01);各组随作用时间延长存活率降低,在48、72 h抑制作用显著强于24 h;G0/G1期细胞比例升高而S期细胞比例降低,细胞阻滞在G0/G1期;凋亡率为(17.4 f1±4.88)%,较空白组(4.29±3.07)%和阿糖胞苷对照组(8.16±3.43)%显著升高(Pa<0.01);免疫组织化学染色示吉西他滨组C-myc蛋白在细胞中表达阳性平均积分为42.00±8.54,较空白组(248.33±20.74)和阿糖胞苷组(102.67±12.06)显著降低(Pa<0.01)。结论吉西他滨对HL-60细胞生长及C-myc蛋白表达有明显抑制作用;能使细胞周期发生重新分布,将细胞阻滞在G0/G1期,从而抑制细胞增殖,并可诱导白血病细胞凋亡;在抑制HL-60细胞增殖、诱导其凋亡及抑制C-myc表达方面,吉西他滨的作用显著强于相同剂量的阿糖胞苷,有望成为新药物用于白血病的治疗。

猪胆汁酸钠对人早幼粒白血病细胞系HL-60的增殖抑制及分化诱导作用(英文)

猪胆汁酸钠不仅是人工牛黄的主要成分,而且有广泛的临床用途.近年来,文献报道已经在实验大鼠证实口服少量牛磺胆酸可以克服长期摄入维生素A酸(retinoic acid,RA)或其衍生物所引起的副作用.鉴于RA是髓系白血病细胞分化的生理性诱导剂,临床试用表明口服RA对急性早幼粒白血病有较满意疗效,我们设想胆汁酸与RA联合用药可能对早幼粒白血病的治疗是有意义的.本文报道体外试验结果表明,药用猪汁酸钠明显抑制HL-60细胞增殖(IC_(50) 400μg/ml)并诱导HL-60细胞向终末方向分化.诱导后的HL-60细胞具有嗜中性粒细胞和单核/巨噬细胞的某些形态及细胞化学特征,表现出明显的细胞呼吸爆发功能.细胞周期分析表明猪胆汁酸钠阻断细胞从G_0+G_1期进入S期.小鼠急性中毒试验测定其LD_(50)为:腹腔注射LD_(50)462±SD 35 mg/kg,灌胃LD_(50)>1 g/kg。药用猪胆酸钠体外试验对粒系白血病原代细胞的增殖抑制及分化诱导作用以及体内试验对某些小鼠白血病的作用正在进一步观察.我们认为进一步研究猪胆汁酸钠和RA的联合应用是有意义的.

碘化砷-硫脲诱导白血病细胞系HL-60细胞凋亡的研究

目的 研究新型砷剂配合物碘化砷 硫脲 (AsI3 Tu)诱导白血病HL 6 0细胞凋亡的生物学效应。方法 采用细胞形态学观察、细胞凋亡原位检测法 (TUNEL法 )检测凋亡细胞并测定其细胞蛋白质的含量。结果 ① 1～16 μmol/LAsI3 Tu对HL 6 0细胞增殖有抑制作用 ,并与时间和剂量相关。②TUNEL法检测凋亡细胞明显增加。③AsI3 Tu能够抑制HL 6 0细胞蛋白质合成。结论 AsI3 Tu能有效诱导白血病细胞系HL 6 0细胞凋亡。

SPGL对白血病细胞系HL-60细胞增殖的影响

采用CFU-GM和白血病CFU-L集落培养、白血病HL-60细胞液体培养的方法,观察了光叶海酮总皂甙(SPGL)对正常人骨髓粒-巨噬系造血祖细胞(CFU-GM)和人急性髓系白血病HL-60细胞增殖的影响。结果表明:5 ×10^(-6)-5×10^(-4)mg/ml浓度SPGL能显著抑制HL-60细胞增殖,且具有明显的量-效关系。而对正常人造血祖细胞无明显的细胞毒作用,提示SPGL有抗白血病作用。此结果为进一步研究SPGL提供了实验依据。

低分子RNA与高三尖杉酯碱联用对白血病细胞系HL-60细胞作用的实验观察

目的：研究低分子RNA与抗白血病药物高三尖杉酯碱联用对HL-60细胞药物敏感性的影响。方法：采用细胞形态学观察、四唑盐（MTT）比色法分析细胞增殖以及应用凯氏定氮法测定细胞蛋白质的含量。结果：①0．05～50μg／ml高三尖杉酯碱对HL-60细胞增殖有抑制作用，并与时间和剂量相关。②低分子RNA与高三尖杉酯碱联用能显著降低HL-60细胞的增殖率，并进一步降低细胞内蛋白质的合成。结论：低分子RNA能提高HL-60细胞对白血病药物高三尖杉酯碱的敏感性，两者联用能有效抑制白血病细胞系HL-60细胞的增殖。

抗CD44单克隆抗体A3D8对人白血病细胞系HL-60细胞增殖及分化的影响

目的 探讨抗CD4 4单克隆抗体A3D8对HL 6 0细胞增殖及分化的影响 ,寻找急性髓系白血病(AML)治疗的新靶点。方法 以AML细胞株HL 6 0为模型 ,通过观察细胞生长、形态学、表面分化抗原、细胞周期和细胞因子表达 ,以及应用硝基四氮唑蓝 (NBT)还原实验来研究抗CD4 4单克隆抗体A3D8对细胞增殖及分化的影响。结果 HL 6 0细胞高表达CD4 4 ;A3D8以浓度和时间依赖性方式抑制HL 6 0细胞生长。A3D8使HL 6 0细胞周期阻滞在G0 /G1期 ,CD11b、CD14表面抗原阳性率明显增高 ,细胞体积增大 ,核 /浆比例减小 ,核染色质聚集 ,NBT还原实验阴性 ,细胞表达粒细胞集落刺激因子mRNA ,呈现向单核细胞系方向分化。结论 A3D8可抑制HL 6 0细胞增殖 ,并诱导其向单核系细胞分化 ,CD4 4有可能成为AML治疗的新途径。

端粒酶反义RNA对人髓性白血病细胞系HL-60的作用

目的 探讨抗端粒酶在急性白血病治疗中的意义 .方法 用脂质体介导法将 p BBS2 12 - h TR(反义端粒酶 RNA真核表达载体 )导入人髓性白血病细胞系 HL- 6 0中 ,采用TRAP法测定端粒酶活性 ,细胞生长动力学检测 ,电镜 ,DNA片段分析等方法观察其对 HL- 6 0细胞的端粒酶活性、细胞增殖及细胞凋亡影响 .结果 端粒酶反义 RNA能显著抑制HL- 6 0细胞的端粒酶活性 ,抑制 HL- 6 0细胞的增殖并促进其凋亡 .结论 以端粒酶反义

S-2-(3-氨丙基氨基)乙基硫代磷酸酯对白血病细胞系HL-60细胞增殖与凋亡的影响

本研究探讨S 2 (3 氨丙基氨基 )乙基硫代磷酸酯 (WR 2 72 1,Amifostine)对白血病细胞系HL 6 0细胞增殖与凋亡的影响。采用XTT法检测细胞增殖及药物敏感性 ,用annexin/PI双染色法检测细胞凋亡 ,用流式细胞术检测细胞周期。结果表明 :WR 2 72 1对HL 6 0细胞增殖呈浓度时间依赖性抑制作用 ,0 .5mmol/LWR 2 72 137℃处理 30分钟后的HL 6 0细胞对VP16的敏感性增强 ,IC50 由 5 2 .5 μg/ml下降为 4 0 .5 μg/ml。WR 2 72 15 .0mmol/L作用 72小时后 ,早期细胞凋亡由 (5 .5± 1.9) %增加至 (4 8.5± 8.4 ) % (P <0 .0 0 1) ,晚期细胞凋亡由 (1.2± 0 .5 ) %增加至 (39.0± 4 .0 ) % (P <0 .0 0 1) ,并出现G2 M期细胞阻滞。结论 :S 2 (3 氨丙基氨基 )乙基硫代磷酸酯能增强HL 6 0细胞对VP16的敏感性 ,并可通过G2 M期阻滞 ,诱导细胞凋亡 ,从而抑制HL 6 0细胞的增殖。

新型氨基甾体类对人粒系白血病HL-60细胞系的增殖抑制和分化诱导的作用(英文)

研究发现一种新型氨基甾体化合物,2β-(4’-甲基-1’-哌嗪基)-3α,17β二羟基-5α-雄甾烷(HY)可抑制HL-60细胞的增殖,并诱导该类细胞向巨噬样细胞分化。其主要证据如下:①细胞计数,集落计数及MTT检测显示抑制HL-60细胞的增殖;②液体培养6天后形态学显示诱导HL-60细胞向巨噬样细胞分化;③可诱导NBT反应阳性;④可诱导α-萘酚醋酸酯酶反应阳性;⑤流式细胞术显示可诱导CD11b和CD14的表达。结论提示该化合物具有治疗白血病的潜在价值。

c-myc反义寡脱氧核苷酸诱导人髓系白血病细胞系HL-60细胞凋亡

为研究c myc硫代反义寡脱氧核苷酸对白血病细胞系HL 60诱导细胞凋亡的作用 ,将人工合成的长度分别为 18mer和 15mer的硫代反义寡脱氧核苷酸 (AspoⅠ和AspoⅡ )转染HL 60细胞 ,用流式细胞术检测c Myc蛋白及DNA倍体分析 ,RT PCR检测c mycmRNA水平 ,电镜观察凋亡细胞的超微结构 ,琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA降解片段。研究结果发现 ,经AspoⅠ 5 μmol L和 10 μmol L作用后c Myc蛋白分别降低 2 3.8%和 4 5 .4 % ,经AspoⅡ 10 μmol L作用后下降38.4 % ,RT PCR显示AspoⅠ和AspoⅡ组c mycmRNA表达明显减少。DNA倍体分析AspoⅠ 10μmol L作用 4 8和 72小时细胞凋亡率分别为 2 3.97%和 5 2 .6% ;AspoⅡ 10 μmol L作用 4 8和 72小时后细胞凋亡率分别为 2 8.8%和 4 5 .19% ;而空白对照和正义寡脱氧核苷酸组均未出现凋亡细胞。电镜观察两个反义寡脱氧核苷酸 10 μmol L作用后均出现细胞固缩 ,染色质边集 ,胞浆浓缩等凋亡细胞的改变。反义寡脱氧核苷酸 10 μmol L作用 4 8小时后均出现典型的DNA降解片段。本研究结果说明 ,c myc反义寡脱氧核苷酸是高特异性的基因药物 ,对HL 60细胞抑制c mycmRNA的表达 ,减少c Myc蛋白合成 ,并诱导HL

c-myc小干扰RNA诱导人髓系白血病细胞系HL-60细胞凋亡

本研究探讨c-myc小干扰RNA对白血病细胞系HL-60诱导凋亡的作用。将体外合成的siRNA转染HL-60细胞,观察形态学变化,应用MTT法绘制细胞生长曲线,用细胞集落培养观察c-myc siRNA对HL-60细胞增殖的影响;应用DNA片段化分析细胞的凋亡,RT-PCR及Western blot检测c-myc siRNA作用前后c-myc基因mRNA及蛋白表达水平的变化。结果表明:c-myc siRNA能明显抑制HL-60细胞增殖,半数抑制浓度(IC50)约为150nmol/L;DNA片段化的检出证实c-myc siRNA能有效诱导HL-60细胞调亡,凋亡率与药物作用时间呈正相关。c-myc siRNA与HL-60细胞作用后c-myc基因和蛋白的表达水平与作用时间呈负相关。结论:c-myc siRNA能有效抑制HL-60细胞增殖,降低c-myc基因和蛋白的表达,诱导其凋亡。

环孢霉素A逆转人白血病耐药细胞系HL-60/ADM后氧自由基水平的变化

本研究旨在探讨将抗阿霉素的人急性早幼粒细胞白血病细胞系HL-60/ADM的耐药性逆转后细胞内氧自由基水平的变化特点。选择环孢霉素A(CsA)作为耐药逆转剂,分别采用MTT法、流式细胞术和免疫组织化学法分析CsA对人白血病耐药细胞系的毒性及逆转效果;用化学比色法检测逆转前后细胞内丙二醛(MDA)、超氧化岐化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)的含量。结果表明:当CsA在4μg/ml以下时对HL-60/ADM无明显毒性作用,超过此浓度,其毒性呈剂量效应(p<0.001)。当CsA浓度为0.5μg/ml时就有明显逆转作用,随着CsA剂量增加,逆转作用逐渐增强(p<0.001),当CsA剂量达8μg/ml以上时对细胞存活产生明显的影响。流式细胞仪检测细胞内药物浓度发现,逆转耐药细胞系HL-60/ADM+CsA细胞内阿霉素的浓度明显高于耐药细胞系HL-60/ADM。免疫组织化学检测结果显示,HL-60/ADM细胞膜上P-gp高表达,经CsA作用后P-gp表达下降。氧自由基测定结果显示:HL-60/ADM细胞经4μg/ml CsA作用72小时后细胞内SOD的活性与对照组相比显著降低(p<0.001),细胞内的脂质过氧化产物MDA的含量与对照组相比有所升高(p<0.05),抗氧化剂GSH的含量较对照组明显降低(p<0.001)。结论:CsA能有效逆转HL-60/ADM的耐药性;逆转后细胞内氧自由基的含量升高,抗氧化剂的活性明显减低,过多的氧自由基可影响细胞的功能状态,导致细胞死亡。

全反式维甲酸联合小剂量阿糖胞苷对急性髓系白血病细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶信号通路的作用机制研究

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)联合小剂量阿糖胞苷(Ara-C)对急性髓系白血病细胞磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(AKT)信号通路的作用机制。方法:选取人急性髓系白血病细胞HL-60,分为空白对照组(未经任何处理的HL-60细胞)、Ara-C组(加入0.5μmol/LAra-C)、ATRA组(加入2μmol/LATRA)、ATRA+Ara-C组(加入2μmol/LATRA和0.5μmol/LAra-C),继续培养24、48、72h,采用CCK8检测HL-60细胞活力,AnnexinV双染法检测HL-60细胞凋亡,qRT-PCR检测PI3K、AKT-mRNA表达,Westernblot检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达,并进行细胞形态学观察。结果:空白对照组HL-60细胞活力高于Ara-C+ATRA组、Ara-C组、ATRA组,Ara-C组、ATRA组HL-60细胞活力高于Ara-C+ATRA组(均P<0.05)。Ara-C+ATRA组HL-60细胞凋亡率高于Ara-C组、ATRA组,Ara-C组、ATRA组HL-60细胞凋亡率高于空白对照组(均P<0.05)。HL-60细胞胞体多呈圆形,可见瘤状突起,胞核多为类圆形,Ara-C组、ATRA组染色质凝聚,颜色变深,部分胞核变小,Ara-C+ATRA组染色质凝聚,颜色变深,可见核固缩、核碎裂。空白对照组HL-60细胞PI3K、AKTmRNA表达高于Ara-C组、ATRA组,Ara-C组、ATRA组HL-60细胞PI3K、AKTmRNA表达高于Ara-C+ATRA组(均P<0.05)。空白对照组HL-60细胞P-PI3K、P-AKT蛋白表达高于Ara-C组、ATRA组,Ara-C组、ATRA组HL-60细胞P-PI3K、P-AKT蛋白表达高于Ara-C+ATRA组(均P<0.05)。结论:Ara-C+ATRA能通过抑制PI3K/AKT信号通路激活,促进HL-60细胞凋亡。