Asb2对急性髓系白血病干细胞和多能祖细胞增殖的影响及其作用机制

目的:探讨锚蛋白重复序列和细胞信号抑制因子盒蛋白2(Asb2)对急性髓系白血病(AML)干细胞和多能祖细胞增殖的影响及其相关分子机制。方法:使用重组慢病毒构建上调或下调Asb2表达的人急性髓系白血病细胞株KG-1a,CCK-8方法检测细胞存活情况。Western blot检测AML干细胞和多能祖细胞及对照组细胞中Asb2、Jak2、Jak3、Foxo1、Mcl-1和β-catenin蛋白分子的表达。在NIH3T3细胞中改变Asb2、Skp2和β-Trcp的表达,Western blot检测细胞中Foxo1、Mcl-1和β-catenin蛋白表达。结果:CCK-8结果显示,上调KG-1a中Asb2表达能够明显抑制细胞增殖(P<0.01),而下调KG-1a中Asb2表达能够明显促进细胞增殖(P<0.01);相比较于对照组细胞,Asb2在AML干细胞和多能祖细胞中表达被抑制,而Jak2、Jak3、Foxo1、Mcl-1和β-catenin蛋白表达被加强;在NIH3T3细胞中,加强Asb2的表达会导致Foxo1、Mcl-1和β-catenin表达降低,Skp2或β-Trcp与Asb2的协同表达会进一步抑制Foxo1、Mcl-1和β-catenin的表达,而shRNA-Skp2或shRNA-β-Trcp的表达会增强Foxo1、Mcl-1和β-catenin的蛋白表达量。结论:Asb2可能通过下调Jak2、Jak3、Foxo1、Mcl-1和β-catenin蛋白分子的表达影响AML干细胞和多能祖细胞增殖,Asb2是急性早幼粒细胞白血病的潜在治疗靶点。